线粒体参与氧自由基代谢的功能

根据呼吸链中传递的电子可从细胞色素c漏出传给H2O2的实验结果,结合文献关于呼吸链底物端电子漏导致生成O2·-和H2O2的报导,提出了呼吸链主链电子传递之外,存在一个由两类电子漏衔接形成的电子漏路径.由于这一路径实质上是氧自由基的代谢途径而显示出线粒体可能具有参与氧自由基代谢的功能.     

高等植物光系统Ⅱ中强光照射产生超氧阴离子自由基的ESR探索

利用自旋捕捉电子顺磁共振（ESR）的方法对从菠菜叶绿体中分离提纯的光系统Ⅱ(PSⅡ)颗粒产生O₂^-_·的机理进行了直接检测.通过对样品充氧、加入超氧化物歧化酶（SOD）抑制剂四氰乙烯（TCNE）以及原位光照检测ESR信号等手段，在PSⅡ中检测到O₂^-_·与DMPO加合物的特征ESR信号.而在没有SOD抑制剂的情况下，光照时PSⅡ中O₂^-_·与DMPO加合物浓度显著下降.进一步实验发现PSⅡ中O₂^-_·产率与氧分子浓度直接正相关.O₂^-_·产率还具有pH值依赖性，在pH值为6.0～6.5范围内，O₂^-_·产率最高，大于此范围时则呈显著下降趋势.而PSⅡ颗粒的Tris处理也将导致O₂^-_·产率的急剧减少.以上结果证实水裂解放氧十分活跃的PSⅡ也是高等植物叶绿体在光照下产生活性O₂^-_·的主要部位，通常大部分的O₂^-_·能被内源SOD清除，且O₂^-_·的生成与PSⅡ的电子传递活性密切相关.     

一种用分光光度计检测氧自由基的新方法

报告检测过硫酸铵／N, N,N′,N′-四甲基乙二胺体系所产生的氧自由基的新方法.O-·2与羟胺溶液反应生成NO-2,NO-2经对氨基苯磺酸和α-萘胺显色在波长530 nm处有专一吸收峰,其颜色深浅与产生的O-·2呈量效关系.氧自由基清除剂抗坏血酸对O-·2的清除作用也呈明显的量效关系.     

H2O2－Fe3+所致人淋巴细胞DNA双链断裂损伤

采用脉冲电场凝胶电泳法检测H₂O₂－Fe³⁺体系产生的OH^·对人淋巴细胞DNA的双链断裂损伤．H₂O₂－Fe³⁺浓度与DNA双链断裂呈明显量效关系;随OH^·作用时间延长,细胞DNA双链断裂加重;过氧化氢酶对OH^·损伤有明显抑制作用．脉冲电场凝胶电泳法可检测到的H₂O₂和FeCl₃引起细胞DNA双链断裂的最低浓度为0.3 mmol/L和6 μmol/L．     

甲2巨球蛋白对电离辐射引起人血中O2-·自由基释放的影响

本实验用 ⁶⁰Coγ线照射正常人新鲜全血,观察电离辐射对多形核白细胞(PMN)释放超氧化物阴离子自由基(O₂^-_·)的影响,以及人血甲2巨球蛋白(α₂M)制剂对辐射引起的PMN释放O₂^-_·的作用。结果表明:正常人新鲜全血照射(5-20Gy)后1h,PMN释放O₂^-_·的量较不照射组增高(P<0.01),红细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活力较不照射组降低(P<0.01)。照前1h加入人血α₂M制剂(每ml全血中加入138.5单位)能有效地降低PMN的O₂^-_·释放量,提高红细胞中SOD的活力。离体实验结果提示α₂M治疗辐射损伤作用可能与其抑制过多的O₂^-_·产生有关。     

不同来源腐植酸与活性氧自由基的相互作用

以ESR波谱仪为工具,利用自旋捕集技术研究不同来源腐植酸与黄嘌呤氧化酶体系和人多形核白细胞(PMN)呼吸暴发产生的超氧阴离子自由基(O₂^-·)及Fenton反应生成的羟自由基(·OH)的相互作用,发现大骨节病病区和非病区的腐植酸对·OH自由基的产生表现促进作用,而对O₂^-·自由基则表现清除作用.而泥炭腐植酸对O₂^-·和·OH均显示清除作用,明显不同于大骨节病病区和非病区腐植酸的行为,认为腐植酸诱导大骨节病的过氧化损伤应主要是通过羟自由基反应而引发的.     

