用电子自旋共振（ESR）研究肾缺血移植和再灌注过程产生的自由基

在低温（－１００℃）用ＥＳＲ检测和分析了大鼠肾缺血,移植和再灌注过程中出现的ＥＳＲ信号,发现在体（ｉｎｖｉｖｏ）肾缺血１小时再灌注２分钟肾组织除了出现ｇ＝２．００４０的醌类自由基以及ｇ＝１．９３７０和ｇ＝１．９７３０处与过渡金属离子有关的信号外,在低场区又出现一个很明显的信号（ｇ＝２．０８１２）,该信号的位置同及ＬＯＯ．的ｇ     

四苯基卟啉在苯溶液中光解产生自由基的ESR研究

用自旋捕捉-ESR方法对四苯基卟啉(H₂TPP)在苯中光解后产生的活泼自由基进行研究。当PBN存在时,光解中可给出6重ESR峰,表明自旋加合物为[HTPP-PBN]^·。而氧和碘化物的猝灭作用可知H₂TPP的光解是经由三重激发态途径进行的。而PBN的光敏分解则是由尚未转入三重态的H₂TPP所引起的。     

用ESR技术研究含硒蛋白抗羟基自由基作用的活性

用ＥＳＲ技术研究含硒蛋白抗羟基自由基作用的活性。与ＳＯＤ、茶多酚相比较,含硒蛋白对羟基自由基的清除也有显著作用。找到了一种有实用价值,天然无毒,抗羟基自由基的新资源。     

含硒银杏叶清除羟基自由基的ESR研究

利用电子自旋共振技术(ESR)研究了含硒银杏叶提取物对H_2O_2-Fe~(2 )体系产生的羟基自由基的清除作用.与SOD、茶多酚相比,含硒银杏叶提取物对羟基自基也有很强的清除效果.增添了有实用价值的天然、无公害的清除羟基自由基的新资源.     

离体和在体大鼠心脏缺血再灌过程自由基特性的ESR研究

用ESR技术直接测定离体和在体大鼠心肌组织缺血再灌(I-R)过程中的自由基浓度。结果表明,在用无细胞K-H液灌流的离体I-R模型和在体I-R过程中,大鼠心脏结扎LAD10min再灌30s心肌组织中g=2.0015的自由基浓度均显著高于假结扎对照组。提示心脏I-R过程有大量自由基生成,且其主要来源不是白细胞。体外自由基生成系统试验结果表明,Vit C可清除O_2~ 和·OH,N-乙酰半胱氨酸(NAC)只对·OH有一定清除作用。在体结扎LAD前2min静脉注射Vit C或NAC(150mg/kg)可使再灌后心肌内短时间产生的自由基浓度降至接近假结扎组水平,说明心脏I-R过程产生的原初自由基可能以·OH和O_2~ 为主。测定心肌组织自由基信号对微波功率敏感性及信号g值特性表明了I-R过程中显著变化的信号成分主要来自碳中心有机自由基及有机过氧化自由基。它们可能是初级活性氧自由基反应的次级产物。抑制或清除初级活性氧自由基可能成为改善心脏I-R损伤的途径之一。     

电子自旋共振-自由基捕获技术在生物学中的应用

本文结合作者实验室的工作,简要回顾了电子自旋共振-自由基捕获技术在生物领域的应用,包括新型自由基捕获探针的分子设计与合成,以及该技术在细胞、植物体系中的应用实例,并结合该技术的研究现状初步讨论了它的未来发展前景。     

芦丁等天然产物清除活性氧自由基O_(?)~-和·OH的ESR研究

本文用促癌剂PMA(phorbol myristate acetate)刺激人多形核白细胞(PMN)呼吸暴发产生的活性氧自由基,Fenton反应产生的羟自由基·OH,光照核黄素和黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶体系中产生的超氧阴离子自由基O(?)为模型,用自旋捕集方法研究天然产物芦丁,槲皮素,异槲皮苷和汉防已甲素对活性氧自由基(?)和·OH的清除作用.除汉防已甲素外,其它药物都能很明显地清除PMN呼吸暴发过程中产生的活性氧自由基.芦丁和异槲皮苷对(?)的清除率分别高达78.1%和79.9%,远远大于维生素E(12.7%)的作用.除汉防已甲素外,其它三种药物对·OH的清除作用也大于维生素E.四种天然产物对O(?)和·OH的清除作用都小于维生素C.     

