结晶紫溶液鞭毛染色法 郭恒彬

细菌的鞭毛是细菌的一种特殊结构,鞭毛染色常用硷性复红乙醇饱和液或结晶紫乙醇饱和液染色。对后者反复试验未能使鞭毛着色,分析染料的溶解度及配制时各染液混合后出现大量结晶紫沉淀物,考虑染液配制过程中损耗大量媒染剂使鞭毛     

一种半永久玻片标本的制备方法

这里介绍一种用蔗糖液制备半永久玻片标本的方法。用这种蔗糖液制备半永久玻片标本研究染色体是很方便的和有实际意义的。这种用蔗糖液制备的半永久玻片标本,可以保存较长时间(一年或更长)。蔗糖液的制备方法取40克蔗糖(化学纯)溶解在60毫升水中,并加热至沸,直至溶液总体积减少了1/4时为止。为避免蔗糖液冷却后出现结晶,要向蔗糖液滴入2—3滴香柏油,细心搅匀,然后再加0.2克苯酚结晶,该糖液可保存一个月以上。花药制片方法 1.从经卡诺固定剂(95％酒精:冰醋酸3:1)固定的保存在70％酒精中的花序上取出一些花药,用醋酸地衣红色液(醋酸洋红、醋酸间     

兔在体膀胱储尿期和排尿期对胆碱能递质响应差异

目的:探讨胆碱能递质对在体膀胱的储尿和排尿影响的差异及特点.方法:提高或降低节后胆碱能兴奋性,分别检测充盈期膀胱内压和排液速度.结果:胆碱能兴奋和胆碱能抑制剂对充盈期膀胱内压影响均不甚明显;胆碱能兴奋使膀胱排液速度明显加快,胆碱能抑制可使排液速度明显减慢.结论:储尿期和排尿期的膀胱对胆碱能递质有不同的响应特性,后者的响应高于前者.     

乙烯利,GA3对采后番茄果实中乙烯,CaM含量的影响（简报）

用300ppm乙烯利或75ppm GA_3处理绿熟期采收的番茄果实,前者促进而后者减少乙烯释放速率;乙烯利处理的果实采后出现两个CaM高峰,而GA_3处理与对照都出现一个CaM高峰。     

亚洲小车蝗痘病毒增效因子的初步研究

OaEPV经2×SDS包涵体碱性裂解缓冲液裂解,离心,分别用上清液及沉淀与绿僵菌孢子混合感染黄胫小车蝗,上清液的增效活性比沉淀大2.5倍.用三种不同方法(2×SDS包涵体碱性裂解液法,0.02 mol/L NaOH裂解法,8 mol/L尿素裂解法)裂解OaEPV所得蛋白液与绿僵菌混用,生测结果表明,包涵体裂解液法制备所得蛋白增效活性最高,NaOH裂解法次之,尿素裂解法制备的蛋白几乎没有增效活性.将OaEPV用包涵体碱性裂解液裂解后,用葡聚糖G-200 凝胶柱层析进行分离,出现两个洗脱峰,这两个峰的洗脱液浓缩后进行生物测定,初步表明增效作用主要为第二个峰的蛋白片段.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,第二个峰的蛋白片段的分子量为40 kDa左右.     

用共聚焦扫描显微镜检术观察水稻胚囊发育

介绍了一种快速简便观察分析水稻胚囊发育程序的方法。水稻子房经固定和脱水,用冬青油整体透明及丁香油封片,在共聚焦扫描显微镜检术下,发育中的胚囊产生自发荧光、可分辨出胚囊内部结构。ＦＡＡ和４％戊二醛两种固定液效果不同,后者效果较佳。     

马兜铃水提液对斑马鱼胚胎的致畸作用和心脏毒性的研究

目的：探索马兜铃水提液对斑马鱼胚胎的致畸作用和心脏毒性.方法：分别用不同浓度的马兜铃水提液和马兜铃酸A（AA）处理斑马鱼胚胎,观察致畸作用和对心脏发育影响.结果：给药组的斑马鱼胚胎出现畸形和死亡;当水提液中AA含量为0.5 μg/mL时,胚胎心率明显减慢;AA含量为5μg/mL时,胚胎在24～48 hpf之间全部死亡;水提液的LC50为1.43 μg/mL.结论：与AA相比,马兜铃水提液对斑马鱼胚胎有着更强的致畸和心脏毒性,且毒性作用具有时间和浓度依赖性.     

