冬虫夏草多糖的研究进展

对近几年来有关冬虫夏草菌丝体中提取出的虫草多糖诸方面研究工作,如提取工艺、多糖组成、药理功能等作了论述。     

冬虫夏草培养及菌丝多糖的提取纯化研究初报

本文对虫草培养条件包括营养、温度、水份等以及多糖的提取工艺进行了研究,采取二级培养后菌丝提取多糖。生产工艺简便。     

北冬虫夏草液体发酵产胞外多糖发酵条件的研究

目的:采用液体发酵生产北冬虫夏草胞外多糖。方法:对北冬虫夏草液体发酵产胞外多糖的影响因素如碳源、氮源以及起始pH值、培养温度、摇床转速、接种量、发酵周期等发酵条件进行研究。结果:最佳发酵条件为:玉米淀粉4%、硫酸铵0.28%、磷酸二氢钾0.05%、七水硫酸镁0.05%、初始pH值为7.0、接种量10%、培养温度23℃、转速150r/min,胞外多糖的产量最高达到41.271mg/100mL。结论:利用液体发酵生产胞外多糖,可有效地缩短生产周期。     

冬虫夏草活性成分研究进展

本文系统综述了冬虫夏草Cordyceps sinensis的主要化学组成和药理学作用研究进展,重点对冬虫夏草多糖、核苷、肽类和甾醇的研究成果进行了总结,同时也针对有关冬虫夏草的一些问题进行了客观评述,为深入研究其有效成分与虫草相关新药物研发提供了依据和思路.     

以松毛虫为基质培养的冬虫夏草菌丝体中多糖的提取研究

研究了不同方法对冬虫夏草发酵菌丝体（以枯叶蛾科昆虫马尾松毛虫为基质发酵所得）中多糖提取的影响。结果表明,采用微波辅助水提法所得多糖的产率最高,影响提取的关键因素为液料比、微波提取时间、微波功率;采用Box-Behnken设计及响应面分析法对这3个因素进行优化,并通过回归拟合,建立了预测虫草多糖提取的多项式模型Y=6.87+0.058A+0.085B+0.075C+0.032AB+0.046AC+0.069BC-0.16A²-0.37B²-0.11C²。经响应面最优化分析,获得冬虫夏草发酵菌丝体中多糖的最优提取工艺参数为：液料比（mL/g）6.3:1、微波功率520W、微波提取时间326s,此工艺提取验证后的提取率达到6.76%。     

北冬虫夏草菌丝体片段诱变育种

目的：通过诱变育种提高北冬虫夏草菌种虫草多糖的含量。方法：对北冬虫夏草子实体进行组织分离,制备菌种,以此作为出发菌株,利用紫外线、微波及其二者结合分别对出发菌株进行诱变,并以其多糖含量为试验指标,探究北冬虫夏草菌丝体片段的诱变育种。结果：通过复合诱变（紫外40s、微波5s,生长正常）的菌株,经测定其多糖含量比对照菌株高17%。结论：通过对北冬虫夏草菌丝体片段进行诱变,找到多糖含量显著提高的菌株是可行的。     

植物多糖与免疫

综述了从自然界分离出来的植物多糖的研究进展和发展前景。讨论了从低等植物到高等植物所含多糖的免疫调节特性和作用以及它们的应用。     

黄芪多糖的分离及其免疫活性的研究

本文报道了黄芪多糖的分离纯化方法、理化性质、组成并进行免疫作用的研究,黄芪水提,经732(H~+)树脂初步纯化,得粗多糖,再经超滤,Sephadex G-150,透析等方法进一步纯化,得白色粉末状多糖M wt:37500。证明为α-糖甙键连接,水解多糖检出葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖,克分子比为:葡萄糖:半乳糖:阿拉伯糖=1:0.95:0.70。体外试验结果表明:(1)黄芪多糖可刺激小鼠脾细胞增殖,但与ConA联合刺激脾细胞时,未见有协同作用;(2)未见黄芪多糖有诱生脾细胞IL-2的作用;(3)黄芪多糖和IL-2均能增加人体LAK细胞活性,且两者合用,效果更佳,体内试验结果表明:(1)黄芪多糖可促使小鼠外周血白细胞数量增加,并且能完全纠正环磷酰胺引起的白细胞数量下降;(2)黄芪多糖对体内淋转无明显促进作用,但对CY所致免疫功能低下有一定的纠正作用;(3)黄芪多糖可增强NK细胞活性,并可完全纠正CY引起的免疫功能低下;(4)黄芪多糖可促进1g G的产生,与PWM无协同作用。     

