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本文报道了白细胞介素-2(IL-2)刺激ConA(5μg/ml)活化的小鼠T细胞产生的条件培养液(TCM)中含有CFU-GEMM诱导活性。这种CFU-GEMM诱导活性的生成在IL-2作用后48h达到高峰。特异性抗IL-3单克降抗体可以完全中和该条件培养液中的CFU-GEMM诱导活性。进一步证明,TCM可以刺激IL-3依赖细胞系FDC-P_1细胞的增殖;在IL-2作用于ConA活化的T细胞后可促进其细胞表达高水平的IL-3mRNA。这些结果表明IL-2可以加强小鼠T细胞产生IL-3。 相似文献
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人白细胞介素—3基因翻译起始区的改造提高其在大肠杆菌中的表… 总被引:2,自引:1,他引:2
为了提高人白细胞介素-3(hIL-3)在大肠杆菌中的表达,在计算机辅助下,设计台成了PCR突变引物,用于改造起始密码AUG上下游序列,并在不改变5’端氨基酸编码的前提下,尽可能选用大肠杆菌高频使用的密码子。将经改造后的hIL-3cDNA和翻译起始区置于PL启动子之下,转入大肠杆菌Tap106,经42℃热诱导后,获得表达产物,提高表达水平近一倍,表达量达到菌体总蛋白量的30%左右。表达产物经West 相似文献
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人白细胞介素-3基因在酿酒酵母中的分泌表达 总被引:4,自引:0,他引:4
利用PCR突变方法,改造了人白细胞介素-3(hIL-3)cDNA,在成熟蛋白编码顺序5'端前突变入了XbaⅠ酶切位点和酵母类胰蛋白酶加工位点Lys-Arg的密码子。改造后的hIL-3cDNA插入大肠杆菌-酵母穿梭质粒pVT102u/α,使其准确融合于α-交配因子前导序列之后,并置于启动子ADH1调控之下。转化入酿酒酵母宿主菌S-78筛选后,30℃培养48h,上清能明显促进hIL-3依赖细胞TF-1生长。上清中分泌表达的hIL-3经ELISA鉴定并定量,其表达量大于1.0mg/L。~3H-TdR掺入法测定上清中hIL-3活性为1.8×10~3u/ml。 相似文献
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利用PCR突变方法,改造了人白细胞介素-3(hIL-3)cDNA,在成熟蛋白编码顺序5'端前突变入了XbaⅠ酶切位点和酵母类胰蛋白酶加工位点Lys-Arg的密码子。改造后的hIL-3cDNA插入大肠杆菌-酵母穿梭质粒pVT102u/α,使其准确融合于α-交配因子前导序列之后,并置于启动子ADH1调控之下。转化入酿酒酵母宿主菌S-78筛选后,30℃培养48h,上清能明显促进hIL-3依赖细胞TF-1生长。上清中分泌表达的hIL-3经ELISA鉴定并定量,其表达量大于1.0mg/L。3H-TdR掺入法测定上清中hIL-3活性为1.8×103u/ml。 相似文献
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本文根据IL- 2基因定点突变研究所提供的有关IL- 2结构和功能重要信息 ,特别是某些关键氨基酸残基的改变对IL- 2生物活性影响 ,探讨了IL- 2和IL- 2受体相互作用关系、新型IL- 2的研制方法和变异IL -2作用机制 ,并提出设计新型天然IL -2单位点到多位点突变的策略 ,从而指导研制更有效或毒副作用降低的新型IL- 2类似物。 相似文献
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将含有人白细胞介素-3基因(hIL-3)cD-NA的真核表达质粒直接注射小鼠骨骼肌,观察hIL-3基因在小鼠肌肉及体内的分泌表达情况。原位分子杂交及免疫组化结果显示注射重组质粒后,第14大重组质粒全部进入到骨骼肌细胞内并有IL-3的表达。ELISA结果显示,注射重组质粒DNA后,第21天小鼠血液中IL-3的含量最高,约有67ng/ml,第14天次之,约51ng/ml,第28天和第7天相近,约34ng/ml。生物学活性检测结果表明,实验组小鼠血清有维持IL-3依赖的TF-1细胞株生长的作用。表明重组质粒DNA直接注射骨骼肌后进入到肌细胞内并表达IL-3,进入血液,而且表达产物有生物学活性。 相似文献
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人白细胞介素—3在大肠杆菌中的高效表达 总被引:2,自引:0,他引:2
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研究白细胞介素-2 与狂犬病毒N蛋白基因工程产物的免疫活性。采用生物工程技术,结果显示经基因扩增分别获得400bp 和1400bp 的IL-2 和狂犬病毒N蛋白基因片段,构建了表达载体PLY-4IN,于工程菌中转化后。得到56KD重组蛋白产物,该产物具有IL-2活性,可诱导小鼠抵抗狂犬病毒攻击。 相似文献
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白细胞介素-8 基因多态性与疾病关系的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
白细胞介素-8(IL-8)是一种炎症细胞因子。近年来研究发现,IL-8不同基因型与胃癌、食管癌、乳腺癌、呼吸道合胞病毒感染、哮喘、阿尔茨海默病等疾病相关。本文就近年来国内外有关IL-8基因多态性与上述疾病的关系作一综述。 相似文献
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兰璇 《现代生物医学进展》2007,7(8):1226-1227
目的:检测慢性肺源性心脏病患者血清白细胞介素-10和白细胞介素-6的水平,探讨细胞因子对慢性肺源性心脏病患者预后评价的临床意义。方法:将我院住院治疗的慢性肺源性心脏病患者40例,按照心功能情况分为肺源性心脏病组21例(对照组)和肺源性心脏病合并心力衰竭组19例(观察组),进行血清白介素-6、白介素-10定量检测。结果:观察组血清白介素-6水平较对照组明显升高,而白细胞介素-10却明显低于对照组(P值均<0.05)。结论:检测白细胞介素-6、白细胞介素-10的水平,可作为监测肺源性心脏病心功能恶化的预测指标。 相似文献
