果蝇中P因子研究与应用的新进展

Ｐ因子是果蝇中一种重要的转座子。Ｐ因子的研究与应用使以果蝇为模式生物的研究迈上了一个新台阶。Ｐ因子的起源、转座及调控研究都提示了其行为的复杂性。Ｐ因子作为果蝇遗传分析的有力工具,更是受到了人们的重视。     

横断山地区的伏绕眼果蝇亚属及三新种(双翅目:果蝇科)

本文记述分布在中国横断山地区绕眼果蝇属伏绕眼果蝇亚属［Ａｍｉｏｔａ（Ｐｈｏｒｔｉｃａ）］的１１个物种，其中包括３个新种：不对称绕眼果蝇Ａ．（Ｐ．）ａｃｏｎｇｒｕｅｎｓｓｐ．ｎ．、突绕眼果蝇Ａ．（Ｐ．）ｐｒｏｔｒｕｓａｓｐ．ｎ．、韩氏绕眼果蝇Ａ．（Ｐ．）ｈａｎｉｓｐ．ｎ．。     

横断山地区的伏绕眼果蝇亚属及三新种

本文记述分布在中国樱花断山地区绕眼果蝇属伏绕眼果蝇亚属「Ａｍｉｏｔａ（Ｐｈｏｒｔｉｃａ）」的１１个物种,其中包括３个新种,不对称绕眼果蝇Ａ．（Ｐ．）ａｃｏｎｇｒｕｅｎｓ ｓｐ．ｎ．、突绕眼果蝇Ａ．（Ｐ．）ｐｒｏｔｒｕｓａ ｓｐ．ｎ．、韩氏绕眼果蝇Ａ．（Ｐ．）ｈａｎｉ ｓｐ．ｎ。     

中国黑腹果蝇中分离变相因子[Segregation Distorter(SD)]的初步研究

黑腹果蝇（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）中的分离变相因子「Ｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ Ｄｉｓｔｏｒｔｅｒ（ＳＤ）」是一种非常典型的具有减数分裂驱动性质的特殊遗传因子，ＳＤ在世界不同地区的黑腹果蝇群体中广泛存在，通过杂交的方法测得其频率在１％－５％范围之内。首次在中国北京，青岛采集大量野生黑腹果蝇样本，对ＳＤ进行频率测定，发现ＳＤ在中国野生黑腹果蝇群体中也广泛存在，且频率与世界其他地区     

我国大陆部分地区黑腹果蝇群体线粒体DNA多态性研究

用１０种限制性内切酶对我国大陆５个地方（武汉,长沙,桂林,南宁和北海）６个黑腹果蝇（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）群体的线粒体ＤＮＡ进行了限制片段长度多态性分析,在５６个单雌系中,发同了２５种不同的限制类型,应用Ｎｅｉ等（１９７９）的数学模型和ＵＰＧ法,构建了限制类型间和群体间的系统进化树,结果发现：所研究的群体分为３个类群,对应于南,中和北３个亚热带地区,除长沙玉合醋厂外,所有采     

中国副白果蝇属Paraleucophenga一新种：双翅目：果蝇科

本文描述了采自中国浙江萧山和安徽绩溪的果蝇科副白果蝇属Ｐａｒａｌｅｕｃｏｐｈｅｎｇａ一新种（图１－３）：山阴副白果蝇Ｐａｒａｌｅｕｃｏｐｈｅｎｇａｓｈａｎｙｉｎｅｎｓｉｓ。本新种近似Ｐ．Ｉｎｖｉｃｔａ,与后者的区别在于：抱握器具９个黑齿,中、腹部具许多细毛（图１）;前叶具２２个长齿的栉（图２）和阳茎远端具稠密细毛（图２）。     

