不同剂量的He—Ne激光对Raji细胞表面电荷的影响

本文以离体培养的Ｒａｊｉ细胞为材料,采用细胞电泳技术检测了不同剂量的Ｈｅ－Ｎｅ激光对Ｒａｊｉ细胞表面电荷的影响,发现低于或者等于０．５Ｊ／ｃｍ＾２的Ｈｅ－Ｎｅ激光能量对膜表面电荷无明显影响（Ｐ〉０．０５）;大于此剂量的Ｈｅ－Ｎｅ激光可使膜表面电荷（绝对值）下降,即负电荷数减小,ＥＰＭ下降（Ｐ〈０．０５）。     

不同离子对原生质体表面电荷和融合的影响

原生质体融合的一个先决条件是不同亲本的原生质体首先发生粘连。有些工作证明原生质体的表面带有负电荷,其电位从负十几毫伏到负五十几毫伏不等。这一特性无疑地会影响原生质体的粘连和融合。此外也有一些结果表明,CaCl_2、NaNO_3、多聚氨基酸、某些蛋白质或磷酯可以降低原生质体的表面负电位;甚至还能将负电荷转变为正电荷。如果这些物质对原生质体的正常功能没有损害,则将有助于提高原生质体的融合率。     

不同表面电荷的阳离子脂质体对人外周血单核细胞活化和细胞活性的影响

本文研究不同表面电荷的阳离子脂质体对人单核细胞活化和细胞活性的影响。将携带不同表面电荷的阳离子脂质体与人外周血单核细胞共育24h,然后采用流式细胞术和酶联免疫吸附法分别检测单核细胞表型、细胞活性以及细胞因子的分泌水平。实验结果显示,不同表面电荷的阳离子脂质体不同程度地诱导单核细胞活化,并表达共刺激分子CD86和分泌肿瘤坏死因子α。脂质体活化单核细胞的能力依赖于其表面电荷的强度,电荷过高或过低均可削弱其单核细胞活化作用。此外,阳离子脂质体对单核细胞具有一定的细胞毒性作用,并呈电荷依赖性。降低脂质体的表面电荷可显著降低其细胞毒性。因此,调整阳离子脂质体的表面电荷对于增强脂质体的免疫促进作用并减轻其副反应具有重要意义。     

表面电荷对阳离子基因载体的影响

阳离子基因载体表面带有大量正电荷,由于许多DNA和细胞膜表面带负电荷,因此阳离子基因载体表面电荷有利于提高结合DNA的效率,纳米粒子与细胞膜的吸附也受粒子表面电荷的影响。同时,其表面电荷也是产生细胞毒性的主要原因之一,因此揭示细胞毒性及其作用机制有利于开发出更安全高效的基因递送载体。本文综述了阳离子基因载体表面电荷对DNA结合能力、细胞摄入、转染效率以及细胞毒性及其作用机制的影响。     

氢分子对宫颈癌细胞HeLa的影响

氢分子对多种疾病具有良好的治疗或改善效果,并且使用简便无副作用,多项实验结果也证明氢分子对肿瘤的防治具有良好的效果。从细胞增殖、细胞成瘤、细胞活性、细胞周期和凋亡、细胞转移侵袭等方面研究了氢分子对宫颈癌细胞HeLa的作用效果,结果显示：克隆球实验中,加入氢分子后,HeLa细胞集落数显著降低,集落的直径也明显减小。平板克隆形成中,加入氢分子后,细胞克隆的数量和直径均显著降低。细胞活性实验显示,氢分子对HeLa细胞活性具有明显抑制效果,对细胞内中间丝波形蛋白的表达具有一定的抑制作用。此外,氢分子对HeLa细胞周期的影响显著,且具有促凋亡的作用和抑制细胞迁移与浸润的效果。研究结果表明,氢分子抑制了细胞波形蛋白的表达,降低了HeLa细胞的增殖速率,同时抑制了细胞侵袭及迁移的能力,为氢分子对宫颈癌的防治提供了一定的实验基础。     

高温诱导HeLa细胞凋亡的相关机理的研究

目的研究不同高温作用后HeLa细胞bcl-2、bax和p53表达的变化.方法人子宫颈癌细胞系(HeLa细胞)分为37℃、40℃、43℃三个温度组,每组经1h相应的温度处理后,以免疫组织化学的方法检测bcl-2、bax和p53的表达并经图象分析仪检测反应产物的光密度并进行统计分析.结果 40℃、43℃组的Bcl-2的平均光密度明显低于37℃组,而43℃组Bax的平均光密度明显高于37℃组和40℃组,P53随着温度的升高平均光密度也随之升高.形态学观察:43℃组均见明显的细胞凋亡.结论温和性高温使HeLa细胞周期受阻,P53表达上调诱导bax基因表达、抑制bcl-2基因的表达,从而导致细胞凋亡.     

