检测大麦抗BYDV的蚜虫获毒的酶联免疫吸附法

检测大麦抗ＢＹＤＶ的蚜虫获毒的酶联免疫吸附法刘常宏（陕西省植物保护研究所,陕西杨陵７１２１００）Ｓ．Ｈａｂｅｒ（ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＣａｎａｄａ,ＷｉｎｎｉｐｅｇＲｅｓｅａｒｃｈＳｔａｔｉｏｎ,Ｃａｎａｄａ）关键词酶联免疫吸附法,大麦,大麦黄矮病毒...     

大麦黄矮病毒GAV株系外壳蛋白基因在大肠杆菌中的高效表达

大麦黄矮病毒 (ＢＹＤＶｓ)是一种由蚜虫专化性传播的循回非增殖型单链正义ＲＮＡ病毒 ,是黄症病毒属 (Ｌｕｔｅｏｖｉｒｕｓ)的代表成员。ＢＹＤＶＧＡＶ是我国的主流株系之一 ,它与美国的ＢＹＤＶＭＡＶ有较强的血清学关系 ,但美国的ＭＡＶ仅由麦长管蚜传播 ,而我国的ＧＡＶ除麦长管蚜传播外 ,还可由麦二叉蚜传播[1,2 ] 。近年来 ,有关麦蚜传播病毒专化性的研究已成为ＢＹＤＶ的研究热点[3 ] 。ＢＹＤＶ病毒的传播涉及病毒粒子表面成分与蚜虫体内专化性受体的相互作用 ,ＢＹＤＶ病毒粒子表面主要成分是ＣＰ ,另外一个次要成分是通读蛋白 (…     

组织培养与普通小麦异源易位系选育

以中国春小麦品种中８６０１、澳大利亚栽培小麦品种Ｓｕｎｓｔａｒ、Ｍｉｌｌｅｗａ作母本,与抗大麦黄矮病毒病（ＢａｒｌｅｙＹｅｌｌｏｗＤｗａｒｆＶｉｒｕｓ,简称ＢＹＤＶ）的小麦－中间偃麦草异附加系Ｌ１杂交,取杂种的幼胚和幼穗作离体培养,获得大量再生植株。经酶联免疫吸附分析（ＥＬＩＳＡ）、限制性内切酶长度多态性分析（ＲＦＬＰ）、染色体数目的检查和田间抗性鉴定,在再生植株回交后代中获得了抗ＢＹＤＶ的杂合易位株,经自交和花药培养纯合,选育出Ｄ１０９１、Ｄ１０９４、Ｄ１６５８、ＴＣ５、ＴＣ６、ＴＣ７等一批抗性稳定或基本稳定的普通小麦选系。以白黑麦６Ｒ二体附加系为抗源,与严重感染白粉病的陕７８５９杂交,经幼胚培养在再生植株回交后代中筛选到白粉病免疫的普通小麦杂合易位系。研究结果表明：在小麦远缘杂交中,组织培养可以作为导入外源基因产生易位的手段之一加以利用。     

抗大麦黄矮病毒小麦——中间偃麦草二体异代换系的选育和细胞,生？…

结合花药培养和常规选育,从７７－５４３３＊中５杂交组合后代中选育出６个抗大麦黄矮病毒（ｂａｒｌｅｙ ｙｅｌｌｏｗ ｄｗａｒｒｆ ｖｉｒｕｓ,ＢＹＤＶ）、染色体数目为４２的小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）新种质,并用减数分裂配对分析、单体小麦测交法、基因组原位杂交、Ｃ分带、同工酶等电聚焦和ＲＡＰＤ对上述材料进行了综合鉴定;表明这些材料都是小麦－中间偃麦草（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎ ｉｎｔｅｒ     

青藏高原矮嵩草草甸种子库的初步研究

青藏高原矮嵩草草甸种子库的初步研究邓自发周兴民王启基（中国科学院西北高原生物研究所,西宁８１０００１）ＴｈｅＳｔｕｄｉｅｓｏｆＳｅｅｄＢａｎｋｏｆＫｏｂｒｅｓｉａｈｕｉｌｉｓＭｅａｄｏｗｉｎＱｉｎｇ＿ＺａｎｇＰｌａｔｅａｕ．ＤｅｎｇＺｉｆａ,Ｚｈｏｕ...     

