不同年龄大鼠主动脉壁的凝集素组织化学研究

本文利用凝集素组织化学的方法对不同年龄大鼠(10天、6个月及2年)主动脉壁进行研究,本文采用的六种生物素化凝集素中(ConA、RCA-Ⅰ、UEA-Ⅰ、PNA、SBA 及 WGA),有三种在大鼠主动脉壁呈阳性反应,即 ConA、RCA-1和 WGA,它们在各年龄组大鼠主动脉壁的内膜及外膜均表现出强阳性反应。而在中膜的反应则相对较弱。UEA-1、PNA 及 SBA 表现出明显无反应性。光镜下可见上述三种阳性反应凝集素在主动脉壁的反应产物随增龄而减少。这表明,大鼠主动脉壁有含α-D-Mannose、β-D-Galactose、sialic acid 或 N-acetyl-D-Glucosamine 残基的糖复合物存在,且其含量随增龄而减少。本文讨论了这种糖复合物随增龄的减少与动脉粥样硬化的可能关系。     

SD大鼠血管内皮细胞的凝集素组织化学研究

为进一步了解大鼠血管内皮细胞表面糖基的分布, 本文应用５ 种生物素化凝集素（ＧＳ－Ｉ、ＲＣＡ－Ｉ、ＷＧＡ、ＣｏｎＡ和ＵＥＡ－Ｉ） 对大鼠心脏、胸主动脉、肝脏和子宫的血管内皮细胞采用ＡＢＣ法标记。结果表明,光镜下, ＧＳ－Ｉ对心脏、胸主动脉、子宫的血管内皮染色阳性; ＲＣＡ－Ｉ对所检组织内血管内皮细胞染色阳性,其中对心脏和肝的血管内皮与血管外组织细胞的染色强度有显著不同; ＣｏｎＡ对肝血窦内皮与对肝细胞的染色强度有明显不同; ＵＥＡ－Ｉ对各脏器血管内皮细胞未见阳性标记。电镜下ＧＳ－Ｉ阳性反应产物位于心肌毛细血管内皮细胞表面。提示, 血管内皮细胞表面存在的某些糖复合物含有Ｄ－半乳糖、Ｎ－乙酰氨基半乳糖、Ｎ－乙酰氨基葡萄糖、Ｄ－甘露糖。ＧＳ－Ｉ可视为心脏、胸主动脉、子宫的血管内皮细胞的特异性标记物。ＲＣＡ－Ｉ既可作为心脏的血管内皮, 亦可作为肝血窦内皮的特异性标记物, ＣｏｎＡ可作为肝血窦内皮的特异性标记物。     

大鼠左室壁血管内皮凝集素受体的观察

采用生物素化凝集素ＣｏｎＡ、ＲＣＡ－Ｉ、ＵＥＡ－Ｉ、ＰＮＡ、ＳＢＡ 和ＷＧＡ, 对大鼠左室壁血管内皮的凝集素受体进行了观察, 结果发现, 大鼠左室壁血管内皮存在有ＣｏｎＡ、ＲＣＡ－Ｉ及ＷＧＡ受体, 文中讨论了血管内皮凝集素受体的分布情况及其意义。     

大鼠降主动脉雌激素受体的免疫组织化学研究

冰冻切片微波修复后,用ER单克隆抗体免疫组织化学SP法及图像分析方法,观察雌激素受体（ER）在雌性与雄性大鼠降主动脉壁的分布,结果显示,ER阳性反应存在于血管壁的内皮细胞与平滑肌细胞中,阳性反应强度无性别差异。无段间差异（降主动脉胸段与腹段）,血管周围的脂肪组织也可见大量呈阳性反应的细胞,结果表明,降主动脉壁的内皮细胞,血管平滑肌细胞中存在ER。降主动脉可能是雌激素的靶器官。     

原发不育症子宫内膜花生凝集素受体的研究

本文以PNA(花生凝集素)为探针,应用ABC亲和组化技术,对69例原发不育症患者的子宫内膜PNA受体进行了检测.结果表明,原发不育症子宫内膜的增生期、分泌期PNA受体的阳性率均显著低于年龄相似、有生育史的对照组子宫内膜的阳性率.不育症子宫内膜分泌欠佳的PNA受体阳性率显著低于不育症分泌期不同时期子宫内膜的阳性率.提示,这种差异可能与雌孕激素对两组子宫内膜作用水平的不同引起.     