重组含有Epstein-Barr病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)基因的杆状病毒在昆虫细胞中的表达

用杆状病毒表达系统重组病毒,在昆虫细胞中表达了完整的含有ＥＢＶ－ＬＭＰ１基因３个外显子开放读码框架的长２．３ｋｂ的ｃＤＮＡ片段。用重组病毒感染Ｓｆ９细胞,用免疫荧光染色,结果表明：４８小时表达重组蛋白,７２小时细胞较完整,免疫荧光染色强阳性,９６小时后细胞出现破碎。我们采集７２小时的组织培养上清和细胞破碎裂解液,分别采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＨＰＬＣ分子筛法,用免疫蛋白印迹法实验证明,表达的蛋白能被抗ＬＭＰ１的单克隆抗体所识别,测定表达蛋白的分子量为６０ｋＤ。经蛋白含量扫描图分析,采用Ｓｅｐｈａｄｅｘ－７５柱初步纯化表达的ＬＭＰ１蛋白,将后者进行裸鼠体内致瘤实验,未见肿瘤生长。     

长白山暗针叶林苔藓植物对三种针叶树种子萌发及幼苗生长的影响

研究了长白山暗针叶林两种主要地面苔藓植物——塔藓和拟垂枝藓对红松、红皮云杉和落叶松种子萌发及幼苗生长的影响.结果表明,在一定浓度下,塔藓浸提液抑制红松发芽,拟垂枝藓浸提液促进红松发芽;苔藓浸提液对红皮云杉和落叶松的发芽率没有显著影响,但不同程度地加快了种子日萌发高峰的出现.用苔藓植物体直接培养红皮云杉和落叶松种子,发现活植物体量大时对发芽率没有显著影响,但延迟了红皮云杉种子萌发高峰的出现,加速了落叶松种子萌发高峰的出现;杀青后的苔藓植物体则明显地抑制种子发芽.通过幼苗培养实验,发现苔藓植物浸提液抑制红皮云杉和红松幼苗生长,但促进了落叶松幼苗的生长;不同处理的苔藓植物体对幼苗生长的影响差异较大,活植物体量大时,两种苔藓均促进了红皮云杉和落叶松幼苗生长,而杀青后植物体则明显地抑制幼苗生长.     

龙脑液导致癌细胞凋亡的实验研究

目的:在细胞培养下检验加入龙脑液诱导癌细胞凋亡的作用.方法:采用人鼻咽癌、肺鳞癌、肺腺癌,乳腺癌细胞和正常细胞株,保持细胞正常培养基浓度下,用不同浓度稀释的龙脑液培养细胞,培养不同时间用四唑盐(MTT)比色试验观察龙脑液对癌细胞增殖的影响,采用细胞涂片染色观察细胞死亡性质,在流式细胞仪分析其凋亡率和性质.结果:二倍稀释浓度的龙脑液能快速导致癌细胞凋亡,四倍稀释浓度的龙脑液培养,均有细胞凋亡发生,凋亡程度从高到底依次为肺鳞癌、肺上皮癌和鼻咽癌,正常细胞293T则只有基础水平的凋亡发生;在撤出龙脑液回到正常培养环境下正常细胞能较快恢复到正常生长状态,而癌细胞则在一定时间内继续发生凋亡.在形态学上出现胞膜起泡或出芽,染色质凝聚分裂、细胞质减少,细胞碎片化等.早期细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻明显导致细胞凋亡,也通过Caspases3凋亡通路变化而引起癌细胞凋亡.结论:龙脑对癌细胞有促凋亡作用.     

国产和进口DMEM培养基培养CHO—C28工程细胞的质量评价

我们用10L转瓶培养能高效表达HBsAg的重组中国仓鼠卵巢细胞(CHO-C_(28)细胞株),在相同的培养条件下比较国产和进口DMEM培养基的质量。结果表明,两种DMEM培养的细胞之生长及分泌的HBsAg之滴度没有显著改变,国产DMEM培养的细胞收液的沉淀收率略高于进口DMEM的,前者的最后收率也不低于后者。两种DMEM培养的细胞收液经纯化后,HBsAg的各项指标都符合基因工程乙肝疫苗制造及检定规程的标准,从试验结果可以看出,用国产DMEM培养基替代进口DMEM培养基是完全有可能的。     

森林的生态经济价值

森林为人类提供的木材和林副产品等物质是它的直接经济价值,而森林在保护和改善环境、维持生态平衡方面的作用则称为它的生态经济价值.二者相比,后者远远超过前者,甚至后者的价值是无法直接用经济数值来衡量的.     

滇金丝猴的血细胞学检查

本文首次报道了滇金丝猴的血细胞学检查结果,内容包括骨髓细胞分类计数和外周血象。前者检查了一例成年 雌性猴,骨髓取自肋骨,涂片用Wright氏染液染色和用Giemsa氏染液复染,两次取样检查,每次计数500个骨髓有核细胞;后者检查了一例成年雌性猴和一例幼年雌性猴,每例检查二次取其平均值。结果如表1、2、3。 检查结果中,值得注意的是:1.骨髓细胞中退化细胞较多,出现率达16.4％;2.骨髓细胞中出现少量环形核粒细胞。据张耀平等(1986),树鼩骨髓细胞中出现少量环形核粒细胞,这在啮齿动物大、小鼠中是常见的,但在灵     

非洲爪蟾孵化酶分子对卵黄膜作用方式的研究

非洲爪蟾的孵化液对卵黄膜和二甲基酷蛋白具有降妥活性。用非洲爪蟾孵化酶的特异性抗ＧＳＴ－ＵＶ．２抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交的结果表明,孵化液中出现一种分子量为６０ｋＤ的大组分,有时也会出现一种分子量为４０ｋＤ的小组分。     

