氯化二丁基锡对雄性小鼠睾丸和精子质量的影响

成年雄性小鼠腹腔注射 0 0 2 5～ 0 40 μg/kg/d氯化二丁基锡 (DBTCl) ,染毒 7d。实验温度 2 2± 2℃ ,光∶暗 =1 2h∶1 2h。结果表明 ,DBTCl对雄性小鼠生殖系统毒性影响很强。在≥ 0 0 5μg/kg剂量作用下 ,小鼠睾丸重量、精子存活率和密度明显下降 ,精子畸形率明显增加。观察发现 ,在 0 0 2 5～ 0 0 5μg/kg低剂量组中精子头部畸形率较高 ,而在0 2 0～ 0 40 μg/kg高剂量作用下 ,精子尾部的畸形率明显增加。剂量大于 0 1 0 μg/kg处理组小鼠体重明显下降。DBTCl和雄性小鼠生殖指标之间存在剂量 效应关系。DBTCl对精子存活率和精子密度 7d的ED50 值分别为 0 1 7和 0 1 9μg/kg。本项研究为有机锡化合物引起哺乳动物精子畸形的早期诊断提供可能的指标与方法     

镧对鲤鱼五种组织超氧化物歧化酶同工酶及酶活性的影响

将鲤鱼暴露于不同浓度的氯化镧溶液120 d,研究稀土元素镧对鲤鱼脑、肝胰脏、肾、鳃、肌肉5种组织超氧化物歧化酶(SOD)同工酶及酶活性的长期影响,结果表明:镧对SOD的影响表现出一定的组织差异性.在实验浓度范围内(0.01～5 mg/L),镧对肝胰脏、鳃、肌肉SOD均有明显抑制作用,且与对照组相比相差显著或极显著(P< 0.05或P< 0.01),而脑、肾SOD活性与对照组相比无显著性差异(P>0.05).同工酶电泳实验结果表明:镧能使鲤鱼肝胰脏、脑、肾、肌肉、鳃SOD酶带活性强弱发生明显变化,还能使肝胰脏SOD同工酶酶带缺失.     

重组人睾丸精子结合蛋白对人精子蛋白激酶A及蛋白激酶C活性的影响

为探讨人睾丸精子结合蛋白(human testis sperm binding protein,hTSBP)促进人精子获能的分子机制,检测了重组hTSBP对人精子蛋白激酶A(PICA)和蛋白激酶C(PKC)活性的影响.用重组载体pcDNA3.1/myc-His(-)B-tsbp转染真核细胞后,金属亲和层析纯化表达的重组蛋白质His6-TSBP;重组蛋白质处理健康成人精子后,分别提取精子胞浆及胞膜蛋白组分,发现重组蛋白质可以与精子胞膜结合;经放射自显影检测,发现0.1 mg/ml重组蛋白质可以提高人精子中PKA的活性,对精子膜PKC活性无显著影响.     

低温胁迫下氯丙嗪和氯化镧对水稻幼苗脯氨酸积累的影响

低温胁迫下水稻幼苗质膜透性增大、相对含水量(RWC)下降、丙二醛(MDA)含量增加,同时脯氨酸(Pro)积累。以氯丙嗪(CPZ)和氯化镧(LaCl3)对水稻幼苗预处理以阻碍Ca2+·CaM(钙调素)信使传导后,加剧了低温胁迫下水稻幼苗质膜透性的增加、RWC的下降、MDA含量的增加和Pro的积累,说明水稻幼苗受伤害程度将加重。     

氯化镧对西门塔尔牛瘤胃发酵及尿嘌呤衍生物的影响

选用4头体重420 kg,年龄2.5岁装有永久性瘤胃瘘管的中国西门塔尔牛,采用4×4拉丁方设计,以混合精料和玉米秸秆为基础日粮,研究日粮中添加氯化镧(0、0.45、0.9和1.8 g/head/d)对瘤胃pH、NH,-N、VFA、营养物质降解及尿嘌呤衍生物浓度的影响.每头牛每天日粮添加0.9 g氯化镧后显著降低瘤胃pH和NH,-N浓度,提高了玉米秸秆干物质、有机物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的有效降解率(P＜0.05);对豆粕干物质、有机物质和粗蛋白质降解无显著影响(P＞0.05);显著提高了瘤胃丙酸、总挥发性脂肪酸浓度和尿嘌呤衍生物的排出量(P＜0.05);乙酸/丙酸显著下降(P＜0.05). 日粮中氯化镧的适宜添加水平为每头牛每天0.9 g.     