环境的pH影响不同电荷离子进入细胞的讨论

在著植物生理简明教程(中译本上册267页)中,曾叙述到“酸度之加强能促进对陰离子的吸收,鹼度之加强能促进阳离子的吸收”。这个问题我们曾经讨论过很多次,也查阅过一些有关的资料,並请教过校外的同志们,均未得到明确的解答。但是每学期课程讲到这里或同学们看书时都会提出这一问题来,似乎成了一个悬而未决的老问题。我曾在组内提出过一种解释,这种解释纯粹是从蛋白质分子的化学特性,首先是它的两性上去推测,经过大家的讨论和补充,就暂时这样来解释。但当时並未在有关生理书籍中找到依据。去年暑假在北京讨论会中也提出了这一个老问题,並介绍过我们是如何来解     

不同的基质表面形貌对细胞生长行为的影响

在细胞体外培养中,基质的表面形貌特征是影响细胞行为的一个重要因素。在微米尺度范围内本文研究了几种不同几何轮廓的脊／沟状形貌结构和不同间距的柱状体对鼠C6神经胶质瘤细胞生长的影响。脊／沟状形貌结构诱导细胞趋向生长,不同的几何轮廓对细胞行为的影响存在差异。柱状体间距影响细胞的贴壁和铺展,进而影响细胞的生长行为;大的间距不利于细胞生长,当间距很小时,柱状体截面的几何轮廓影响细胞的行为。     

阿司咪唑对宫颈癌细胞HeLa自噬的影响

该研究利用蛋白质免疫印迹法(Western blot)、稳定表达m Cherry-EGFP-LC3B(microtubuleassociated proteins 1A/1B light chain 3B,LC3)自噬双标荧光细胞、mt-Keima荧光探针活细胞扫描技术在人宫颈癌细胞He La中检测了多种自噬相关标志物,探究了阿司咪唑(astemizole,AST)对He La细胞自噬的影响。结果表明,阿司咪唑在He La细胞中引起自噬标志蛋白质LC3-II与SQSTM1/p62的显著累积,并存在剂量和时间依赖性效应;阿司咪唑导致He La细胞存活率显著降低;用自噬抑制剂Bafilomycin A1(Baf-A1)阻断自噬流(autophagic flux)后,再加入阿司咪唑不能促进LC3-II进一步累积;阿司咪唑处理细胞后自噬体与自噬溶酶体的数量均显著增加;此外,阿司咪唑显著抑制了线粒体氧化磷酸化解偶联剂羰基氰化物间氯苯腙(carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,CCCP)导致的线粒体标志蛋白质TOMM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20)的降解,其线粒体自噬水平显著低于对照组。以上结果证明了阿司咪唑有抑制自噬流的作用,导致损伤的线粒体不能被顺利降解,并且提示该作用可能是通过抑制溶酶体功能实现的。     

IER5基因对HeLa细胞辐射敏感性的影响

为寻找放射敏感性基因,采用基因芯片技术筛选出辐射可诱导表达mRNA上调的基因,其中就有IER5．为探索IER5基因的生物学功能及其在宫颈癌放疗中的作用,采用RNA干扰技术构建IER5基因表达抑制的质粒载体并构建IER5-siRNA-HeLa细胞系．对该细胞系与HeLa细胞进行辐射,旨在了解IER5-siRNA-HeLa的细胞生长曲线、细胞周期等实验参数的变化,揭示了IER5基因在辐射诱导中的生物学功能．实验发现,IER5基因表达抑制可提高细胞分裂进入S期与G2-M期的比例,促进细胞分裂,促进细胞生长,提高细胞对辐射的拮抗性,同时发现IER5-siRNA-HeLa细胞在尺寸上大于HeLa细胞．研究表明,IER5基因表达抑制可促使细胞受辐射后发生S期与G2-M期的阻滞,IER5参与辐射细胞周期的调控,对临床宫颈癌放疗有一定的潜在应用价值．     