抗黄矮病小麦新品系YW443的分子细胞遗传学鉴定

以小麦－中间偃麦草二体附加系Ｌ１衍生抗病系ＰＰ９－１为抗源,与小麦推广品种陕７８５９．丰抗８号杂交并自交,在Ｆ６代中选到农艺性状优良的高抗黄矮病小麦新品系ＹＷ４４３。对ＹＷ４４３及其亲本进行抗病性鉴定。结果表明：ＹＷ４４３高抗大麦黄矮病毒ＧＰＶ、ＧＡＶ株系。利用基因组原位杂交,ＲＦＬＰ分析和ＲＡＰＤ分析,研究诉遗传构成及其抗病基因染色体归属。结果表明：ＹＷ４４３（２ｎ＝４３）的遗传构成了４０条（２     

虱矮螨属二新种记述(蜱螨亚纲:矮螨科)

记述我国虱矮螨属Ｐｅｄｉｃｕｌａｓｔｅｒ Ｖｉｔｚｔｈｕｍ二新种：亚潜虱矮螨Ｐ．ｓｕｂａｒｃａｎｕｓ Ｇａｏ ｅｔ Ｚｏｕ,ｓｐ．ｎｏｖ．和闽菇虱矮螨Ｐ．ｍｉｎａｇａｒｉｃｉ Ｇａｏ ｅｔ Ｚｏｕ,ｓｐ．ｎｏｖ．,均采自蘑菇床（培养料）,模式标本保存于上海农学院。     

中国巴矮螨属一新种记述（蜱螨亚纲：矮螨科）

本文记述我国巴矮螨属一新种,陕菇巴矮螨Ｂｒａｓｉｌｏｐｓｉｓｓｈａａｎｌｅｎｔｉｎｉｓｐ．ｎｏｖ标本采自陕西（凤县）栽培香菇椴木架下的表土。模式标本保存于上海农学院园林环境科学系。     

普通大麦和球茎大麦抗病种间杂种的产生及其同工酶标记

以二棱大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ Ｌ．）“苏啤１ 号”为母本与四倍体球茎大麦（Ｈ． ｂｕｌｂｏｓｕｍＬ．）“ＧＢＣ１４１”杂交, 并通过幼胚培养获得１１ 株三倍体Ｆ１ 植株． 三倍体Ｆ１ 植株与二倍体母本二棱大麦“苏啤１ 号”回交, 获得７ 株二倍体回交后代ＢＣ１． ７ 个回交后代株系通过大麦黄花叶病病圃鉴定, 其中ＢＣ１－２株系抗大麦黄花叶病． 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对父本、母本和ＢＣ１－２株系进行了同工酶分析,结果表明二倍体二棱大麦与四倍体球茎大麦的过氧化物酶同工酶差异显著,并且在ＢＣ１－２株系幼根的过氧化物酶同工酶谱中,发现一条来自父本球茎大麦“ＧＢＣ１４１”的过氧化物酶谱带,该酶带的相对迁移率（Ｒｆ）为０．４７, 重复性好并且易于检测．由于回交后代ＢＣ１－２抗大麦黄花叶病, 又带有来自球茎大麦特异的幼根过氧化物酶谱带作为易于检测的同工酶标记,因此该回交后代株系可以作为大麦抗病育种工作重要的抗源．     

利用AABBDDDD八倍体培育小麦一簇毛麦二体附加系的研究

对普通小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ）－节节麦（Ａｅｇｉｌｏｐｓ ｓｑｕａｒｒｏｓａ）八倍体（２ｎ＝８ｘ＝５６,ＡＡＢＢＤＤＤＤ）与硬粒小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｄｕｒｕｍ）－簇毛麦９Ｈａｙｎａｌｄｉａ ｖｉｌｌｏｓａ）六倍体（２ｎ＝６ｘ＝４２,ＡＡＢＢＶＶ）杂交后,将所得七倍体杂种（ＡＡＢＢＤＤＶ）进行连续自交,在Ｆ４代中利用Ｃ－分带鉴定出可能的簇毛麦６Ｖ二体附加系９５－７和２Ｖ二体附加     

