用1640培养基培养L型细菌的探讨

用１６４０培养基培养Ｌ型细菌的探讨大连医科大学附属一院１１６０１２刘新元大连医科大学微生物学教研组李岩本试验室用１６４０培养基和其它成份制成的高渗培养基,与８６３培养基和改良Ｋａｇａｎ氏培养基同时对Ｌ型细菌进行培养,并做对比观察。取临床发热病人的血液...     

淋球菌AFLP基因分型的初步研究

采用扩增片段长度多态性技术(AFLP)对奈瑟氏淋球菌菌株进行基因分型研究。以EcoRI和MesI酶切26株淋球菌临床分离株基因组,并进行AFLP分析。同一地区的淋球菌分离株之间存在相当大的DNA多态性。AFLP是鉴别淋球菌临床分离株有用而敏感的基因分型技术,有助于了解流行淋球菌菌株的来源、流行菌株之间的克隆相关性,以及抗生素耐药性菌株的传播情况。     

一株嗜麦芽寡养单胞菌的分离及其生物学特性

近年来,基于高通量测序技术对植物根际土壤微生物菌群结构的测定结果表明,土壤中绝大多数微生物难以通过传统的富营养培养基实现培养和分离。为进一步探索分离土壤中寡营养微生物的方法,结合多种培养因素,以土壤浸出液为基础培养基设计寡营养培养基分离土壤细菌菌株。并通过菌株的细胞形态、生理生化特征、16S rRNA和gyrB基因序列等对其中一株菌进行鉴定,同时对其蛋白酶与铁载体的产生能力进行检测以评价其在植物根际促生方面的应用潜力。利用土壤浸出液做培养基是有效分离土壤寡营养细菌的方法 ;编号为S35的菌株鉴定为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia),具有蛋白酶和铁载体产生能力。采用的寡营养培养基可以分离获得在富营养培养基上不易分离的细菌,得到S. maltophilia S35菌株在植物促生方面具有一定的应用潜力。     

不同培养基成分在球虫细胞培养中的作用

比较不同基础培养基（α－ＭＥＭ、ＲＰＭＩ１６４０）和培养基的添加成分（胎牛清血、小牛血清、鸡血清和胰岛素）对鸡球虫Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ（ｗｉｓ株）细胞培养的影响结果发现：α－ＭＥＭ优于ＲＰＭＩ１６４０，鸡血清优于国外普遍使用的胎牛血清。胰岛素有促进细胞生长，促进球虫裂殖体和卵囊形成的作用。     

用无血培养基和鲍姜培养基临床分离百日咳杆菌的比较

<正> 自从进行百日咳预防接种以来,百日咳的发病率已有减少。但仍有极少的小型暴发。由于百日咳杆菌不易从临床标本中分离出来,所以诊断通常依靠临床资料作出。尽管鲍姜培养基已广泛应用于营养要求高的百日咳杆菌的临床分离。一般来说,含有新鲜血液的培养基的贮藏期限不长。人们认为成功地分离百日咳杆菌最重要的因素是立即划线接种标本。可是,经济上却不利于把鲍姜培养基一直保持在医院里,因为在医院采取标本     

一种葡萄球菌分离培养基的研制和应用

研制一种葡萄球菌分离用培养基对培养检查葡萄球菌具有选择性和一定的鉴别能力。在分离培养的同时,可利用同一平板的生长菌落观察耐盐性、色素产生、甘露醇发酵和明胶液化的试验结果。该培养基配制简单,成本低廉,可替代血液琼脂平板供临床、商检和卫生检验工作中葡萄球菌培养检查。     

2005-2013年肠道致病菌中志贺菌和沙门菌的分布及检测方法经验总结

目的分析杭州市第三人民医院2005-2013年肠道致病菌中志贺菌和沙门菌的分布并对检测方法进行经验总结。方法采用定位显色培养基和营养琼脂初筛疑似志贺菌和沙门菌,并参考该院历年菌种分离情况进行血清凝集。采用EXCEL统计处理数据,χ2检验比较采用定位显色培养基和营养琼脂平板之前和之后,粪便培养志贺菌和沙门菌的分离率之间差异的显著性。结果采用定位显色培养基和营养琼脂平板初筛疑似菌株后,志贺菌和沙门菌的分离率差异存在统计学意义。结论采用定位显色培养基和营养琼脂初筛疑似菌株,并对本院历年菌种分离情况进行总结,对改善志贺菌和沙门菌的分离率,提升检验科微生物室的工作效率有较大帮助。     

