利用正交方法进行藻类细胞生长抑制试验制定稳定塘入水标准的研究

藻类细胞生长抑制试验在单项毒物条件下进行时,常未考虑毒物对藻类细胞的联合作用（拮抗效应、叠加效应和协同效应）。本研究采用单项毒物试验和多种毒物同时存在时的正交试验（Ｌ１６＜４￣５＞）,评价了进入武汉市墨水湖中试稳定塘的主要污染物（硫化物、挥发酚、石油类）对羊角月牙藻的９６ｈ的毒性效应。结果表明,正交试验的ＥＣ５０值都比单项毒物试验低得多,其９６ｈＥＣ５０降低２０－８０％,受试的几种主要污染物对藻类有协同毒性效应或叠加毒性效应。采用正交试验方法进行藻类细胞生长抑制试验以制定稳定塘的入水标准,更接近真实。     

五氯酚对大型溞的急性亚慢性和慢性毒性

本文采用换水式试验研究了五氨酚溞（ＰＣＰ）对大型（Ｄａｐｈｎｉａｍａｇｎａ）的急性、亚慢性和慢性毒性,稀释水硬度为８０─１００ｍｇ／Ｌ（以ＣａＣＯ３计）。急性和慢性试验均使用小于一日龄的幼溞,试验温度为２５─２６℃,慢性试验进行了２０ｄ。用小于一日龄幼溞进行的亚慢性试验暴露了１９ｄ,而用四日龄幼溞的亚慢性试验则进行了１６ｄ,水温均保持在１９─２０℃。ＰＣＰ对大型溞的２４ｈ和４８ｈＥＣ５０分别是４８９和２４５μｇ／Ｌ。依据第１胎所产幼溞数求得的最低可观察效应浓度（ＬＯＥＣ）和无可观察效应浓度（ＮＯＥＣ）,在慢性试验中分别是１６０和８０μｇ／Ｌ,在１９ｄ亚慢性试验中分别为２００和１００μｇ／Ｌ,二者相近。试验结果表明,第１胎所产幼溞数是敏感的指标。     

Cu对中国林蛙蝌蚪的急性毒性

试验测定了不同温度条件下Ｃｕ２＋对中国林蛙蝌蚪的急性毒性．结果表明,在水温为９～１３℃、１８℃和２４℃条件下,Ｃｕ２＋对１０ｄ龄中国林蛙蝌蚪９６ｈ的ＬＣ５０分别为５．０１、３．８０和２．９９ｍｇ·Ｌ－１,致死阈浓度分别为４．０、２．５和１．６ｍｇ·Ｌ－１,而在９６ｈ内的无可观察效应浓度分别为２．５、１．６和１．０ｍｇ·Ｌ－１．１８℃条件下Ｃｕ２＋对２０ｄ龄中国林蛙蝌蚪的９６ｈＬＣ５０为２．１７ｍｇ·Ｌ－１．     

稀有鮈鲫──一种新的鱼类毒性试验材料

本文研究了稀有鲫（Ｇｏｂｉｏｃｙｐｒｉｓｒａｒｕｓ）作为毒性试验材料的可行性。采用换水式试验,在硬度为２００ｍｇ／Ｌ（以ＣａＣＯ３计）、ｐＨ７．８±０．２、温度２４－２５℃条件下研究了铬、铜、锌和五氯酚（ＰＣＰ）对稀有鲫的急性毒性。重铬酸钾对２日龄稀有鲫的２４ｈ和９６ｈ和ＬＣ５０控制范围分别２６３．６－３３４．７和１１５３－１７８．５ｍｇ／Ｌ（ｎ＝８）。铬、铜、锌和五氯酚对２日龄稀有鲫的急性毒性值（９６ｈＬＣ５０）范围,从铜的５２．２μｇ／Ｌ到铬的５２０００μｇ／Ｌ,毒性大小的顺序是铜＞五氯酚＞锌＞铬。研究结果表明,稀有鲫有可能发展成为一种较为理想的毒性试验材料。     

