白细胞介素2亲和性配体的筛选

白细胞介素2(IL-2)及其受体拮抗剂的研究对免疫抑制药物的研制具有重要作用.抗白细胞介素2受体α链中和性单克隆抗体5G1(抗Tac型抗体)能够特异性地阻断IL-2与其受体的结合.因此,5G1可作为目标分子被用来在噬菌体展示肽库中筛选白细胞介素2的亲和性配体.经过4轮亲和性筛选以及5G1亲和活性的测定,6个具有明显5G1亲和活性的噬菌体克隆被发现.DNA序列分析结果显示出,所得到的肽序列具有明显的保守性,即SSFT(L/P)I.该序列与IL-2受体α链没有同源性.因此,SSFT(L/P)I可能模拟了IL-2受体α链上的一个不连续表位(mimotope),为白细胞介素2亲和性配体片段.     

金顶侧耳酸提水溶性多糖的研究——PC-3的分离、纯化与结构确定

金顶侧耳(Pleurotus citrinopileatus)子实体的3%三氯乙酸提取液经甲醇分级,十六烷基三甲基溴化铵等进一步提纯得到水溶性多糖PC-3。经Sepharose CL-4B柱层析,醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,PC-3为均一级份。G.C.与P.C.分析表明,Gal、Man为该多糖的组份,其单糖摩尔比为2.5∶1.0。PC-3的分子量约为67000,比旋光度[α]_D~(18°)=+28°。经核磁共振谱等分析,PC-3不含β型糖苷键。部份酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、完全甲基化、G.C.及G.C.-M.S.的分析表明,PC-3是由α(1→6)糖苷键相连的半乳糖构成分子的主链,部分残基C_2上带有分支,每5个Gal残基带有1个侧链,侧链为α(1-2)Man-α(1-2)Man。     

基于气相色谱法分析T2DM患者粪便中SCFAs水平与HbA1c的相关性

目的研究2型糖尿病患者粪便中6种短链脂肪酸水平与糖化血红蛋白的相关性。方法采用气相色谱法检测粪便中短链脂肪酸的含量,并对方法学进行考察。选取2018年在本院查体的2型糖尿病患者57例,根据糖化血红蛋白水平将其分为高糖化组(糖化血红蛋白7.0,28例)与低糖化组(糖化血红蛋白≤7.0,29例)。应用气相色谱法检测两组患者粪便中6种短链脂肪酸水平,并分析6种短链脂肪酸水平与糖化血红蛋白的相关性。结果低糖化组患者粪便中乙酸、丙酸、丁酸、戊酸水平显著高于高糖化组(均P0.05),异丁酸与异戊酸水平差异无统计学意义(均P0.05)。Pearson相关性分析结果表明:在2型糖尿病患者中,糖化血红蛋白与粪便中乙酸呈负相关(r=-0.540 1,P0.000 1),与丙酸呈负相关(r=-0.358 1,P=0.006 2),与丁酸呈负相关(r=-0.421 7,P=0.001 1),与戊酸呈负相关(r=-0.326 8,P=0.042 3),与异丁酸、异戊酸无相关性。结论 2型糖尿病患者粪便中短链脂肪酸水平与糖化血红蛋白存在一定的相关性,短链脂肪酸水平的下降可能是影响血糖控制不佳的主要原因。     

利用~1H-NMR模拟谱研究三核苷酸A3′P(CH_3)5′A3′P(CH_3)5′A的构象性质

根据Altona等人的方法.利用~1H—NMR模拟谱分析了A3′P(CH_3)5A3′P(CH_3)5′A的三种非对映异构体:a、b和C的构象状态.发现:在室温下三个核糖环都是S型构象占优势(X_N≤0.44),而且随温度升高S型构象成分增多;两个二核苷酸片段-PAPA和APAP-的磷酸骨架扭角分别与A3′P(CH_3)5′A两种异构体a或b数值接近.差值约5°左右;二核苷酸片段中核糖环的重叠程度与手性磷原子的构型有关、R构型比S构型的核糖环重叠程度小;从而推测,A3′P(CH_3)5′A3′P(CH_3)5′A各种非对映异构体的稳定性为RR>RS.SR>SS,与化学合成中所见相符合.     

