光动力学诊断肿瘤中光敏剂光漂白特性的研究

实验研究了三种光敏剂:血卟啉衍生物(HpD)、癌光啉(PsD-007)和血啉甲醚(HMME),在光敏剂浓度C分别为2μg/mL、3μg/mL、5μg/mL,激发光波长λ为488 nm和514.5 nm,光功率P为10 mW、15 mW、20 mW等不同条件下照射,光敏剂的光漂白特性。结果表明光敏剂的光漂白时间除了与光敏剂自身类型有关,还与其浓度、入射光源的功率及波长有关。HMME在488 nm、激光功率15 mW,浓度为2μg/mL、3μg/mL、5μg/mL时光漂白时间分别为210 s、240 s、325 s。     

紫光激发中药光敏剂用于早期胃癌的诊断

采用405nm紫光激发传统中药光敏剂(CpD4)发射的荧光中心波长在660nm。红色荧光能深入组织,因而能够应用在胃癌早期诊断及治疗中。本文测定了中药光敏剂的吸收光谱和发射荧光光谱,并提出了二种用于激发光敏剂的紫光光源。一种为“Hg-Xe”灯,发射峰为433nm;另一种为采用紫光LD,发射峰为405nm。这二种波长和中药光敏剂的吸收峰完全匹配。     

光系统II核心复合物的稳态荧光光谱(英文)

在 83K 和 160K 两个温度下,通过激发波长对荧光发射谱的影响研究了光系统II中核心复合物的荧光光谱特性。用不同波长的光激发,核心复合物的发射谱的最大发射峰值不变,用 480、489、495 和 507nm 的光分别激发核心复合物,其光谱最大峰值处的荧光强度随不同激发波长下β-胡萝卜素分子的吸收强度的增大而降低,在长波长区域光谱的变化依赖于首先被激发的色素分子。所以,激发波长的不同影响着核心复合物中能量传递的途径。通过高斯解析,分析出核心复合物中至少存在有 7组叶绿素a组分,它们是Chla660,Chla670,Chla680,Chla682,Chla684,Chla687和Chla690。     

光系统Ⅱ核心复合物的稳态荧光光谱

在83K和160K两个温度下,通过激发波长对荧光发射谱的影响研究了光系统Ⅱ中核心复合物的荧光光谱特性。用不同波长的光激发,核心复合物的发射谱的最大发射峰值不变,用480、489、495和507nm的光分别激发核心复合物,其光谱最大峰值处的荧光强度随不同激发波长下β-胡萝卜素分子的吸收强度的增大而降低,在长波长区域光谱的变化依赖于首先被激发的色素分子。所以,激发波长的不同影响着核心复合物中能量传递的途径。通过高斯解析,分析出核心复合物中至少存在有7组叶绿素a组分,它们是Ch1 a660,Ch1 a670,Ch1 a680,Ch1 a682,Ch1 a684,Ch1 a687和Ch1 a690。     

血啉甲醚在鼻咽癌细胞中的浓度分布

利用激光诱导荧光方法实验测定了新型光敏剂血啉甲醚（Hematoporphyrin Monomethyl Ether, HMME）在鼻咽癌细胞株CNE中的时间分布和浓度变化规律.实验结果表明,鼻咽癌细胞株CNE的荧光光谱中的两个特征峰615 nm和675 nm证实了鼻咽癌细胞对HMME的选择性特异吸收.HMME在鼻咽癌细胞中的潴留浓度在混合培养后的140分钟达到最大值.当用于培养鼻咽癌细胞的HMME药物浓度低于32 μg/ml时,测量得到的相对荧光光谱强度与HMME浓度呈现出很好的线性关系,通过拟合方程可以间接确定在给定注射剂量条件下鼻咽癌细胞中所潴留HMME的浓度.结果可以为HMME在光动力学诊断与治疗中的临床应用提供理论依据和剂量参考.     