利用DGGE评价不同培养基回收番茄根际细菌类群的能力

用营养肉汤、YG、根系分泌物、土壤浸渍液4种培养基从番茄根际分离培养细菌,并结合变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,对4种培养基回收番茄根际细菌种群的能力进行了比较研究。结果表明,不同培养基和培养温度,回收到的细菌种群有一定差异;低营养浓度的YG培养基在较低的培养温度20℃下进行较长时间的培养,比高营养浓度营养肉汤培养基产生更多、更具代表性的细菌;以根系分泌物为基础的培养基从番茄根际回收到的优势菌群最多。该研究初步建立了用DGGE技术对不同培养基回收分离细菌种群能力进行评价的方法。     

FX培养基在腹泻病菌分离中的初步应用

“腹泻病菌鉴别培养基”(简称FX培养基)是湖北省卫生防疫站叶玉林研制的一种快速分离和选择鉴别腹泻病菌的新型培养基。FX培养基对腹泻病菌的阳性分离率优于其它鉴别培养基。1987年我们结合其它体格检查应用FX培养基对通城县隽水镇食品行业人员1338人份健康者粪便     

不同培养基组合提高土壤细菌可培养性的研究

为选择性采用多培养基组合以提高土壤细菌可培养性,利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术研究了贫营养、富营养和自然营养培养基在3种培养方式下获得细菌种群的差异。结果表明:平板培养条件下,细菌在贫营养培养基上生长较慢,菌落连续稳定形成。培养5d后,富营养的LB培养基和贫营养的R2A培养基获得菌落数最多,分别是贫营养的0.1×LB培养基获得菌落数的5.1倍和5.3倍。7种培养基中,LB培养基获得细菌种群数目最多,营养成分适当稀释后,培养物中有新的种群出现。贫营养培养基和富营养培养基培养物DGGE图谱相似性低,条带互补性强。三角瓶静置培养时,R2A和LB培养基获得细菌种群数目较多,其它几种培养基获得的细菌类群都能在这2种培养基中找到。试管静置培养条件下,LB培养基获得细菌种群数目最多,某些种群也只出现在R2A培养基和TSB培养基上,R2A及LB培养基与TSB培养基获得的细菌种群差异较为明显。研究结果为特殊培养基设计及选用合适培养基分离土壤细菌提供参考。     

花粉对Raji肿瘤细胞株的抑制作用研究

花粉是一种完全营养食品。研究花粉对Ｒａｊｉ肿瘤细胞株的抑制作用,结果：（１）破壁花粉中游离氨基酸组成基本与１６４０培养基相似;（２）花粉水提取液对Ｒａｊｉ肿瘤细胞株有明显的抑制作用     

人体肠道细菌寡营养培养组条件的优化研究

【目的】探讨寡营养对人体肠道细菌培养组的条件。【方法】通过稀释富集培养基、固体平板和增菌肉汤培养基成分获得寡营养培养基。对健康人粪便样本分别用原液(0)、5、10、20、30和40倍稀释的富集培养基(添加羊血和瘤胃液的血培养瓶)连续增菌,在不同时间点(第0、3、6、9、15、27、30天)吸取增菌液,用YCFA (yeast casitone fatty acid)固体培养平板分离菌落;用YCFA增菌肉汤增菌后再次挑取单菌落,利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF)质谱和16S rRNA基因测序鉴定菌株。通过比较上述6种寡营养条件分离肠道菌群的效果,选取富集培养基原液、稀释10倍和30倍这3 种条件下分离效果较好的富集条件,与同样稀释倍数条件的固体平板和增菌肉汤分别组合成9种培养基条件,进一步优化肠道菌群的培养组条件。【结果】在6种寡营养富集培养基中,未稀释(原液)、10 倍和30倍稀释的富集培养基分离细菌的种类比其他...     

从两类不同培养基上分离的土壤细菌的特征比较

通过对两类不同培养基上分离的土壤细菌的生理特征的比较,发现两组细菌的种群有所不同.芽孢杆菌主要生长在宫营养的培养基上,而很难在低营养的培养基上生长.假单孢杆菌和棒杆类型的细菌则在两类培养基上均可生长.这与两类细菌对环境的适应能力有关.     