海水养虾池浮游动物对浮游植物牧食力的研究

利用常规显微镜直接计数法评估了海水养虾池浮游动物对浮游藻类的牧食力。测得虾池浮游动物对水柱浮游植物的总滤水率为８０．３８ｍｌ／（Ｌ·ｈ）,每个浮游动物的滤水率平均为１１．１３μｌ／（ｉｎｄ·ｈ）,总牧食率为１０．５０μｇ／（Ｌ·ｈ）,即１．２５ｎｇＣ／（ｉｎｄ·ｈ）。浮游动物对水柱原位主要浮游藻类的选食,以隐藻和舟形藻为最多,其次是扁藻和小环藻,６ｈ内对上述４种藻类的选食率分别为９２．６８％、７２．４６％、３６．２２％和３２．５６％,其相应的选择指数依次为０．７３３１、０．６７１７、０．４３４５和０．３９１３。对水柱总体而言,６ｈ内有３５．７２％的主要浮游藻类被选食了。     

CD自杀基因系统对胶质瘤细胞作用的实验研究

将含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（ＥＣ－ＣＤ）基因的重组逆转录病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞Ｃ６,获得稳定表达ＣＤ的克隆细胞Ｃ６／ＣＤ。ＣＤ可以将无毒性的原药５－氟胞嘧啶（５－ＦＣ）转化成高度细胞毒性物质５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）。生长抑制试验表明Ｃ６／ＣＤ细胞对５－ＦＣ高度敏感。ＩＣ５０为３μｍｏｌ／Ｌ,５－ＦＣ对Ｃ６细胞基本无毒性,ＩＣ５０近６０００μｍｏｌ／Ｌ;而Ｃ６／ＣＤ和Ｃ６细胞均低浓度５０ＦＵ敏感。     

单宁酶的固定化及其在酯型儿茶素水解反应中的应用

采用自制的壳聚糖为载体对单宁酶（ＴＡ）固定化,ＴＡ与壳聚糖配比１：２．５,３０℃固定２ｈ,活力回收达２３．６％～３３．１％;偶联效率为８４．９％～８８．０％。固定化单宁酶（ＩＴＡ）的表观Ｋｍ值（以没食子酸丙酯为底物）为２２．２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ,ＴＡ的Ｋｍ值（以没食子酸丙酯为底物）为１０×１０－６ｍｏｌ／Ｌ,ＴＡ和ＩＴＡ的最适反应温度分别为４０℃和５０℃;６０℃处理１５ｍｉｎ,残存活性分别为１３．６％和６０．３％。ＴＡ和ＩＴＡ的最适ｐＨ值分别为５．８和６．４;ＴＡ在ｐＨ４．８～７．８活力稳定,而ＩＴＡ活力稳定范围在ｐＨ４．８～６．８．ＩＴＡ作用于ＥＧＣＧ的半衰期为７８．７ｈ,ＥＧＣＧ水解率达９０．３％。对茶多酚提取物进行水解,其所含的酯型儿茶素ＥＧＣＧ和ＥＣＧ水解率分别为９６．４％和９６．８％,非酯型儿茶素ＥＧＣ和ＥＣ的含量显著增加。     

人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用＾３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣ ＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＧＤＦ）、ＰＧＤＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或     

人脑及红细胞膜乙酰胆碱酯酶的芳基酰胺酶活性

采用联合亲和层析法从人小脑及红细胞膜中纯化了ＡＣｈＥ,纯化的人脑及红细胞ＡＣｈＥ在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上呈一主带,分子量约为６６０００。人脑ＡＣｈＥ制备酯酶与酰胺酶比活性分别为１２９９与１４３Ｕ／ｍｇ,人红细胞ＡＣｈＥ制备分别为４５８４与７４７Ｕ／ｍｇ。人脑及红细胞ＡＣｈＥ制备的酯酶与酰胺酶活性最适ｐＨ较接近,在ｐＨ７．５－８．０之间,酯酶活性底物ＡＴＣｈ对其芳基酰胺酶活性有抑制作用。ＩＣ_（５０）分别为１０．２×１０~（－３）及３×１０~（－３）ｍｏｌ／Ｌ。梭曼对其酯酶及酰胺酶活性均有明显抑制作用,说明二者均需活性中心丝氨酸参与。     