O -·2增强谷氨酸与其受体的结合力及EBSELEN的保护作用

用放射配体测定受体法研究了黄嘌呤(X)/黄嘌呤氧化酶(XO)体系产生的超氧阴离子自由基(O -·2)对［3H］DL-谷氨酸与大鼠大脑皮层突触膜谷氨酸受体结合的影响,结果表明O -·2明显增强谷氨酸与其受体的结合力,此作用能被2-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)酮(EBSELEN)(1 μmol/L)所抑制.     

活性氧清除剂和钙离子通道阻断剂对人淋巴细胞化学发光的效应

本文报道了活性氧(ROS)清除剂——苯甲酸钠、维生素C、甘露醇、L-组氨酸、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶对Con A诱导的人外周血淋巴细胞化学发光(Ly-CL)均有抑制效应,提示人Ly-CL与ROS的生成有关,参与人Ly-CL的ROS类型有·OH、¹O₂、H₂O₂和O₂^-_·。钙通道阻断剂——Verapamil对人Ly-CL也有抑制效应,表明人Ly-CL依赖于人淋巴细胞内钙离子浓度的增加。     

邻二氮菲－Fe2＋氧化法检测H2O2／Fe2＋产生的羟自由基

报告检测H₂O₂/Fe^2＋所产生羟自由基的新方法. 羟自由基氧化反应后, 邻二氮菲-Fe^2＋的A₅₃₆明显下降, 且△A₅₃₆与邻二氮菲, FeSO₄及H₂O₂呈量效关系, 随反应时间延长, △A₅₃₆依幂函数规律上升. 此法试验结果表明, 甘露醇, 抗坏血酸及硫肥清除羟自由基作用呈明显的量效关系.     

多形核白细胞产生的NO和O2-自由基主要形成 ONOO-

用ESR自旋捕集技术研究了人多形核白细胞(PMN)受促癌剂佛波醇(PMA)刺激产生O₂^-和NO自由基的相互作用.发现加L-精氨酸使在PMA刺激PMN体系中捕捉到的O₂^-明显减少,加N^G-甲基精氨酸(NGMA)使在PMA刺激PMN体系中捕捉的O₂^-明显增加.用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶和光照核黄素体系证明,加L-精氨酸使PMA刺激PMN产生NO^-·自由基与O₂^-结合生成ONOO^-是加入L-精氨酸使PMA刺激PMN体系捕捉的O₂^-减少的主要原因,并且推算了加入不同浓度L-精氨酸PMN产生NO^-·自由基的量.用羟基自由基清除剂和ONOO^-氧化DMPO和DMSO及其对pH的依赖关系,证明了ONOO^-分解并没有直接生成羟基自由基.用依赖鲁咪诺的化学发光法研究了人多形核白细胞受促癌剂PMA刺激产生NO^-·自由基动力学过程.另外,用化学合成的NO^-·自由基和过氧亚硝基在模型体系研究了它们的ESR和化学发光特征.说明PMA刺激PMN生成的NO^-·和O₂^-自由基反应形成的ONOO^-是引起化学发光的主要形式.     

运动对人体自由基代谢的影响

自由基代谢普遍存在于机体各组织。正常情况下,人体自由基的产生与清除处于平衡状态。而人体自由基产生过多或机体清除自由基能力下降将给机体带来损伤。本文采用文献资料法,阐述了自由基的类型、功能、自由基产生的机制以及抗氧化系统的种类等基本理论。通过对力竭运动、耐力运动和无氧运动3种不同形式的运动对自由基代谢及抗氧化酶活性的研究得出结论:不同的运动形式及负荷方式对体内自由基代谢及抗氧化酶活性将产生不同影响;运动对自由基代谢影响具有器官与组织差异性。这些研究成果为科学指导运动训练和健身活动、快速有效的消除运动性疲劳并增强运动能力提供重要的科学理论依据。     

壳聚糖季铵盐合成及其抗氧化性能研究

通过Eschweiler Clarke反应得到N,N-二甲基壳聚糖中间体。然后与碘甲烷反应生成水溶性的壳聚糖季铵盐:N,N,N-三甲基壳聚糖碘化铵(TMCI)。检测三种不同取代度的季铵盐产品对羟基自由基(.OH)、超氧自由基(O2-.)的清除率。结果发现:取代度为33.9%时,对.OH的最大清除率为40.2%,对O2-.的最大抑制率为65.6%。并且季铵盐产品对两种自由基的清除率都随着取代度的增大而减小,取代度为80.3%的产品对这两种自由基几乎无清除作用。     