通过睾丸内注射转染外源DNA在小鼠精子的表达

为研究睾丸内注射外源DNA法生产转基因小鼠(Mus musculus)的可行性,并探讨注射DNA的最佳浓度。将环形的质粒DNA pEGFP-N1与脂质体混合制备DNA-脂质体复合物,按DNA浓度不同分为0.08μg/μl、0.12μg/μl和0.24μg/μl3组,分别注射入成年SPF级昆明小鼠睾丸内,同时设空白对照;每组处理公鼠2只,注射5d后每只与3只成年母鼠同笼,20d后在荧光显微镜下检测公鼠附睾精子,并制作睾丸石蜡切片,检测绿色荧光蛋白(GFP)的表达;PCR法检测各组后代阳性率。结果显示,3组小鼠附睾荧光精子比例分别为9.09%、47.06%和27.78%。3组小鼠的睾丸石蜡切片中均可看到不同强度的GFP表达。后代经PCR检测阳性率分别为17.26%、47.61%和22.11%。本实验证实了睾丸注射法能使外源DNA整合进入精子基因组,并能在自身和后代中得到表达,本研究中外源DNA注射浓度以0.12μg/μl效果为最佳。     

外源氯化镧对干旱胁迫下水稻幼苗生长及生理特性的影响

为了探究LaCl_3对干旱胁迫下水稻幼苗生长及生理特性的影响,采用15%PEG6000模拟干旱胁迫,研究不同浓度LaCl_3对干旱胁迫下水稻幼苗生物量、壮苗指数、根系形态、抗氧化系统、丙二醛含量等的影响。研究结果表明,喷施外源LaCl_3后,干旱胁迫下水稻幼苗的各项指标呈现低促高抑的浓度效应,其中,1μmol/L的LaCl_3可以显著促进植株鲜重及地上部分干重;100μmol/L的LaCl_3可以显著提高地下干重和壮苗指数、叶片和根系SOD活性、叶片CAT活性,降低根系MDA含量。本研究为LaCl_3调控水稻幼苗耐旱机制研究奠定了基础。     

低剂量三聚氰胺对小鼠精子质量影响的研究

采用灌胃法,研究了三聚氰胺在1.0 mg/kg、2.0 mg/kg、4.0 mg/kg浓度下染毒35 d时,小鼠体重、精子运动参数和精子形态的变化.结果显示,4.0 mg/kg 处理组小鼠部分精子运动参数显著性降低(P＜0.05),1.0 mg/kg 和2.0 mg/kg 浓度组各项精子运动参数与对照比较变化不显著(P＞0.05);在染毒一周后,2.0 mg/kg 浓度组小鼠体重增长显著性下降(P＜0.05),4.0 mg/kg 浓度组小鼠体重极显著降低(P＜0.01);3个处理浓度组对小鼠精子形态影响均不显著.总之,食物中低浓度三聚氰胺对小鼠精子活性和形态无明显的影响.     

氯化镧对玉米根切段钾离子外渗影响的动力学研究

研究了氯化镧对玉米(Zea mays L.)“京早8号”根切段细胞膜透性及质子分泌的影响,并用动力学方法研究了钾离子外渗过程的变化。氯化镧处理可降低外渗液的电导率及K~ 和糖的外渗量,使质子分泌活动增强。用动力学方法分析玉米根切段K~ 外渗过程的结果表明:(1)应用于K~ 吸收研究的数学模型也能适应于K~ 外渗的研究;(2)在LaCl_3和(或)CaCl_2存在的条件下,最大吸收速度(V_(max))升高,而米氏常数(K_m)没有变化;(3)在LaCl_3和(或)CaCl_2存在的条件下,K~ 外渗量降低是由于最大吸收速度(V_(max))升高所致。     

镉对小鼠精母细胞凋亡及附睾内精子质量的影响

采用人工水质染毒的方法,利用透射电镜技术及流式细胞术（FCM）,探讨重金属镉对小鼠精巢内生殖细胞凋亡及附睾内成熟精子质量的影响.结果表明：各试验组小鼠生殖细胞处于凋亡时期的数量显著高于对照组,凋亡时期的生殖细胞超微结构呈现出线粒体空泡、核膜内陷、染色质周缘化及核固缩等形态特征,表明镉容易引起小鼠生殖细胞凋亡;各试验组精子早期凋亡的比例显著高于对照组,而活性精子的比例显著低于对照组（P<0.05）,其中高剂量组（0.10 mmol·L^-1）精子成活率（75.1%）显著低于对照组和其他试验组,而早期凋亡率（22.6%）则显著高于对照组;高剂量组睾丸生殖细胞DNA断裂率（18.2%）及附睾精子断裂率（26.5%）均显著高于对照组（3.3%、5.6 %）（P<0.05）.各试验组小鼠睾丸内DNA断裂的生殖细胞数量低于附睾内DNA断裂的精子数量.随着添加剂量的增加,小鼠睾丸内生殖细胞及附睾内精子凋亡率逐渐升高.表明小鼠生殖细胞凋亡及DNA损伤数量与镉剂量具有一定相关性.     

