用硝酸纤维膜作抗原或抗体的载体筛选交瘤培养物

<正>杂交瘤技术中的关键是鉴定产生的单克隆抗体的特异性,最方便的方法可能是用抗原吸附稳定的载体(例如塑料微量培养板)的各种固相酶免疫试验(EIA),并用酶结     

微量免疫酶染色检测斑疹伤寒IgM、IgG抗体

本文介绍了微量免疫酶染色(Micro-IP)检测斑疹伤寒IgM、IgG抗体的方法,Micro-IP与临床诊断的符合率为78.9%。IgM抗体早于第四病日阳性,第一周阳性率达76.2%,适于早期诊断。检测IgG抗体适于流行病学调查。Micro-IP检测免疫兔及患者血清抗体为群特异性(对普氏及莫氏立克次体均反应)。     

Epstein-Barr病毒膜抗原基因免疫的研究

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒（ＥＢＶ）膜抗原（ＭＡ）ＢＬＬＦ１基因,插入含有ＣＭＶ启动子的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３下游ＢａｍＨＩ位点,构建成真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＭＡ。将纯化的ＤＮＡ注射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠股四头肌。经免疫的动物产生抗ＥＢ病毒ＭＡ特异性的抗体和中和抗体,依赖抗体细胞介导的细胞毒作用（ＡＤＣＣ）,特异性Ｔ淋巴细胞增生性反应及细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤作用。基因免疫与基因－蛋白联合免疫效果相似。不同启动子控制下的ＭＡ基因,诱发小鼠免疫应答无明显差异。     

用酶联免疫吸附法检测狂犬病病毒膜糖蛋白抗体

<正>当今的狂犬病疫苗刺激机体产生的是对病毒所有蛋白的抗体,而中和病毒的感染性是由于抗体对膜糖蛋白G引起的。虽然病毒中和抗体不是防止狂犬病的唯一因素,但是血清中和抗体的存在是主动免疫成功的可靠标志。WHO建议中和抗体需要在小白鼠或者细胞培养中测定,用快速荧光灶抑制试验(RFFIT)是细胞培养测定中和抗体所选择的方法。检测整个病毒或提纯的G蛋白的ELISA在文献中已有叙述,以整个病毒为抗原的方法,除了检出G蛋白抗体外还检出其他蛋白的抗体,因此将导致对保护力的错误评价。由于经济的原因,检测G蛋白抗体的ELISA方法无法被广泛应用。因此,我们试图研究一种提纯G蛋白的简单而经济的程序。本文结果表明基于这种蛋白的ELISA方法检测中和抗体具有高度的敏感性和特异性。     

免疫酶双重染色中抗体洗脱的进一步研究

本实验进一步检查了三种常用的洗脱方法从切片上除去免疫酶组织化学染色后的抗体的效果。结果表明,PAP法染色后,氧化法的抗体洗脱完全,效果可靠;酸洗法和酸洗/二甲基甲酰胺法的效果视不同抗体而不同,二甲基甲酰胺单用或用于酸洗后似无效。所用方法均不能从ABC法染色的垂体组织切片上完全除去抗体复合物。因之,将ABC法用于第一抗体来源于同一动物种的双重染色中,来显示第一种抗原时,要特别注意排除假性双标记。     

福尔马林固定微丝蚴免疫酶染色试验检测丝虫抗体的初步观察

以马来丝虫微丝蚴为固相抗原,做免疫酶染色试验(IEST)检测丝虫病人血清抗体,具有较好的效果。但是,微丝蚴固相抗原在常温下极易腐败变质,影响了其在基层的推广应用。我们用福尔马林处理抗原后,在常温下保存60天,IEST的效果仍较满意。     

呼吸道合胞病毒抗原酶免疫测定法的临床评价

RSV是婴幼儿急性下呼吸道感染的主要病因。感染的症状可以分为从较轻的感冒到支气管炎或支气管肺炎。 RSV感染的流行发生在每年的晚秋至早春。流行病学研究证明,暴露于首次流行中的婴儿,约50％受到RSV感染;两次流行后,几乎全部儿童被感染。支气管炎年发病总数的85％和支气管肺炎年发病总数的35％是由RSV所致。一岁以下因支气管炎而住院的患儿中,40％是由RSV引起的。一岁以下婴儿中,因感染RSV而住院的约占1—2％。院内感染RSV也是儿科至关重要的问题。     

Epstein—Barr病毒膜抗原基因免疫的研究

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）膜抗原（ＭＡ）ＢＬＬＦ１基因,插入含有ＣＭＶ启动子的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３下游ＢａｍＨＩ位点,构建成真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＭＡ。将纯化的ＤＮＡ注射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠股四头肌。经免疫的动物产生抗ＥＢ病毒ＭＡ特异性的抗体和中和抗体,依赖抗体细胞介导的细胞毒作用（ＡＤＣＣ）,特异性Ｔ淋巴细胞增生性反应及细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤作用。基因免疫与基因－蛋白     

鼻咽癌患者血清中抗Epstein-Barr病毒早期和晚期膜抗原抗体的检测

对Epstein-Barr(EB)病毒抗原的研究,发现有淋巴细胞确定的膜抗原(Lydma)、早期抗原(EA)、壳抗原(VCA)、核抗原(EBNA)、早期膜抗原(EMA)和晚期膜抗原(LMA)。除了Lydma抗原外,鼻咽癌患者对上述抗原均产生相应的IgG和IgA抗体。因而研究这些抗体,对阐明EB病毒与鼻咽癌的关系及鼻咽癌的早期诊断都十分有价值。     

