一种新的内源性钠泵抑制因子前海葱苷原A样物质在牛体内的分布

为了建立一种蟾蜍二烯羟酸内酯（ｂｕｆａｄｉｅｎｏｌｉｄｅｓ）前海葱苷原Ａ免疫方法，并对哺乳动物体内的前海葱苷原Ａ样物质进行检测，我们制备了兔和羊前海葱苷原Ａ抗体。利用ＥＬＩＳＡ法检测了一种新的内源性钠泵抑制因子前海葱苷原Ａ样物质在牛的肾上腺、丘脑、心脏、肾脏、肝脏、小脑、骨骼肌和血液中的分布。研究发现这种前海葱苷原Ａ样物质在肾上腺及下丘脑的含量高于其它腺体组织，其具有抑制人红细胞８６Ｒｂ摄取的特性，可与前海葱苷原Ａ抗体发生免疫交叉反应，但几乎不与哇巴因抗体交叉反应，是一种新的类固醇激素     

从蟾酥中纯化一种内源性钠泵抑制因子

内源性Ｎａ+ Ｋ+ ＡＴＰ酶 (钠泵 )抑制因子是新发现的一种由肾上腺或下丘脑分泌并贮存的具有生理和病理意义的一种生物活性物质 ,在高血压的发生和发展中可能是重要的因素之一 .内源性钠泵抑制因子与高血压发病关系的研究近年来报道较多 ,已成为该领域国际研究的热点 .Ｈａｍｌｙｎ和Ｈａｕｐｅｒｔ研究组从人的血液及牛的下丘脑中纯化出一种与哇巴因相似的明显抑制钠泵活性的哇巴因样物质(ｏｕａｂａｉｎ ｌｉｋｅｃｏｍｐｏｕｎｄ ,ＯＬＣ) [1 2 ] .Ｓｃｈｏｎｅｒ研究组由牛肾上腺中纯化得到一种分子量为 6 0 0 (ＵＶ 2 5 0ｎｍ)的前…     

兔肠道大豆异黄酮还原菌株的分离鉴定及其转化特性

【目的】从兔新鲜粪样中分离对大豆异黄酮黄豆苷原和染料木素具有转化作用的特定细菌菌株。【方法】在厌氧工作站内对獭兔新鲜粪样进行梯度稀释后涂板,挑取单菌落与底物黄豆苷原和染料木素分别厌氧混合培养,用高效液相色谱检测底物被转化情况。【结果】分离得到一株对大豆异黄酮黄豆苷原和染料木素均具有转化作用的革兰氏阳性严格厌氧细菌菌株AUH-JLR41(KJ188150)。根据产物的高效液相保留时间、紫外吸收图谱和质谱分析结果,将菌株AUH-JLR41代谢底物黄豆苷原和染料木素生成的产物分别鉴定为二氢黄豆苷原和二氢染料木素。经手性高效液相系统检测,产物二氢黄豆苷原和二氢染料木素均呈现两个等面积物质峰,表明这两个产物的对映体过量率均为0。通过转化动态研究发现,菌株AUH-JLR41分别在底物黄豆苷原和染料木素加入48 h和72 h后将底物全部转化为产物,该菌株能转化底物黄豆苷原和染料木素的最大浓度均为0.6 mmol/L。经BLAST比对,菌株AUH-JLR41的16S r RNA基因序列与斯奈克氏菌属菌株Slackia equolifaciens DZE(EU377663)的相似性高达99.6%。【结论】兔肠道分离的斯奈克氏菌属菌株Slackia sp.AUH-JLR41在厌氧条件下能将大豆异黄酮黄豆苷原和染料木素分别还原为二氢黄豆苷原和二氢染料木素。     

肾上腺髓质素受体及其信号转导

肾上腺髓质素（Ａｄｍ）是新近发现的一种生物活性多肽,在体内有着广泛的分布,参与机体多种生理功能的调节。Ａｄｍ可与两种受体结合：ＣＧＲＰ受体和Ａｄｍ特异受体。Ａｄｍ与体结合后,通过ｃＡＭＰ－ＰＫＡ等信号转导通路发挥舒长血管、降低血压、利尿利钠和抑制细胞增殖等作用。     

兼性肠球菌Enterococcus hirae AUH-HM195对黄豆苷原的开环转化

摘要：【目的】从褐马鸡粪样中分离对大豆异黄酮黄豆苷原具有转化作用的功能微生物菌株。【方法】在厌氧工作站内对褐马鸡新鲜粪样进行梯度稀释后涂板,从板上挑取单菌落与底物黄豆苷原厌氧混合培养,用高效液相色谱检测底物被转化情况。【结果】分离出一株对黄豆苷原具开环转化作用的革兰氏阳性兼性好氧菌株AUH-HM195（EU919863）,经BLAST比对,该菌株的16S rDNA基因全序与肠球菌属菌株Enterococcus hirae (DSM20160) 的相似性为100%。根据保留时间、代谢产物最大紫外吸图谱以及核     

