光学显微镜的新技术

与光学显微观察有关的技术拟可分为两方面:制样技术和光学显微镜技术.自50年代以来前者一直在不断改进.出现特异组织成份染色、荧光技术、免疫酶标、免疫金银法等新技术,使观察的特异性不断提高.相比之下光学显微镜(以下简称光镜)的基本构造和观察清晰度没有明显改善.80年代以来,随着科学技术的飞速发展和计算机与图象处理技术的引入,传统的光镜已经与庞杂的辅助装置结合起来形成了若干新型的光学显微系统.特别是光源与显示部份的改进大大提高了成象清晰度,甚至可对小于光镜理论分辨力的亚细胞结构进行动态观察,从而弥补了光镜分辨力低与电镜只能观察静态标本的不足.这为进一步从亚细胞和分子水平将结构与功能结合起来研究提供了新的技术手段.本文仅就有关进展做一扼要介绍.     

淀粉质体遗传研究的现状与展望

淀粉质体来源于前质体,与叶绿体同源,具有其特有的遗传特性,是核外遗传的重要组成部分。本文综述了淀粉质体遗传研究方面取得的成果和进展。淀粉质体DNA发现于20世纪70年代,其含量随着组织发育的不同阶段有所变化,最后这些DNA作为贮藏的形式积累在质体中。淀粉质体基因组与叶绿体基因组同源性很高,但是不表达与光合作用有关的基因。现有的实验证据表明,淀粉质体基因组的表达调控发生在转录水平,与DNA甲基化有关。淀粉质体的发育受核基因组和质体基因组双重调控。组织发育到一定时期,淀粉质体中出现单核糖体和多聚核糖体;淀粉质体具有蛋白质合成体系。淀粉质体DNA及淀粉质体遗传的研究具有重要的理论和实际意义,对淀粉质体遗传进行深入的研究,将丰富核外遗传知识和理论。     

光学显微镜下细菌芽孢染色方法的探讨

由于细菌芽孢对水溶性染料具有较强的抗性,造成芽孢的染色较困难。加热、酸水解、机械摩擦等措施均可以提高芽孢的染色性能,对这些处理方法的优缺点进行分析,并对常规使用的Moeller法进行了改进,提出了一种更适合于微生物学实验课堂教学的细菌芽孢鉴别染色方法。     

用显微分光光度术测定不同发育时期蚕豆子叶淀粉质体DNA含量

叙述了用显微光度术在亚细胞水平上测量蚕豆子叶细胞中淀粉质体Ｆｅｕｌｇｅｎ－ＤＮＡ含量,显示了在不同发育时期蚕豆子叶细胞中的淀粉体ＤＮＡ含量的动态变化。随着发育时期的递增,淀粉体ＤＮＡ拷贝数不断地增长。生长中期的淀粉体ＤＮＡ含量平均数为２．１４（任意单位）,到了成熟期淀粉体ＤＮＡ平均含量增长到１０．１２（任意单位）。在成熟期,子叶细胞中的淀粉体ＤＮＡ含量比生长中期增长了９．６倍。通过生物统计分析,在     

应用深度学习分割光学显微镜下的细胞图像

目的 为了在细胞培养过程中便捷地分析细胞的数目和形态.方法 本文将深度学习应用到细胞识别中,实现了一种可以通过普通光学显微镜拍照,并直接在培养皿中进行细胞识别计数的方法.结果 通过构建U-Net网络结构,并对贴壁细胞和悬浮细胞图像进行标记训练,来实现贴壁细胞和悬浮细胞的分割计数.同时,用该算法绘制细胞生长曲线以及计算抑...     

一种光学显微镜下观察原生质体的染色方法

Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌａｃｔｏｆｅｒｍｅｎｔｕｍ菌液经溶菌酶处理后分别与４种微生物染色液混合,在光学显微镜下比较观察原生质体形态的效果。结果表明;染色样品中的原生质体比未经染色的形态清晰易观察,而且显微照相效果好;其中使用草酸铵结晶紫和复红染色液的效果更佳。该方法程序简单、操作方便、效果明显,还适用于悬滴法观察菌体形态和细菌运动方式。     

激光共聚焦显微镜与光学显微镜之比较

激光扫描共聚焦显微镜在活细胞的动态检测、光学切片和三维结构重建等方面较光学显微镜有质的飞跃。本文对激光扫描共聚焦显微镜和光学显微镜进行了比较和讨论,并简单介绍多光子激光扫描显微镜。     

近场扫描光学显微镜及其在生物学领域的应用

评述了近场扫描光学显微镜（near-field scanning optical microscopy,NSOM）的仪器构造、工作原理及其在生物学领域的应用成果。对NSOM目前存在的主要问题进行了讨论,并展望了NSOM在该领域的发展潜力。     

原子力显微镜研究不同温度下质粒DNA结构变化

采用原子力显微镜（ＡＦＭ）在无水乙醇中成象了ｐＢＲ３２２质粒ＤＮＡ。在不同温度范围加热云母表面的ＤＮＡ溶液,并在相应温度下干燥使ＤＮＡ充分展开地固定在云母基底上。ＡＦＭ观察结果表明：在３０～４０℃,质粒ＤＮＡ主要是超螺旋和环状分子;在４０～５０℃,环状分子开环形成线形分子;　在７０～８０℃,这些线形分子全部变性,解链形成无规线团。我们通过测定ｐＢＲ３２２质粒ＤＮＡ的熔融曲线,发现了两个突变点,对应于ＡＦＭ所观察到的质粒ＤＮＡ在加热过程中由环状变成线形、双螺旋解开成单链的两个结构变化过程。这是首次通过ＡＦＭ直接观察到质粒ＤＮＡ在不同温度下的结构变化。     

光学显微镜使用中小黑斑的妙用

光学显微镜使用中小黑斑的妙用王永良（宁夏隆德县沙塘中学,７５６３００）用光学显微镜观察切片或装片上的标本,能直接找到,便很省事了,但由于物镜镜头的通光部分很小,观察者将片子放在载物台上时眼晴在侧面注视,常常不能准确的将标本放在通光孔的正中心或适宜观察...     