荧光探针在光动力疗法亚细胞损伤位点研究中的应用

目的：应用荧光探针在光动力疗法研究中检测亚细胞损伤位点。方法：传代培养鼠肺毛细血管内皮细胞,将血卟啉单甲醚(HMME)与内皮细胞共同孵育24小时后,加入线粒体探针Bhodamine-123、内质网探针DioC6(3)和溶酶体探针Lucifer yellow分别对细胞器染色。首先采用激光共聚焦显微镜对光敏剂进行亚细胞定位。应用荧光显微镜汞灯照射激发光敏剂的光动力效应,加入ROS探针H2DCF-DA检测产生的单线态氧。分别在激发前后采集Pdloclamine-123、Lucifer yellow和DioC6(3)的荧光图像。结果：线粒体探针Phodamine-123的荧光图像在光动力损伤前后差异显著,原有形态特点发生明显改变;Phodamine-123在光动力损伤后再分布于细胞核区。结论：血卟啉单甲醚介导的光动力效应导致亚细胞水平多位点损伤,线粒体和核膜可能是PDT敏感位点;荧光探针标记检测光动力损伤亚细胞位点方法简便可靠。     

血啉甲醚对斜纹夜蛾SL细胞的氧化损伤

通过研究血啉甲醚（hematoporphyrin monomethyl ether, HMME）对斜纹夜蛾Spodoptera litura (SL)细胞的增殖抑制率IC₅₀、处理后细胞内丙二醛（malondialdehyde, MDA）的生成量、细胞内还原型谷胱甘肽（glutathione, GSH）水平和细胞器超微结构的变化,明确血啉甲醚对SL细胞的氧化损伤,并探讨将血啉甲醚及其衍生物拓展应用到农业害虫防治领域的可行性。用MTT法测定血啉甲醚光照处理下对SL细胞24 h和48 h的IC₅₀值分别为8.35 μg/mL和7.66 μg/mL。硫代巴比妥酸（TBA）法测定表明,血啉甲醚光活化后能导致胞内MDA含量明显升高,且MDA的生成量与其浓度呈正相关;当血啉甲醚浓度为50.000 μg/mL,光照处理48 h时,细胞内MDA生成量达到173.08±3.51 nmol/L。5,5′-二硫代双 (2-硝基)苯甲酸（DTNB）法对处理后细胞内GSH水平测定结果表明,光活化后的血啉甲醚处理SL细胞能导致细胞内还原型GSH相对含量随血啉甲醚浓度升高而显著降低;当血啉甲醚浓度为50.000 μg/mL,处理48 h时,光照处理组细胞内GSH相对含量较之同浓度黑暗处理下降了39.59%。扫描电镜观察显示,6.250 μg/mL的HMME处理细胞并光照后,细胞膜表面出现了明显的孔洞,有的细胞出现了花样皱褶和内陷。这些结果表明在血啉甲醚的试验剂量下,SL细胞受到了氧化损伤。     

肽链及蛋白质N-末端喹喔啉类荧光衍生物的形成

蛋白质及肽链N-末端经Dixon转氨后的羰酰基与邻苯二胺作用可形成喹喔啉类荧光衍生物.形成这一发色团的过程较为缓慢;喹喔啉短肽的激发(Ex 293-305nm)与发射(Em 360-365nm)波长随肽链氨基酸残基组成不同而有一定变化;喹喔啉胰岛素荧光衍生物的激发光波长为Ex318nm,发射波长为Em 353nm.喹喔啉三肽的荧光在乙二醇溶液中的变化因其氨基酸残基组成的不同而有差异.以上结果提示:喹喔啉类荧光衍生物可能作为研究蛋白和肽结构与功能的一种手段.     

荧光法定量肿瘤中的光敏剂浓度

在光动力学治疗和肿瘤的荧光诊断中,要确定剂量就需要知道组织中的光敏剂浓度.一种基于荧光测定的方法已被设计出来,可测量瘤体中光敏剂浓度,实验结果表明此注是有前途的.我们应用漫射理论于平面组织体,用的激发波长和发射波长很接近,断定了激发和发射辐射能流及深度x的函数与x的无关性.又从测得的漫反射率推得漫射系数和衰减系数的函数.该函数补偿了不同组织或是定标模型和组织间吸收和散射的差异,从而建立了肿瘤中光敏剂浓度定量测定的技术路线.     

人体鼻咽组织的时间分辨自体荧光光谱研究

实验研究了在397 nm半导体脉冲激光激发下,人体离体鼻咽正常和癌变组织在600 nm荧光发射波长处的时间分辨自体荧光光谱特性。利用双指数衰减方程对时间分辨自体荧光光谱进行拟合后,获得相应的荧光强度随时间的指数衰减方程以及荧光平均寿命。人体鼻咽癌变和正常组织在600 nm处的自体荧光平均寿命分别为(2.94±0.51)ns和(4.29±0.71)ns,两者之间存在显著的差异。应用时间分辨光谱技术的诊断灵敏度和特异性分别为75%和100%。初步表明了时间分辨自体荧光光谱在早期鼻咽癌诊断的应用价值,该方法可望与传统的稳态荧光光谱结合起来,进一步提高早期鼻咽癌荧光诊断的准确率。     

