昆虫颗粒体病毒增效蛋白研究进展

昆虫颗粒体病毒的颗粒体中有一种可以提高核型多角体病毒侵染能力的蛋白质,叫做增效蛋白.后来的研究发现,增效蛋白也可以提高苏云金杆菌等生物杀虫剂的杀虫活性.本文就增效蛋白的性质、基因结构和表达、增效机理,以及增效蛋白对核型多角体病毒和Bt的增效作用等方面的研究进展进行了概述.最后本文还讨论了增效蛋白可能的开发和应用前景.     

毛细管气相色谱内标法测定核桃油中的脂肪酸

测定了核桃油的脂肪酸组成,建立了以十七烷酸甲酯为内标物,用毛细管气相色谱同时测定核桃油五种脂肪酸（棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸）的方法。样品经氢氧化钾．甲醇皂化、三氟化硼．甲醇酯化后使生成相应的脂肪酸甲酯,以DM-FFAP毛细管柱分离,火焰离子化检测器测定。用保留时间定性,内标法定量。结果表明,在所选择的条件下,核桃油脂肪酸在10min内能获得较好的分离;五种脂肪酸的峰面积与其质量浓度有良好的线性关系,相关系数均大于0．998;样品加标回收率（n=6）为92．5％-100．3％,相对标准偏差为2．41％-4．31％。该方法操作简便、快速、准确,适合批量样品的测定。     

棉铃虫核型多角体病毒多角体蛋白聚集体特性及与其它包涵体蛋白的血清学关系

纯化的多角体碱解释放多角体蛋白,经等电点沉淀和柱层析对多角体蛋白进行分离纯化,结合SDS-PAGE、免疫双向扩散、免疫电镜等方法,证明棉铃虫核型多角体病毒(HaNPV)的多角体蛋白以聚集体形式存在。用ELISA法检测包涵体蛋白之间的血清学关系,结果表明,与黄地老虎颗粒体病毒(AsGV)和粘虫颗粒体病毒(PsGV)颗粒体蛋白相比较,HaNPV多角体蛋白与葡萄天蛾核型多角体病毒(ArNPV)和黄地老虎核型多角体病毒(AsNPV)多角体蛋白之间的血清学关系更为密切。     

几种昆虫病毒交叉感染玉米螟的研究

银纹夜蛾NPV(P_aNPV)、柞蚕NPV(ApNPV)和赤松毛虫CPV(D_aCPV)可感染玉米螟。D_aCPV对玉米螟1龄幼虫的ID_(50)为5.9×10~5PIB/ml饲料,对幼虫的生长发育、蛹重、羽化率和成虫寿命有显著影响。D_aCPV主要侵染幼虫中肠柱状细胞,在细胞质中增殖;P_aNPV和A_pNPV主要侵染幼虫的体壁细胞和气管壁细胞。D_aCPV在玉米螟幼虫体内增殖后,多角体形态由正六角形变为锥形或四方形;成虫羽化时排出的蛹便可观察到多角体,病毒可传递给子代。利用其他昆虫病毒有防治玉米螟的可能性。     

粘虫核型多角体病毒和颗粒体病毒侵染粘虫前胸腺的病理观察

观察比较了粘虫核型多角体病毒(Pseudelatia separata NPV,PsNPV)、粘虫颗粒体病毒(Pseudelatia separata GV,PsGV)感染粘虫,以及两种病毒混合感染粘虫后,粘虫(Pseudelatia separata)前胸腺的形态特征和前胸腺细胞的超微结构。结果表明,不同感染组粘虫前胸腺腺体都有不同程度的组织病变,PsNPV感染组在感染晚期与前胸腺相连的气管严重病变,出现大量白色颗粒状物累积,被伊红染成紫黑色,腺体细胞被挤压变形;PsGV感染组的前胸腺腺体变小,单个细胞也小,细胞界限不十分明显;两种病毒混合感染组的腺体细胞小,能被伊红染色的细胞极少。同时,前胸腺细胞的超微结构也有不同程度的病变。     

