棉酚抗生育作用的研究——Ⅳ.大白鼠长期服棉酚睾丸退化的观察

选用出生1月龄大白鼠按20毫克/公斤体重/日灌服棉酚,每周5次,连续1个月和2个月取材;性成熟大白鼠每天服棉酚5毫克/只,每周6次,给药3、4、6个月和停药1、2、3个月分别取材,睾丸称重后固定、制片作比较观察。实验结果表明,棉酚对幼龄大白鼠睾丸的发育没有影响,但使发育到变态后期的精子细胞受损伤,附睾中出现断头坏死的精子。长期服抗生育有效剂量棉酚的大白鼠中,有相当一部分出现不同程度的睾丸退化。退化通常在睾网附近最先出现,并和死精子在曲精细管中积聚相关连。第Ⅶ—Ⅷ期生精上皮退化的过程是自上皮游离缘18—19期精子细胞开始渐进地向基膜方向推进,直至上皮完全剥落或仅留以个别精原细胞和较多的媬育细胞。停服棉酚后恢复1—3个月的结果指出,已开始退化的睾丸在停药后有继续退化的趋势。严重退化的睾丸经停药3个月,虽然曲精细管排列较整齐,部分留有精原细胞的曲精细管中精原细胞显示增加数目并有B 型精原细胞,但尚未见进一步发展。对于睾丸退化可能与死精子在曲精细管内积聚有关,而不是由于棉酚对整个生精上皮的损伤问题进行了讨论。     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅱ.棉酚抗生育作用的形态学分析

利用电子显微镜观察到小剂量棉酚能引起大白鼠精子发生后期精子细胞的中段线粒体肿胀,证明在大白鼠睾丸中对棉酚最敏感的成分是成熟期精子细胞。     

服棉酚大白鼠血清睾丸酮和LH含量的放射免疫测定

用放射免疫测定法分析了服棉酚雄性大白鼠血清睾丸酮和LH的含量。数据表明,无论是幼龄大白鼠服棉酚2个月和服棉酚2个月停服1个月的,或是性成熟大白鼠服棉酚1个月和停服棉酚1个月的以及服棉酚6个月的血清睾丸酮食量都明显低于同月龄对照大白鼠的或服棉酚前的水平。但血清LH含量没有明显改变。血清睾丸酮含量降低和体重增长以及睾丸生精上皮退化与否都没有明显相关。根据现有的资料可以认为,服棉酚大白鼠血清睾丸酮含量减低,是由于棉酚直接作用于睾丸间质细胞的结果。停服棉酚后睾丸酮含量,除个别动物外均未见明显回升,可能由于棉酚在体内有一定的积累所致。     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅱ.对雄性大鼠的抗生育作用

早在1957年刘宝善提出了用“食用生棉油来节制生育”的刍议;但当时未引起人们的重视。此后,在我国一些产棉区因长期食用粗制棉油引起不育或生育力显著降低的启示下,自1971年以来,全国一些单位开展了棉籽仁和棉酚抗生育作用的实验研究(全国男用避孕药协作组1978)。本文以雄大鼠为模型,探讨棉酚抗生育的最低有效剂量,并分析其抗生育作用的起效和恢复时间及其作用方式,以期为临床用药提供资料。     

醋酸棉酚对褐家鼠抗生育作用的研究

1.用30毫克/公斤·日和50毫克/公斤·日棉酚饲喂褐家鼠6周,合笼交配结果表明,不仅雄性产生不育,雌性也产生不孕。 2.形态学观察,与对照组相比,棉酚主要损伤曲细精小管内精子、精子细胞和精母细胞,同时管壁萎缩、变形并明显变薄。雌性卵巢重量有所下降,形态基本正常,但子宫粘膜萎缩变薄,腺体数目显著减少。 3.由器官系数测定可知,50毫克组的雄雌褐家鼠与对照组相比,除雄性肾上腺外,其它器官都有明显的差异。     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅰ.附睾结扎的实验分析

为了分析棉酚影响大白鼠精子的作用部位,在灌服棉酚后不同时间作一侧或两侧附睾结扎手术。第Ⅰ组,结扎了19只用药21天的大白鼠的输出管、附睾中段和输精管;第Ⅱ组,在12只用药14天的大白鼠做了同样的手术;第Ⅲ组,结扎了10只用药12天、停药7天的大白鼠附睾中段和输精管;第Ⅳ组是施行类似手术的正常大白鼠,分别作为用药组的对照。各组均在手术后第7天检查分隔在附睾不同部位的精子的活动能力。结果发现:在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组中,附睾中段结扎部位上的精子都死亡;在第Ⅱ组中,8例结扎侧的附睾尾部和输精管里留有很多活动的精子,这种情况在第Ⅰ组中也有少数几例;在第Ⅲ组,附睾头段的精子能够活动但有较多的畸形;对照组的大白鼠附睾中段结扎部位上虽有少数死精子,但大部分精子运动良好,附睾尾部精子保持正常运动和头-头型凝集现象。这一结果表明,棉酚抗生育的作用部位不在附睾而是在睾丸内。对于棉酚影响精子发生后期的可能性进行了讨论。     