经典名方温胆汤物质基准总黄酮、柚皮苷和新橙皮苷含量测定

目的：研究并建立紫外分光光度法（UV）和高效液相色谱法（HPLC）分别测定温胆汤物质基准中总黄酮、柚皮苷和新橙皮苷含量。方法：以柚皮苷为对照品，采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮的含量并采用HPLC法测定柚皮苷和新橙皮苷的含量。结果：采用直接测定法测定总黄酮类成分在284 nm处有较强吸收，柚皮苷在20.22～80.88μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系，平均加样回收率为98.33%。柚皮苷和新橙皮苷分别在0.01～0.51 mg/mL和0.01～0.50 mg/mL范围内有良好的线性关系，精密度、稳定性、重复性的RSD均小于5.0%，加样回收率分别为97.11%和102.72%；温胆汤物质基准中总黄酮的平均含量为15.03%，柚皮苷、新橙皮苷的平均含量分别为22.78 mg/g和9.75 mg/g。结论：建立的温胆汤物质基准总黄酮、柚皮苷和新橙皮苷含量测定方法简单、稳定、重复性好，为温胆汤及其相关制剂进一步研究和开发提供实验基础。     

中草药徐长卿(Cynanchum paniculatum)治疗毒蛇咬伤的分子机制研究

徐长卿(Cynanchum paniculatum)作为一种传统中草药,被广泛应用于毒蛇咬伤治疗,然而其疗效的科学实验证据缺乏,治疗的分子机制也不清楚.本文采用有机溶剂萃取、柱层析及高效液相色谱法(HPLC)相结合,从徐长卿中筛选出和分离得到一个功效组分,经质谱和核磁共振鉴定为丹皮酚原苷.动物活体实验与组织病理切片观察表明,该组分显著地抑制尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒引起的出血、水肿及肌肉组织坏死等活性.体外酶活检测显示,丹皮酚原苷可以抑制尖吻蝮蛇毒水解纤维蛋白原活性和PLA2活性.进一步采用分子模拟软件技术,揭示出丹皮酚原苷是通过与蛇毒中主要成分金属蛋白酶和PLA2发生相互作用,从而抑制尖吻蝮蛇毒发挥致伤作用.本研究首次揭示了中草药徐长卿治疗蛇伤的分子机制,为中医治疗毒蛇咬伤使用徐长卿找到了科学实验证据,也为蛇伤药物的研发提供了新的思路.     

内源性洋地黄样物质

近年来发现人和动物体内存在一种内源性洋地黄样物质,该物质对Na-K-ATP 酶能竞争抑制[~3H]-哇巴因与Na-K-ATP 酶的结合,能与地高辛抗体产生交叉结合反应。它具有利尿、排钠、强心和收缩血管等作用。该物质可能产生于下丘脑,高钠摄入和血容量扩张为其释放的有效刺激。内源性洋地黄样物质的性质和作用,与排钠激素、内源性钠泵抑制因子以及血管敏化因子等相似,可能是同一种或同一类物质。内源性洋地黄样物质参与高血压发病机理。     

有基因转录活性的血管紧张素Ⅱ1B受体的组织分布

我们首次利用基因同源重组技术,用包含编码β半乳糖苷酶（ＬａｃＺ基因）基因的ＡＴ１Ｂ同源ＤＮＡ片段,置换ＡＴ１Ｂ受体基因的外显子序列,通过显色示踪基因ＬａｃＺ产生的β半乳糖苷酶,观察了有基因转录活性的ＡＴ１Ｂ受体的组织分布。结果显示ＡＴ１Ｂ受体主要分布在睾丸、肾上腺皮质的球状带和蛛网膜下腔血管及侧脑室脉络膜血管上,在垂体前叶组织中也有少量的存在。为进一步研究ＡＴ１Ｂ受体的生理和生化功能确定了组织学分布范围     