羊精子表面的凝集素标记特征

用辣根过氧化物酶标记的蓖麻凝集素和伴刀豆素Ａ,对绵羊精子表面的凝集素标记特征进行了观察。蓖麻凝集素在睾丸内精子的顶体区有中等强度标记,尾部有弱标记,在附睾内成熟时,顶体区标记逐渐增强,尾部的标记消失,获能后标记强度则明显减弱。伴刀豆素Ａ的标记在睾丸内的精子仅限于顶体区,随着在附睾内成熟,顶体区的标记增强,尾部也出现弱的标记,获能后有部分精子的标记强度有所增加。实验结果表明,羊精子在成熟过程和获能过程表面糖复合物发生明显修饰。     

小鼠角膜发育期间凝集素受体的分布及变化

用辣根过氧化物酶标记的ConA、WGA和RCA Ⅰ为探针,研究了小鼠发育期间角膜内糖残基的分布和变化。Man残基主要分布在角膜基质和内皮;SA残基主要存在于角膜上皮;Gal残基在角膜上皮和基质中都有分布。Man残基在出生前后的小鼠角膜基质中朝内皮方向呈现递增的梯度。SA和Gal残基随角膜发育最后在成体角膜上皮的外表而密集。胎龄13天是小鼠角膜成纤维细胞合成复合糖的起始时间。     

人食管鳞状上皮癌糖复合物表达的研究

凝集素可与其相对应的糖复合物特异性结合。在癌症形成过程中细胞表面经历着显著的变化,本文用十种生物素化凝集素即ＵＥＡ－Ｉ、ＲＣＡ－Ｉ、ＤＢＡ、ＰＳＡ、ＰＮＡ、ＢＳＬ、ＬＣＡ、ＷＧＡ、ＣｏｎＡ和ＳＢＡ作为探针,对正常食管上皮和食管鳞状上皮癌进行研究,以确定正常食管上皮和食管鳞状上皮癌中糖复合物的改变,结果发现,ＰＮＡ和ＰＳＡ在正常食管和食管鳞状上皮癌中均无反应,ＲＣＡ－Ｉ、ＤＢＡ、ＢＳＬ、ＬＣＡ、ＣｏｎＡ和ＳＢＡ受体在正常和癌组织中有着特征性变化,ＢＳＬ和ＤＢＡ在食管中无反应,ＬＣＡ、ＳＢＡ和ＲＣＡ－１正常食管和食管鳞状上皮癌中反应方式不同,ＣｏｎＡ和ＷＧＡ则在同一癌组织的不同部位都显示出不同的反应。尽管ＵＥＡ－Ｉ在正常食管和食管鳞状上皮癌均呈阳性反应,但似乎未表现出有意义的变化。上述结果提示食管癌的发生与含α－Ｄ－ＧａｌＮＡｃ（ＤＢＡ和ＳＢＡ）、β－Ｄ－Ｇａｌ／β－Ｎ－ａｃｅｔｙｌ－Ｄ－Ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ（ＲＣＡ－Ｉ）、α－Ｄ－Ｇｌｃ／α－Ｄ－Ｍａｎ（ＬＣＡ和ＣｏｎＡ）、［β－（１－４）－Ｄ－ＧｌｃＮＡｃ］２／ＮｅｕＮＡｃ（ＷＧＡ）和α－Ｄ－Ｇａｌ（ＢＳＬ）等的糖复合物的改变有较为密切的关系。     