人工冬虫夏草的氨基酸含量及其营养价值评价

目的为明确人工和野生冬虫夏草在氨基酸方面的差异,并为进一步开发利用人工冬虫夏草提供理论依据,对室内全人工培殖冬虫夏草和产自四川康定的野生冬虫夏草的氨基酸营养价值进行分析评价。方法用日立L-8800型全自动分析仪检测氨基酸含量并根据FAO/WHO的氨基酸评分标准模式和鸡蛋蛋白模式进行氨基酸营养价值评价。结果人工冬虫夏草氨基酸种类齐全,其全草氨基酸总量高于产自康定的野生冬虫夏草;其全草的鲜味氨基酸高于产自康定的野生冬虫夏草;其全草必需氨基酸总量低于产自康定的野生冬虫夏草。人工冬虫夏草必需氨基酸与氨基酸总量的比值高于WHO/FAO评分模式而低于鸡蛋蛋白模式。结论人工冬虫夏草氨基酸不仅种类组成合理,而且具有较高的营养价值。这一结果为人工冬虫夏草的进一步开发利用提供了理论基础。     

冬虫夏草菌侵染及寄生阶段的生长发育研究

冬虫夏草菌侵染进入寄主幼虫血体腔后,断裂形成长梭形的菌体。菌体以顶端出芽的方式增殖,分隔分化,互相质配。质配菌体生长出菌丝充满寄主幼虫血体腔,使幼虫死亡并形成僵虫形的菌核,菌核萌生子座即形成冬虫夏草。     

冬虫夏草培养子实体ITS,5.8S的分析及系统发育研究

对野生冬虫夏草的人工培养子实体的ITS1,ITS2和5.8S间区序列进行了克隆,并结合已有的序列对ITS1,ITS2和5.8S进行了系统发育分析。结果表明,人工培养子实体与中华被毛孢(Hirsutella sinensis L95DBM-1)具有96%的同源性,在NJ邻接树上形成明显的一支,与虫草属其它类群种间具有明显差异,表明分离培养的虫草子实体为中华被毛孢。遗传距离分析结果显示,培养虫草序列与已知虫草在种内也存在一定差异,可能暗示虫草种群在不同区域具有一定的遗传分化。     

猫爪草多糖对小鼠腹腔巨噬细胞活力的调节作用

此次研究旨在探讨猫爪草多糖对体外培养的正常状态下的原代小鼠腹腔巨噬细胞活性的调节作用,以及小鼠腹腔巨噬细胞在体外培养条件下的活力变化情况。以原代培养的小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,设对照组(加入100μL DMEM培养基)和实验组(分别加入25μg/mL, 50μg/mL, 100μg/mL, 200μg/mL,400μg/mL的猫爪草多糖),分别采用噻唑蓝(MTT)比色法、CCK-8法、乳酸脱氢酶释放法和中性红吞噬实验检测不同浓度的猫爪草多糖对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞活力的调节作用;同时设置24 h、36 h、48 h、60 h和72 h的不同培养时间,观察在体外培养条件下,小鼠腹腔巨噬细胞活力的变化情况。结果表明:与对照组相比,不同浓度的猫爪草多糖均能增强小鼠腹腔巨噬细胞的活力,且猫爪草多糖浓度在100~400μg/mL的细胞活力极显著增强(p<0.01)。此外,各处理组的巨噬细胞在体外培养24~72 h不更换培养液的条件下,48 h处活性最佳。体外培养条件下,一定浓度的猫爪草多糖可以激活小鼠腹腔巨噬细胞,通过猫爪草多糖激活巨噬细胞,可能是猫爪草发挥提升机体免疫力的作用机制之一。此外,体外培养的巨噬细胞虽能存活长达一个月,但仍有一个最佳活力时间。     

银耳碱提多糖的纯化、化学表征及其抗氧化作用的研究(英文)