人脑和人血清胆碱酯酶三维结构的计算机模拟研究

本文以同源的电鳐胆碱酯酶（Ｔ．ＡＣｈＥ）的三维结构为模板,模拟预测了人脑和血清胆碱酯酶（Ｈ。ＡＣｈＥ和Ｈ．ＢｕＣｈＥ）的三维结构和活力中心的组成。指Ｔ．ＡＣｈＥ,Ｈ．ＡＣｈＥ和Ｈ．ＢｕＣｈＥ宁间结构差异,并讨论了ＡＣｈ和Ｈ。ＡＣｈＥ的对接（ｄｏｃｋｉｎｇ）。Ｈ。ＡＣｈＥ和Ｈ．ＢｕＣｈＥ三维结构的确定将为进一步深入研究它的中毒机理和合理药物设计提供靶子。     

草鱼呼肠孤病毒在CIK细胞中复制及形态发生的研究

以草鱼呼肠孤病毒（ＧＣＲＶ）感染的草鱼肾细胞系（ＣＩＫ）为模型,进行了草鱼呼肠孤病毒在细胞内的形态发生的研究。当病毒以感染复数为５￣１０ＰＦＵ／ＣＥＬＬ感染ＣＩＫ细胞时,在病毒感染细胞４ｈ以内的切片中,可观察到脱去部分外层衣壳的不完整病毒颗粒。感染细胞８ｈ,可观察到浆胞内病毒发生基质,其内含有大量的直径约５０ｎｍ的亚病毒颗粒,无外层蛋白结构。感染１２￣１６ｈ后,这些亚病毒颗粒装配上外层蛋白结构,形     

隔区亚细胞群乙酸胆碱酯酶阳性神经元的分布

采用组织化学方法研究了１８只大鼠隔区６个亚细胞群乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）阳性神经元的分布。结果表明,隔核存在着大量的ＡｃｈＥ阳性神经元,并发现主要集中在斜角带核垂直部（ＶＤＢ）和斜角带核水平部（ＨＤＢ）、还观察到在ＶＤＢ腹侧部和ＨＤＢ前部的ＡＣｈＥ阳性神经元呈环形排列。     

G蛋白在亮啡肽诱导心肌细胞内钙释放中的作用

本实验采用分离的ＳＤ大鼠心室肌细胞,以Ｆｕｒａ－２ＡＭ荧光指示剂负载,检测心肌细胞内游离钙浓度（Ｃａ＾２＋）变化。探讨亮啡肽（ＬＥＫ）对（Ｃａ＾２＋）的作用及其机制。实验结果：ＬＥＫ（６０μｍｏｌ／Ｌ）能升高（Ｃａ＾２＋）移去细胞外液钙此效应仍能出现,用ｃａｆｆｅｉｎｅ （５ｍｍｏｌ／Ｌ）耗竭细胞内钙池的钙,该效应消失,纳洛酮（１００μｍｏｌ／Ｌ）,百日咳毒素（２００ｎｇ／Ｌ）处理８－１０ｈ及ｐｒ     

表皮生长因子对离体大鼠肺动脉及肺动脉平滑肌细胞作用的研究

本研究着重探讨表皮生长因子（ＥＧＦ）对大鼠肺动脉的收缩作用及对肺动脉平滑肌细胞分裂增殖的影响。浓度为１×１０－９－１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ的ＥＧＦ可引起大鼠肺动脉剂量依赖性收缩（ｒ＝０．９６８,Ｐ＜０,００１）,其Ｅｍａｘ为１００．６ｍｇ,ＥＣ５０为１１．９６ｎｍｏｌ／Ｌ。在同时存在０．５％胎牛血清（ＦＣＳ）时,ＥＧＦ能促进平滑肌细胞的３Ｈ－ＴｄＲ参入率,该作用与剂量呈正相关（ｒ＝０．８２３,Ｐ＜０．０５）,其ＥＣ５０为６．５×１Ｏ－１２ｍｏｌ／Ｌ。１×１０－９ｍｏｌ／Ｌ的ＥＧＦ＋０．５％ＦＣＳ能产生与１０％ＦＣＳ相当的促细胞分裂增殖能力（在培养的第１,３,５,７天,二者促分裂增殖能力相差不明显,Ｐ均＞０．０５,第９天时,前者大于后者,Ｐ＜０．０５）。１×１０－９ｍｏｌ／ＬＥＧＦ单独存在时对平滑肌细胞未显示出明显的致分裂活性。上述作用提示ＥＣＦ在某些肺血管病变如缺氧性肺动脉高压中可能有一定意义。     