灰树花提取物清除氧自由基的研究

采用化学发光法比较了灰树花各提取物对超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除效果。研究结果表明,灰树花子实体和菌丝体的提取物对羟基自由基均有很好的清除作用,灰树花菌丝体水提物(GFME)、灰树花子实体水提物(GFE)、灰树花子实体水提多糖(GFP)、灰树花子实体碱提多糖(GFAP)清除羟基自由基的IC50均小于1.0 mg/mL,其他提取物清除羟基自由基的IC50也均小于3.0 mg/mL。而对超氧阴离子自由基仅GFME、GFMP、GFE有清除作用,其他的提取物清除作用很弱。     

Inactivation of E. coli pyruvate formate-lyase: role of AdhE and small molecules

Escherichia coli AdhE has been reported to harbor three distinct enzymatic activities: alcohol dehydrogenase, acetaldehyde-CoA dehydrogenase, and pyruvate formate-lyase (PFL) deactivase. Herein we report on the cloning, expression, and purification of E. coli AdhE, and the re-investigation of its purported enzymatic activities. While both the alcohol dehydrogenase and acetaldehyde-CoA dehydrogenase activities were readily detectable, we were unable to obtain any evidence for catalytic deactivation of PFL by AdhE, regardless of whether the reported cofactors for deactivation (Fe(II), NAD, and CoA) were present. Our results demonstrate that AdhE is not a PFL deactivating enzyme. We have also examined the potential for deactivation of active PFL by small-molecule thiols. Both beta-mercaptoethanol and dithiothreitol deactivate PFL efficiently, with the former providing quite rapid deactivation. PFL deactivated by these thiols can be reactivated, suggesting that this deactivation is non-destructive transfer of an H atom equivalent to quench the glycyl radical.     

酶解骨胶原多肽的抗氧化特性研究

本文主要研究了酶解法制备的骨胶原多肽的总抗氧化能力、羟自由基清除作用和抑制超氧阴离子自由基的能力.通过与谷胱甘肽(GSH)的比较发现,溶液浓度在1130～150 mg/mL时,该骨胶原多肽的总抗氧化能力为GSH的71.92%.溶液浓度在2.5～20 mg/mL时,该多肽羟自由基清除作用为谷胱甘肽的1.36倍.溶液浓度为10～150 mg/mL时,多肽抑制超氧阴离子自由基的能力低于谷胱甘肽.     

北虫草对四氯化碳诱导的脂质过氧化的影响

通过体内及体外自由基发生体系 ,进一步研究了北虫草提取液的抗氧化作用。肝脏形态学观察可见 ,北虫草对膜系统损伤具有明显的保护作用 ;人工培育的北虫草子座对Fenton反应生成的羟自由基具有较强的清除作用 ,且作用明显强于相同剂量的羟自由基特异清除剂甘露醇 (P <0 0 1) ;北虫草对邻苯三酚自氧化体系产生的氧自由基亦具有清除作用 ,与对照组比较P <0 0 1,但作用弱于相同剂量的抗坏血酸。结果显示 :北虫草具有抗脂质过氧化作用     

丝裂霉素促进活性氧自由基生成的研究

本文探讨了抗癌药丝裂霉素对活性氧自由基,超氧负离子自由基(O_2~-),羟自由基(OH)生成反应的作用,实验表明,丝裂霉素对O_2~-及OH的生成有明显的促进作用,其作用随着丝裂霉素浓度的增加而加强。分别测定了它对两种自由基生成反应的促进率。     

杨桃提取物体外清除氧自由基作用

从杨桃果中提取得到三种提取物为匀浆提取物、蛋白提取物和多糖提取物。采用化学发光法测定这三种提取物清除氧自由基的活性,实验结果:匀浆提取物清除羟自由基(·OH)和H2O2的活性大小相近,而清除超氧阴离子自由基(O2–·)的活性较小,其IC50约为前两者的4倍。蛋白提取物清除O2–·和·OH的活性大小相近,而清除H2O2的活性明显小于前两者,IC50约为前两者的9倍。多糖提取物清除.OH的活性明显大于清除O2–·和H2O2的活性,其IC50约为O2–·的1/22,约为H2O2的1/65。结果表明,杨桃果具有清除O2–·、·OH和H2O2的作用,不同提取物对这些活性氧自由基的清除能力有所不同。     

芦丁-锗配合物及其自由基清除活性研究

芦丁是存在于多种植物中的天然多羟基黄酮苷,能与多种金属离子形成配合物。本文采用紫外分光度法考察了芦丁与锗离子的配位作用,并研究了芦丁-锗配合物清除超氧自由基和DPPH自由基的作用。结果显示在KH2PO4-NaOH(pH6．70)的缓冲液中,芦丁与锗离子能形成1：1的配合物,其K稳=10^7.46,同时配合物显示有较好的自由基清除活性。