过氧化心肌线粒体产生的脂类自由基及（－）－EGCG的抑制作用

本文利用ＥＳＲ技术研究了心肌线粒体酶修饰下的脂质过氧化和脂类自由基,以及（－）－ＥＧＣＧ的抑制作用。结果表明：４－ＰＯＢＮ能捕集ｌｉｐｏｘｙｇｅｎｇｓｅ诱发心肌线粒体产生的自由基,得到６条线谱的脂类自由基和４条线谱捕集物,（－）－ＥＧＣＧ对该体系中使用的１ｉｐｏｘｙｅｎａｓｅ活性无影响,对所产生的自由基有明显的清除作用,并呈量效关系。对脂质过氧化的抑制作用,在本试验浓度范围内随浓度增加变化不大,最大抑制率约２０％。     

高等植物光系统Ⅱ中强光照射产生超氧阴离子自由基的ESR探索

利用自旋捕捉电子顺磁共振（ESR）的方法对从菠菜叶绿体中分离提纯的光系统Ⅱ(PSⅡ)颗粒产生O₂^-_·的机理进行了直接检测.通过对样品充氧、加入超氧化物歧化酶（SOD）抑制剂四氰乙烯（TCNE）以及原位光照检测ESR信号等手段,在PSⅡ中检测到O₂^-_·与DMPO加合物的特征ESR信号.而在没有SOD抑制剂的情况下,光照时PSⅡ中O₂^-_·与DMPO加合物浓度显著下降.进一步实验发现PSⅡ中O₂^-_·产率与氧分子浓度直接正相关.O₂^-_·产率还具有pH值依赖性,在pH值为6.0～6.5范围内,O₂^-_·产率最高,大于此范围时则呈显著下降趋势.而PSⅡ颗粒的Tris处理也将导致O₂^-_·产率的急剧减少.以上结果证实水裂解放氧十分活跃的PSⅡ也是高等植物叶绿体在光照下产生活性O₂^-_·的主要部位,通常大部分的O₂^-_·能被内源SOD清除,且O₂^-_·的生成与PSⅡ的电子传递活性密切相关.     

用电子自旋共振（ESR）研究肾缺血移植和再灌注过程产生的自由基

在低温（－１００℃）用ＥＳＲ检测和分析了大鼠肾缺血,移植和再灌注过程中出现的ＥＳＲ信号,发现在体（ｉｎｖｉｖｏ）肾缺血１小时再灌注２分钟肾组织除了出现ｇ＝２．００４０的醌类自由基以及ｇ＝１．９３７０和ｇ＝１．９７３０处与过渡金属离子有关的信号外,在低场区又出现一个很明显的信号（ｇ＝２．０８１２）,该信号的位置同及ＬＯＯ．的ｇ     

高等植物光系统Ⅱ中强光照射产生地超氧阴离子自由基的ESR探索

利用自旋捕捉电子顺磁共振(ESR)的方法对从菠菜叶绿体中分离提纯的光系统Ⅱ(PSⅡ)颗粒产生Q2的机理进行了直接检测.通过对样品充氧、加入超氧化物歧化酶(SOD)抑制剂四氰乙烯(TCNE)以及原位光照检测ESR信号等手段,在PSⅡ中检测到O2与DMPO加合物的特征ESR信号.而在没有SOD抑制剂的情况下,光照时PSⅡ中O2与DMPO加合物浓度显著下降.进一步实验发现PSⅡ中O2产率与氧分子浓度直接正相关.O2产率还具有pH值依赖性,在pH值为6.0～6.5范围内,O2产率最高,大于此范围时则呈显著下降趋势.而PSⅡ颗粒的Tris处理也将导致O2产率的急剧减少.以上结果证实水裂解放氧十分活跃的PSⅡ也是高等植物叶绿体在光照下产生活性O2的主要部位,通常大部分的O2能被内源SOD清除,且O2的生成与PSⅡ的电子传递活性密切相关.     

苦皮藤中酚性成分抗羟自由基活性研究

从苦皮藤中分离出四个酚性成分 :( )儿茶素 ( 1) ,(— ) -表儿茶素 ( 2 ) ,3,4 ,5-三甲氧基 -苯 - 1- O- β- D-葡萄糖甙 ( 3)和 3,7,4 -三羟基 - 3 -甲氧基黄烷 - 5- O- β- D-葡萄糖甙 ( 4 )。其中 ( 4 )为新化合物。用电子自旋共振技术 ( ESR)研究了它们对羟自由基即(· OH)的清除作用。     

氟中毒大鼠肝肾自由基代谢及硒对其影响

为探讨硒对氟中毒大鼠肝、肾自由基代谢的影响,两组Wistar大鼠饮1.58 mmol/L和2.63 mmol/L高氟水;饮高氟水的同时加饲2.0 mg/kg硒饲料;饮氟水7个月后加饲硒饲料.实验14个月时用低温电子自旋共振(ESR)技术测其肝、肾活性氧自由基(FR)含量;同时测氟(F)、硒(Se)含量;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化物(LPO)含量.结果：氟中毒大鼠在肝、肾氟升高的同时,FR和LPO上升,GSH-Px、SOD下降.在氟中毒不同时期投硒,大鼠肝、肾氟降低,FR和LPO减少,抗氧化酶活性恢复.表明硒不但可拮抗大鼠体内的高氟,还可纠正高氟造成的自由基代谢紊乱.     

