分光光度法测定血清谷丙转氨酶活力实验原理的教学

分光光度法测定血清谷丙转氨酶活力的实验原理包括光吸收、朗伯-比尔定律、分光光度计仪器工作原理和生物化学反应原理。论述在生物化学实验教学中既要重视生物化学知识原理,也要重视实验仪器基本工作原理,有利于学生触类旁通,利用所学知识分析和解决科学实验或生产实践中遇到的问题。     

显微分光光度计测量细胞内物质含量的两种方法——双区法和双波法的比较

一、前言根据显微分光光度计测得被测物质的透射光、反射光、荧光等的光强可确定物质的含量。其中透射法的原理是基于朗伯-比尔定律。此定律在被测物质均匀分布的情况下才能成立。化学样品很易满足这一条件。但生物样品,特别是细胞样品由于其所含物质的不均匀分布及其形状不规则,满足不了此种条件,测量结果必然产生误差。为消除这一误差,人们引入了双区法、双波法和扫描法。本文只就前两种方法     

基于微孔板的高通量筛选6-羟基烟酸转化菌方法的建立

建立了一种基于96孔板-酶标仪的双波长紫外分光光度法高通量筛选6-羟基烟酸转化菌的方法.实验以251nm为测定波长、231nm为参比波长测定转化样品的6-羟基烟酸含量,6-羟基烟酸与△A251-231在0.5～11 μg/mL浓度范围内有良好的线性关系,服从朗伯-比尔定律,平均回收率为99.11%～100.81%.利用96孔板-酶标仪,每天筛选量可达到2000～5000个反应,达到高通量筛选要求.     

利用激光雷达数据估算韩国森林有效植被面积指数

雷达系统能够同时探测森林的水平结构和垂直结构, 结合地面控制点还可以高精度地描绘森林中的树干、树冠及林下植被. 基于此理念, 通过计算雷达激光束被拦截的比例估算红松(Pinus koraiensis)、日本落叶松(Larix leptolepis)和栎类(Quercus sp.)的有效植被面积指数(PAI_e). 从冠层表面或冠层内部反射的雷达数据中利用k-均值聚类方法提取林隙分数(G_LIDAR), 根据比尔-朗伯吸收定律和G_LIDAR计算PAI_e. 结果显示, 利用雷达数据推算的红松、日本落叶松和栎类的PAI_e与实际测量的PAI_e之间的相关系数分别为0.82, 0.64和0.59. 不同树种之间雷达测量值与实测值之间相关性的差异, 主要来自于叶片与枝条数量的不同. 如果没有树叶, 激光雷达的脉冲只能由枝条反射, 然而枝条的大小往往小于激光雷达的分辨率(1 m), 所以与长满树叶的枝条相比, 光秃的枝条反射雷达脉冲的几率非常小. 因此, 若在春季末期树叶出现后进行此类研究, 估算的准确度将有所提高.     

分光光度法测定叶绿素含量及其比值问题的探讨

本文以水稻、棉花、玉米以及喜荫植物吉祥草为材料,采用分光光度法比较了不同性能的分光光度计对叶绿素含量及其比值测定的影响。结果表明,狭缝宽度过小或过大均导致叶绿素定量结果的相对误差增大,但仪器的波长偏移是引起测定结果误差的主要原因。波长偏差超过1nm时会影响混合溶液中叶绿素b的定量结果以及叶绿素的相对比值（Chla／Chlb）,波长“蓝移”引起Chla／Chlb偏高,波长“红移”则导致Chla／Chlb偏低。波长偏移及波长重现性差是造成Chla／Chlb比值偏离其“理论比值”、导致测定数据之间缺少可比性的原因。选择具有波长自动校准功能、波长精度高、狭缝宽度在1-2nm的分光光度计用于叶绿素含量及其比值的测定则可获得可比性强、重现性好、准确度高的结果。     

薄层层析和高效液相层析技术结合测定植物叶片水杨酸含量

水杨酸（SA）是植物的一种次生代谢产物,具有多种生理调节作用［‘j。它属于酚类化合物,有一个苯环,在一定波长的紫外光激发下有一个特定的荧光发射峰。所以,利用荧光分光光度计或者高效液相层析（HPte）可以定量分析。由于植物组织中具有许多发荧光的物质,会干扰SA的测定,因此,直接利用荧光分光光度计测定植物组织中3A含量会有误差。目前,大多数实验室都用HPth测定植物组织中SA,其中除Palva等［’‘在制备样品时用C18柱纯化了样品之外,多半对样品均未预先纯化p,‘－”。从经济角度考虑,用C18往纯化样品的价格较贵,而国…     