中国特有果蝇 Drosophila curviceps 种亚组在Drosophila immigrans种组中的种系发生地位

果蝇immigrans种组中的curviceps种亚组是1992年新建立的中国特有果蝇类群。该种亚组中的物种主要分布在中国大陆和台湾。目前除了形态学水平的研究外,还没有其他证据支持建立该种亚组的合理性及其起源和种系发生地位。为了在DNA分子水平上探讨果蝇curviceps种亚组在果蝇immigrans种组中的种系发生地位,从而为今后更深入地研究中国特有果蝇,甚至为果蝇亚属的进化遗传学提供理论依据,测定了immigrans种组5个种亚组（nasuta、immigrans、hypocausta、quadrilineata、curviceps)中12个代表物种的rDNA的ITS1和部分Adh基因的序列。其中ITS1序列的长度为513－587bp,共有191个信息位点;Adh基因片段的长度在714－747bp之间,共99个信息位点。考虑到单个分子提供的信息较少,将两个分子的序列综合起来,组成一个较长的复合序列。分别根据ITS1,Adh和两个分子的复合序列排比（Alignment)结果,和最大简约法和邻接法构建分子系统树,其中根据复合序列构建的系统树与形态学研究结果最为一致。分子树显示curviceps种亚组的特种确定单独形成一个分枝,为种亚组级的分类阶元,支持了形态学将其建立为一个新种亚组。根据Kimura距离,估算了复合分子的替换速率约为每百万年1．48％,进而计算出5个种亚组的分 歧年代。结合各物种的地理分布,推测了immigrans种组的进化历史：curviceps种亚组与quadrilineata种亚组的亲缘关系最近,主要分布在中国南部的温带地区。它们之间的分歧时间大约为3．4百万年,是最年轻的两个种亚组。主要分布在苏门答腊及附近的热带地区的hypocausta种亚组的物种是最早分化出来的,与其他种亚组的分歧时间约为9．2百万年。该结果与形态学和生物地理学研究相吻合。值得一提是的,目前归属仍存在争议的物种D.neohypocausta,在分子系统树中与hypocausta种亚组的物种相距较远,而与immiagrasn种亚组的关系较近,但分枝置信度较低（＜50％）。由于还缺乏其他方面的证据,因此D.neohypocausta的归属有待今后的研究来作定论。     

DAKO-M1在胃癌组织表达的免疫组织化学研究

对９５例胃癌组织进行ＤＡＫＯ－Ｍ１（ＤＡＫＯ－ＣＤ１５）表达的免疫组织化学研究。结果发现,ＤＡＫＯ－Ｍ１在胃癌中的阳性率（８６．３％）显著高于癌旁粘膜和正常胃粘膜（Ｐ＜０．０５和０．００５）。其定位分布有３种类型：即腺腔缘型（Ａ型）、胞膜型（Ｍ型）和胞浆型（Ｃ型）。胃非肿瘤性粘膜组织仅为Ａ型。胃癌３型兼有,高分化癌Ａ型（１８．２％）和Ｍ型（６１．４％）均显著高于低分化癌（Ｐ值均＜０．００５）;低分化癌和粘液癌Ｃ型（各占７２．０％和５３．８％）均显著高于高分化癌（２０．５％）,Ｐ＜０．００５和０．０２５。ＤＡＫＯ－Ｍ１Ｃ型和Ｍ型淋巴结转移率（分别为９７．１％和６９．２％）均显著高于Ａ型（３３．３％）者,Ｐ＜０．００５和０．０５。结果提示,ＤＡＫＯ－Ｍ１是判断胃癌分化水平、恶性程度及预测淋巴结转移的一种有用标志物     

冻干胡蜂蜂蛹对果蝇寿命和繁殖性能的影响

本实验通过研究胡蜂蜂蛹冻干品对果蝇寿命和繁殖力的影响,证明胡蜂蜂蛹具有延缓衰老和增强繁殖性能的作用。采用乙醚麻醉法,收集8h（小时）内羽化的成虫,选择个体大小相近的雌雄果蝇,在不同浓度的培养基中饲养,每两天观察统计一次果蝇死亡数,直到全部死亡。结果表明,雌雄果蝇在5．0％实验组与对照组的平均寿命比较均具有极显著差异性（P〈0．01）,雌雄果蝇在0．2％和1．0％实验组与对照组比较平均寿命差异性显著（P〈0．05）,由此可见胡蜂蜂蛹可延长果蝇平均寿命;0．2％,1．0％组的果蝇子代数显著高于对照组果蝇子代数（P〈0．05）,5．0％组果蝇子代数极显著高于对照组果蝇子代数（P〈0．01）,由此可见冻干胡蜂蜂蛹可增强果蝇的繁殖能力。     

中国大陆部分地区Drosophila immigrans果蝇种群中mtDNA的遗传多态？…

选用１４种限制性内切酶分布在中国大陆部分地区的Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｉｍｍｉｇｒａｎｓ果蝇种群的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）进行了分析,在６个地理种群的４６例单雌系中仅检测到１１种限制性类型,表征种群内均一程度的Ｉ值平均为０．８３３,衡量种群间等同程度的Ｊ值平均为０．７９７,在整个种群中只有１６．８％（Ｇｓｔ）的变异是由种群间变异所引起的,说明分布在中国大陆部分地区的Ｄ     