Role of Two Chloride-Binding Sites in Functioning of Testicular Angiotensin-Converting Enzyme

Modeling the structure of the C-domain of bovine angiotensin-converting enzyme revealed two putative chloride-binding sites. The kinetic parameters, K(m) and k(cat), of hydrolysis of the substrate Cbz-Phe-His-Leu catalyzed by the testicular (C-domain) enzyme were determined over a wide range of chloride concentrations. Chloride anions were found to be enzyme activators at relatively low concentrations, but they inhibit enzymatic activity at high concentrations. A general scheme for the effect of chloride anions on activity of the C-domain of bovine angiotensin-converting enzyme accounting for binding the "activating" and "inhibiting" anions is suggested.     

光质对油菜幼苗生长及抗氧化酶活性的影响

用 40 μE·m- 2 ·s- 1 的白光和红光对油菜幼苗照光处理 9d ,结果表明 ,红光促进油菜幼苗的生长 ,使其抗坏血酸过氧化物酶 (APX)活性明显升高 ,过氧化物酶 (POD)活性下降 ,但对过氧化氢酶 (CAT)活性无明显影响。     

镉对小鼠精子和生精细胞超微结构及生精细胞bcl-2、bax基因表达的影响

研究镉暴露对小鼠附睾精子和睾丸生精细胞超微结构的变化以及镉对生精细胞凋亡相关基因bcl-2、bax表达水平的影响。采用24只雄性ICR小鼠随机分为4组,每组6只,分别以0.183、0.915、1.83mg/kg氯化镉腹腔注射,每天1次,连续5次,设阴性对照生理盐水组。于第6天透射电镜观察附睾精子超微结构、睾丸生精细胞核和线粒体超微结构的变化,免疫组化方法检测生精细胞Bcl-2、Bax表达水平。透射电镜观察显示,0.183mg/kg组精子超微结构无显著性变化,0.915mg/kg组精子头部两侧膜与头部胞质间隙轻微扩大,线粒体嵴间腔扩大且轻度空泡化,但与对照组相比无统计学意义(P>0.05)。1.83mg/kg组头部两侧膜与胞质间隙扩大,与对照组相比有显著性差异(P<0.05),尾部线粒体嵴间腔扩大且轻度空泡化,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。3种剂量处理组睾丸生精细胞核超微结构异常发生率显著高于对照组(P<0.05),且随着处理浓度的升高异常发生率升高;1.83mg/kg组线粒体肿胀空泡化发生率显著高于对照组(P<0.05)。3种剂量实验组生精细胞Bcl-2表达水平(吸光度)显著低于对照组(P<0.01),0.915mg/kg组Bax表达水平显著高于对照组和0.183、1.83mg/kg组(P<0.01)。3种剂量实验组Bcl-2/Bax吸光度比值显著低于对照组(P<0.01);0.915mg/kg组Bcl-2/Bax比值显著低于1.83mg/kg组(P<0.01)。上述结果提示:高浓度镉诱导附睾精子超微结构改变,高中低浓度镉致睾丸生精细胞超微结构的改变,生精细胞超微结构发生凋亡现象。镉对Bcl-2、Bax表达水平的改变可能是生精细胞凋亡的分子机制之一。     

不同人群精液质量现状的分析

通过对 434例有生育力、346例生育力不明男性的精液质量进行检测 ,并与同实验室 80年代前期 1 1 0例的数据相比较 ,评价目前男性精子质量的现状。结果表明 ,精子质量均明显降低 ,以精子数目中的计数和总数的降低最为明显 ,分别降低 5 4 .2 %～ 98.9%和 39.7%～ 1 1 4.5 % ;出现异常指标的异常百分率以精子活动性中的活动率、a级活力、a +b级活力最高 ,分别达到 1 8.4%～ 42 .3%、37.5 %～ 68.1 %、39.5 %～ 75 .2 % ;各指标在正常值范围内的比率仅占 33.6%和 2 6.0 %。因此 ,提出精液质量的普遍降低应引起足够重视。     