DNA原子力显微镜成象方法研究

采用Ｓｅｐｈａｄｅｘ色谱柱分离,保温稀释的ＤＮＡ溶液,不仅可除去ＤＮＡ链上吸附的盐,而且可使盘绕一起的ＤＮＡ链部分展开;在此基础上,通过采用苯二甲基苄基溴化胺（ＢＡＢ）－甲酰胺微量展层技术,可使钠克级ＤＮＡ完全展开的云母基底上,通过无菌水和无水醇洗涤样品表面,不仅可除去杂质颗粒,而且可使展开的ＤＮＡ链有效地固定的基底上,实验结果表明,通过以上较为系统的样品制备方法,可获得满足原了力显微镜（ＡＦＭ）     

随体DNA不是指随体中的DNA

随体(satellite)是细胞中的一个结构成分,指某些染色体远端前的一小段,是一小段染色体,一般也是一个核仁组织区.随体DNA(Satellite DNA),则是指在DNA密度梯度离心时,处于卫星带中的DNA.真核生物的核内DNA,在CsCl或Cs_2SO_4中进行密度梯度离心时,除了形成一个主带(main band),即包含大部分DNA的分带外,往往在主带较轻或较重的一边还有一个或几个副带,称卫星带(satellite band).一般地,随体DNA(处于卫星带中的DNA)是高度重复DNA. 随体既然是一小段染色体,其中当然就有DNA.     

DNA光学逻辑门研究进展

DNA逻辑门是一种重要的新型计算单元,为下一代计算机的研发提供了新的思路。光学检测器拥有快速简便的优势,因此在DNA逻辑门的研究中显得十分重要。本文综述了近些年来DNA光学逻辑门的研究进展,对荧光、比色和表面增强拉曼光谱为基础的逻辑门的研究进行了阐述和评价,并对DNA光学逻辑门的发展前景进行了展望。     

原子力显微镜在双微体形态学研究中的应用

原子力显微术(atomic force microscopy,AFM)是一种新型的纳米显微技术,由于其拥有标本制备简单、分辨率高等优点,因此常用于细胞超微结构的观察。双微体(double minute chromosomes,DMs)是基因扩增的主要表现形式,经常出现在肿瘤细胞及耐药细胞中,可使肿瘤细胞获得生存优势或产生耐药性,因此对双微体进行研究可使人类了解肿瘤的生长特性及其抗药性的产生机理。为寻找一种研究双微体的有效方法,本实验利用原子力显微镜对小鼠耐氨甲喋呤细胞3T3R500中的双微体进行观察,在获得双微体高分辨AFM形态图的同时,还对双微体的大小进行了测量,发现细胞中双微体大小存在差异。此外,就原子力显微镜在双微体研究中的一些技术细节进行了探讨。实验结果表明原子力显微术是研究双微体的一种有效手段。     

光学显微镜技术在活细胞单分子检测中的应用

单分子检测是一门以高度的时间以及空间分辨率研究生物单分子的技术。近来,科学技术的探索发展使我们可以观察、检测甚至操纵单个分子并且研究它们的构象变化和动力学行为。这一发展使得以前被传统系综研究体系平均化所隐藏的新信息被揭示出来。单分子检测技术的发展已经揭开了生命科学研究的新篇章。在本文中,我们将介绍有关活细胞中单分子检测技术的发展以及活细胞内单分子检测的现状。     

显微镜下的湍流

为了实验观察生物作用所致的新的湍流方式—生物性微观湍流,探索其过程及支配因素,以奇异变形杆菌潜生体进行显微培养发生微生物悬液特殊运动现象,通过对照实验比较分析控制因素。结果表明显微镜下湍流呈整体混乱而局部有序特征,以实验证明具凹坑效应及发生启动温度依赖性和悬液量自控性。通过研究阐明新的湍流自发、自控混沌过程,为湍流研究提供一个可控条件的实验模型,并为生物体内体液流动机制及生理作用研究提供新的认识途径     

原子力显微镜下淋巴瘤患者血浆外泌体的物理特征

目的 外泌体是细胞外囊泡的一种，被认为是一种生物信息载体。本文探究在AFM检测下淋巴瘤患者血浆中外泌体的物理特性。方法 从不同亚型淋巴瘤患者的外周血中提取外泌体，首先利用静电吸附法将分离的外泌体固定在云母基质上，然后应用原子力显微镜（AFM）扫描获取外泌体的多参数图像。在纳米/微尺度上，取得外泌体的形貌与力学信息并统计比较。结果 利用AFM表征单个外泌体的力学信息。其中，表面黏附力图像显示，外泌体边缘的能量耗散高于中心部分，因此具有显著边缘效应，来自不同亚型淋巴瘤患者的血浆中外泌体杨氏模量存在差异。结论 血浆中外泌体可被提取并在经过处理固定后可被AFM捕获并测量，血浆外泌体有望成为肿瘤诊断及治疗的新型生物标志物，外泌体的物理特性可能与其生物学性能存在关联。