首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 31 毫秒
1.
测定了棉铃虫(Helicoverpaarmigera)核型多角体病毒(HaSNPV)基因组DNA的HindIIK片段核苷酸序列。该片段全长3255bp,含可编码大于40个氨基酸残基的多肽的开放阅读框(ORF)15个,包括多角体蛋白(ph)基因编码区3′端489bp和蛋白激酶HavPK基因编码区801bp。在ph和HavPK两基因之间鉴定出一个可编码412个氨基酸残基的ORF1236,转录方向与ph和HavPK基因相反。同源分析表明,ORF1236与谷实夜蛾(Helicoverpazea)核型多角体病毒(HzSNPV)的ORF8推导的蛋白氨基酸序列有95.9%同源性,与苜蓿丫纹夜蛾(Autographacalifornia)核型多角体病毒(AcMNPV)ORF1629只有24.8%同源性,但三者均含有二组由多个脯氨酸残基串联而成的特征基序。  相似文献   

2.
王家旺  齐义鹏 《病毒学报》1998,14(2):172-177
测定了粘虫核型我角体病毒两个EcoRV片段共1201bp序更,发现一个714bp的开放阅读框(ORF),根据其与NPV多角体收白基因同源性的比较和5端典型的14bp保守序列。说明此ORF即为LsNPV的ocu基因。根据核苷邓列预测的多角体蛋白有246个氨基酸,其中酸性和碱性氨基酸数相符,疏水氨基酸含理很高,氨基酸组成中以谷氨酸含量最高,谷氨酰胺和半胱氨酸含量最低。编码区碱基同源性与MbNPV最高,  相似文献   

3.
谷子(Setaria italica)叶绿体DNA 含有rbcL基因的3.0 kb Bgl Ⅱ+ XbaⅠ酶切片段被克隆到pBluescript SK (- )质粒载体上,并构建了该基因的限制性酶切图谱,测定了该基因的1990 bp 全序列。其中基因的编码区长1431 bp,共编码476 个氨基酸,推测其分子量为52679 D。其389 bp 的5′上游区含有类似于原核生物的- 10 box、- 35 box 和SD序列。其170 bp 3′下游区含有3 个茎环结构。对C4 植物和C3 植物中的rbcL基因序列进行比较,表明在编码区、启动区和3′下游区没有差别。由此认为C4 植物中rbcL基因的细胞特异性表达与其序列无关  相似文献   

4.
树Qu载脂蛋白CI cDNA序列及其组织表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
分离提取树Qu肝组织mRNA,经皮为模板,反转录构建了TS肝组织cDNA文库。利用制备的兔抗TS载脂蛋白CI多抗血清为探针筛选该文库,获得两个阳性克隆。测序及序列分析表明:两个克隆均为TSapoiCIcDNA基因。大的克隆由380个核苷酸要成,包括21bp,95bp组成的5’和3‘非编码区,264bp组成的一个完整开放阅读框架,编码88个氨基酸的apoCI前体,含26个氨基酸构成的信号肽和62肽的  相似文献   

5.
家蚕核型多角体病毒ZJ8株蛋白激酶(BmvPK-1)基因编码区全长828个核苷酸,可编码276aa的多肽,推测分子量为32kD。RNA杂交显示病毒感染细胞后18h,该基因已开始转录,感染后48h达高峰,为一种晚期或极晚期基因。删除该基因编码区中最保守的365bp,在缺失部位插入lacZ基因构建转移载体。与野生型病毒DNA共转染BmN细胞。同源重组后检测到表达lacZ基因的重组病毒蓝斑。但空斑纯化方  相似文献   

6.
根据免疫球蛋白重链和轻链可变区基因5’端序列和J区序列,化学合成适合于体外扩增抗体重、轻链可变区基因的二对引物。从体外培养的OKT3杂交瘤细胞中提取总RNA,反转录生成cDNA,以cDNA为模板,分别加入合成的重、轻链可变区引物进行PCR,扩增出抗体重、轻链可变区基因片段。将扩增产物分别插入pUC19质粒,筛选出阳性克隆,用链终止法进行DNA序列测定。所测重链可变区基因全长357bp,编码119个氨基酸,轻链可变区基因全长321bp,编码107个氨基酸。  相似文献   

7.
免疫球蛋白变区基因的体外扩增及人—鼠嵌合抗体的表达   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因,经核苷酸序列分析,轻链变基因为324bp,编码108个氨基酸,重链变区基因为315bp,编码117个氨基酸,将重变区基因克隆至pSV2△HgptHuγ3质粒,经一系列克隆,筛选,得一插入方面正确的表达人-鼠嵌合重链抗体的载体-pSV2△Hgpt2F7VHHuγ3。用电穿孔方法将该粒导入鼠源骨髓瘤细胞J588L,用霉酚酸进行初步筛选,最终  相似文献   