二苯胺棉酚中棉酚的含量测定

用紫外分光光度法测定二苯胺棉酚中棉酚的含量。方法回收率平均达 93.6 %以上 ,变异系数 ( CV )为1.2 %。该方法准确 ,重现性好 ,可作为二苯胺棉酚质量监控方法。     

棉籽中游离棉酚的含量测定

用紫外分光光度法测定棉籽中游离棉酚的含量。脱除棉酚的棉籽乙醚提取物经石油醚和 75 %乙醇分离和纯化后 ,用 0 .5 %对氨基苯磺酸显色来检测棉籽中游离棉酚的含量 ,结果表明 ,该方法具有简便、重现性好、回收率高达 97%以上等优点 ,可作为棉籽中游离棉酚质量控制方法。     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅰ.对小鼠及大鼠雄激素依赖器官的影响

棉酚可抑制大鼠、兔、犬及猴睾丸精子发生(男用节育药全国协作组,1978;张寅恭等,1972,1974,1979;中国医学科学院药物研究所,1972;山东省中草药研究组,1972,1975;戴荣禧等,1978),临床试用也表明棉酚具有可靠的节育效果(江苏省棉酚抗生育科研协作组,1974),这为男用节育药的研究提供了一个可喜的苗头。作为男用节育药对性功能有无影响,是一个值得重视的问题。然而,目前棉酚对控制性功能的雄激素有无影响     

在体和离体的大白鼠肝细胞经棉酚处理后的观察

性成熟的雄性Wistar大白鼠经小剂量棉酚持续处理半年,肝细胞的超微结构,无论是细胞器或是细胞内含物都和对照大白鼠的相似;但大剂量棉酚短期处理,即可引起肝细胞呈“空泡”样变。在离体条件下,棉酚对大鼠肝细胞的损伤作用,与在体肝细胞经大剂量棉酚短期处理的结果相同,受损伤的程度与棉酚浓度和处理时间成正相关。表明离体肝细胞对棉酚比在体肝细胞敏感,但和生精细胞相比,这些体细胞则是相对不敏感的。小剂量长期用药组及其对照组中部分大白鼠的肝细胞线粒体出现类晶体样内含物,可能提示肝细胞在超微结构水平受损伤,但与灌服棉酚没有必然联系。     

紫外分光光度法同时测定厚朴酚与和厚朴酚的含量及活性研究

使用pH =8.93的KH2 PO4 NaOH缓冲液 (0 .0 2 5mol/L) ,根据混合物含量测定的原理 ,在 2 89.4nm和 316 .4nm处测定溶液吸光度来测定厚朴酚与和厚朴酚的含量 ,在 5 17nm处考察厚朴酚与和厚朴酚清除DPPH·的活性 ,建立了同时测定厚朴酚与和厚朴酚含量的紫外分光光度法 ,初步考察了二者的自由基清除活性。DPPH·可作为二者抗氧化活性的研究方法。     

紫外分光光度法测定栀子黄色素中栀子酚和栀子甙的含量

我国生产的栀子黄色素主要成份是藏花素(Ⅰ)和藏花酸(Ⅱ),但也还有一些其他成份,主要有栀子酚(Ⅲ)和栀子甙(Ⅳ)等。从着色的作用来看栀子酚和栀子甙也显黄色, (Ⅰ)R:龙胆二糖 (Ⅱ)R=H但色价较差,而且对人体的生理功能也完全不同。藏花素、藏花酸对人体的肝有治疗保健作     

牡丹种壳中丹皮酚和芍药苷的微波提取及含量测定

以牡丹种壳为原料,采用微波辅助提取方法,以芍药苷和丹皮酚得率为指标,利用单因素实验对于影响牡丹种壳中芍药苷和丹皮酚得率的因素进行优化。得到的最佳提取工艺参数为:乙醇提取分数70%,液料比10∶1、微波功率230 W、微波时间10 min,浸泡时间1 h,提取次数1次,牡丹种壳芍药苷和丹皮酚的得率分别为2.88和0.52 mg·g-1。同时,对于选取的微波辅助提取方法的稳定性,回收率和重现性进行验证,结果显示微波辅助提取方法是一个稳定的、可靠的提取方法。     

黄芩配伍川贝母后黄芩中主要化学成分含量变化及抗肺炎作用研究

本文旨在探究黄芩川贝母不同比例配伍后对黄芩中主要化学成分含量影响及等比配伍后抗肺炎作用.将黄芩川贝母按3∶0、3∶1、3∶2、3∶3、2∶3、1∶3、0∶3比例配伍后,水提取,高效液相色谱法测定黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量.选择健康ICR小鼠36只,随机分为6组,分别为空白组、LPS组、阳性药组、黄芩组、川贝...     