Salvia officinalis L. Methanolic Extract Reduces Lead and Nicotine-Induced Sperm Quality Degeneration in Male Rats

Most heavy metals and industrial chemicals such as nicotine and lead cause harm to the reproduction process through a decrease in sperm motility, fertilization process, and sperm binding to the oocyte. Salvia officinalis L. (sage) has been reported to enhance serum testosterone levels and other certain biochemical enzymes. Thus, the current study is aimed at evaluating the potential health benefits of S. officinalis L. methanol extract on lead and nicotine hydrogen tartrate-induced sperm quality degeneration in male rats and also identifying some of the non-polar volatile bioactive compounds that might be attributed to the bioactivity of S. officinalis extract using gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). In the study, fifty-four mature male albino rats of about 220–250 g [were divided randomly and equally into 9 groups (n=6)]. Sperm quality degeneration was induced through the oral administration of 1.5 g/L of lead acetate in drinking water or peritoneal injection of 0.50 mg/kg (animal weight) nicotine hydrogen tartrate for sixty days. Two doses (200 & 400 mg/kg b.w.) of S. officinalis L. were used. The rats were anesthetized after the experimental period and then sacrificed. Blood samples were collected while the epididymis, testicle, and accessory sex organs (prostates and seminal vesical) were taken for histopathological studies. Twelve major compounds were identified through the GC/MS analysis of S. officinalis L. methanol extract. Lead and nicotine toxicity had a great effect on the rats’ sperm quality causing a significant (p<0.05) decrease in the quantity of sperm and sperm motility as well as an upsurge in the abnormalities of the sperm and a reduction in the length & diameter of seminiferous tubules and size & weight of sexual organs (accessory sex glands, epididymis, and testis). The administration of S. officinalis L. methanol extract, however, had a positive impact on the sexual organ weights, semen quality & quantity, and rats’ fertility, thus, ameliorating the adversative effects of both lead and nicotine. Further evaluation and isolation of the bioactive components are recommended as potential drug leads.     

低温下钙对黄瓜幼苗抗氧化酶活性及POD同工酶谱的影响

以耐冷性存在明显差异的栽培黄瓜‘长春密刺’和‘北京截头’为材料,研究了冷胁迫下C a2 、钙离子螯合剂(EGTA)和钙调素拮抗剂(CPZ)对低温胁迫黄瓜幼苗叶片3种抗氧化酶活性及POD同工酶的影响.对保护酶活性的研究结果表明:C aC l2、EGTA和CPZ处理均能引起3种抗氧化酶活性变化,但变化幅度因材料而异.胁迫处理中C a2 能提高2种材料的叶片抗氧化酶活性,减少其在低温逆境中的下降幅度,而EGTA和CPZ处理降低了2种材料的抗氧化酶活性,加大了低温逆境中的下降幅度.POD同工酶研究发现,C aC l2延缓冷胁迫中同工酶条带的丢失,EGTA和CPZ处理则使同工酶条带丢失提前,但材料不同对酶条带丢失时间也有影响.     

镉对雄性小鼠生精细胞的影响

为了研究镉对小鼠生殖力和生精细胞的作用,本文对氯化镉处理后的雄性小鼠进行了交配实验,以观察其对怀孕率、每窝产仔数及子代性比的影响。测定比较了注射镉后,小鼠成熟精子的总LDH酶和LDH-X酶的活性;还用双向电泳方法分析了成熟精子的蛋白质变化。结果表明,处理组在怀孕率、每窝产仔数及子代性比方面无统计学意义的差异。成熟精子的总LDH活性经镉处理后未发现明显变化,但镉能显著地抑制与精子运动的能量有关的LDH-X酶的活性。双向电泳图谱表示,镉处理后,精子中含量较少的三组蛋白质或消失不见,或发生明显变化。     

精子DNA甲基化异常与男性不育

DNA甲基化／去甲基化是表观遗传学最重要的内容并可以控制基因的表达和印迹,越来越多的研究显示DNA甲基化异常与不育男性精子发生异常、特定肿瘤的发生、神经系统疾病、Rett综合征等有关。文章通过总结近来的相关研究资料来阐述精子发生过程中的DNA甲基化状态的改变,探讨精子DNA的甲基化异常与男性不育之间的联系,旨在为男性不育的治疗提供新的临床思路。