毛细管气相色谱细胞脂肪酸测定法鉴定28种分枝杆菌的研究

用毛细管气相色谱对分枝杆菌属28种参考株的细胞挥发性脂肪酸进行测定,发现均含有较多量的脂肪酸C18:1、C18:0及本属特异性组分TBSA。利用色谱图中这三种脂肪酸峰高的比例关系,可将所测菌株分应8群。再借助具有种间特异性的脂肪酸C19:0、C21:0和C26:0将其中的1 7株(60％)鉴定到种,11株鉴定到含有2或3个种的群。本鉴定程序区分多数临床常见的致病菌(如人型、牛型结核杆菌及一些分枝杆菌复合体),经计算机对细胞脂肪酸模式的聚类分析,表明了这一程序的客观合理性。     

昆虫病毒多角体蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

将含有大尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)多角体蛋白基因(ocu)的BamHl一H片段克隆到表达载体pDR 540的BamiHl位点,得到能抗高浓度氨苄青霉素(200μg／ml)的两个阳性重组体,其胞外总蛋白比亲本质粒高1．1-1．4倍。在大肠杆菌细胞中,BsNPV ocu基因在原核杂合启动子tac驱动下能高水平的表达,表达量达到0．8和4．7mg／ml。免疫沉淀反应证明,表达蛋白为BsNPV的包涵体蛋白,凝胶过摅法测定的平均分子量为32.1×103道尔顿。     

马尾松毛虫核型多角体病毒包涵体的表面增强拉曼光谱研究

获得了马尾松毛虫核型多角体病毒（ＤｐＮＰＶ）包涵体在Ａｇ胶中的ＳＥＲＳ谱。包涵体是通过膜蛋白的ＣＯＯ－和ＮＨ２基团吸附在Ａｇ表面上,Ｔｒｐ和Ｐｈｅ残基侧链接近Ａｇ表面,Ｔｙｒ残基侧链远离Ａｇ表面,ＳＥＲＳ谱中没出现ＡｍｉｄｅⅠ和ＡｍｉｄｅⅢ带。强的低波数谱带（２３８ｃｍ－１）的出现表明包涵体与Ａｇ表面发生了明显的化学吸附。     

粘虫核型多角体病毒和颗粒体病毒侵染粘虫前胸腺的病理观察

观察比较了粘虫核型多角体病毒(Pseudelatia separata NPV,PsNPV)、粘虫颗粒体病毒(Pseudelatia separataGV,PsGV)感染粘虫,以及两种病毒混合感染粘虫后,粘虫(Pseudelatia separata)前胸腺的形态特征和前胸腺细胞的超微结构.结果表明,不同感染组粘虫前胸腺腺体都有不同程度的组织病变,PsNPV感染组在感染晚期与前胸腺相连的气管严重病变,出现大量白色颗粒状物累积,被伊红染成紫黑色,腺体细胞被挤压变形;PsGV感染组的前胸腺腺体变小,单个细胞也小,细胞界限不十分明显;两种病毒混合感染组的腺体细胞小,能被伊红染色的细胞极少.同时,前胸腺细胞的超微结构也有不同程度的病变.     

流感病毒的裂解气相色谱分析

裂解气相色谱法(Pyrolysis Gas Chromatography,PGC)在微生物学的应用中曾多侧重于细菌的鉴定,Mayer最早用PGC做植物病毒的快速鉴定,80年代国内开始开展了病毒的PGC研究。本文报道用PGC分析流感病毒和新城疫病毒的初步结果。     

天然除虫菊素的毛细管气相色谱定量分析

本文建立了一种利用毛细管气相色谱从除虫菊提取物中分离六个有杀虫活性菊酯类化合物,并进行定量分析的方法.采用15 m × 0.25 mm i.d.0.25 μm 的DB-1MS石英毛细管柱,柱温从150至242 ℃分二阶程序升温分离除虫菊提取物中六个有杀虫活性菊酯类化合物,以邻苯二甲酸二丁酯为内标物,用FID检测器进行六个化合物的定量分析.该方法线性相关系数为0.9995,高、中、低三个水平的添加回收率分别为99.7%、99.4%和99.3%.     