不同刺激对小鼠B细胞表面IgD表达的影响

本文通过细胞流式计（ＦＡＣＳ）技术,利用单克隆抗体抗－ＩｇＤ［Ｉｇ（５ｇ（５ａ）７．２］研究了膜表面ＩｇＤ（ｓＩｇＤ）在新制备的小鼠Ｂ细胞上的表达。并通过用不同的丝裂原刺激脾脏休止Ｂ细胞,研究了不同刺激对Ｂ细胞ｓＩｇＤ表达的调节,发现脾脏Ｂ细胞形成两个主要细胞群,高浮力密度小Ｂ细胞高度表达ｓＩｇＤ的细胞主要是低浮力密度大Ｂ细胞。无论用细菌脂多糖（ＬＰＳ）或抗－ＩｇＭ和白细胞介素－６（ＩＬ－６）刺激     

细胞表面电荷的光镊测量方法及应用研究

分析了细胞表面电荷测量的意义、方法和现状,提出采用光镊技术测量细胞表面电荷的方法,介绍了实现该方法的系统构成和检测原理。在电场力的作用下,处于悬浮液中的带电细胞产生电泳。在外加电场力为零时利用激光的陷阱力捕获该细胞,然后施加并逐渐加大外加电场力,直到细胞刚好逃脱光阱力的束缚时的瞬间光阱力,理论上就是细胞所带电荷在电场中产生的库仑力与粘滞力之和。     

不同序贯的索拉非尼与化疗药物联用对人肝癌细胞Bel一7402的增殖抑制作用

应用MTT法检测了靶向性药物索拉非尼（Sorafenib）分别与阿霉素（ADM）、氟尿嘧啶（5一FU）、顺铂（DDP）和紫杉醇（PTX）等4种化疗药物按照不同给药序贯联合作用对肝癌细胞Bel-7402增殖的影响。结果表明,索拉非尼与4种化疗药物联用对Bel-7402细胞增殖的抑制作用效果均要好于单独用药,对细胞的Ic,。明显低于单独用药。联合用药效果受到给药序贯的影响,索拉非尼先于化疗药物给药,cI值（除与紫杉醇联用）均大于1,表现为拮抗效应;索拉非尼后于化疗药物给药,cI值均小于1,表现为明显的协同效应。研究结果可供肝癌f临床治疗参考,有助于lI缶床降低用药剂量,减轻药物毒副作用。     

艾氏腹水瘤耐药瘤细胞的表面电荷和浸润

细胞电泳法测知细胞表面带有电荷,结合化学或酶学方法证明:表面电荷是由带负电荷的羧基、磷酸等基团和带正电荷的氨基、硫氢基等基团组成的。不同种的细胞或不同状态下的同一种细胞,它们的表面电荷密度是不同的。细胞表面电荷密度的改变可能与细胞表面的某些行为有关。例如,去掉带有羧基的神经氨酸,细胞的十多种功能发生改变(Winzler,1970)。这固然可能反映细胞表面的神经氨酸具有多种功能,亦说明对表面电荷的生物学功能尚不够了解。我们曾看到艾氏腹水瘤细胞获得耐药性后,细胞表面的电荷密度发生改变,而且,这种改变并不随耐药性的消失而恢复(顾国彦和刘黎,1965)。本     

抑制Rent1表达对HeLa细胞黏附能力的影响

Rent1是无义介导的mRNA降解(NMD)通路中的关键因子之一,通过引导含有提前出现的终止密码子(PTC)的mRNA至P-body,从而引发mRNA降解.为了进一步研究Rent1的生理功能,应用RNA干扰(RNAi)技术抑制Rent1的表达.试验发现,抑制Rent1的表达能够增强HeLa细胞对纤维粘连蛋白的黏附能力,另外,抑制Rent1的表达能够增加整合素基因ITGA2、ITGA3、ITGA6、ITGB5的表达.     