8.
应用RT-PCR技术从分泌抗人黑色素瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞HB8760中克隆了抗体轻、重链可变区基因,然后用(Gly4Ser)3连接肽基因将VH、VL连接成ScFv基因,并进行了序列测定.计算机分析表明VH,VL均符合小鼠抗体可变区的特征,为功能性重排的抗体可变区基因.VH、VL、linker拼接正确.ScFv基因全长729bp,其中VH基因长360bp,编码120个氨基酸,VL基因长324bp,编码108个氨基酸.在噬菌粒表达载体pCANTAB5E中表达了可溶性的ScFv蛋白,表达产物经流式细胞仪检测可特异地与黑色素瘤细胞结合,不与肝癌、胃癌及良性黑痣细胞结合  相似文献   

9.
葡萄叶绿体rbcL基因的结构分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
以玫瑰香葡萄(Vitisvinifera L.)为材料,克隆了含有叶绿体rbc L基因的3.1 kb Bam HⅠ片段,构建了该基因的限制性酶切图谱,测定了该基因的核苷酸序列。所测的核苷酸序列总长度为2004 bp,其中基因的编码区为1428 bp,编码一个含475 个氨基酸的蛋白质,其分子量约为53 kD;测定基因的5上游含启动子的部分共358 bp,包括- 10 区(TAAAAT)、- 35区(TTGCGC)和SD 序列(GGAGG);基因的3下游区共218 bp,含有3 个转录茎环终止结构。玫瑰香葡萄rbc L基因编码区的核苷酸序列与烟草、矮牵牛、菠菜、苜蓿、水稻和玉米之间的同源性分别为91.5% 、91.4% 、90.2% 、89.8% 、86.3% 和84.5% ;推导出的氨基酸序列的同源性分别为92.2% 、91.6% 、92.2% 、93.7% 、93.5% 和90.1% 。  相似文献   

10.
王业富  齐义鹏 《病毒学报》1999,15(3):252-259
用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒凋亡抑制基因p35的合成引物,从棉铃虫核型多角体病毒基因组中用PCR扩增到1kb片段。采用PCR-双脱氧核苷酸链终止银染法,测定了所扩增到的1010bp全序列,发现其开放阅读框完整,长897bp,编码299个氨基酸。  相似文献   

11.
橡胶延伸因子REF(Rubber Elongation Factor)是橡胶生物合成中最重要的酶之一.作者利用REF基因序列设计并合成引物. 通过提取胶乳总RNA 用RT法合成cDNA 后,通过PCR技术扩增并克隆了REF基因和3端非编码区. 序列测定结果表明,REF基因全长414 个碱基,编码138 个氨基酸,3端非编码区长112 bp. 与Goyvaerts E 等人发表的序列比较:REF基因同源率为100% ,3端非编码区有2 bp 的差异,同源率为98% . 将所克隆的REF基因及3非编码区进行地高辛标记, 对胶乳和叶片总RNA 进行点杂交分析,结果表明,胶乳总RNA 呈阳性反应,叶片总RNA 则呈阴性反应.  相似文献   

12.
人端粒酶RNA基因的克隆与鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
以人血基因组DNA为模板,合成两段20个寡聚核苷酸为引物,经过PCR扩增,得到480bp的片段,克隆到pMD18-T载体中,经电泳、酶切、PCR鉴定后测定序列。序列分析表明氙克隆的人端粒酶RNA(human telomease RNA,hTR)基因含有480bp,包括约450bp的编码模板区主序列和约30bp的上游调控区序列,其中模板区的11个核苷酸(5’-CUAACCCUAAC-3’)合成端粒亚  相似文献   

13.
应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因,经核苷酸序列分析,轻链变区基因为324bp,编码108个氨基酸;重链变区基因为351bp,编码117个氨基酸。将重链变区基因克隆至pSV_2△HgptHuγ_3质粒,经一系列克隆、筛选,得一插入方向正确的表达人-鼠嵌合重链抗体的载体-pSV_2△Hgpt2F7VHHuγ_3。用电穿孔方法将该质粒导入鼠源骨髓瘤细胞J558L,用霉酚酸进行初步筛选,最终用兔抗人免疫球蛋白IgGFc片段的抗体筛选得七株阳性克隆,免疫印迹法结果表明在与人IgG相同位置上有一阳性条带。  相似文献   