莱菔子脂肪酸成分的GC-MS分析

采用索氏提取法提取莱菔(Raphanussativus)种子中的脂肪酸成分,进行甲酯化处理后用气相色谱-质谱联用技术分离和鉴定脂肪酸成分的组成和含量。结果表明,从莱菔子中共分离鉴定出12种脂肪酸成分,占总量的99.32%,主要包括芥酸(32.47%)、油酸(29.07%)、亚油酸(9.45%)、亚麻酸(8.41%)、棕榈酸(4.31%)和硬脂酸(2.08%)等脂肪酸,其中饱和脂肪酸占9.25%,不饱和脂肪酸高达90.07%。     

气相色谱法测定猪结肠内容物中短链脂肪酸含量

目的:为了准确测定猪结肠内容物中蛋白质代谢物短链脂肪酸含量以研究猪结肠蛋白质代谢情况,本文拟利用气相色谱建立一种更准确快速分析猪结肠内容物中短链脂肪酸含量的方法。方法:实验选用体重相近的21日龄断奶的杜长大三元杂交仔猪,单栏饲养。试猪麻醉后放血致死,迅速剖开腹腔,收集结肠末端内容物,保存于-80℃。收集到的结肠末端内容物用偏磷酸预处理,利用毛细管气相色谱法程序升温测定猪结肠内容物中短链脂肪酸含量。结果:结肠内容物经偏磷酸预处理3 h后,在程序升温、0.8 m L/min载气流量的气相色谱条件下,内容物中乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸得到有效分离,其回收率为93%~113%,相对标准偏差为0.46%~0.70%,变异系数小于1%。结论:此方法具有操作简便、快速、准确的优点,是测定动物肠道内容物中短链脂肪酸较为理想的方法。     

Optical Configuration Analysis of Hydroxy Fatty Acids in Bacterial Lipids by Chiral Column High-Performance Liquid Chromatography

Through the adoption of a chiral stationary phase in high-performance liquid chromatography and a simple derivatization method for hydroxy fatty acids, it became easy to separate and identify the optical isomers of 2- and 3-hydroxy fatty acids composing several kinds of microbial lipids. The 2- and 3-hydroxy fatty acids were converted with dinitrophenyl isocyanate to their 3, 5-dinitrophenyl urethane derivatives (DU-derivatives), which were analyzable by HPLC using a chiral column. By varying the composition of an eluent, separation of the DU-derivatives of hydroxy fatty acids differing in optical configuration, chain length and position of hydroxyl group was achieved. The general elution orders of these DU-derivatives were determined with authentic 2- and 3-hydroxy fatty acids. Small amounts (~300 μg) of ornithine-containing lipids isolated from the Serratia marcescens strains were examined by this method to identify 3-hydroxy fatty acids of the lipids as D isomers.     

The Use of Gas Chromatography to Analyze Compositional Changes of Fatty Acids in Rat Liver Tissue during Pregnancy

Gas chromatography (GC) is a highly sensitive method used to identify and quantify the fatty acid content of lipids from tissues, cells, and plasma/serum, yielding results with high accuracy and high reproducibility. In metabolic and nutrition studies GC allows assessment of changes in fatty acid concentrations following interventions or during changes in physiological state such as pregnancy. Solid phase extraction (SPE) using aminopropyl silica cartridges allows separation of the major lipid classes including triacylglycerols, different phospholipids, and cholesteryl esters (CE). GC combined with SPE was used to analyze the changes in fatty acid composition of the CE fraction in the livers of virgin and pregnant rats that had been fed various high and low fat diets. There are significant diet/pregnancy interaction effects upon the omega-3 and omega-6 fatty acid content of liver CE, indicating that pregnant females have a different response to dietary manipulation than is seen among virgin females.