关于测定叶绿素含量及a:b值等若干问题

常有读者来信询问:为什么同一叶绿素溶液,在相同波长下,用72型或721型分光光度计测得的光密度值要比用751型分光光度计测得的值低?代入Arnon公式计算所得的a:b值也比文献报道的数值范围(2.5—3:1)不同,有的竟低到2:1左右。关于这个问题以及叶绿素测定的有关事项,现请植物生理研究所光合室杨善元同志简复如下:     

“孟德尔定律”的教学组织

19世纪中期,在布隆修道院的花同里,孟德尔种植豌豆、山柳菊、玉米等植物,进行植物杂交试验,通过对豌豆试验现象分析和研究,发现了生物遗传的分离定律和自由组合定律．后人称为孟德尔定律。本文主要探讨高中生物学新课程中有关孟德尔定律的教学组织。     

关于用硫酸钡比浊法测定叶片中硫化物的探讨

采用硫酸钡比浊法法测定叶片中的硫化物。植物样品经强酸的消解和氧化产生硫酸根离子,加起浊剂(BaCl2)硫酸根与钡离子生成微细的硫酸钡胶体(BaSO4)微粒悬浮于溶液中,然后用分光光度计测定其浊度。该法是经典方法,简单实用。     

示波极谱滴定法测定植物中钾含量的研究

示波极谱滴定法测定植物中的钾未见报道,本文用示波极谱滴定法对植物中钾的测定,做了多方面的研究。实验表明以ＨＡｃ－ＮａＡｃ为底液ｐＨ＝５．０的缓冲溶液中,加入过量的标准四苯研究钠（Ｎａ－ＴＰＢ）溶液,然后用标准ＡｆＮＯ３溶液滴定过量的四苯硼钠,利用四苯硼钠示波极谱曲线（ｄＥ／ｄｔ＝ｆ（Ｅ））上有切口,并和Ａｇ＋能定量反应,使切口消失为终点。测定结果满意。该法直观、简便、快速、灵敏、准确、不用加指示剂。溶液混浊、沉淀及有色,均不干扰测定,适用于植物中钾的测定。     

中国毛蚜亚科一新纪录属--朗伯毛蚜属(同翅目,蚜科)

报道了中国毛蚜亚科Chaitophorinae1新纪录属——朗伯毛蚜属Lambersaphis Narzikulov,1961和1新纪录种——杨朗伯毛蚜Lambersaphis pruinosae(Narzikulov,1954)。该蚜虫在中国采自新疆维吾尔自治区的石河子市,国外分布在塔吉克斯坦和哈萨克斯坦。文中记述了杨朗伯毛蚜无翅孤雌蚜的形态特征、在中国的地理分布,绘制了形态特征图。研究标本保存在中国科学院动物研究所动物标本馆和法国自然历史博物馆。     

几种测定植物叶绿素含量的方法比较

植物叶绿素含量的测定大致可分为分光光度计法和活体叶绿素仪法两大类,目前还有人在研究反射型的活体叶绿素仪。本文就这些测定方法作些简要介绍和比较,以供读者参考。 1.分光光度计法由于所用提取叶绿素的溶剂不同,分光光度计法又有多种测定方法。 (1)丙酮法丙酮法是Mackinney(1941)首先     

全细胞高通量筛选α-氨基酸酯水解酶突变体的方法

【目的】建立高效敏感的高通量筛选方法,用于筛选头孢克洛合成活性提高或热稳定性提高的α-氨基酸酯水解酶。【方法】根据头孢克洛在碱性条件下水解生成的衍生物在340 nm处有特征吸收峰的原理,制作出标准曲线。采用全细胞96孔板紫外分光光度法高通量测定α-氨基酸酯水解酶突变体的头孢克洛合成活性。【结果】头孢克洛含量与△A340?405在(0.1?0.6)×10?3 mol/L浓度范围内有良好的线性关系,服从朗伯-比尔定律,平均回收率为99.8%?101.3%。一轮定点饱和突变产生的2 300个克隆经该方法的筛选,获得3株kcat提高40%以上,4株半失活温度较野生型提高5°C以上的突变体酶。【结论】该方法准确可靠,每天筛选量可达到2 000个反应,达到高通量筛选的要求。     

哈代-温伯格定律的妙用

1908年和1909年英国数学家哈代和德国医生温伯格分别独立证明，如果一个种群符合下列条件：①种群是极大的；②种群个体间交配是随机的；③没有突变产生；④种群之间不存在个体的迁移或基因交流；⑤没有自然选择。那么。这个种群的基因频率（包括基因型频率）就可以一代代保持平衡，这就是哈代-温伯格定律。也称遗传平衡定律。下面探讨该定律在相关问题中的应用。     