超高产杂交水稻皮秒分辨荧光特性

采用时间分辨荧光光谱测试系统,研究了超高产杂交水稻(Oryza sativa L.)两优培九(P9)和对照汕优63(SH 63)类囊体膜的荧光光谱特性和时间特性.以脉宽为120 ps,重复率为4MHz,波长为514 nm的Ar+激光分别激发P9和SH 63水稻类囊体膜荧光.通过对其超快荧光的时间特性和光谱特性比较研究发现:无论是在灌浆期还是在扬花期,P9水稻类囊体膜中光系统I激发能传递的速度比光系统Ⅱ的快;P9和SH 63两种水稻类囊体膜在灌浆期的激发能传递速度都比扬花期的快;两种水稻类囊体膜的光谱特性还给出,在从扬花期到灌浆期这一生长发育过程中,SH 63水稻类囊体膜的色素成分和结合状态发生了变化,而P9却没有出现这种变化.     

超高产杂交水稻皮秒分辨荧光特性

采用时间分辨荧光光谱测试系统，研究了超高产杂交水稻(Oryza sativa L.)两优培九(P9)和对照汕优63(SH 63)类囊体膜的荧光光谱特性和时间特性。以脉宽为120ps，重复率为4MHz，波长为514nm的Ar^-激光分别激发P9和SH 63水稻类囊体膜荧光。通过对其超快荧光的时间特性和光谱特性比较研究发现：无论是在灌浆期还是在扬花期，P9水稻类囊体膜中光系统I激发能传递的速度比光系统Ⅱ的快；P9和SH 63两种水稻类囊体膜在灌浆期的激发能传递速度都比扬花期的快；两种水稻类囊体膜的光谱特性还给出，在从扬花期到灌浆期这一生长发育过程中，SH63水稻类囊体膜的色素成分和结合状态发生了变化，而P9却没有出现这种变化。     

血卟啉及其衍生物在水溶液和细胞内的时间分辨荧光的研究

本文报道了血叶啉衍生物(Hpd)及其由高压液相色谱法分离制备的4种主要成分以及血叶啉,血叶啉二盐酸盐和原叶啉(Ⅸ)二钠盐等8种叶啉衍生物分别在水溶液和CHO细胞内的荧光衰变动力学的研究,实验表明,除Hpd分离组分d的荧光寿命略短外,其余7种在水落液里的荧光寺命均在15ns左右,并发现它们的荧光态在细胞内衰变加快,然而,分离组分d在细胞内的荧光寿命却明显加长.根据实验结果,本文对叶啉衍生物的最低激发单线态在细胞内的驰豫过程提出了一种可能的模式,它反映了叶啉衍生物在细胞内与某种细胞组分的结合以及它们之间的能量传递.分析表明,荧光寿命的缩短意味着光敏效率的降低.     

荧光光谱校正的原理和方法(下)

四、校正曲线的探测方法(一)激发光谱校正曲线(激发光强度-波长曲线)1.温差电偶由于温差电偶在一定波段内不存在光谱特性,可在荧光分光光度计样品室中放置一个很灵敏的、具有石英窗口的热电偶,热电偶的后面连接一个灵敏检流计,当改变激发光单色器波长时,检流计上面读数的变化便是光源-激发光单色器组合体的强度-波长曲线。然后将表观激发光谱每一波长上的读数乘以激发光强度-波长曲线同一波长上的数值,以所得的数值对波长作图,便可得到真实的荧光激发光谱。但利用热电偶的探测方法,只有在光通量较强时才是可以的。因热电偶的电输出信号微弱。容易受各种外界因素干扰。     

镁离子对柱孢鱼腥藻(Anabaena cylindrica)类囊体膜吸收光谱和荧光光谱的影响

研究了不同浓度(5和10mM)的镁离子对柱孢鱼腥藻类囊体膜吸收光谱和荧光光谱的影响。5mM镁离子浓度降低柱孢鱼腥藻类囊体膜的叶绿素α在红区和蓝区的吸收峰,表现相似于镁离子对叶绿体的叶绿素α吸收峰的变平效应。在室温下,加入5mM镁离子浓度使膜的光系统Ⅱ684nm发射荧光强度降低。在液氮低温下,镁离子降低膜的光系统Ⅱ684nm和光系统Ⅰ728nm发射荧光强度的比值。可能表明镁离子促进光系统问激发能的传递。同时,镁离子增大叶绿素α所吸收光的激发能对光系统Ⅰ发射荧光的贡献,促进叶绿素α至光系统Ⅰ的激发能传递。     