一种从土壤样品选择性分离假诺卡氏菌的方法

为提高假诺卡氏放线菌的分离效率,根据其营养特性和对抗生素的敏感性,设计、检验了５种选择性分离培养基;实验检测了模式菌株在不同培养基上的生长情况,结果表明培养基Ｓ１和Ｓ２对假诺卡氏菌生长有显著的选择性。经该方法从韩国、印度尼西亚和中国广西地区不同土样中分离到一收诺卡氏放线菌。     

一种从土壤样品中选择性分离假诺卡氏菌的方法

为提高假诺卡氏放线菌的分离效率,根据其营养特性和对抗生素的敏感性,设计、检验了5种选择性分离培养基;实验检测了模式菌株在不同培养基上的生长情况,结果表明培养基S1和S2对假诺卡氏菌的生长有显著的选择性。经该方法从韩国、印度尼西亚和中国广西地区不同土样中分离到一些假诺卡氏放线菌。     

自4例男性急性尿道感染的脓性分泌物中检出乳酸奈瑟氏菌(N.lactamica)

我室对临床已诊断为急性淋病的58例男性尿道脓性分泌物进行了细菌的分离鉴定,结果从4例标本中检出了N.lactamica,没有检出淋球菌,现将分离鉴定结果报告于下。     

实用淋巴细胞培养技术

采自人体的外周静脉血液,用淋巴细胞分离液进行分析,收集分离得到淋巴细胞,同时回收血液的血清成分,此血清不经灭活可直接用于培养。本实验对影响淋巴体外激少在、增殖的相关因子进行了详细的统计分析,实验结果表明,在基础培养液ＲＰＭＩ１６４０中添加１００μｇ／ｍｌ的ＰＨＡ、１００ｉｕ／ｍｌ的ＩＬ－２和１０％的自体或胎血清,可以有产地激活淋巴细胞并在营养条件允许的情况下长期处于增鱼的状态。     

明永冰川垂直气候带中可培养低温细菌多样性分析

本研究对位于云南滇西北的明永冰川地区暖温带、中温带和寒温带三个不同垂直气候带中可培养低温细菌的多样性进行了研究。利用四种不同培养基对该地区可培养低温细菌进行了分离纯化,共得到细菌37 513株,根据菌落形态特征分为了391种,其中LB培养基分离到99种,Organic培养基分离到78种,PSG培养基分离到96种,PYGV培养基分离得到118种,可以看出寡营养培养基PYGV分离得到的细菌种类多于LB和Organnic等富营养培养基,表明PYGV针对冰川地区细菌的分离与鉴定更为合适;通过革兰氏染色和扫描电镜观察表明大部分菌株为革兰阴性杆菌;对已分离得到的优势菌进行了16S rRNA基因测序并构建系统发育树,分析得出:假单胞菌属(Pseudomonas)、耶尔森氏菌属(Yersinia)和黄杆菌属(Flavobacterium)在明永冰川不同垂直气候带上均有分布,其中假单胞菌属最多占据35%;而寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)是寒温带上特有的菌属。本研究证明明永冰川地区垂直气候带中可培养低温细菌多样性非常丰富,也为下一步了解这一特殊地理生态环境下微生物的群落演替规律、研究冰川环境中微生物群落如何响应气候变化提供了参考。     

淋病奈瑟菌分型的研究进展

淋病奈瑟菌(淋球菌)分型可追溯细菌的来源,了解其地域分布和流行情况,对淋病的防治具有重要意义.常用的淋球菌分型方法有营养、血清学、营养/血清学双重、植物凝集素、基因、耐药谱和质粒分型等.本文就当前的分型概况予以介绍.     

产紫杉醇真菌Pestalotiopsis microspora NK17适合遗传筛选的培养基优化

小孢拟盘多毛孢菌株NK17被证明能够产生多种具有药物开发价值的紫杉烷类似物以及冠心病治疗药物的前导物pestalotiollide B等次级代谢产物。由于是天然分离的菌株,该菌的营养要求未知,特别是缺少合适的全合成基础培养基,制约了实验室对其性状和基因水平的操作。尤其是在使用营养缺陷型菌株进行遗传转化时,全合成基础培养基是筛选工作的前提。对各种基础培养基进行筛选比较,最终确定酵母氮源加乳糖和硫酸铵的全合成基础培养基最适合NK17菌丝生长和营养缺陷型筛选。同时对该培养基的发酵产物进行了研究,成功应用该培养基进行了缺陷型回补筛选,效果较好。