研究银耳孢子发酵物中的多糖类化学成分,并探讨了分离得到的一个多糖组分的抗氧化活性。银耳孢子发酵粉用热水煮提除去水溶性组分后,再采用0.5 mol.L-1的氢氧化钠溶液提取,Sevage法除蛋白,用乙醇沉淀得到粗多糖。粗多糖经DEAE-32-纤维素和Sephadex G-200分离纯化得到分布均一的多糖TFBP-A。糖组成分析显示,TFBP-A单糖组成为:甘露糖:半乳糖:葡萄糖,摩尔比为90∶5∶5;HPGPC测定TFBP-A分子量为58962。TFBP-A的抗氧化活性实验显示:在H2O2引起的红细胞溶血试验中,以蒸馏水抑制率为0%计算,TFBP-A抑制率为78.6%;在超氧阴离子自由基的清除作用实验中,TFBP-A最高抑制率为53%;在清除羟基自由基实验中,TFBP-A的EC50为0.191 mg.mL-1。从银耳孢子发酵物中用碱液提取得到的多糖组分TFBP-A为酸性杂多糖,重均分子量为58962,且具有一定的抗氧化活性。     

不同产地冬虫夏草及不同厂家虫草发酵菌丝的可溶性蛋白比较

冬虫夏草〔Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｓｉｎｅｎｓｉｓ (Ｂｅｒｋ .)Ｓａｃｃ.〕为我国滋补名贵出口中药 ,主产于青海、西藏、四川、云南、甘肃等省。因野生资源有限 ,严重脱销。为解决药源问题 ,近年来我国已开发出了虫草菌丝体发酵产品[1] 。由于虫草系真菌寄生在昆虫体上的复合体     

夏枯草多糖的分离纯化与抗氧化活性研究

对夏枯草多糖(PP2)的分离纯化方法作了探讨,通过正交试验,筛选出多糖提取条件的最佳组合。采用纸层析、琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法对多糖纯度进行鉴定。通过气相色谱仪对多糖的单糖组成进行分析。通过体外化学模拟,研究夏枯草多糖的抗氧化性。实验表明,夏枯草多糖对O2-.、.OH二种自由基及亚硝酸根离子具有一定的清除能力,对R.自由基的清除较弱,具有防止膜脂质过氧化,减少红细胞溶血和降低脂质过氧化产物丙二醛的生成量的作用。     

伤寒Vi多糖疫苗大规模生产中的工艺改进

对伤寒Ｖｉ多糖疫苗大规模生产进行了三项工艺改进：１．将液体菌种由静止期接种大罐改为对数生长期接种大罐,大罐培养时间可缩短３－４小时。２．２％（Ｖ／Ｖ）甲醛溶液杀菌时间由５℃６小时改为２０－２５℃２小时,能保证杀菌完全。３．用冷酚精制Ｖｉ多糖由常规法改为乳化法,可减少精制次数及冷酚用量,提高多糖收率     

龙须菜多糖脱硫酸化及免疫活性研究

考察了Miller等和Nagasawa等报道的脱硫酸方法对龙须菜多糖硫酸基脱除效果,并比较了脱硫酸前后多糖的免疫活性变化。实验结果显示,采用Miller等报道的方法时,以草酸作为催化剂对硫酸基脱除效果最好,脱除率达到71.4%,远好于其他种类酸催化,但多糖回收率却只有36.4%;采用Nagasawa等报道的方法时,向二甲基亚砜溶液中加入10%甲醇比加入2%吡啶或2%吡啶+2%三甲基氯硅烷具有更好的脱硫酸基效果,硫酸基脱除率达到72.9%,回收率48.9%,是本次实验中效果最好的。免疫活性实验表明,当降低龙须菜多糖硫酸基含量时,免疫活性相应降低。     

半枝莲多糖SPS_4组分的纯化性质及分析

半枝莲经热水提取,除蛋白质,乙醇沉淀,DEAE-纤维素及Sephadex G-150柱层析分离得到一种白色粉状多糖SPS_4。经琼脂糖电泳、玻璃纤维纸电泳及醋酸纤维素薄膜,凝胶柱层析证明SPS_4为均一性多糖。经进行完全酸水解后纸层析及气相层析分析确定糖基的组成及摩尔组成比为鼠李糖:岩藻糖:阿拉伯糖:木糖:甘露糖:葡萄糖:牛乳糖=0.22:0.26:1.0:0.09:0.51:1.82:2.09。平均分子量为10000。体外实验表明,多糖SPS_4对S-180肉瘤细胞及腹水肝癌细胞均有一定的抑制作用。