氮磷供给比例对长白落叶松苗木磷素吸收和利用效率的影响

有关氮(N)∶磷(P)供给比例对苗木P吸收和利用影响的研地究仍存在盲点.选用长白落叶松(Larix olgensis Henry.)播种苗作为材料,对比了1∶3、1∶2、1∶1、2∶1、3∶1五个N∶P供给比例对温室条件下苗木生长、针叶和根系中P的含量以及P的吸收和利用效率的影响差异.另设试验对比了分别以NH4+-N和NO3--N为N源情况下5个N∶P比例对P吸收的动力学特征的影响差异.结果表明:1)随着N∶P比例的增加根系有变粗和变长的趋势且根系生物量分配逐渐提高(P=0.0027);2)1∶2比例下叶片P浓度较2∶1和3∶1比例分别提高37％和45％ (P=0.0187),但是P利用率却分别下降了84％和37％ (P=0.0008),并且P吸收效率分别下降了48％和62％ (P=0.0004);3)NH4+-N环境中,随着N浓度提高,P吸收速率呈线性上升(R2=0.908),而在NO3--N环境中P吸收速率和N∶P比例间无相关关系(R2 =0.005).前者和后者环境中Vmax值分别为0.89和0.60 mmol/h/gFM,Km值分别为0.15和0.03 mmol/L.综上:如在N、P同时存在的情况下欲提高长白落叶松苗木对P的吸收和利用效率,可考虑适当控制N的硝化并在一定范围内提高N∶P供给比例.     

LED光质及光周期对香子含笑幼苗生长和光合特性的影响

香子含笑(Michelia gioii)为我国珍贵阔叶树种,在用材、香料、景观等方面具有重要价值。为了进一步培育优良苗木和开发利用其非木质资源,该研究将香子含笑幼苗放置在由2个光周期(12、16 h·d^-1)和4种光质(R:B=8:1、R:B=6:1、R:B:P:G =8:1:1:1、R:B:P:G=6:1:1:1,其中R、B、P、G分别代表红光、蓝光、紫光、绿光)两两组合成、光照强度一致的8个光照条件下生长。结果表明:(1)香子含笑幼苗的苗高和地径增长量、叶长宽比、最大净光合速率、暗呼吸速率及光补偿点在12 h·d^-1光周期R:B=6:1光质下最高,叶面积和叶绿素含量在16 h·d^-1光周期R:B:P:G=6:1:1:1光质下最高。(2)16 h·d^-1光周期处理下的苗高增长量、叶面积、质量指数、叶绿素a+b含量、叶绿素a/b比值、类胡萝卜素含量和光饱和点均高于12 h·d^-1光周期。(3)在红蓝组合光质基础上添加紫、绿光提高了幼苗的质量指数,并影响光合色素的合成和积累;(4)光质R:B=6:1与R:B=8:1相比,更具有促进香子含笑幼苗苗高、地径、叶片生长及提高光合作用的潜力。综上结果认为,对于促进香子含笑幼苗生长和进行光合作用,光周期为 16 h·d^-1光质为R:B:P:G=6:1:1:1光照条件的潜力较大,其次是光周期为12 h·d^-1光质为R:B=6:1的光照条件。     

β-二酮亚胺-铁(Ⅱ)羰基配合物的合成及其表征

β-二酮亚胺配体(ArN(R)CCH(R)NAr,R=CH_3,H,Ar=2,6-二异丙基苯胺,苯胺,2,6-二甲基苯胺等等)可与不同金属配位形成多种配合物,上述配合物因其特殊的反应性能引起了研究者的广泛关注。本文以环戊二烯氯代羰基铁与β-二酮亚胺配体(ArN (R)CCH(R)NAr,R=CH_3,Ar=2,6-二甲基苯胺)反应生成铁的金属配合物,并对其产物进行了IR,1HNMR表征。     

