真核细胞内转录的调节

长期以来,在细胞学、遗传学、组织学和胚胎学上经常有这样一个问题:就是双亲的遗传物质经受精作用集合于受精卵,除个別例外,受精卵经卵裂又将全部遗传物质传递给子细胞,每个子细胞都含有双亲的遗传物质,即使在已分化的细胞中也不例外,但为什么在细胞分化的过程中,遗传物质所携带的基因并不全部表现出来,而是有选择地表现或不表现这些或那些基因。这就说明基因的表现与否,必然受生物体的內环境与外环境     

通过微型细胞转入外源染色体的研究

通过微型细胞与整个细胞融合的方法,将小鼠B82HTQ_2细胞(TK~-)的三条染色体导入到小鼠PG19细胞(HGPRT~-)中去,被导入的X染色体使PG19细胞恢复了HGPRT功能。经过连续6个月的体外培养和小鼠体内接种实验证明,这三条外源染色体在宿主PG19细胞里是相当稳定的。用细胞分类器进行的荧光抗体分析表明,杂交细胞M_(?-1)没有亲本B82HTQ_2细胞特有的膜表面抗原H-2~k,这就证明了用微型细胞作为媒介物,可以在不引入外源主要组织相容性抗原基因(MHC)的情况下,实现基因的互补和导入新的遗传物质。本文还介绍了诱导产生B82HTQ_2微核化细胞的最适宜条件、微型细胞的制备和纯化系统以及对微型细胞表面结构的扫描电镜观察结果,并对M_(?-1)细胞的致癌性进行了初步的讨论。     

农杆菌转化的分子生物学

农杆菌感染植物形成冠瘿组织是细菌和植物细胞相互作用的结果,T-DNA的转移和整合是在细菌及植物基因和蛋白的共同作用下完成的,双方的协作是实现遗传物质转移和整合的必要条件。     

转染GFP对结肠直肠癌细胞遗传物质稳定性的影响

为探究绿色荧光蛋白(GFP)对结肠直肠癌细胞遗传物质稳定性是否存在影响,选取3种常用的结肠直肠癌细胞系HCT116,SW480,DLD-1;采用脂质体转染法把GFP转入细胞,统计几种细胞系微核、核芽的比例;分别比较各种细胞系自发微核、核芽和GFP组的差异.结果发现,HCT116细胞中对照组与GFP组的微核细胞率分别为3...     

NF1微基因及突变体微基因的克隆与鉴定

Ⅰ型神经纤维瘤病(Neurofibromatosis typeⅠ,NF1)是一种常染色体的显性遗传病,其致病性是由NF1基因突变引起。NF1基因m RNA前体受可变剪接的影响,NF1微基因是研究其可变剪接机制的重要工具。本研究从人类外周血中提取基因组DNA,并设计出克隆NF1及突变目的片段的两对引物,利用PCR方法扩增目的片段并导入p EGFP质粒载体,从而构建了分别包含NF1微基因及突变体微基因的载体p EGFP-NF1和p EGFP-NF1m。分别用Bam HⅠ和HindⅢ对NF1微基因及突变体微基因进行双酶切鉴定,均得到预期片段,测序结果正确,表明成功构建了NF1微基因及突变体微基因载体。用转染试剂将NF1微基因和突变体微基因的质粒转染到Hela细胞中,荧光检测说明真核表达载体NF1微基因与突变体微基因成功转染到细胞中。本研究为后续NF1的m RNA前体可变剪接以及调控NF1剪接因子的研究提供了参考。     

大肠埃希菌TA系统mazEF的研究进展

大部分细菌的遗传物质中含有毒素-抗毒素系统(TA)的遗传基因.mazEF是大肠埃希菌染色体上的一对毒素抗毒素基因,由毒素基因mazF和抗毒素基因mazE组成.其在细菌的生长调控和细胞程序性死亡中发挥了重要的作用.环境压力激活mazEF后,MazF可以通过对mRNA的剪切作用造成翻译停止.mazEF的存在可以增加细菌对环境压力的耐受性、保持细菌遗传物质的稳定、参与抗生素引起的细胞死亡、也在细菌的耐药性中发挥重要作用.     

