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1.
斯托氏变形杆菌印rovidencia stuartii)含
有一种限制性内切酶Pst I,其切割位点是
CTGCAG[1];球芽抱杆菌(Bacillus globiggi)含
有两种不同的限制性内切酶Bgl I和Bgl I,)
Bgl I的识别位点是GCCNNNN}NGGC, Bgl
II的识别位点是A杏GATCT[1]。这些限制性内
切酶在DNA重组、基因的结构与功能的研究
中都是常用的工具酶。本文参照Greene等121的
方法分离和纯化了Bgl I和Pst I酶。在所采
用的球芽抱杆菌的菌株中,Bgl II的含量似乎
较少,未能得到较好结果。现简略报道如下。 相似文献
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胚胎骨Ⅰ型胶原的提取与鉴定 总被引:5,自引:0,他引:5
应用酸性、中性交互提取法从人胚骨中提取Ⅰ型胶原,经SDS-PAGE电泳,氨基酸分析和免疫学方法鉴定.结果表明所提胶原电泳区带与Ⅰ型标准品相同,环状沉淀反应阳性,氨基酸分析甘氨酸占1000个氨基酸总残基的1/3,羟脯氨酸与脯氨酸之比为0.65,符合Ⅰ型胶原特征,并显示有较高的纯度,可用于胶原制品的制作. 相似文献
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人胎盘中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原的提取 总被引:1,自引:0,他引:1
胶原蛋白是重要的细胞外基质成分,约占人体蛋白总量的1/3,目前已确定的胶原至少有12种类型,各型胶原都具有一定的分子构型、基因定位及组织分布特点。胶原的提取与纯化是进行胶原免疫组织化学研究的必要步骤。本文参照国外有关文献并作适当改进,成功地从人胎盘中提取了Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白。 相似文献
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采用响应面分析法对酶解液中Ⅱ型胶原的盐析条件进行优化,并通过SDS-PAGE电泳及圆二色谱对其纯度和结构进行鉴定。结果表明:酶解液中Ⅱ型胶原的最佳盐析条件为NaCl浓度3.5mol/L、22.3℃、31.08h,在此条件下Ⅱ型胶原回收率为90.88%;采用盐析法从酶解液中制备的Ⅱ型胶原,具有较高纯度并保持着完整的3股螺旋结构。 相似文献
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I型胶原对巨噬细胞摄取氧化低密度脂蛋白的作用 总被引:1,自引:1,他引:0
为探讨胶原的存在对细胞摄取氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的影响,本研究在体外制成I型胶原凝胶和巨噬细胞实验体系,LDL经Cu^2+催化氧化,丙二醛(MDA)及乙酰化修饰后,与胶原的结合能力明显增强,但4-羟基壬烯醛(HNE)修饰的LDL与胶原的结合能力反应不如天然LDL。当小鼠腹腔巨噬细胞培养在胶原凝胶上时,其对ox-LDL的摄取明显减少,这时大部分ox-LDL为胶原凝胶所结合,如用细胞松弛素D 相似文献
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在胶原存在条件下低密度脂蛋白(LDL)的氧化反应性的改变一直未见报道,通过在体外分离大鼠I型胶原并制成胶原凝胶,发现铜离子(Cu^2+)介导的LDL氧化反应的潜伏期明显延长,所生成的硫代巴比妥酸反应物(TBARS)最大值远低于对照组,胶原组氧化LDL(ox-LDL)的相对电泳迁移率(REM)也较对照组为低;在偶氮类化合物2,2'-盐酸脒基丙烷(AAPH)诱导的LDL氧化过程中,胶原组与对照组的LD 相似文献
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娑罗子中七叶皂苷的提取分离与纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
以中药娑罗子为原料,用酒精提取有效成分七叶皂苷,再用乙酸乙醍(去掉脂溶性物质)、正丁醇(去掉水溶性物质)分别萃取,将正丁醇萃取液真空干燥浓缩后上NKA—9树脂和反相层析柱(Sep—Pak C18),进行精制,即可得回收率为3.67%,纯度为63.323%(经高效液相色谱检测)的七叶皂苷。 相似文献
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桔梗多糖的提取与纯化 总被引:3,自引:0,他引:3