雅鲁藏布江河水中CH_4和N_2O气体浓度及释放特征

河流向大气释放大量温室气体,是陆地生态系统物质循环和能量流动的重要环节。山地河流是温室气体排放的热点区域,但迄今山地河流CH_4和N_2O释放方面的研究较少。为探究高原中大型河流CH_4和N_2O浓度的时空分布特征及其影响因素,对雅鲁藏布江(雅江)干流和主要支流河水中CH_4和N_2O气体进行了季节性采样分析。结果表明,雅江河水中CH_4含量为2.3～864.9 nmol·L-1,N_2O含量为8.2～23.7 nmol·L-1,枯水期CH_4含量和丰水期无显著差异(P=0.112),但枯水期N_2O含量显著高于丰水期(P=0.017),流量和水温可能分别是影响CH_4和N_2O变化的主要因子。雅江河水CH_4和N_2O的释放速率分别为4.3～11.1 mg C·m-2·d-1和0.16～0.37 mg N·m-2·d-1,排放量分别为1.88～4.59Gg C·a-1和0.07～0.16 Gg N·a-1,分别约占全球河流CH_4和N_2O释放量的1.25‰～3.06‰和2.17‰～4.96‰。山地河流CH_4和N_2O的排放需要引起重视,全球河流温室气体释放可能需要进行重新评估。     

环氧合酶基因多态性与阿司匹林抵抗的关系

目的:研究缺血性脑卒中患者阿司匹林抵抗与血小板环氧合酶(COX)单核苷酸基因多态性(SNP)的相关性.方法:169位缺血性脑卒中患者服用阿司匹林100mg/d至少7d,根据血栓弹力图(TEG)检测结果分为阿司匹林敏感(AS)组和非阿司匹林敏感(NAS)组,并采用PCR产物直接测序分析法对患者的COX-1(-1676A＞G)、COX-2(-765G＞C)基因的单核苷酸多态性进行分析.结果:根据TEG检测结果,非阿司匹林敏感(NAS)组66例,阿司匹林敏感(AS)组103例.两组患者间COX-1基因-1676A＞G SNP位点的基因型和等位基因频率分布差异具有统计学意义(P=0.016和P=0.008),特别是其等位基因频率分布具有显著差异.两组患者间COX-2基因-765G＞C SNP位点的基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义(P=0.084和P=0.090).结论:COX-1基因-1676A＞G位点多态性可能与缺血性脑卒中患者患者阿司匹林抵抗的发生相关,COX-2基因-765G＞C位点多态性可能与阿司匹林抵抗的发生无关.     

两猪群间繁殖相关基因表达与生殖细胞数性状相关性研究

采集三周龄杜洛克×梅山(DM,n=30)杂种母猪与PIC-长大(PLL,n=53)杂种母猪卵巢,测定其生殖细胞数目,比较2个猪群间生殖细胞数的差异,并对4个卵泡发育相关基因在2个猪群卵巢中的mRNA表达进行定量分析,研究了这些基因的表达与生殖细胞数之间的关系.结果表明DM杂种猪生殖细胞数显著高于PLL杂种母猪(P＜0.01);DM猪和PLL仔猪卵巢重没有明显差异(P=0.269),两猪群内生殖细胞数和卵巢重的相关性均不显著(分别R=0.335,P=0.07;R=0.119,P=0.398);DM杂种猪ESR和IGF1R的mRNA表达量与其生殖细胞数存在相关(分别R=0.648,P＜0.05;R=0.757,P＜0.01),FSHR和INHBAmRNA的表达与其生殖细胞数无显著相关;PLL母猪ESR、FSHR和IGFlRmRNA的表达与其生殖细胞数有相关性(分别R=0.435,P＜0.01;R=0.438,P＜0.01;R=0.292,P＜0.05),INHBA mRNA的表达与其生殖细胞数无显著相关.     