E3泛素连接酶基因CG4911敲除和功能的初步研究

蛋白质的泛素化是一种重要的翻译后修饰过程,参与调控细胞周期、基因转录、信号转导、炎症反应和干细胞的维持等过程。泛素连接酶E3（ubiqutin ligase）是泛素化过程中关键酶。但许多E3基因在发育中的功能和作用机制还不明确。该研究以黑腹果蝇为模式动物,研究泛素连接酶家族一个重要基因CG4911的功能及分子机制。获得CG4911基因敲除果蝇,CG4911敲除果蝇纯合子可活。原位杂交结果显示,CG4911在胚胎发育早期表达。通过构建CG4911-pUAST-3HA重组子转染Hela细胞,确定CG4911定位于细胞质中,其表达并无修饰作用,并且过表达基因CG4911可导致背板发育缺陷。该研究首次获得了CG4911基因敲除果蝇和CG4911转基因果蝇,并初步探索了F-box基因CG4911的功能,为进一步阐明泛素连接酶的功能及分子机制提供了科学依据。     

中国不同地区和人群HDV cDNA的筛选、克隆及抗原编码区基因异质性的分析

为研究我国不同地区不同人群中ＨＤＶ毒株的感染分子特征,从我国河南、内蒙、北京、四川、广西、西藏、新疆、辽宁、上海等地的ＨＤＶ健康携带者、慢性丁肝病人与重症肝炎病人中筛选获得１０余份ＨＤＶ－ＲＮＡ阳性血清。经逆转录一多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）交叉扩增获得ＨＤＶ抗原编码区的ｃＤＮＡ片段并克隆到ＰＧＥＭ－３Ｚｆ（－）或ＰＧＥＭ－Ｔ载体上,经序列分析研究其基因结构特点,结果表明：中国的ＨＤＶ毒株基因型均为Ⅰ型,但至少存在ⅠＡ、ⅠＢ两个亚型,ＨＤＶ毒株在不同地区间存在异质性,其中河南－１、－２、－３株及新疆株与台湾株同源性较高（核苷酸与氨基酸同源性分别大于９２．１％与８６．９％）．当为ⅠＡ型;内蒙－１、四川、广西、西藏－１、辽宁、北京株与美国－１株同源性较高（核苷酸与氨酸同源性分别大于９４．３％与８８．８％）,当为ⅠＢ亚型;上海株与意大利株的核昔酸同源性最高,为９８．１％。研究证明我国新疆、内蒙、西藏等地区抗ＨＤ阳性率比其他省市高并不是由于存在其他基因型所致。     

林氏果蝇的生殖隔离研究

本文以果蝇科的林氏果蝇不同种群间交配后的生殖隔离机制进行了研究。这些种群包括源产于我国台湾省的ＴＡＷ３１４６．１,采自广东两地区的６个单雌系ＤＨＳ３１５,ＤＨＳ４０１,ＤＨＳ４１０,ＤＨＳ５０１,ＮＫＳ９２１２,ＮＫＳ９２３１,采自广东两地区的６个单雌系ＤＨＳ３１５,ＤＨＳ４０１,ＤＨＳ４１０,ＤＨＳ５０１,ＮＫＳ９２１２,ＮＫＳ９２３１,采自缅甸两个地区的４个单雌系ＭＭＹ３２６,ＭＭＹ３０７,Ｒ     