蛇莓中鞣花酸和短叶苏木酚羧酸的分离鉴定及含量测定

蛇莓为民间常用草药,通常与其它中药配合使用,用于多种癌症的治疗.为了解其抗肿瘤活性成分,本文对其化学成分进行了研究.从该植物的酚性部分中分得两个酚性成分,分别鉴定为鞣花酸(Ellagic acid,EA)和短叶苏木酚羧酸(Brevifolincarboxylic acid,BA).EA为首次从该属植物中分得.并首次建立了蛇莓中EA和BA的HPLC含量测定方法,样品以50%乙醇为溶剂超声提取30 min,提取液以C18色谱柱进行分离.以25 mM磷酸二氢钾缓冲液(pH=2.4)-乙腈进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,360 nm下检测.结果显示,EA和BA均具有良好的线性范围(r2>0.999)、精密度(RSD<0.50%)和重现性(RSD<1.50%),回收率分别为99.65%和102.95%.当进样体积为20μL时,EA和BA的最低检测限分别为12和20 ng/mL.以上结果表明该方法简便易行,结果准确,重复性好,可用于蛇莓中EA和BA的含量测定.     

壮、瑶药小槐花中异柠檬酚的分离鉴定及含量测定研究

采用硅胶色谱柱分离纯化的方法从小槐花药材中分离得到一种黄酮类化合物,根据理化性质及光谱数据鉴定其为异柠檬酚。采用HPLC法对异柠檬酚的含量进行测定,HPLC分析条件如下:色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液(70∶30),流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm,柱温为35℃。实验结果表明异柠檬酚在0.011~0.242μg范围与其峰面积呈良好的线性关系;平均回收率为99.76%,RSD为1.42%(n=6),不同采集地的小槐花药材中异柠檬酚的含量存在一定差异。     

穿心莲抗生育作用的研究Ⅰ.对体外培养的人绒毛滋养层细胞激素分泌功能的影响

本实验报道了穿心莲苦素、穿心莲氯仿提取物等穿心莲制剂有抑制体外培养的早孕人胎盘绒毛滋养层细胞分泌激素的作用,显微镜下观察,以上制剂损伤、破坏滋养层细胞并使它死亡。 本文讨论了穿心莲的抗生育机理,认为是药物对滋养层细胞直接破坏所致。     

抗茉莉酸甲酯单抗制备及小麦和黑麦草颖花中茉莉酸含量的测定

本文报道了识别茉莉酸甲酯(MeJA)的单克隆抗体的制备。该抗体源于以茉莉酸的C-1位羧基为偶联位点,钥孔娥血蓝蛋白为载体合成的免疫原。该抗体对甲酯化茉莉酸的识别力明显强于对茉莉酸(JA)的;JA分子中戊烯侧链的完整性对该抗体的识别力有很大影响。于该侧链的C-9和C-10位加氢(形成Dihydro-JA),或除去C-12(形成JAS-25),都会大幅度降低该抗体的结合活性。该抗体对亚麻酸、南瓜酸、冠毒素及Theobroxide均无识别力。用该抗体建立了定量检测JA的固相抗体型酶联免疫吸附定量测定法,检测范围为2．06-500 pmol MeJA。并探查了小麦及黑麦草开颖前后颖花的JA含量。发现随着开颖时间的临近,JA含量显著升高;颖花开放时达到最大值,随后急剧下降。     

抗茉莉酸甲酯单抗制备及小麦和黑麦草颖花中茉莉酸含量的测定

本文报道了识别茉莉酸甲酯(MeJA)的单克隆抗体的制备.该抗体源于以茉莉酸的C-1位羧基为偶联位点,钥孔(虫戚)血蓝蛋白为载体合成的免疫原.该抗体对甲酯化茉莉酸的识别力明显强于对茉莉酸(JA)的;JA分子中戊烯侧链的完整性对该抗体的识别力有很大影响.于该侧链的C-9和C-10位加氢(形成Dihydro-JA),或除去C-12(形成JAS-25),都会大幅度降低该抗体的结合活性.该抗体对亚麻酸、南瓜酸、冠毒素及Theobroxide均无识别力.用该抗体建立了定量检测JA的固相抗体型酶联免疫吸附定量测定法,检测范围为2.06-500 pmol MeJA.并探查了小麦及黑麦草开颖前后颖花的JA含量.发现随着开颖时间的临近,JA含量显著升高;颖花开放时达到最大值,随后急剧下降.