孕期小鼠服用阿斯匹林后胎盘糖原组织化学的图像分析

为探讨孕期小鼠服用阿斯匹林后 ,胎盘糖原含量变化与胎鼠发育异常之间的关系 ,给妊娠 8.5天的小鼠连续 3天灌服阿斯匹林 (2 5 0 mg/ kg/ d) ,用组织化学方法、图像分析技术定量研究第 12 .5天和第 17.5天胎盘糖原的变化。结果显示 ,第 12 .5和 17.5天用药组海绵滋养层细胞特别是糖原细胞内糖原含量与对照组相比显著减少 (P<0 .0 0 1,P<0 .0 0 1) ,胚胎发育异常的胎盘其糖原细胞的形态结构及糖原含量均有明显改变。提示阿斯匹林可通过降低胎盘的糖原贮存 ,使其葡萄糖释放量下降 ,进而使胚胎发育过程中所必需的能量供应不足 ,影响了胎鼠的正常发育甚至导致畸形发生     

基于凝集素芯片的不同转移潜能肝癌细胞膜蛋白糖谱比较

评估采用凝集素芯片技术寻找肝癌细胞表面侵袭和转移相关特征性糖谱的适用性．首先选取一对模式细胞株(中华仓鼠卵巢细胞CHO和其N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅰ缺陷株Lec1)验证凝集素芯片系统的可靠性．然后通过凝集素芯片比较正常肝细胞L02、非转移肝癌细胞Hep3B、高转移肝癌细胞HCCLM3的细胞表面糖谱,同时采用细胞凝集素组织化学的方法验证芯片结果．细胞Hep3B和L02相比,对凝集素PHA-L、ConA、AAL、MPL的亲和作用增强而对凝集素WGA的亲和作用减弱,提示在肝癌细胞表面可能出现了增多的复杂寡糖分支、高甘露糖、末端岩藻糖、黏蛋白T抗原和减少的N-乙酰葡萄糖胺和/或多价唾液酸结构．细胞HCCLM3和Hep3B相比,对凝集素LCA、MAL-Ⅰ、MAL-Ⅱ、WGA、PHA-E的亲和作用增强而对凝集素RCA-I的亲和作用减弱,提示在高转移肝癌细胞HCCLM3的表面可能出现了增多的核心岩藻糖、唾液酸(主要是α2-3链接方式)、N-乙酰葡萄糖胺、平分型GlcNAc结构以及减少的末端β1-4链接半乳糖结构．细胞凝集素组织化学的结果支持芯片结果．研究证明,凝集素芯片技术是解析生物学进程中糖谱改变的适用工具．     

不同月龄大鼠椎间盘退变与多效生长因子表达的关系

目的观察不同月龄大鼠椎间盘的形态学变化并检测椎间盘中多效生长因子（pleiotrophin,PTN）的表达,探讨PTN与椎间盘退变的关系。方法取Wistar大鼠50只,以1,3,6,12,18个月龄不同分为5组,每组10只。采用苏木精-伊红染色观察椎间盘的形态学变化。采用SABC免疫组织化学方法,检测椎间盘中PTN的表达情况;结果（1）随着月龄的增加,椎间盘组织结构紊乱的程度逐渐增加,髓核内基质降解、正中出现空腔,胶原纤维增生、粗大、排列紊乱、并可见纤维断裂或缺失。（2）随着大鼠月龄的增加（1-12月龄）,椎间盘细胞中PTN的表达有逐渐减低的趋势,但至18月龄,PTN表达又有所增加;6和12月龄组椎间盘细胞中PTN的表达显著低于1月龄组,而18月龄组PTN的表达显著高于12月龄组。同月龄组椎间盘细胞中,PTN在终板的表达高于髓核和纤维环,髓核和纤维环中PTN的表达未见明显差异。结论大鼠椎间盘结构随月龄增加发生退行性变,PTN参与了大鼠椎间盘的退变,并可能通过促进椎间盘组织中新生血管的形成,延缓椎间盘的退变。     