中国黑腹果蝇种组40种果蝇的核型多样性研究

通过传统的敲片、Giemsa染色的方法制片对中国黑腹果蝇种组(Drosophilamelanogasterspeciesgroup)8个种亚组40种果蝇的染色体进行了分析,共发现18种核型,即A、A′′、C、C′、C′′、C′′′、C′′′′、D、D′、D′′、E、E′、E′′、F、F′、G、H和I,其中A、A′′、C′′′、C′′′′、D′′和F′为新发现的核型。8个种亚组的基本核型分别是:嗜凤梨果蝇种亚组(D.ananassaesubgroup)的核型为F、F′、G和H型;牵牛花果蝇种亚组(D.eleganssubgroup)的核型为A和A′′型;细针果蝇种亚组(D.eugracilissubgroup)的核型为C型;嗜榕果蝇种亚组(D.ficusphilasubgroup)的核型为C′型;黑腹果蝇种亚组(D.melanogastersubgroup)的核型为C和C′型;山果蝇种亚组(D.montiumsubgroup)的核型为C、C′、C′′、D、D′、D′′、E、E′、E′′和I型;铃木氏果蝇种亚组(D.suzukiisubgroup)的核型为C′′′和C′′′′型;高桥氏果蝇种亚组(D.takahashiisubgroup)的核型为C、C′′′和C′′′′型。透明翅果蝇(D.lucipennis)雌性核型2n=8,雄性核型2n=7,雄性Ⅳ号染色体为染色体单体。此外还发现,吉川氏果蝇(D.kikkawai)、林氏果蝇(D.lini)、奥尼氏果蝇(D.ogumai)、拟嗜凤梨果蝇(D.pseudoananassae)和叔白颜果蝇(D.triauraria)5种果蝇有B染色体。本文确定了D.sp.likeelegans、D.sp.likenyinyii、D.sp.liketrapezifrons1、D.sp.liketakahashii、D.sp.liketrapezifrons2和D.sp.likeauraria等6个未描述种的核型和1个新记录种吉里果蝇(D.giriensis)的核型。本研究证明了在黑腹果蝇种组内、亚组内、种内和单雌系内的核型多样性,为果蝇遗传和进化提供了进一步的细胞学证据。     

轻稀土离子对钙调蛋白激活的磷酸二酯酶活力作用的影响

研究了轻稀土离子（Ｌｎ３＋）对钙调蛋白（ＣａＭ）调控的磷酸二酯酶（ＰＤＥ）活力的影响。结果表明,在无Ｃａ２＋的ＣａＭ（Ａｐｏ—ＣａＭ）体系中,由ＣａＭ调节的ＰＤＥ的活力随Ｌｎ３＋浓度的变化曲线是双相效应,即在高浓度时,Ｌｎ３＋具有抑制ＣａＭ调节ＰＤＥ活力的能力;低浓度的Ｌｎ３＋可以提高ＣａＭ调节ＰＤＥ活力的能力。在Ｃａ２＋４－ＣａＭ－ＰＤＥ体系中,高浓度的Ｌｎ３＋的加入能抑制ＣｈＭ调节ＰＤＥ活力的能力,其抑制程度因其离子不同而异。ＣａＭ的两类拮抗剂ＪｕＡ（非竞争性抑制剂）和ＴＦＰ（竞争性抑制剂）都能抑制ＣａＭ－Ｌｎ３＋－ＰＤＥ系统的活性。最后对Ｌｎ３＋和ＣａＭ相互作用的分子机制进行了初步的讨论。     

数量性状主基因＋多基因混合遗传分析中鉴定多基因存在的IECM算法

为了进行２对主基因＋多基因混合遗传分析中的主基因存在的鉴定和多基因存在的鉴定以及多世代的联合遗传分析的分布参数估计,在ＥＣＭ算法和剖分成分分布方差为主基因变异组分、多基因变异组分和误差变异组分三部分基础上,提出了计算简便的迭代ＥＣＭ算法,简称ＩＥＣＭ算法,以利用 Ｐ_１、Ｆ_１、Ｐ_２和 Ｆ_（２：３）家系世代鉴定多基因存在为例阐明该算法．它的 ＣＭ步包含迭代ＣＭ_１、迭代ＣＭ_２和迭代ＣＭ_３步,在固定其它参数的情况下分别求分布平均数、多基因方差组分和误差方差的极大似然估计．通过１１３８－２ｘ邳县天鹅蛋杂交组合的Ｐ_１、Ｐ_２、Ｆ_１和Ｆ_（２：３）家系群体研究了大豆豆秆黑潜蝇的遗传规律．结果表明,它受 １对主基因的控制并有多基因的修饰．     