螺旋藻藻胆体核心复合物结构与功能的研究──四种变藻蓝蛋白复合物的分离及光谱特性的研究

从螺旋藻（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓ）的藻胆体中分离出四种不同光谱形式的变藻蓝蛋白（ＡＰＣ）复合物：ＡＰⅠ、ＡＰⅡ、ＡＰⅢ、ＡＰＢ,利用吸收光谱、荧光先谱（室温和低温）以及荧光激发偏振光谱比较了ＡＰＣ复合物三聚体和单体的光谱特性。四种ＡＰＣ复合物三聚体的最大吸收和最大发射峰位置各不相同,ＡＰⅡ和ＡＰⅢ位于短波区（最大吸收波长在～６５０ｎｍ．最大发射波长在６６２～６６４ｎｍ）,ＡＰⅠ和ＡＰＢ位于长波区（最大吸收波长在～６５５ｎｍ,最大发射波长在～６８０ｎｍ）,低温下的荧光发射光谱均有红移。在能量传递中,各种不同形式的ＡＰＣ复合物表现出不同的功能,以实现能量的高效传递：ＡＰⅡ和ＡＰⅢ是能量传递的中介,ＡＰⅠ和ＡＰＢ作为终端发射基因,分别将激发能传给反应中心。通过荧光激发偏振光谱研究了四种ＡＰＣ复合物及其单体内各色团间的相互关系及其在能量传递中的取向和功能。     

荧光光谱分析法在地沟油鉴别中的应用研究

由于地沟油的成分含量复杂性和不定量性,导致了现有的单一检测方法不能同时满足快速和准确的辨认。荧光光谱具有高灵敏度和分辨率的特性,由此提出了一种利用荧光光谱快速检测食用油中是否掺有地沟油的新方法。将花生油分成7组,每组油所含的地沟油的比例不同,用220 nm到800 nm的激发和发射光检测各组样品油,收集其荧光数据后做归一化处理进行分析。在荧光实验中,特别是在365 nm和720 nm激发波长波段和434 nm发射波长波段,样品油的荧光强度与所含地沟油的体积分数大小明显成反比,当地沟油的体积分数大于5%时,荧光强度的衰减更为明显。结果证明了荧光光谱法检测地沟油的可行性,而且步骤更为简单。利用荧光光谱的非接触和高灵敏度的优势,能够更为简便地检测到加入了5%以上地沟油的花生油。     

口腔常见致龋菌荧光光谱特征的初步研究

目的采用三维荧光光谱分析技术对口腔常见致龋菌荧光光谱特征进行初步分析。方法选择口腔常见致龋菌变形链球菌及远缘链球菌,对其进行复苏和培养,运用三维荧光光谱分析技术对其菌液进行荧光学光谱检测。结果变形链球菌及远缘链球菌的三维荧光光谱图相似,均出现2个荧光峰,最佳激发波长分别位于230nm和280nm,最佳发射波长相同,均为340nm。结论成功获得口腔常见致龋菌(变形链球菌及远缘链球菌)的固有荧光三维光谱图,为致龋菌荧光评价技术的应用提供参考。     

带有功能性多肽的光敏剂及其应用

光动力治疗( photodynamic therapy,PDT )是光敏剂在特定波长光源的激发下、在氧分子存在下产生细胞毒性物质的一种治疗方法,主要用于抗肿瘤治疗．目前临床应用的光敏剂对肿瘤细胞的靶向性比较有限,近来的一个热门研究方向是靶向性光敏剂．结合作者多年来在该方向的工作,综合近年来光敏剂研究的发展,比较全面地阐述了带有功能性多肽的靶向性光敏剂及其在光动力治疗中的应用．阐述多肽作为靶向基团的优势,总结了包括透膜多肽、血管靶向多肽、细胞受体靶向多肽等功能多肽与光敏剂偶合物的生物效应,说明了多肽能够实现光敏剂的靶向作用．     

癌症病人血液的荧光光谱研究

研究了癌症病人全血、血浆和血红蛋白的激发波长—发射波长—荧光光强三维光谱,观察到特征谱带625nm的荧光本原物质存在于血红蛋白部分,比较了十五种癌症(28例),十例非癌症病人和健康人血液在625nm带的荧光强度.