细菌与遗传工程

遗传工程又称“遗传操作”,有广义和狭义之说。广义的遗传工程指把一种生物的遗传物质转移到另一种生物的细胞中去,并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。狭义的遗传工程又称基因工程或重组DNA技术,这是从供体生物提取所需基因,也就是DNA片段,与载体重组后引入受体生物,从而改变受体     

《生物工程讲座》(Ⅳ)——基因工程的理论及应用(三)真核细胞的基因转移技术及其应用

真核细胞基因的转移可以通过转移整个染色体组,也可以转移一组染色体或重组的DNA分子到细胞中去,这些,若从方法学上加以分类有: 1.细胞杂交法; 2.微细胞(microcell)融合; 3.染色体介导的基因转移; 4.DNA介导的基因转移; 5.细胞微量注射法。用细胞杂交方法可以转移整个基因组,而用微细胞转移基因则是用微细胞作供体。在微细胞中有一个或几个染色体与遗传性完整的受体融合,因此,在微细胞系统中只有一个或很少的染色体转移到受体中去。用染色体转移基因是由受体细胞经细胞内吞作用(endocytosis)来     

细胞核基因组和线粒体基因组的相互作用

线粒体DNA是细胞内唯一的核外遗传物质,线粒体的主要功能是合成ATP,为细胞生命活动提供直接能量。线粒体基因组与核基因组在基因、蛋白以及细胞水平上相互作用,共同保证细胞能量代谢有关的活动,维持着线粒体的正常功能和细胞的正常状态。     

植物中的水平基因转移

水平基因转移是不通过生殖而进行的遗传物质交流, 在原核生物和单细胞真核生物的进化中起着重要作用。然而, 水平基因转移在多细胞真核生物之间的发生频率以及对多细胞真核生物进化的影响尚不明确。近期的一些研究显示, 水平基因转移在高等植物之间以及高等植物和其它生物之间普遍存在。该文将对高等植物中已发现的一些水平基因转移现象进行综述, 并尝试解析植物之间水平基因转移可能的机制及其重要意义。     

模拟微重力诱导的细胞微丝变化影响COL1A1启动子活性

细胞骨架系统是细胞内的重力感受系统。已知微重力导致的细胞形态、功能、信号传导等多种变化均与细胞骨架系统变化有关,但微重力对相关基因调控的影响知之甚少。本研究以构建的基因工程细胞株（EGFP-ROS）为对象,以回转器模拟微重力效应,利用增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescence protein,EGFP）荧光半定量和细胞微丝荧光染色分析技术,探讨回转模拟微重力条件下,细胞微丝系统对Ⅰ型胶原α1链基因（collagen type Ialpha chain 1 gene,COL1A1）启动子活性的影响。空间飞行和回转模拟微重力后,细胞微丝解聚、张力纤维减少,表明微重力可降低细胞微丝结构的有序性,诱导细胞骨架重排。适合剂量的细胞松弛素B处理EGFP-ROS细胞诱导微丝骨架解聚,同时导致COL1A1启动子活性增加,细胞荧光强度增强,并呈现剂量依赖性。因此,一定程度的细胞微丝系统破坏将导致COL1A1启动子活性的增强,证明细胞微丝骨架系统参与了微重力对COL1A1启动子活性调节,且在微重力信号传导中起重要作用。     

ph1b基因对簇毛麦遗传物质导入普通小麦的影响

ph1b基因对簇毛麦遗传物质导入普通小麦的影响@陈静$中国科学院成都生物研究所!成都610041ph1b基因;;小麦;;簇毛麦     

家蚕微孢子虫感染对家蚕BmN细胞凋亡以及凋亡蛋白抑制因子IAPs表达的影响

【目的】在无任何外界凋亡因素诱导条件下,探究家蚕微孢子虫感染对家蚕卵巢细胞-BmN凋亡的影响,以及凋亡蛋白抑制因子IAPs实相表达的变化情况。【方法】显微镜下观察家蚕微孢子虫感染BmN细胞后不同时间段宿主细胞的变化情况,以及利用荧光定量PCR方法检测家蚕促凋亡基因——细胞色素C(BmCyt c)表达水平的变化,随后检索家蚕基因组与蛋白质家族数据库搜寻家蚕凋亡蛋白抑制因子IAPs基因信息,并通过荧光定量PCR方法对这些基因的实相表达情况进行定量分析。【结果】家蚕微孢子虫感染BmN细胞的前5 d,细胞状态未见明显变化。感染后7 d,BmN细胞的生长受到了一定程度的影响。第12天时,对照组中几乎所有细胞出现空泡化或细胞死亡的现象,而感染家蚕微孢子虫的BmN细胞未见空泡的出现,并且大量细胞形态完整,细胞核清晰可见。同时,BmCyt c基因的表达几乎一直处于被抑制状态,特别是感染后的第10天与第12天,该基因的表达量显著性降低(P0.01)。通过数据库检索共得到4个家蚕凋亡蛋白抑制因子:BmIAP-1、BmIAP-2、BmSurvivin-1与BmSurvivin-2。荧光定量PCR结果表明:BmIAP-1和BmSurvivin-1基因在感染后期(10 d与12 d)表达量有上升趋势,尤其是感染后的12 d,表达量显著上升(P0.01)。然而,BmIAP-2与BmSurvivin-2基因的表达在大多数时间段均处于下调状态。【结论】当无任何外界凋亡因素诱导条件下,家蚕微孢子虫感染BmN细胞后可影响宿主细胞的生长,并可抑制细胞的正常生理凋亡。依据荧光定量PCR结果,我们推测在家蚕微孢子虫感染BmN细胞时,BmIAP-1和BmSurvivin-1蛋白可能在调节细胞凋亡的过程中起一定作用。     