发育中人胎儿肥大细胞的组织化学研究

用组织化学技术,对５０例不同胎龄胎儿颊部和食管肥大细胞进行了研究。我们发现：幼稚的肥大细胞颗粒ＴＢ染色呈淡紫色。ＡＢ·Ｓ染色呈蓝色,ＣＥＣ值偏低,颗粒的糖胺多糖硫酸化程度偏低;成熟的肥大细胞颗粒ＴＢ染色呈深紫色,ＡＢ·Ｓ染色呈红色,ＣＥＣ值偏高,颗粒的糖胺多硫酸化程度偏高,含肝素。颊部、食管的肥大细胞在出现的时间、ＡＢ·Ｓ组化染色、ＣＥＣ值与肝素含量等存在不同。结果说明发育中胎儿肥大细胞颗粒的组化性质发生了改变,不同部位肥大细胞的发育是不同步的,这些是发育中胎儿肥大细胞异质性的表现。本文对这些现象进行了讨论。     

人输卵管粘膜凝集素受体表达的研究

研究正常、妊娠及慢性炎症三种状态下输卵管粘膜凝集素受体表达及其相互关系。应用免疫组织化学ABC方法,以六种生物素化的凝集素为探针,对以上三种状态下的输卵管粘膜凝集素受体进行标记。结果表明PNA.UEA－1.SJA的表达在分泌期比增生期为强;妊娠时输卵管壶腹部粘膜DBA、PNA、SJA表达比分泌期为强,而UEA－1表达比分泌期减弱;慢性输卵管炎粘膜凝集素受体的表达与输卵管妊娠时接近或相同。提示：月经周期中输卵管粘膜凝集素受体的表达受雌激素及孕激素的调节;输卵管妊娠时的表达除受雌孕激素的影响外,还可能与着床时胚泡的局部作用有关;慢性输卵管炎易致输卵管妊娠的因素之一,可能与输卵管粘膜凝集素受体的改变有关。     

啤酒对肝影响的组织化学及酶组织化学研究

啤酒为营养丰富的低度酒精饮料。目的　探讨啤酒对肝功能的影响。方法　以小白鼠作为实验对象 ,用 2 0只刚断乳昆明种 (清洁级 )小鼠随机分为两组 ,A组 (10只 )饲以标准饲料 ,强制以啤酒为饮料。B组 (10只 )饲以标准饲料 ,自由饮清水。经 2周喂养后处死 ,取小鼠肝右叶作AcP、LDH、ChE、ATPase、SDH、PAS组织化学及酶组织化学检测。结果　 (1)A、B两组未见肝细胞变性。 (2 )A、B两组AcP为阳性 (+) ,LDH为阳性 (+)。 (3)A、B两组ChE为中等阳性 ( ) ,ATPase为阳性 (+)。 (4)A组SDH为阳性 (+) ,PAS为中等阳性 ( )。B组SDH为中等阳性( ) ,PAS为强阳性 ( )。将A、B两组PAS、SDH标本各随机抽五张 ,经IBAS图像分析系统作定量测定 (P <0 0 5 ,即抽样误差小于 5 % ,有统计学意义 )。A、B组小鼠肝均无明显组织学损害。A、B组小鼠肝蛋白质及糖原合成、胆汁分泌功能未受影响。结论　长期饮用啤酒对小鼠肝的组织结构、肝合成、分泌及代谢功能未产生明显的损害及影响。     