中药桔梗饮片经水浸提、乙醇分步沉淀,获得乙醇终浓度60%和80%的两个粗多糖组分,分别命名为PPS60和PPS80。经Molish反应、Fehling试剂反应呈阳性,碘-碘化钾反应呈阴性,说明PPS60和PPS80中均含有多糖和还原糖,但不含有淀粉。运用苯酚-硫酸法测得PPS60和PPS80的总糖含量分别为82.25%和84.17%;3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测得还原糖含量分别为6.21%和8.05%。PPS60和PPS80经过Sevage法除蛋白、透析、浓缩和Sephrose 6B凝胶柱层析获得两个单一组分。这些结果为进一步研究桔梗多糖奠定了基础。 相似文献
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霍乱是由于霍乱弧菌分泌一种类似酶样的肠毒素作用于小肠上皮而引起的局部细胞代谢紊乱的急性肠遗传染病。霍乱肠毒素的概念是自Koch氏发现霍乱弧菌一百年来的一个重大进展。近年国内一些单位已开展提取工作,所化人力物力甚大,经常一无所获,或产毒很低,在毒素的鉴定与纯化上均存在一定的困难。本文介绍国外霍乱肠毒素的提取与纯化的研究进展。一、肠毒素的发现和早期研究 相似文献
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人I型胶原基因第一内含子调节转录的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
人I型胶原α1(I)链(COLIA1)基因内含子序列在不同细胞内有不同的转录调节活性,报道了含人COLIA1基因内含子I不同区段(+544~+855和+820~+1093)的重组质粒pSCEP-CAT和pSCIP-CAT的构建并转染人胚肌腱成纤维细胞和Tca8113舌癌细胞,地高辛标记抗CAT-ELISA检测结果显示:pSCEP-CAT在两种细胞均获表达;pSCIP-CAT在人成纤维细胞未表达,但 相似文献
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《基因组学与应用生物学》2016,(6)
玫瑰精油的提取会产生大量玫瑰花渣,对环境产生很大污染。同时,玫瑰花渣中含有大量黄酮类化合物,具有显著的药理作用。出于对玫瑰花渣资源开发利用之目的,本研究从工业化角度研究了玫瑰花渣中黄酮类化合物的检测方法及提取和纯化工艺。结果表明,与氯化铝显色法相比,硝酸铝显色法稳定可靠,更适于玫瑰花渣的黄酮含量测定。70%乙醇有利于从玫瑰花渣中提取黄酮类化合物,提取物中黄酮含量为14.60%,提取得率达2.63%。经AB-8大孔树脂纯化后,黄酮含量为53.23%,回收率达35.84%。本研究结果可为玫瑰花渣资源开发提供参考。 相似文献
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鱼鳞中胶原蛋白的提取纯化及应用 总被引:6,自引:0,他引:6
总结了鱼鳞中胶原蛋白的提取、分离和纯化方法及其结构特点、生物学功能,并探讨了其在食品、生物、医学、造纸、饲料等方面的应用及发展前景。 相似文献
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牛Ⅲ型前胶原的提取及抗血清的制备 总被引:1,自引:0,他引:1
在中性pH和蛋白酶抑制剂的存在下,从新生小牛皮肤中提取Ⅲ型前胶原。利用反复盐析法将Ⅰ型胶原和前胶原与Ⅲ型胶原和前胶原分开,再经DEAE纤维素层析分离出Ⅲ型前胶原。 用提取的Ⅲ型前胶原免疫家兔,获得抗血清,用酶联免疫法测定效价达1:10O,000。经与国外标准品鉴定该提取物为Ⅲ型前胶原。 相似文献
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家兔肝脏LRP蛋白的分离纯化与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
利用家兔LRP蛋白聚集形成蛋白复合物的性质,首先通过两次蔗糖密度梯度离心从家兔肝脏中分离得到LRP粗提液,再利用分子大小差异,使用Sephacryl-1000分子筛层析纯化,SDS-PAGE银染结果显示最终得到了单一电泳条带的家兔LRP蛋白.最后使用LRP单克隆抗体的Western blotting鉴定结果正确. 相似文献
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以蚯蚓为原材料提取纯化了GSH-Px,通过比较超声波提取法、组织匀浆法和闪式提取法,得出闪式提取法提取效果最佳.通过正交实验优选得到蚯蚓GSH-Px的最佳闪式提取条件为:料液比1:6(m/V)、提取液pH值8.0、提取时间1min.在最佳条件下锝到的粗提液经硫酸铵沉淀、选择性酸碱变性、DEAE-cellulose和Sephadex-G100柱层析,最终得到纯化的GSH-Px,比活达到157.08 U/mg,活性回收率达到12.32%.产物在SDS-PAGE上为单一条带,其亚基分子量约为26 kD. 相似文献