隆宝滩保护区不同生态系统CH_4和CO_2通量差异及其影响因素

以位于青藏高原中部的隆宝滩自然保护区为对象,在2017—2018年生长季节使用便携式温室气体分析仪对高寒草地、沼泽化草甸和高寒沼泽的CH_4和CO_2通量进行原位观测,结合环境因子确定不同生态系统的CH_4和CO_2通量差异及其影响因素。结果表明,2个生长季节中沼泽化草甸和高寒沼泽排放CH_4,峰值出现在7—9月,高寒草地吸收CH_4,峰值出现在8月,沼泽化草甸和高寒沼泽CH_4通量与高寒草地差异显著(P0.05)。3种生态系统的CO_2通量均为正值,峰值出现在6—8月,高寒草地CO_2通量年均值最大,高寒沼泽最小,二者差异显著(P0.05)。统计显示,高寒草地和高寒沼泽CO_2与CH_4通量之间呈极显著负相关(P0.01),而在沼泽化草甸中二者呈显著正相关(P=0.02)。CH_4、CO_2与环境因子关系的主成分分析结果显示,第1主成分是土壤因子,第2主成分是生物因子,第3主成分是温度因子。逐步回归结果显示,土壤温度是影响月尺度CH_4通量的关键因子,土壤温度和湿度是影响月尺度CO_2通量的关键因子。Pearson相关分析表明,3种生态系统的CO_2通量均与土温呈极显著正相关(P0.01),与土壤水分呈显著负相关(P0.05),CH_4通量则与土壤水分呈极显著正相关(P0.01)。受温度、土壤水分以及土壤有机质和氮等因素影响,高寒草地、沼泽化草甸和高寒沼泽CH_4和CO_2通量存在明显的异质性。因此,在估算青藏高原CH_4和CO_2排放时,需考虑不同生态系统碳排放的差异。     

IL-8受体拮抗剂G31P拮抗小鼠旋毛虫感染的实验研究

目的通过检测感染旋毛虫的小鼠膈肌中IL-8受体CXCR1/2的表达以及肌肉组织纤维化程度,探讨G31P对旋毛虫囊包形成的影响以及防治效果。方法 30只雌性BALB/c小鼠随机分成三组:阳性模型对照组(n=12,皮下注射生理盐水),G31P治疗组(n=12,皮下注射G31P)和阴性正常对照组(n=6,皮下注射生理盐水)。阳性模型对照组与G31P治疗组小鼠应用口饲法感染旋毛虫囊包,(100±5)个/只,于感染后第10天皮下注射G31P(500μg/kg),1次/2d,连续14d,阳性对照组和阴性对照组分别皮下注射等量生理盐水。感染24d后无菌解剖小鼠,收取膈肌组织,用于HE染色和免疫组化分析。结果与阳性模型对照组相比,G31P治疗组旋毛虫囊包数量明显减少(P0.01),而且囊包大多形成不完整、纤维化程度轻。炎症因子受体CXCR1和CXCR2的表达均显著低于模型组(P0.01)。结论 G31P具有下调膈肌组织中炎症因子IL-8受体CXCR1和CXCR2表达的作用,从而拮抗旋毛虫囊包纤维化的形成,并对旋毛虫幼虫虫体结构的完整性产生一定的影响。     