向合成细胞迈进：细胞与计算机的复制过程中的遗传问题

对生命机制的理解预示着人类总有一天能重建细胞。对于生命表征的深入分析显示, 细胞的分裂、繁殖与计算机间的复制非常相似。这要求我们在亚细胞水平上进行分析比较。首先, 细胞必须被看作是一个独立于其遗传物质的机器。在此意义上, 遗传物质在数代间复制, 而机器也可以再生。繁殖是一个可以在子代间累积有用信息的过程, 从大量无用的信息海洋中提取有用信息是一个依赖能量的过程, 并借助能量阻止功能性实体的降解。细菌基因组的分析显示, 核心基因( 即维持必需功能的基因) 负责执行这种类似于棘齿运行的信息累积过程。本文提出, 磷酸化矿物盐类可能是广泛的能量来源。     

生产转基因动物的技术现状

用实验手段,可将特定外源基因导入早期胚胎的细胞,由此整合到染色体上,还可通过被整合动物的生殖细胞系传给子代。这类整合外源基因的“新动物”被统称为转基因动物(Transgenic Animals)。 按人为意愿设计生产转基因动物,能达到如下若干目的:1)将理想的遗传物质导入动物染色体,以扩大种内遗传变异,迴避有性繁     

DNA与个体发育调控(1)

多细胞生物的身体都是由一个细胞发育而来的,因此该细胞内的遗传物质DNA应携带有建造身体结构的全部信息指令。然而,在DNA序列中却只有为基因编码的序列,以及控制基因表达时间、地点、多少的调控序列,并没有如何建造身体的具体信息指令。DNA的蓝图作用,是通过各种蛋白质分子的顺序表达来形成各种类型的细胞,同时通过一些细胞分泌的信息分子指挥周围细胞表达出能够产生机械力的蛋白质分子,让细胞按照特异方式彼此结合,从而实现个体发育的精准调控。     

外源基因表达

体外重组DNA技术,在很多方面已经被用来导入外源遗传物质到一个新的细胞里,其目的常常是分离以及在结构上研究一个特定的DNA片段。可是,主要目的是在新的寄主细胞中获得外源基因的表达。 到达新寄主的某些外源基因,其表型至少在定性上与在原寄主中是一样的(表一)。     

全景呈现——免疫系统和病毒的星球大战

正病毒是拥有自身的遗传物质和蛋白质外壳,依赖于宿主细胞的一种寄生物。病毒的个子很小,只有红细胞直径的1/50左右,离开活体细胞不能自我复制,只能"入侵"到其他生命体的细胞内才能复制自己的遗传物质和构筑自己的蛋白质外壳,重新组装为新的病毒后,将细胞破坏,从细胞内释放出来后     

向合成细胞迈进：细胞与计算机复制过程中的遗传问题

对生命机制的理解预示着人类总有一天能重建细胞.对于生命表征的深入分析显示,细胞的分裂、繁殖与计算机间的复制非常相似.这要求我们在亚细胞水平上进行分析比较.首先,细胞必须被看作是一个独立于其遗传物质的机器.在此意义上,遗传物质在数代间复制,而机器也可以再生.繁殖是一个可以在子代间累积有用信息的过程,从大量无用的信息海洋中提取有用信息是一个依赖能量的过程,并借助能量阻止功能性实体的降解.细菌基因组的分析显示,核心基因(即维持必需功能的基因)负责执行这种类似于棘齿运行的信息累积过程.本文提出,磷酸化矿物盐类可能是广泛的能量来源.     

外源基因表达

体外重组DNA技术,在很多方面已经被用来导入外源遗传物质到一个新的细胞里,其目的常常是分离以及在结构上研究一个特定的DNA片段。可是,主要目的是在新的寄主细胞中获得外源基因的表达。 到达新寄主的某些外源基因,其表型至少在定性上与在原寄主中是一样的(表一)。获得这些结果的时间相对地早一些,并且一般地被介释为,原核和低等真核基因在新的