14.
炭疽杆菌水肿因子基因的克隆与序列测定   总被引:1,自引:0,他引:1  
袁斌  何君  王慧  荫俊 《生物技术通讯》2000,11(4):249-251
采用聚合酶链反应(PCR)从炭疽芽孢杆菌减毒株YB1中扩增其水肿因子(EF)的编码区基因,将其克隆至pGEM-T载体中,并分步测定其序列。序列测定表明,该基因长2 301 bp,编码767个氨基酸,与已报道的Sterne标准株的EF基因完全一致。  相似文献   

15.
炭疽杆菌保护性抗原基因的克隆与序列测定   总被引:1,自引:0,他引:1  
袁斌  何君  王慧  荫俊 《生物技术通讯》2000,11(3):189-191
采用聚合酶链反应从炭疽芽孢杆菌减毒株YB1中扩增其保护性抗原(PA)的编码区基因,将其克隆至pGEM-T载体中,并分步测定其序列。序列测定表明,该基因长2205bp,编码735个氨基酸残基,与献报道的标准菌株Sterne株的PA序列只有4个碱基的差异。  相似文献   

16.
生物信息学技术克隆人类神经髓鞘蛋白零家族基因   总被引:8,自引:0,他引:8  
为克隆新的髓鞘蛋白相关基因,将MPZ基因编码区cDNA与EST数据库进行同源性比较,得到与MPZ显著相似的2个EST,构建成801bp的重叠群。此重叠群与定位在1q24的128kb gDnA的相似性为100%。计算机分析有bp和重叠群可能存在一个435bp的阅读框架。在重叠群上设计两个引物与文库载体臂上的引物配对,扩增各种cDNA文库DNA作巢式PC拓所得cDNA上再设计引物进行巢式PCR,最终克  相似文献   

17.
用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒( Ac N P V) 凋亡抑制基因p35 的合成引物,从棉铃虫核型多角体病毒( Ha N P V) 基因组中用 P C R 扩增到了1kb 片段。采用 P C R- 双脱氧核苷酸链终止银染法,测定了所扩增到的1 010bp 全序列,发现其开放阅读框完整,长897bp ,编码299 个氨基酸。用 D N A S I S 和 P R O S I S 软件分析发现,此片段与 Ac M N P V p35 基因同源区核苷酸同源性为91 % ,氨基酸同源性也达81 % ,证明了所扩增的片段是 Ha N P V 的p35 基因。为了研究此p35 基因的功能及其效应机制,克隆了这一基因并在大肠杆菌细胞中实现了表达。  相似文献   

18.
测定了粘虫核型多角体病毒(Leucaniaseparatanuclearpolyhedrosisvirus,LsNPV)两个EcoRV片段的共1201bp序列,发现了一个714bp的开放阅读框(ORF),根据其与多种NPV多角体蛋白基因(ocu)同源性的比较和5'端典型的14bp保守序列,说明此ORF即为LsNPV的ocu基因。根据核苷酸序列预测的多角体蛋白有246个氨基酸,其中酸性和碱性氨基酸数相等,疏水氨基酸含量很高,氨基酸组成中以谷氨酸(Glu)含量最高,谷氨酰胺和半胱氨酸含量最低。编码区碱基同源性与MbNPV最高,为97.0%;氨基酸同源性与MbNPV最高,为97.5%。密码子偏爱选用以第三个碱基为嘧啶的密码子。二级结构分析表明,α-螺旋(H)和β-折叠(S)相等,β-转角含量是H和S含量之和。  相似文献   

19.
根据抗体基因可变区两端保守序列FR1和FR4,设计并化学合成轻重链PCR扩增引物。从体外培养细胞UCHT1中提取总RNA,反转录成Cdna,以Cdna为模板经PCR扩增轻,重链可变区基因片段。将扩增片段克隆至Puc19质粒,筛选阳性克隆并测序,序列分析结果为重链366pb,编码122个氨基酸,轻链327bp,编码109个氨基酸  相似文献   

20.
水稻脂质转移蛋白基因的分离和分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
用水稻脂质转移蛋白(lipidtransferprotein,LTP)的cDNA(pFDRSC110)为探针,从水稻(OryzasativaL.sp.indica)“广陆矮4号”基因文库中筛选出LTP基因,完成了1.8kb长片段的序列测定。该基因编码一个121个氨基酸组成的肽,编码区中间有一个90bp的内含子,基因的调控区除有2个TATAbox和polyA加工信号外,还存在多个回文序列和逆向重复序列。该基因编码的蛋白质N端是由28个氨基酸组成的信号肽,同源性比较表明它具有典型的植物LTP特征。  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号