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白细胞介素—2加强小鼠T淋巴细胞产生白细胞介素—3 总被引:1,自引:0,他引:1
In addition to the regulation of T cell growth, IL-2 exerts effects on the induction of certain lymphokines. We show here that IL-2 synergizes with 5 micrograms/ml of ConA to promote the production of IL-3 in mouse splenic T cell cultures. IL-3 was measured as CFU-GEMM-inducing activity on mouse bone marrow progenitor cells in the supernatant of the stimulated mouse splenic T cells (TCM). The resting T cells produced no CFU-GEMM-inducing activity, but could be induced to produce low level of CFU-GEMM-inducing activity in the presence of ConA. In vitro exposure to IL-2 markedly increased CFU-GEMM-inducing activity production (nearly up to 8-fold) by the ConA-activated T cells. Optimal stimulation was observed when 80 u/ml IL-2 was used for 48 h incubation. Anti-mouse IL-3 monoclonal antibody inhibited the CFU-GEMM inducing activity of TCM. Moreover, the TCM stimulated the proliferation of IL-3 dependent cell line FDC-P1. We also show that IL-2 and ConA-treated T cells expressed high level of IL-3 mRNA through dot blot analysis. These results confirmed the nature of CFU-GEMM-inducing activity of TCM as IL-3. The capacity of IL-2 to promote the production of IL-3 may represent an important mechanism by which it mediate the communication between the immune and hematopoietic systems. 相似文献
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白细胞介素-2受体结构及信号传导 总被引:1,自引:0,他引:1
白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)又称T细胞生长因子(cell growth factor,TCGF),Morgan于1976年在诱生培育外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)时首先发现,其空间结构由反向平行的α螺旋核心和小β片段组成,分子量约15.KDa,具有多种生物学功能。 相似文献
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将缺少编码信号肽序列的人白细胞介素 11(hIL 11) 5 46核苷酸cDNA ,重组于质粒pBacPAK8构建重组转移载体pBacIL 11,与经线性化修饰的家蚕核型多角体病毒 (BmBacPAK)DNA共转染家蚕培养细胞株BmN ,获得了插入hIL 11基因的重组病毒。Southern杂交表明重组病毒基因组中含有hIL 11基因片段 ,RNA斑点杂交表明hIL 11基因得到了转录。重组病毒感染BmN细胞株、家蚕幼虫和蛹 ,在细胞培养上清、细胞抽提物、幼虫和蛹的体液样品中 ,SDS PAGE电泳分析都能检测得到表达产物的特异性条带 ;采用IL 11依赖细胞株B9- 1 1 和MTT法测定表达产物的生物活性 ,表明hIL 11基因分别在培养细胞和蚕体内得到了高效表达 相似文献
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人白细胞介素-3(humanInterleukin3,hIL-3)是一种造血前体细胞早期分化的关键调节因子。用PCR方法从人T淋巴细胞cDNA文库中扩增出0.44kb的DNA片段,并克隆入pUC19载体中。经DNA序列测定,确定0.44kb的PCR产物合完整的编码人白细胞介素-3成熟蛋白cDNA序列,并在信号肽与成熟蛋白编码序列之间通过突变引入了限制性内切酶位点和ATG起始密码。构建的PL启动子控制下的hIL-3cDNA表达质粒,转入大肠杆菌Tap106,经42℃热诱导,获得hIL-3的表达产物。SDS-PAGE电泳显示表达产物为15kd,约占细菌总蛋白的15%。表达产物经ELISA和Western-blot验证。hIL-3表达产物在细胞内形成包涵体,纯化包涵体,使产物纯度提高到70.8%,产物复性后,能明显促进hIL-3依赖细胞株生长,具有明显的生物活性。产物转移到PVDF膜后进行N端序列分析,N端16个氨基酸正确。 相似文献
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目的探讨哮喘患儿外周血白细胞介素-10(IL-10)、13的变化及其在哮喘发病机制中的作用。方法用ELISA双抗体夹心法测定20例哮喘患儿及18例正常儿童血浆IL-10、13的含量。结果哮喘组血浆IL-13水平明显高于正常对照组,IL-10水平明显低于正常对照组(p均<0.05)。结论IL-10、13等细胞因子参与儿童哮喘发病的病理生理过程,可为判断病情提供较好的实验室参数。 相似文献