温州蜜柑叶片气体交换和叶绿素荧光对低温的响应

研究了低温对温州蜜柑叶片气体交换和叶绿素荧光的影响,结果表明：（１）８℃低温处理１１８ｈ对气体交换和叶绿纱荧光影响不大。（２）２℃低温处理１５ｈ后,净光合速率（Ｐｎ）、气孔导度（Ｇｓ）,羧化效应（ＣＥ）下降,胞间ＣＯ２浓度（Ｃｉ）升高,表观量子效率（ＡＱＹ）和叶绿素荧光参数ＦＱ及Ｖｖ／Ｆｍ没有显著变化。（３）室外自然低温处理作７ｄ,Ｐｎ、Ｇｓ、ＣＥ饱和ＣＯ２光合速率、ＡＱＹ及Ｆｖ／Ｆｍ显著下降,Ｃ     

海水养虾池浮游运行对浮游植物牧食力的研究

利用常规显微镜直接计数法评估了海水养虾池浮游动物对浮游藻类的牧食力,测得虾池浮游运行对水柱浮游植物的总滤水率为８０．３８ｍｌ／（Ｌ·ｈ）,每个浮游动物的滤水率平均为１１．１３μｌ（ｉｎｄ·ｈ）,总牧食率为１０．５０μｇ／（Ｌ·ｈ）,即１．２５ｎｇ℃／（ｉｎｄ·ｈ）、浮游动物对水柱原位主要浮游藻类的选食,、以隐菏和舟形藻为最多,其次是扁藻和小环藻,６ｈ内对上述４种藻类的选食率为９２．６８％、７２．４     

血管活性肠肽对兔支气管上皮细胞抗臭氧损伤的保护作用

用支气管刷洗法收集新西兰兔支气管上皮细胞（ＢＥＣ）,以臭氧（Ｏ３）攻击培养的ＢＥＣ,建立细胞损伤模型。测定ＢＥＣ的３Ｈ释放率计算Ｏ３的细胞毒指数（ＣＩ）、测定细胞内丙二醛（ＭＤＡ）的含量反映细胞氧化性损伤的程度,测定细胞内过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性及还原型和氧化型谷胱甘肽（ＧＳＨ和ＧＳＳＧ）的含量反映细胞抗氧化能力。观察血管活性肠肽（ＶＩＰ）预处理对ＢＥＣ的细胞保护作用并初步探讨其保护机制。观察到：ＢＥＣ的３Ｈ释放率与Ｏ３暴露时间成正比;Ｏ３暴露２ｈ使ＭＤＡ含量和ＧＳＳＧ含量明显增加,ＧＳＨ减少;ＶＩＰ预处理呈剂量依赖性降低Ｏ３暴露的ＣＩ值、降低ＭＤＡ和ＧＳＳＧ含量、增加ＧＳＨ及ＧＳＨ／ＧＳＳＧ比值、增加ＣＡＴ活性,显示出细胞保护效应;ＶＩＰ的保护效应可被放线菌素Ｄ（Ａ－Ｄ）或蛋白激酶Ｃ阻断剂Ｈ７部分取消。结果表明：Ｏ３暴露会导致ＢＥＣ损伤,ＶＩＰ可通过增强ＢＥＣ的抗氧化能力而保护ＢＥＣ,ＶＩＰ的信号在细胞内的转导途径与基因转录及依赖ＰＫＣ的酶蛋白磷酸化有关。     