水稻矮缩病毒最外层外壳蛋白基因（S2）cDNA克隆,序列分析及其在大？…

从水稻矮缩病毒（Ｒｉｃｅｄｗａｒｆｖｉｒｕｓ,ＲＤＶ）中国福建分离物中克隆分离了最外层外壳蛋白基因（Ｓ２）全长ｃＤＮＡ并对其进行序列分析,结果表明ＲＤＶＳ２ｃＤＮＡ全长３５１２ｂｐ,仅含一个３３４８ｂｐ的阅读框架,编码一人含有１１１６个氨基酸的蛋白（Ｐ２）。与基因库中已知基因序列比较,发现它与日本ＲＤＶＨ株系相应片段的核苷酸和氨基酸同源率分别为９４．６％和９５．４％与轮状病毒ＶＰ２氨基酸序列有一定     

水稻齿叶矮缩病毒Segment 9 dsRNA的序列分析及其在大肠杆菌DE3中的表达

通过有机试剂抽提,ＣＦ－１１纤维素柱层析,从感染水稻齿叶矮缩病毒菲律宾分离株（ＲｉｃｅＲａｇｇｅｄＳｔｕｎｔＶｉｒｕｓ,Ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｉｓｏｌａｔｅ,简称ＲＲＳＶ－Ｐ）的水稻植株中获取该病毒的全基因组,即获得从Ｓｅｇｍｅｎｔ１到Ｓｅｇｍｅｎｔ１０（Ｓ１－Ｓ１０）的１０条双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）,然后设计合适的引物,用ＲＴ－ＰＣＲ方法得到Ｓ９的ｃＤＮＡ并将其克隆到ｐＵＣ１１９质粒上扩增,以双链测序法测定该ｃＤＮＡ的全序列。同时又将此ｃＤＮＡ克隆到大肠杆菌表达质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ上,在大肠杆菌菌株ＤＥ３中用ＩＰＴＧ诱导表达,经超声波破菌、离心、Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析,得到纯化的分子量为６４ｋＤ的融合蛋白。     

携带抗黄矮病基因的中间偃麦草染色体2Ai—2特异的分子标记

小麦－中间偃麦草二体异附加系Ｚ１、Ｚ２具有一对携带抗黄矮病基因的中间偃麦草染色体２Ａｉ－２。利用中间偃麦草（Ｔｈｉｎｏｐｙｒｕｍ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｍ （Ｈｏｓｔ） Ｂａｋｗｏｔｈ ａｎｄ Ｄｅｗｅｙ）和拟鹅冠草（Ｐｓｅｕｄｏｒｏｅｇｎｅｉａ ｓｔｒｉｇｏｓａ）基因组ＤＮＡ作探针,对Ｚ１、Ｚ２进行基因组原位杂交分析。结果表明,Ｚ１、Ｚ２附加的一对中间偃麦草染色体２Ａｉ－２为Ｓｔ－Ｅ染色体,Ｅ组染     

增强UV—B辐射对菜豆蛋白质代谢的影响

模拟研究了温室条件下兰州地区臭氧层减薄２５ ％ 时增强的ＵＶＢ（２８０ ～３２０ ｎｍ） 辐射对菜豆（ Ｐｈａｓｅｏｌｕｓｖｕｌｇａｒｉｓ Ｌ．） 蛋白质代谢的影响。菜豆幼苗期,ＵＶＢ辐射（ＵＶＢＢＥ：１６ ｋＪ·ｍ －２·ｄ－１） 促进菜豆叶片中蛋白质的合成;菜豆生长后期,ＵＶＢ辐射则抑制蛋白质的合成,降低叶片中可溶性蛋白质的含量,促进蛋白水解酶活性的上升和总游离氨基酸的积累。ＳＤＳＰＡＧＥ分析表明,ＵＶＢ辐射使幼苗期菜豆叶片中８８ ｋＤ、７６ ｋＤ、４２ ｋＤ、３５ ｋＤ、３３ ｋＤ 多肽的含量上升;而在菜豆生长后期,ＵＶＢ辐射使大分子量多肽（７６ ｋＤ 以上） 的含量迅速下降,１０～１４ ｋＤ、２９ ｋＤ、３３ ｋＤ、３５ｋＤ的多肽含量上升。蛋白质代谢的这种变化可能是植物的一种适应性反应     