应用免疫粘附血凝技术检测流行性出血热病毒抗原和抗体的试验研究

本文对免疫粘附血凝(IAHA)技术进行了改进并用于检测流行性出血热病毒搞原和血清效价。比较了不同毒株在Vero-E_6细胞内抗原滴度,表明A_9株的滴度最高达1:64,以IAHA法对出血热病人9份血清,3份恢复期血清和家兔免疫血清6份进行了效价测定。并同时用免疫荧光(IFA)法进行比较,结果抗体阳性率二种方法一致,但前者的抗体滴度和增长倍数较后者高2-64倍,以上结果表明IAHA法可代替IFA法用于出血热病人或感染动物的抗体检测。     

胶体金免疫电子显微技术用于病毒抗原的检测

本文报道了一种改良的胶体金免疫电镜技术:以低温包埋,常规超薄切片代替超薄冰冻切片,成功地显示了细胞内的病毒抗原定位。     

应用病毒感染细胞酶联免疫吸附试验检测肾综合征出血热病毒抗原和抗体

应用病毒感染细胞酶联免疫吸附试验(VIC-ELISA)检测肾综合征出血热病毒(HFRSV)感染性滴度比双抗体间接ELISA和间接免疫荧光法(IFA)分别敏感10倍和100倍。VIC-ELISA检测兔抗HFRSV抗体的滴度比双抗体间接夹心ELISA和IFA分别敏感1.6倍和8倍。VIC-ELISA能敏感、快速、有效地检测HFRSV抗原和抗体。     

巨细胞病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)的性能验证

目的:对本公司研制的人巨细胞病毒(HCMV)Ig G抗体检测试剂盒(酶联免疫法)的性能进行验证。方法:应用间接法研制HCMV Ig G抗体检测试剂盒(酶联免疫法),对的3批试剂盒的阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、重复性、检测限、批间差等技术指标进行评价,并用1050例样本进行比对试验,结果进行Kappa检验、χ~2检验。结果:3批试剂盒阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、检测限、重复性、批间差均达到要求。同时,经中国食品药品检定研究院检定,3批试剂盒所检项目全部合格。比对试验敏感度为98.92%,特异性为98.60%,与已上市试剂盒的总符合率为98.83%,Youden指数为0.9752,Kappa系数为0.9710,一致性优,χ~2检验P0.05。结论:制备了HCMV Ig G抗体检测试剂盒,可应用于临床监测、诊断及预后判断。     

人类免疫缺陷病毒1／2型抗体检测酶联免疫试剂盒的研制

采用二聚体合成肽（ＨＩＶ－１ｇｐ４１、ｇｐ１２０、ｐ２４和ＨＩＶ－２ｇｐ３６）包被酶标板条制备成固相抗原,与鼠抗人ＩｇＧ单克隆抗体酶标记物、底物ＴＭＢ及阴阳性参考血清配套制备成ＨＩＶ抗体ＥＩＡ试剂盒,专供检测人血清或血浆ＨＩＶ１／２抗体之用。以荷兰、韩国及万泰试剂作为对照,用该试剂盒对检定所的Ｐａｎｅｌ标准及献血员１５５５０例（其中ＨＣＶ抗体阳性１２８例,ＨＢｓＡｇ阳性４６例）进行检测,四种试剂对检定所Ｐａｎｅｌ标准的１３份阳性血清均呈阳性反应,２８份阴性血清均为阴性;献血员１５５５０例,四种试剂对其中１份血清均呈阳性反应,经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ试验证实为阴性,四种试剂的阴性检出率均为９９．９９％。连续制备三批试剂经中国药品生物制品检定所检定,所检项目全部合格;同时委托检定所进行临床考核,４７份阳性血清全部呈阳性反应,１５０份阴性血清全部为阴性。说明该试剂盒具有很好的敏感性和特异性。     

用国产重组抗原研制丙肝病毒抗体检测试剂

用克隆表达的丙型肝炎病毒核心蛋白及非结构 3区蛋白、非结构 4区蛋白和非结构 5区蛋白作为抗原 ,研制装配了第三代丙肝病毒抗体检测试剂。用该试剂检测国家第三代丙肝病毒抗体检测试剂标准血清 ,40份阴性血清全部符合 ,40份阳性血清出现 1份假阴性。分析探讨了各种影响试剂质量的因素     

应用斑点酶免疫法检测狂犬病毒抗体的研究

本文通过特异性试验、重复性试验、稳定性试验,建立了斑点酶免疫试验(DEIA)检测狂犬病毒抗体的方法,其结果与间接免疫荧光(IFA)法进行了比较,符合率100％,实验结果表明本法不但简便、稳定而且敏感特异,不需要特殊仪器设备及昂贵的荧光显微镜,是一种值得推广的检测狂犬病毒抗体的方法。     

免疫酶技术检测流行性出血热病人抗体的研究

流行性出血热(EHF)是一种死亡率较高的传染病,国内常用免疫荧光(IF)法进行此病的检测及诊断。由于荧光设备不普及,很多基层单位不能监测及诊断此病,因而妨碍防治工作的进展。本文介绍免疫过氧化物酶技术(IPT)或称免疫酶染色(IES)进行EHF抗体的检测,同时     

使用固定于硝酸纤维膜上的抗原筛选单克隆抗体的两种方法

<正>近年来免疫化学和放射性免疫的许多工作已经涉及到固定于硝酸纤维膜上抗原的应用。Haukes等人的点一免疫结合试验用微量抗原结合硝酸纤维膜上为筛选单克隆抗体(McAb)提供了一个方案。我们发展了一种简化了的筛选体系,即把抗原点加在一张与96孔微量滴定板同样大小的硝酸纤维膜上,用一块制成单园孔的铝模板置于有抗原点的硝酸纤维膜上面,可加入极少量(2ul)的杂交瘤上清液亦可与大量(可达200ul)杂交