胸苷激酶基因治疗胃癌的体外实验

将单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）导入恶性肿瘤细胞,随后可应用药物丙氧鸟苷（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ, ＧＣＶ）选择性杀死肿瘤细胞．构建了含胸苷激酶与潮霉素磷酸转移酶（ｈｐｈ）融和基因（ＨｙｔＫ）的真核表达载体ＬＸｐｓｐ－ＨｙｔＫ．以脂质体（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）为介导,将这种质粒与仅含潮霉素Ｂ基因的质粒ＬＸＳＨ 分别转染胃癌细胞系ＢＧＣ－８２３,用６０ Ｕ／ｍ ｌ潮霉素Ｂ进行筛选,得到了可稳定传代的阳性克隆,分别命名为ＢＧＣ－ＨｙｔＫ 和ＢＧＣ－Ｈｙ．三种细胞的生长曲线无明显差别．用不同浓度的ＧＣＶ 分别作用于ＢＧＣ－ＨｙｔＫ, ＢＧＣ－Ｈｙ 及ＢＧＣ－８２３,０．０２～２００ μｇ／ｍ ｌ 的ＧＣＶ 对ＢＧＣ－ＨｙｔＫ 细胞有明显的杀伤作用（ＩＣ５０＝ ０．０２ μｇ／ｍ ｌ）,而对另外两种细胞几乎无毒性作用（ＩＣ５０＞ ２００μｇ／ｍ ｌ）．２０ μｇ／ｍ ｌＧＣＶ 作用９６ ｈ 后,仅存在２０％ 的ＢＧＣ－ＨｙｔＫ 就可使周围的大部分ＨＳＶ－ｔｋ－ 的肿瘤细胞死亡,说明存在较显著的“旁观者效应”     

人骨髓基质细胞的长期培养及其对病毒的敏感性

为了长期培养骨髓基质细胞和研究其对病毒的敏感性,我们采用静置贴壁培养法,体外长期培养了胎儿、儿童和成人骨髓基质细胞,并将传至５代以上的肌样骨髓基质细胞采用微量细胞病变（ＣＰＥ）法,开展了对５种病毒的敏感性试验。结果表明,人骨髓基质肌样细胞对滤泡性口腔炎病毒,脊髓灰质炎病毒、Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒均敏感,能产生明显的ＣＰＥ,其效价（ＴＣＩＤ５０）可达１０＾－３～１０＾－４,其中胎儿骨髓基质肌样细胞对     

人胸腺上皮细胞培养上清液促进鼠胸腺细胞和细胞株增殖的研究(英文)

胸腺是细胞分化发育的场所,源于骨髓的前Ｔ细胞。在以胸腺上皮细胞为主体的基质细胞作用下,增殖、分化、成为成熟Ｔ细胞,迁移至外周。胸腺基质细胞通过细胞与细胞之间的直接接触和分泌细胞因子影响细胞分化发育的各个阶段。本文探讨了人胸腺上皮细胞培养上清液（ＴＥＣＳＮ）对鼠胸腺细胞、８５、Ｂｅ１３、ＨＤＭａｒ、Ｍｏｌｔ４、Ｒｅｈ以及Ｊｕｒｋａｔ细胞株增殖的影响。取人胸腺组织,用０．１５％的胰酶消化组织块后,将其接种到培养瓶中进行培养,收集上清液。将ＴＥＣＳＮ加到鼠胸腺细胞悬液中,２ｈ后加３ＨＴｄＲ,观察鼠胸腺细胞自发性掺入３ＨＴｄＲ有无改变。同时将ＴＥＣＳＮ＋ＣｏｎＡ加入鼠胸腺细胞悬液中培养４８ｈ,收获细胞前１８ｈ加入３ＨＴｄＲ,测定ＣＰＭ值。此外,ＴＥＣＳＮ加入８５细胞株及其它细胞株悬液中,观察ＴＥＣＳＮ对这些细胞株增殖的影响。上述各实验均设有对照组（Ｔａｂ．１）。结果表明：ＴＥＣＳＮ本身能增强鼠胸腺细胞３ＨＴｄＲ自发掺入,其３ＨＴｄＲＣＰＭ值明显大于对照组（Ｆｉｇ．１）。ＴＥＣＳＮ单独使用不影响胸腺细胞增殖,ＣｏｎＡ单独作用能促进鼠胸腺细胞增殖反应,而ＴＥＣＳＮ与ＣｏｎＡ共同使用,胸腺