棉铃虫及粘虫肠中咽侧体静止激素样活性物质对咽侧体活性的影响

利用放射化学的方法分别检测了棉铃虫Helicoverpaarmigera、粘虫Mythimnaseparata幼虫和成虫肠中咽侧体静止激素 (allatostatin ,AS)样的活性物质。发现在棉铃虫、粘虫幼虫和成虫肠中均存在的AS样活性物质 ,可以在体外抑制咽侧体 (corporaallata,CA)的保幼激素 ( juvenilehormone,JH)的生物合成。生物测定的结果表明 ,粘虫幼虫肠中AS样活性物质的含量较棉铃虫的高 ;粘虫 1个幼虫肠当量对CA的JH合成的抑制率达 4 3% ,而棉铃虫幼虫肠只有 2 6%。无论是棉铃虫还是粘虫 ,雌成虫中肠对CA的抑制比雄成虫中肠的高 ,后肠对CA的JH合成的抑制明显的低于中肠对CA的抑制。中肠对CA的JH合成的抑制是可回复的。中肠粗提物经蛋白酶水解后对CA合成JH的抑制率降低 ,表明肠中AS样的活性物质是肽或蛋白质     

肾上腺髓质素抑制血管内皮细胞凋亡

肾上腺髓质素抑制血管内皮细胞凋亡内皮细胞结构及功能的正常与否在高血压、动脉粥样硬化、再狭窄等心血管疾病的发病中有重要意义。Ｋａｔｏ等人发现肾上腺髓质素（ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｉｎ,Ａｄｍ）可以抑制内皮细胞凋亡,维持内皮细胞的正常功能。去除培养基中的血...     

动物也能合成吗啡

长期以来认为,动物组织中的内源性阿片类物质都是长链的阿片肽前体:前阿黑皮素(proopiocortin)、前脑啡肽(proenkephalin)或前强啡肽(prodynorphin)的片段,而非肽类的吗啡仅存在于植物中。Spector 及其同事用放射免疫测定法从蟾蜍皮肤中检测出低浓度的吗啡(3 pmol/g)。Goldstein 实验室也从牛的下丘脑及肾上腺检测出吗啡。他们指出,所发现的极少量的吗啡是属于内源性物质还是来自外界,仍不清楚。因此,决定证明吗啡的生物合成。Spector 实验室和 Goldstein 实验室都发表了进一步分析内源性非肽类阿片样物质的实验结果。Goldstein 等发现吗啡和可待因存在于牛下丘脑提取物中;但在牛肾上腺及大鼠脑提取物中则无规律可循。所以不能断定吗啡和可待因是否为内源性物质、是否参与脑功能。Spector 等从大鼠脑     

休克过程中内源性阿片样物质对交感-肾上腺髓质系统的影响

内源性阿片样物质(endogenous opiate substance,EOS)在中枢及外周广泛分布,对机体功能产生多方面影响。就其心血管效应而言,休克等应激状态 EOS水平明显升高,可在心血管中枢、交感神经节、交感神经末梢膨体、肾上腺髓质及心血管效应器官等多个环节程度不同地影响交感-肾上腺髓质系统的活性,参与抑制心血管功能。纳洛酮等阿片受体阻断剂可能通过上述环节程度不等地拮抗 EOS 的作用,部分改善休克个体的心血管功能而表现出一定的抗休克效应。     

棉铃虫及粘虫肠中咽侧体静止激素样活性物质对咽侧体活性的影响

利用放射化学的方法分别检测了棉铃虫Helicoverpa armigera、粘虫Mythimna separata幼虫和成虫肠中咽侧体静止激素（allatostatin, AS）样的活性物质。发现在棉铃虫、粘虫幼虫和成虫肠中均存在的AS样活性物质,可以在体外抑制咽侧体（corpora allata, CA）的保幼激素（juvenile hormone, JH）的生物合成。生物测定的结果表明,粘虫幼虫肠中AS样活性物质的含量较棉铃虫的高;粘虫1个幼虫肠当量对CA的JH合成的抑制率达43%,而棉铃虫幼虫肠只有26%。无论是棉铃虫还是粘虫,雌成虫中肠对CA的抑制比雄成虫中肠的高,后肠对CA的JH合成的抑制明显的低于中肠对CA的抑制。中肠对CA的JH合成的抑制是可回复的。中肠粗提物经蛋白酶水解后对CA合成JH的抑制率降低,表明肠中AS样的活性物质是肽或蛋白质。     

肾上腺髓质脑移植能改变痛觉感受

最近,Illinois 大学的 Sagen 等采用肾上腺嗜铬细胞脑移植的方法,试图改变病觉感受。选用肾上腺嗜铬细胞作为移植物是由于这些细胞可释放去甲肾上腺素、肾上腺素、甲硫-脑啡肽、亮-脑啡肽及其它神经肽等活性物质,从而作用于中枢神经系统调节痛敏。达些活性物质的释放可被类似于尼古丁样的药物激活。首先将成年大鼠的肾上腺髓质组织颗粒或牛肾上腺嗜铬细胞定位注入大鼠中脑中央导水管周围灰质部位,然后分别在1、2、4和8周时间内皮下注射低剂量尼古丁(0.1mg/kg)以刺激移植细胞释放神经活性物质;     

新发现的缩血管活性肽：肾上腺升压素

新发现的缩血管活性肽：肾上腺升压素１９９３年Ｋｉｔａｍｕｒａ等从人的嗜铬细胞瘤组织中分离出一种含５２个氨基酸残基的具有降压作用的肾上腺髓质素（ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｌｉｎ,ＡＤＭ）。它是一种在正常人血浆中发现的血管活性肽,ｍＲＮＡｂｌｏｔ分析表明ＡＤ...     