纳豆激酶粗提液的体外溶栓抑菌实验

目的探讨纳豆激酶粗提液的体外溶栓、抑菌作用.方法以大豆为培养基,米曲霉为菌种,发酵制得成熟纳豆,用不同饱和度(NH4)2SO4对粗提液进行盐析,所得沉淀溶于生理盐水中,用纤维蛋白平板法测定其活性,确定提取纳豆激酶的分级沉淀范围.用体外溶栓法测纳豆激酶粗提液的体外溶栓作用.用平板打孔法及纸片扩散法测不同浓度纳豆抑菌物质的体外抑大肠杆菌作用.结果纳豆激酶的(NH4)2SO4分级沉淀范围选择在60%.纳豆激酶粗提液对血块的溶解作用较同样活力大小的尿激酶强.纳豆抑菌物质粗提液对大肠杆菌都具有一定的体外抑制作用,当浓度大于50%,抑菌圈直径随着浓度的增高而增大.结论纳豆激酶粗提液具有较好的体外溶栓作用,并对大肠杆菌具有一定的抑制作用.     

玉米浆对玉米粉和木薯淀粉发酵甘油的影响及二者的比较

以玉米粉和木薯淀粉为原料 ,比较了二者的液化和糖化 ,结果表明 :在相同条件下 ,木薯淀粉液化时间较短 ,玉米粉液化时间较长 ,但二者的液化液均较易糖化。然后分别以玉米粉和木薯淀粉糖化液为原料 ,用耐高渗酵母发酵生产甘油 ,研究了玉米浆对二者甘油发酵的影响并对二者进行了比较 ,结果表明 :当玉米粉和木薯淀粉糖化液还原糖含量分别为 2 5 % ,尿素为 0 .2 % ,pH为 4 .5时 ,用玉米粉糖化液发酵甘油时可不添加玉米浆 ,甘油产量最高可达 2 % ,而用木薯淀粉糖化液发酵甘油时 ,适宜的玉米浆为 0 .15 % ,甘油产量最高可达 4 .9%。对二者的比较结果表明 :用玉米粉糖化液为发酵原料时 ,发酵时间较短 ,残糖降低较快 ,甘油产量较低 ,在 36h之后 ,甘油开始反耗。而用木薯淀粉糖化液发酵时 ,发酵时间较长 ,残糖降低较慢 ,甘油产量较高 ,在 72h之后 ,甘油开始反耗。     

荨麻青霉菌原生质体紫外线辐照对产量的影响

灰黄霉素产生菌——荨麻青霉菌的原生质体用20—30mg/mI蜗牛酶在水浴30℃作用,7小时左右制成.用P溶液制成原生质体悬液,然后用紫外线对原生质体进行辐照,照后的原生质体用P溶液作系列稀释,涂布于再生培养基上,置28℃培养4—5天,出现再生菌落。进行摇瓶初筛与复筛三次鉴定,获得新菌株的灰黄霉素发酵单位比对照组平均提高20～30％。     

小经验介绍——微波在蛋白质电泳染色和脱色中的应用

经过实验摸索和实践,我们发现一种利用微波处理在10 min内可使聚丙烯酰胺凝胶染色及脱色完成的方法.a 将电泳后的凝胶(厚度0 75 mm)取出,置于培养皿中用蒸馏水冲去残留缓冲液.b 加入染色液将凝胶完全浸泡其中,放入微波炉内高火档照射20 s,停留1 min,再照射10 s. c 取出染色液(回收还可再用2次),用蒸馏水冲去凝胶上残留染色液.d 加入脱色液,高火档照射20 s,取出脱色液,然后加入新鲜脱色液再照射20 s,重复 5～6次,直至背景清晰透明.     

根霉超氧化物歧化酶同工酶类型的鉴别

利用ＫＣＮ、Ｈ２Ｏ２睡ＳＤＳ的选择性反应引起的ＳＯＤ同工酶谱带变化即可鉴别精 抽提液中的ＳＯＤ同工酶类型,用这种方法对五株不同种根霉的鉴别实验表明,它们均不同程度地含有Ｃｕ,Ｚｎ型和Ｍｎ型两各ＳＯＤ,前者约点８０％左右,后者只占２０％左右,用邻苯三酚自氧化法对样品中ＳＯＤ活性测定结果与在同工酶谱上的鉴别结果基本一致。     

3种渗透剂对转基因烟草根系枯草芽孢杆菌纤溶酶(BSFE)分泌的调节

用0.05%～8.00%的甘露醇、山梨醇和聚乙二醇6000等3种渗透调节剂可提高转枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillus subtilis fibrinolytic enzyme, BSFE)转基因烟草(Nicotiana tabacum L.)根系BSFE的分泌表达水平,其水培液BSFE活性在15 d内基本呈抛物线型变化趋势.经3种渗透剂处理后转BSFE基因烟草水培液的BSFE活性峰值明显高于对照,且出现时间比对照相对延迟1-2d.甘露醇、山梨醇和聚乙二醇6000可作为该转基因烟草根系BSFE分泌表达的有效化学调节剂.