叶绿素含量测定中Arnon公式的推导

绿色植物叶绿素的定量测定,是植物生理学的必做实验之一。在测定叶绿素含量时,一般都采用分光光度法,即根据叶绿素对可见光的吸收光谱,在某一特定波长下,测定其吸光度(A),然后利用Arnon公式计算叶绿素含量。关于同一叶绿素溶液,在相同波长下,用不同型号分光光度计测得的吸光度值的误差及用Arnon公式计算所得叶绿素a/b比值的高低,杨善元同志曾在《植物生理学通讯》1983年第4期上作过解释。关于Arnon公式的求解精度及其对实际应用的影响,     

全细胞高通量筛选a-氨基酸酯水解酶突变体的方法

【目的】建立高效敏感的高通量筛选方法,用于筛选头孢克洛合成活性提高或热稳定性提高的a-氨基酸酯水解酶。【方法】根据头孢克洛在碱性条件下水解生成的衍生物在340 nm处有特征吸收峰的原理,制作出标准曲线。采用全细胞96孔板紫外分光光度法高通量测定a-氨基酸酯水解酶突变体的头孢克洛合成活性。【结果】头孢克洛含量与△A340?405在0.1?0.6×10?3 mol/L浓度范围内有良好的线性关系, 服从朗伯-比尔定律, 平均回收率为99.8%?101.3％。一轮定点饱和突变产生的2 300个克隆经该方法的筛选, 获得3株kcat提高40%以上, 4株半失活温度较野生型提高5 °C以上的突变体酶。【结论】该方法准确可靠,每天筛选量可达到2 000个反应, 达到高通量筛选要求。     

叶面积指数田间测量中有限长度平均法的改进

叶面积指数(LAI)的田间测量是生态和农业等领域的常规工作之一, 测量方法分为直接测量和间接测量, 间接测量中有一类方法基于数字相机照片提取冠层孔隙率, 再用有限长度平均法同时估算LAI和聚集指数。然而, 有限长度平均法自提出以来缺少进一步的发展, 在有限长度的样线/样方上应用比尔定律的方式具有理论缺陷, 可能造成无效值或高估LAI。从模拟的训练数据中提取经验公式以取代比尔定律进行样线/样方的LAI估算, 提高了有限长度平均法的精度和鲁棒性。进一步分析在一定精度需求下对样线/样方大小和数量的要求, 对于非均匀样地, 提出样线长度为8倍等效叶片边长、样方边长为3倍等效叶片边长的推荐设置。在基于数字相机照片提取非均匀样地LAI的应用中, 使用样方采样比样线采样更为适宜。     

重组生物制品十二烷基硫酸钠含量检测方法的建立

目的：用亚甲基蓝-分光光度法检测重组生物制品中十二烷基硫酸钠（SDS）的含量。方法：将送检样品按比例稀释后与亚甲基蓝混合,加入氯仿进行萃取,然后用紫外分光光度计测定各样品的吸光度D值。结果：SDS浓度为0～0.01mg/mL时,SDS与D651nm值呈线性关系。结论：在一定的SDS浓度范围内可用亚甲基蓝-分光光度法检测重组生物制品中SDS的含量。     

鸢尾属药用植物总DNA提取方法的比较研究

以鸢尾属（Iris L．）药用植物鸢尾Iris tectorum Maxim．叶片为材料,分别采用CTAB法、高盐低pH法、SDS法和试剂盒法四种方法提取植物总DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计、ISSR和RAPD四种方法对所提取的DNA样品进行检测。结果表明,用SDS—I法提取的植物总DNA纯度、浓度和完整性都很高,从经济角度考虑优于用试剂盒提取,从提取效果考虑不亚于用CTAB法和高盐低pH法提取,是比较适合鸢尾属植物总DNA提取的方法。     

芳香酰胺类化合物的选择性水解菌初筛模型的研究

建立了一种快速筛选选择性水解手性芳香酰胺类化合物微生物的方法。在中性或弱碱性条件下,KMnO4能氧化芳香胺,但对芳香乙酰胺没有氧化效果。KMnO4被芳香胺还原而褪色,通过褪色程度来快速测定菌的酶活力及手性选择性。以1-苯基乙酰胺为例,得出最佳筛选体系:最大吸收波长为525 nm;1-苯基乙胺在0.04~5 mmol/L的浓度范围内与其ΔA525符合朗伯比尔定律;反应温度为60℃,反应时间为20 m in。通过该模型筛到5株选择性的菌株,R-选择性的菌株4株,S-选择性的菌株1株。