果蝇幼虫的视觉系统

视觉对于动物的生存和行为来说是非常重要的。虽然果蝇幼虫的视觉神经系统在组织结构上比成虫简单,但是也具有一定的复杂性和多样性。在最近几年中,随着对果蝇幼虫视觉系统功能的研究取得重要进展,我们对于果蝇幼虫视觉系统的认识更加丰富了。果蝇幼虫视觉系统的结构中,最初级的光感受神经元包括三类,一类是BO/BN(Bolwig's organ/Bolwig's nerve),一类是表达感光分子CRY(cryptochrome)的神经元,另外一类是Ⅳ型DA(classⅣdendriticarborization)神经元;果蝇幼虫视觉系统的次级神经元主要是光节律相关的侧神经元(lateralneurons,LN),它表达Per(period)、Tim(timeless)及Pdf(pigment dispersion factor)等节律相关的蛋白分子;而第三级神经元包括更为下游的、表达果蝇促胸腺激素且直接调控幼虫光偏好的NP394神经元。这三级神经元构成了我们现在所了解的果蝇幼虫视觉神经系统的基本框架。     

5—羟色胺对肺动脉平滑肌细胞在缺氧条件下增殖的作用

本研究应用细胞培养、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,核酸分子杂交、免疫组织化学染色技术,探讨无氧（０％Ｏ２＋９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２）和／或低氧（２．５￣３％Ｏ２＋９２％Ｎ２＋５％ＣＯ２）对新生小牛肺动脉平滑肌细胞增殖和５－羟色胺转载体基因表达的影响。结果表明：无氧２４ｈ可刺激ＰＡＳＭ的ＤＮＡ合成,＾３Ｈ－ＴｄＲ的掺入增加（Ｐ〈０．０５）,加入５－羟色胺能非常显著地促进无氧ＰＡＳＭ增殖（Ｐ〈０．００１）,而对常     

高分化及低分化鼻咽癌细胞株中Epstein－Barr病毒潜伏感染膜蛋白（LMP1）基因的原位杂交与克隆及序列分析

应用染色体原位杂交、ＰＣＲ扩增、克隆及核苷酸序列分析等方法,分析了ＣＮＥ１和ＣＮＥ３细胞株中的潜伏感染膜蛋白（ＬＭＰ１）基因。ＣＮＥ１是来自我国东北的高分化鼻咽癌细胞株,ＣＮＥ３是来自广西的低分化鼻咽癌细胞株。染色体原位杂交结果表明,ＣＮＥ１细胞中ＬＭＰ１基因存在于细胞核内,整合在第一号染色体上,ＣＮＥ３中ＬＭＰ１基因则随机存在于细胞核内及多条染色体上。用ＰＣＲ方法分别从ＣＮＥ１及ＣＮＥ３中扩增得到了ＬＭＰ１基因片段（外显子３）,核苷酸序列分析证明,来自ＣＮＥ１的ＬＭＰ１与来自Ｂ９５－８细胞的ＬＭＰ１核苷酸序列同源性极高,达９９．５％,而ＣＮＥ３的ＬＭＰ１基因与Ｂ９５－８的ＬＭＰ１基因同源性为９３％。     

慢性肺心病肺动脉平滑肌细胞的胶原合成：体内及体外观察

肺动脉构形重建（ｓｔｒｕｃｔｒｕｒａｌｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ）是慢性肺心病的重要血管病变,但其发生机制至今未完全明了。病变以血管中膜平滑肌细胞肥大、增生和细胞外基质（包括纤维性与非纤维性成分）增多导致的血管壁增厚、血管腔狭窄为特征。本文用天狼星红－偏振光显微镜观察,真彩色全自动图像分析法,测量１０例慢性肺心病尸检肺小动脉中膜厚度及中膜内Ⅰ、Ⅲ两型胶原的含量和所占的百分比。用３Ｈ－胸腺嘧院核苷和３Ｈ－脯氨酸掺入法,观察缺氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）对培养的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣＳ）ＤＮＡ及胶原合成的影响。结果：（１）肺心病组４３７支肌型肺动脉平均中膜厚占血管直径的百分值高于对照组５±１．０８％;（２）肺心病组的Ⅰ型和Ⅲ型胶原面积分别占中膜面积的５４．６２％和５１９％,而对照组两型胶原占中膜面积小于２％。（３）ＨＥＣＣＭ组平滑肌细胞的３Ｈ－ＴｄＲ和３Ｈ－脯氨酸掺入量（ｃｐｍ值）,均明显高于常氧对照组（ＮＥＣＣＭ）,两组相比,有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。（４）细胞周期分析,ＨＥＣＣＭ组平滑肌细胞的Ｇ０／Ｇ１期细胞数百分值比ＮＥＣＣＭ组少２８％,Ｇ２＋Ｍ期细胞百分值则比ＮＥＣＣＭ组高３０％。可以认为,缺