温度、盐度对强壮箭虫耗氧率和窒息点的影响

研究了不同温度、盐度下强壮箭虫的耗氧率和窒息点.结果表明:温度和盐度均对强壮箭虫的耗氧率和比耗氧率有显著影响.试验温度在5℃-25℃,强壮箭虫个体耗氧率(IO)和比耗氧率(SO)开始随温度的升高而升高,之后呈明显下降趋势.其回归方程分别为y=0.0058x3 -0.2956x2+4.415x-8.7816(R2=0.99,P＜0.05)和y=0.0011x3 -0.0546x2+0.8161x-1.6232(R2=0.99,P＜0.05),数值分别为6.30～11.71μg·ind-1·h-1和1.22 ～2.16μg· mg-1·h-1,窒息点为4.18～6.87 mg·L-1.盐度10 ～40条件下,IO和SO随盐度的升高逐渐下降,回归方程分别为y=-0.0068x2 -0.1412x+21.702(R2=0.89,P＜0.05)和y=-0.0013x2-0.0261x+4.0114( R2 =0.89,P＜0.05),数值分别为4.98～17.73μg ·ind-1·h-1和0.92～3.56 μg·mg-1 ·h-1,窒息点为4.02～6.24 mg·L-1.对强壮箭虫与其他水生动物的耗氧率和窒息点进行比较得出,强壮箭虫是一种狭氧性浮游动物.     

苄星青霉素与头孢曲松钠联合治疗早期梅毒的疗效比较

目的:观察苄星青霉素与头孢曲松钠联合应用治疗早期梅毒的临床疗效及血清学变化。方法:113例早期梅毒患者,随机分成苄星青霉素联合头孢曲松钠治疗组(A组)58例和苄星青霉素单一治疗组(B组)55例。结果:A组有效随访例数为55例;B组有效随访数为52例。1周内皮损消退率,A组为89.7%(35/39),B组为64.9%(24/37)。3个月TRUST阴转率,A组为40.0%(22/55),B组为21.2%(11/52),二组差异有统计学意义(x2=4.451,P=0.039)。6个月TRUST阴转率,A组为67.3%(37/55),B组为42.3%(22/52),二组差异有统计学意义(x2=6.735,P=0.012)。9个月TRUST阴转率,A组为90.9%(50/55),B组为73.1%(38/52),二组差异有统计学意义(x2=5.820,P=0.022)。12个月TRUST阴转率,A组为94.5%(52/55),B组为82.7%(43/52),二组差异无统计学意义(x2=3.771,P=0.068)。血清固定率,A组为1.8%(1/55),B组为9.6%(5/52)。结论:苄星青霉素联合头孢曲松钠治疗早期梅毒效果较单一使用苄星青霉素显著,表现在皮损消退时间快、梅毒血清阴转时间缩短,血清固定率降低。     

荒漠草原柠条新萌蘖枝叶相关关系及生态学意义

为了解荒漠草原柠条当年新生枝叶比例关系及其对干旱环境的生态适应策略,通过调查当年新萌蘖枝长、枝重和总叶数、叶面积、叶重和比叶重等指标以及测定新生叶水分含量,研究了新萌蘖枝量和叶量间相关关系,并分析了枝量变化对枝叶水分分配的影响.结果表明,总叶数(R~2=0.573,Adjusted R=0.569,P=0.000)和比叶重(R~2=0.237,Adjusted R=0.230,P=0.000)均与枝长存在幂函数回归关系,总叶面积(R~2=0.522,Adjusted R=0.518,P=0.000)和叶鲜重(R~2=0.485,Adjusted R=0.481,P=0.000)均与枝长存在线性回归关系;枝长越大,叶量越大,叶重越大.总叶数与枝重间存在幂函数回归关系(R~2=0.626,AdjustedR=0.623,P=0.000),而总叶面积(R~2=0.645,Adjusted R=0.642,F=196.824,P=0.000)、叶重(R~2=0.758,AdjustedR=0.756,P=0.000)和比叶重(R~2=0.361,Adjusted R=0.356,P=0.000)均与枝重间存在线性回归关系;叶重与枝重间成等速生长关系,与WBE预测模型3/4次幂函数关系出现偏差.并且,枝量(枝长和枝重)与叶水分含量间存在显著负相关关系(P<0.01),枝量特别是枝长显著影响新叶的水分含量.     