光系统Ⅱ颗粒内单线态氧诱导产生超氧阴离子自由基

活性氧是生物体有氧代谢的必然产物。当机体处于疾病或胁迫条件下 ,活性氧的生成将更加活跃[1] 。由于类囊体膜是植物体光合放氧的器官 ,处于高浓度的氧环境中 ,同时类囊体膜上还存在着活跃的电子传递体系 ,因此类囊体膜是超氧阴离子自由基生成的活跃部位[2 ] 。最近的研究表明 ,ＰＳⅠ和ＰＳⅡ都是超氧阴离子自由基的生成部位[3] 。其中 ,对ＰＳⅠ生成超氧的机制研究已比较深入[2 .4 ] ,而对ＰＳⅡ生成超氧阴离子自由基的机制研究是在近几年内刚刚开展[3 ,5- 7] 。ＰＳⅡ中生成的另一活性氧是单线态氧。通常认为由于强光照射下ＰＳⅡ生成的…     

黄芪有效成分对氧自由基清除作用的ESR研究

用电子自旋共振技术研究了黄芪总黄酮(TFA)、黄芪总皂甙(TSA)和黄芪总多糖(TPA)对次黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子自由基和H₂O₂－Fe²⁺体系产生的羟自由基的清除作用．结果表明,这3种成分均有清除氧自由基的作用;对超氧阴离子自由基的清除效能大于对羟自由基的清除作用;其作用强度依次为TFA＞TSA＞TPA．结果提示清除氧自由基可能是黄芪抗衰老的主要机理之一,TFA和TSA是黄芪抗氧化作用的主要药理活性成分．     

神经节苷脂对大鼠缺血皮层自由基和丙二醛含量的影响

成年大鼠永久性结扎右侧颈总动脉,烧凝右侧大脑中动脉并暂时夹闭左侧颈总动脉,造成右侧皮层局灶性缺血模型。采用电子自旋共振(ESR)技术,测定右侧皮层组织的自由基水平;同时用比色法测定丙二醛(MDA)含量。发现动物缺血后12h右侧皮层的自由基和MDA含量均明显升高;而术中一次注射混合型神经节苷脂(GM,50mg/kg,ip)的动物,脑缺血后12h,自由基和MDA含量与正常对照动物比较无明显差别。阻断脑血流可导致皮层自由基增加,伴有自由基诱发的脂质过氧化产物MDA增多。GM通过抑制缺血皮层自由基的生成,减轻脂质过氧化程度,对缺血脑组织起到一定的保护作用。     

ESR检测大鼠肺巨噬细胞释放的活性氧自由基

用ESR捕捉技术检测大鼠AM释放的活性氧自由基的性质表明:1.PMA和BCG均能刺激AM产生较强的OH·;能刺激人末稍血白细胞释放活性氧自由基的ConA和顺铂在本实验条件下未能使AM产生活性氧自由基信号。2.经膜活性剂PMA刺激的AM所释放活性氧自由基的高峰在刺激后2min,而经颗粒性物质BCG刺激,AM释放自由基的高峰时间明显后移。3.测试体系中的AM数过多或过少都不适合捕捉ESR信号。在本实验条件下,捕捉到最高自由基信号的AM终浓度为5×10⁷AM/ml。4.测试体系中存在DETAPAC或EDTA,可使捕捉到的自由基信号明显增强。     

巨噬细胞产生NO.和O_2~-自由基的分子机理

建立了用顺磁共振（ＥＳＲ）和化学发光技术测定巨噬细胞产生ＮＯ和氧自由基的方法．捕捉到了巨噬细胞受佛波酯刺激产生的ＮＯ．和Ｏ－２自由基．测定了在不同浓度Ｌ－精氨酸存在时佛波酯刺激后巨噬细胞产生的ＮＯ自由基．研究了巨噬细胞产生的ＮＯ和氧自由基的分子机理．结果表明巨噬细胞不仅产生氧自由基而且产生ＮＯ自由基．ＮＡＤＰＨ氧化酶产生氧自由基的部位位于巨噬细胞膜的外侧．ＮＯ合成酶活化产生ＮＯ自由基比ＮＡＤＰＨ氧化酶活化产生氧自由基晚几分钟．     

衰老叶片和叶绿体中超氧阴离子和有机自由基浓度的变化

以电子自旋共振波谱技术,研究从水稻、玉米、花生和苋菜的成熟及衰老叶片分离的叶绿体中O_2~-的形成,以及干燥叶绿体和叶片粉末的有机自由基。经紫外光照射后老叶叶绿体的O_2~-浓度比成熟叶增大10～249％。冷冻干燥叶绿体及烘干叶片粉末在辐照前后皆有明显的单峰信号。辐照引发两种干样中形成更多的有机自由基。老叶制备的干样不论辐照或暗下都有较高水平的自由基。以上结果表明,叶片的衰老与自由基引起的损伤有关。