HBsAg携带者重叠感染HCV、HDV的血清学调查

对３６２名无症状高滴度ＨＢｓＡｇ携带者用ＲＩＡ法检测ＨＢｅＡｇ、Ａｎｔｉ－ＨＢｅ、Ａｎｔｉ－ＨＣＶ、Ａｎｔｉ－ＨＤＶ。结果表明,ＨＢｅＡｇ阳性率随ＨＢｓＡｇ滴度的增高而增加,且有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。重叠感染以ＨＢＶ＋ＨＣＶ最高,占２７．６％;其次是ＨＢＶ＋ＨＤＶ,占９．１％;ＨＢＶ＋ＨＣＶ＋ＨＤＶ最少,占６．４％。但是,以上重叠感染率均与ＨＢｓＡｇ滴度及／或ＨＢｅＡｇ阳性率高低无关（Ｐ＞０．０５）。调查显示,无症状ＨＢｓＡｇ携带者中ＨＢＶ＋ＨＣＶ,或ＨＢＶ＋ＨＤＶ,或ＨＢＶ＋ＨＣＶ＋ＨＤＶ的重叠感染均可发生。     

五加属一新种

五加属一新种廉永善,陈学林（西北师范大学生物系,兰州７３００７０）关键词五加属,矮五加,红毛五加ＡＮＥＷＳＰＥＣＩＥＳＯＦＴＨＥＧＥＮＵＳＡＣＡＮＴＨＯＰＡＮＡＸＭＩＱ．￥ＬｉａｎＹｏｎｇｓｈａｎａｎｄＣｈｅｎＸｕｅｌｉｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢ...     

鸡传染性法氏囊炎病毒分子生物学进展

鸡传染性法氏囊炎病毒分子生物学进展赵轶暹,黄海波,郑明（中国兽药监察所,北京１０００８１）１简介鸡传染性法氏囊炎病毒ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｕｒｓａｌＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ（ＩＢＤＶ）可引起鸡的急性传染病,感染雏鸡法氏囊组织,杀伤Ｂ淋巴细胞,其它淋巴...     

用光生物素标记大麦黄矮病毒cDNA探针

应用光生物素(Photobiotin)标记大麦黄矮病毒(BYDV)cDNA分子杂交探针,可用于检测大麦黄矮病毒。反应灵敏度至少可达1ng。在灵敏度相同的情况下,与常规应用α-~(32)p-dCTP标记的分子探针相比,具有安全、稳定、方便、经济的优点。     

一种中国发生的真菌传小麦花叶病毒RNA－13＇末端核苷酸序列分析

以采自河南的真菌传小麦花叶病毒（ＦＷＭＶ－Ｃ）为材料,抽提病毒ＲＮＡ,合成互补ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）。对杂交筛选所得ｃＤＮＡ克隆进行亚克隆及序列分析,结果表明,亚克隆ｐＧＳＩ含有一个长度为８９１个核苷酸的不完整开放阅读框架（ＯＲＦ）和长度为２５８个核苷酸的３＇末端非编码区（ＮＴＲ）,并带有Ｐｏｌｙ（Ａ）尾序。此段序列与大麦黄花叶病毒（ＢａＹＭＶ）及法国报道的一种小麦梭条花叶病毒（ＷＳＳＭＶ－Ｆ）的ＲＮＡ－１３＇末端分别具有６７．６％和６９．９％的同源性。由所测序列编码区（１－８９１ｎｔ）可推导产生２９６个氢基酸,并与ＷＳＳＭＶ－Ｆ及ＢａＹＭＶ外壳蛋白氨基酸序列分别具有７５．９％和７１％的同源性。此结果表明,ＦＷＭＶ－Ｃ为另外一种不同于ＷＳＳＭＶ－Ｆ的大麦黄花叶病毒组（Ｂａｙｍｏｖｉｒｕｓ）病毒,所测基因组片段应为ＲＮＡ－１３＇末端序列,其中可能包括了病毒全长外壳蛋白编码区域。     

小麦丛矮病毒M蛋白基因的序列测定,表达和鉴定

从小麦丛矮病毒（ＷＲＳＶ）基因文库含磷蛋白ＮＳ基因的质粒中,经亚克隆、测序,得到ＮＳ蛋白基因的下游序列,其中含有一读框４５３ｎｔ、编码一分子量约１７ｋＤ蛋白。用ＰＣＲ方法获得该读框全长片段并克隆到表达载体ｐＧＥＸ－３Ｘ,在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）菌株中以ＩＰＴＧ诱导表达,产物由谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）亲和层析柱纯化后,用蛋白质印迹分析鉴定,结果表明,该读框为编码病毒基质蛋白Ｍ的基因。