尼罗罗非鱼消化道肥大细胞的组化性质

实验采用改良甲苯胺蓝(MTB)、阿利新蓝-沙黄(AB/SO)、甲基绿-派洛宁(MG-P)、天青Ⅱ-伊红-瑞氏混合液和硫堇5种组化染色法,对尼罗罗非鱼(Nile tilapia)消化道组织中的肥大细胞(Mast cell,MC)组化性质进行研究。尼罗罗非鱼的食管、胃及小肠壁内均显示有肥大细胞,在食管和胃的切片标本上肥大细胞主要分布在黏膜固有层和胃腺体之间。在肠道中的肥大细胞主要分布在黏膜固有层和肠上皮下方,少量肥大细胞存在于黏膜下层结缔组织中。细胞呈圆形、椭圆形,也有长梭形的。而且肥大细胞有沿血管分布的特点。5种组化染色结果表明:AB/SO、MTB和MG-P显示的MC效果较好,尤其AB/SO染色效果最好,肥大细胞轮廓清楚,胞质颗粒较清晰;尼罗罗非鱼肥大细胞胞浆颗粒都呈红色,即肥大细胞胞浆主要含肝素,不含组胺。天青Ⅱ-伊红-瑞氏混合液染色效果也很好,但被染的肥大细胞较少;80%乙醇硫堇染色,在尼罗罗非鱼消化道各段组织中均未能鉴定出肥大细胞。尼罗罗非鱼消化道肥大细胞大多分布于浅层的黏膜或血管、腺体周围的结缔组织等易表露于环境抗原的位点。罗非鱼消化道黏膜层结缔组织中的肥大细胞与大多数脊椎动物的肥大细胞一样,具有沿血管分布的特性,说明硬骨鱼的肥大细胞如哺乳动物肥大细胞一样与血管有着密切的关系。       

胃粘膜肠上皮化生与胃癌的粘液组织化学研究

应用粘液组化技术对１８５例胃良恶性疾病进行了研究。结果：胃良恶性疾病伴肠化检出率无明显差异;但含有硫酸粘液的结肠型肠化在胃癌癌旁检出率明显高于良性疾病组。不同分化程度胃癌的转移及术后生存率无明显差异;但含有酸性粘液的肠型、混合型胃癌的淋巴结转移率明显较仅含中性粘液的胃型胃癌高。提示：结肠型肠化与胃癌有一定关系;癌细胞产生大量酸性粘液可能有利癌细胞的扩散与转移,对胃癌病人的预后有一定影响     

不同年龄大鼠大脑皮层神经元胞体与胶质细胞递质氨基酸含量的比较研究

用非连续 Ficoll-蔗糖密度梯度超离心方法分离幼年、成年和老年大鼠大脑皮层的神经元胞体和胶质细胞。观察到以幼年大鼠为材料分离得到的神经元胞体和胶质细胞纯度高;而以成年、老年大鼠为材料分离得到的神经元胞体和胶质细胞则有少量污染。用 Dans 反应-聚酰胺薄膜层析-荧光方法测定神经元胞体和胶质细胞中的 GABA、甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、牛磺酸含量。发现:(1)幼年与成年大鼠神经元胞体的递质氨基酸含量少于胶质细胞中的含量。老年大鼠的这种差异不显著。(2)由幼年到成年,胶质细胞中的牛磺酸含量显著下降,而神经元胞体中的牛磺酸含量无显著变化。(3)由幼年到成年,神经元胞体与胶质细胞中的“抑制性”与“兴奋性”递质氨基酸总量的比值皆下降50%左右。本文讨论了神经元胞体和胶质细胞的分离纯度及这两类细胞的“抑制性”与“兴奋性”递质氨基酸含量比值的年龄特点。     

大鼠左室肌凝蛋白重链同功酶谱的增龄性变化

用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法分析了５—６０周龄的大鼠左心室肌凝蛋白重链同功酶（ｍｙｏｓｉｎｈｅａｖｙｃｈａｉｎｉｓｏｅｎｚｙｍｅｓ,ＭＩ）。结果表明：大鼠幼年期ＭＩ以高ＡＴＰ酶活性的Ｖ１形式存在（５周龄：Ｖ１＝９８．９２±１．４７％）,随着年龄增长,Ｖ２（１０周龄：３．５４±２．４２％）和Ｖ３（１５周龄６．３１±３．４８％）依次出现并逐步增加,到２８周时Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３分别为６１．３６±１１．７１％、２０．１１±４．９８％和１３．５２±５．３２％,随后基本稳定于该水平;以Ｖ１／Ｖ３为指标分析各周龄组大鼠,可见Ｖ１／Ｖ３具有增龄性的下降趋势,但均以Ｖ１占优势（６０周：Ｖ１／Ｖ３＝３．８５±０．９５）;同功酶谱变化以及它与左室重量相关分析表明,同功酶谱增龄性变化主要发生在大鼠生命的早期,并且这种变化可能与左室重量的增长有关。