荷包牡丹碱对垂体前叶组织块释放促肾上腺皮质激素的刺激效应

本实验利用垂体组织块离体灌流技术,观察到－氨基丁酸Ａ受体拮抗剂荷包牡丹碱对切除双侧肾上腺９６ｈ后的大鼠垂体前叶ＡＣＴＨ的分泌具有强烈的刺激作用。但同样浓度的荷包牡丹碱对分离的垂体前叶细胞的ＡＣＴＨ分泌无影响。提示肾上腺切除后,－氨基丁酸在垂体前叶直接或通过间接途径抑制ＡＣＴＨ分泌。     

芍药苷通过抑制脊髓Akt-NF-kB信号通路及小胶质细胞激活缓解炎症性疼痛

芍药苷具有抑制炎症和镇痛的作用，在治疗炎症疼痛方面具有重要价值，但其作用机制尚不明确。本研究发现，弗氏完全佐剂诱导小鼠炎症疼痛模型，用80 mg/kg芍药苷腹腔注射能有效缓解疼痛。检测发现芍药苷治疗后，小鼠机械性痛阈与热板痛阈均明显升高（机械性痛阈值：由6.38±1.00 g提高至8.31±0.81 g；热板痛阈值：由5.78±0.76 s提高至9.90±1.58 s）；同时抑制外周炎症因子TNF-α等的释放（由708.71±46.55 pg/mL降低至588.65±16.02 pg/mL）；免疫组织化学检测发现，芍药苷能有效抑制脊髓背角小胶质细胞的激活；NO检测结果发现，脊髓部位NO合成降低（3.55±0.28 μmol/L·g^-1Pro降至2.25±0.71 μmol/L·g^-1Pro）；Western 印迹检测证实，脊髓部位iNOS在使用芍药苷后，表达恢复正常水平。同时发现，Akt-NF-κB信号可能参与芍药苷的镇痛作用。上述结果提示，芍药苷缓解慢性炎症疼痛可通过抑制炎症因子释放，也通过抑制脊髓小胶质细胞的激活，而此过程依赖抑制Akt-NF-κB信号的激活。     

葆包牡丹碱对垂体前叶组织块释放促肾上腺皮质激素的刺激效应

本实验利用垂体组织块离体灌流技术,观察到γ－氨基丁酸Ａ受体拮抗剂荷包牡丹笃切除双侧肾上腺９６ｈ后的大鼠垂体前叶ＡＣＴＨ的分泌具有强烈的刺激作用。但同样浓度的荷包牡丹笃分离的垂体前叶细胞的ＡＣＴＨ分泌无影响,提示肾上腺切除后,γ－氨基丁酸在垂体前叶直接或通过间接途径抑制ＡＣＴＨ分泌。     

连作苹果土壤酚酸对平邑甜茶幼苗的影响

为探讨连作(重茬)苹果土壤中酚酸类物质的积累与苹果连作障碍的关系,在砂培条件下,取连作果园土壤中实际浓度的酚酸类物质处理平邑甜茶幼苗,探讨了连作2a的果园土壤中实测浓度的根皮苷、间苯三酚、根皮素、对羟基苯甲酸和肉桂酸对平邑甜茶幼苗根系线粒体指标、抗氧化酶活性、膜过氧化程度及活性氧(ROS)含量的影响。结果表明:连作土壤中实际浓度的5种酚酸类物质均使平邑甜茶幼苗生长受到抑制,根系受影响程度高于地上部分,表现为根冠比降低;线粒体膜通透性转换孔(MPTP)开放程度增大,线粒体膜电位降低,细胞色素Cyt c/a比值下降;降低了幼苗根系中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,增加了过氧化氢(H2O2)、超氧阴离子自由基(O·-2)以及丙二醛(MDA)的含量。土壤浓度的5种酚酸类物质中,以根皮苷处理抑制效果最显著,间苯三酚处理抑制力最小。因此,根皮苷是引起苹果连作障碍的主要酚酸,实践中应重点考虑对根皮苷的降解以缓解苹果连作障碍。