半胱胺盐酸盐对高温条件下泌乳后期奶牛生产性能的影响

目的:探讨夏季高温、环境温湿指数(THI)高于76条件下半胱胺盐酸盐(Lactonin)对泌乳后期奶牛产奶性能的影响.方法:96头黑白花奶牛,分为Lactonin(3000 U/d)处理(LT,n=49,泌乳中期曾接受Lactonin)和对照组(n=47),再根据高温期以前的产奶量(M)将LT组和对照组分别组分成4个产量组(G,n=12;第4组LT,n=13;对照组,n=11):G1(M＜24 kg/d),G2(24＜M＜28 kg/d),G3(28＜M＜32 kg/d),G4(M＞32kg/d).结果:与对照相比,第一产量组LT奶牛的体温降低(P＜0.05);常乳、标准乳及饲料转化效率提高(P＜0.05)、乳脂率增加(P＜0.05),乳蛋白量倾向增加;体细胞数趋于降低.所有参试LT奶牛平均乳脂率显著增加(P＜0.05),乳蛋白量倾向增加;常乳和标准乳产量趋于提高;血清中胰岛素浓度显著提高(P＜0.01),T3、T4浓度有降低趋势.结论:Lactonin有利于高温季节奶牛正常代谢的维持,改善奶产量和乳品质,提高饲料利用效率.Lactonin对奶牛的积极影响是经过胰岛素、T3、T4等内分泌激素和生长轴介导的.     

电针对炎性痛大鼠背根神经节卫星胶质细胞活化和P2X7受体表达的干预

目的观察电针对慢性炎性痛大鼠患侧足跖机械痛阈(paw withdrawal thresholds,PWTs)以及背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)内卫星胶质细胞及其P2X7受体活化的影响,探讨电针抗大鼠炎性痛的外周机制。方法第一部分:将大鼠完全随机分为空白组(Con group,n=12)、炎性痛组(CFA group,n=12)、炎性痛+电针组(CFA+EA group,n=12)、炎性痛+假电针组(CFA+s EA group,n=12)。炎性痛大鼠于右后足掌侧正中皮下注射完全弗氏佐剂(complete freud’s adjuvant,CFA)每只0.1 m L构建模型;电针处理取穴"足三里"、"昆仑",电针参数为疏密波,频率2/100 Hz,强度0.5-1-1.5 m A(每个强度治疗10 min),每日1次,连续7 d。检测造模前和造模后1、3、7、8、10、12、14 d各组大鼠机械痛阈,采用免疫印迹法检测造模后14 d各组大鼠患侧DRG中神经胶质酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及P2X7受体活化情况。第二部分:将大鼠随机分为炎性痛+DMSO组(CFA+DMSO group,n=8)、炎性痛+P2X7R抑制剂A740003组(CFA+A740003 group,n=10)、炎性痛+电针+生理盐水组(CFA+EA+NS group,n=8)、炎性痛+电针+P2X7R激动剂Bz ATP组(CFA+EA+Bz ATP group,n=12),分别鞘内注射相应药物。分别于手术前、造模前、造模后和给药后各时点检测大鼠PWTs变化。结果 (1) CFA致炎性模型大鼠痛阈显著下降(P 0.01),电针治疗后其机械痛阈显著升高(P 0.01)。CFA足底注射14 d后,大鼠患侧L4-6 DRG中GFAP、P2X7蛋白表达显著增多(P 0.05);电针显著抑制大鼠患侧L4-6 DRG中GFAP、P2X7蛋白表达(P 0.05),而CFA+s EA组却无明显变化(P 0.05)。(2)与CFA+DMSO组比较,鞘内注射P2X7抑制剂A740003显著提高CFA大鼠机械痛阈(P 0.01); CFA+EA+Bz ATP组大鼠PWTs明显低于CFA+EA+NS组(P 0.01)。结论抑制大鼠背根神经节卫星胶质细胞活化和P2X7受体表达参与电针抗慢性炎性痛,可能是电针镇痛外周机制之一。     

基于TM影像的表层土壤有机碳空间格局

土壤有机碳是土壤肥力的核心指标之一,理解其空间分布格局对促进精准农业的发展和科学施肥具有重要意义.本研究旨在检验TM影像结合地面采样数据分析黑龙江省黑土分布区表层土壤有机碳空间分布格局的可行性.结果表明:1)表层土壤有机碳浓度与TM5波段呈显著正相关(r=0.553,P＜0.01),与TM4、TM5波段影像像素值之间满足二次多项式回归关系(R2=0.6791,P＜0.05);2)回归模型对表层土壤有机碳空间分布格局具有较好的预测效果(R2=0.7097,P＜0.05);3)海拔高于200 m的地区表层土壤有机碳浓度显著高于海拔低于200 m的地区(P＜0.05).     

冬季水分管理和水稻覆膜栽培对川中丘陵地区冬水田CH4排放的影响

采用静态箱-气相色谱法观测冬季水分管理和水稻覆膜栽培对川中丘陵地区冬水田全年的CH_4排放通量。试验设置持续淹水(CF)、冬季直接落干+稻季淹水(TF)与冬季覆膜落干+稻季覆膜(PM)3个处理。结果表明,冬季休闲期,CF、TF和PM处理CH_4排放分别为16.1、1.4 g/m~2和2.7 g/m~2;水稻生长期,CF、TF和PM处理CH_4排放分别为57.7、27.7 g/m~2和13.5 g/m~2。相较于CF处理,TF与PM处理分别减少其全年CH_4排放60.6%和78.0%。TF与PM处理水稻生长期CH_4排放峰值分别较CF处理低33.0%和56.1%。休闲期,TF、PM处理厢面与厢沟区域CH_4排放与土壤温度显著正相关(P0.05),与土壤氧化还原电位(土壤Eh)显著负相关(P0.05),而CF处理CH_4排放仅与土壤温度显著正相关(P0.05)。水稻生长期,CF处理CH_4排放与土壤温度显著正相关(P0.05),与土壤Eh显著负相关(P0.05),TF处理CH_4排放仅与土壤Eh显著负相关(P0.05),PM处理厢沟CH_4排放与土壤Eh显著正相关(P0.05)。各处理水稻生长期土壤可溶性有机碳含量(DOC)与微生物生物量碳含量(MBC)显著高于休闲期(P0.05)。研究结果为进一步研究冬水田全年CH_4排放规律及寻求有效的减排措施提供数据支撑和科学依据。     

组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶重组大肠杆菌发酵条件研究

目的:对重组大肠杆菌组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)进行了发酵条件研究。方法:在摇瓶和5L发酵罐中研究了(NH4)2SO4和葡萄糖浓度对质粒的分离稳定性及青霉素G酰化酶表达的影响。结果:该工程菌质粒具有分离不稳定性,培养基中无(NH4)2SO4时发酵过程中pH和糊精水解生成葡萄糖的浓度变化较小,细胞前期(0h-12h)的生长速率降低,质粒分离稳定性和青霉素G酰化酶的表达水平提高。发酵过程中维持低葡萄糖水平可以限制细胞的生长速率,提高质粒稳定性和促进青霉素G酰化酶的合成。采用混合碳源发酵,发酵培养基含糊精2g/L,12h后以1g/L.h恒速流加葡萄糖至35h,控制流加过程葡萄糖浓度0.1g/L左右,平均比生长速率为0.06h-1,发酵结束时质粒稳定性为86%,青霉素G酰化酶的表达水平达23 000U/L。结论:重组大肠杆菌组成型表达青霉素G酰化酶的研究对工业生产有一定指导意义。