蛋白激酶A抑制剂对HeLa细胞S期进程的影响

以同步化的HeLa细胞为实验材料, 研究了蛋白激酶A(PKA)抑制剂对HeLa细胞S期进程的影响及其作用的分子机理.通过TdR双阻断法, 获得了同步化的S期细胞, ³H-TdR掺入实验表明PKA抑制剂typeⅢ(80 mg/L)明显提高了S期³H-TdR的掺入水平, 提示了PKA在S期进程中起阻抑作用.进一步实验表明,在PKA抑制剂typeⅢ作用下胸苷激酶(TK)活性和PCNA蛋白水平均有所提高,同时明显促进了CyclinA蛋白的表达, 并抑制了周期负调因子p21蛋白的水平,但对CDK2表达几乎无影响.结果表明, PKA可通过作用于PCNA和引擎分子CyclinA的水平和通过影响p21的表达负调于S期进程. 这可能是PKA负调HeLa细胞S期进程的分子机理之一.     

过表达小鼠UNCV蛋白质对HeLa细胞凋亡的影响

目的研究小鼠UNCV蛋白质对HeLa细胞凋亡的影响。方法将BALB/c小鼠Uncv基因重组质粒转染HeLa细胞,筛选出稳定过表达UNCV蛋白质的HeLa细胞株。通过细胞计数法和流式细胞术,检测过表达UNCV蛋白质对血清饥饿和阿霉素诱导的HeLa细胞凋亡的影响。结果获得稳定正确过表达UNCV蛋白质的HeLa细胞株。细胞计数和流式细胞术结果显示过表达UNCV蛋白质对血清饥饿诱导的HeLa细胞凋亡有抑制作用,对于阿霉素诱导的HeLa细胞凋亡没有显著影响。结论过表达UNCV蛋白质对血清饥饿诱导的HeLa细胞凋亡有抑制作用。     

蛋白激酶A抑制剂对HeLa细胞S期进程的影响

以同步化的HeLa细胞为实验材料,研究了蛋白激酶A(PKA)抑制剂对HeLa细胞S期进程的影响及其作用的分子机理.通过TdR双阻断法,获得了同步化的S期细胞,3H-TdR掺入实验表明PKA抑制剂typeⅢ(80mg/L)明显提高了S期3H-TdR的掺入水平,提示了PKA在S期进程中起阻抑作用.进一步实验表明,在PKA抑制剂typeⅢ作用下胸苷激酶(TK)活性和PCNA蛋白水平均有所提高,同时明显促进了CyclinA蛋白的表达,并抑制了周期负调因子p21蛋白的水平,但对CDK2表达几乎无影响.结果表明,PKA可通过作用于PCNA和引擎分子CyclinA的水平和通过影响p21的表达负调于S期进程.这可能是PKA负调HeLa细胞S期进程的分子机理之一.     

志贺菌对HeLa细胞侵袭力的研究

通过使用噬斑形成试验、透射电镜及检测志贺菌蛋白表达等方法,研究志贺菌对Hela细胞的侵袭能力。研究发现:37℃培养条件下,胞质内出现成堆的志贺菌;30℃培养条件下,细菌主要分布在细胞外。SDS-PAGE显示,与30℃培养条件相比,在37℃培养下,志贺菌表达蛋白质的种类和数量明显增加。噬斑形成发现,12株福氏志贺菌强毒株,有9株噬斑数>1000个／ml,而2株弱毒株噬斑数则在50个／ml以下。透射电镜证实了志贺菌对细胞的黏附、侵入和释放过程。结果表明:志贺菌对细胞的侵袭能力受温度的影响;不同志贺菌流行株对细胞的侵袭力存在着差异:实验也显示,应用HeLa细胞研究志贺菌侵袭力是一种简便易行且价廉的方法。     

婴儿脊灰母传抗体对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗不同序贯免疫接种程序效果的影响

目的探讨婴儿脊髓灰质炎(简称脊灰)母传抗体对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin inactivated poliovirus vaccine,s IPV)与不同剂型脊髓灰质炎减毒活疫苗(oral poliovirus vaccine,OPV)采用不同序贯免疫程序接种效果的影响。方法选取柳州市600名2月龄无脊髓灰质炎疫苗免疫史的常住健康婴儿,分为6个序贯免疫组,其中1剂s IPV+2剂b OPV 2组:s IPV+2b OPV(糖丸)组、s IPV+2b OPV(液体)组;2剂s IPV+1剂b OPV 2组:2s IPV+b OPV(糖丸)组、2s IPV+b OPV(液体)组;2剂s IPV+1剂t OPV 2组:2s IPV+t OPV(糖丸)组,2s IPV+t OPV(液体)组。每组100人。按照0、28、56 d程序,分别在婴儿2、3、4月龄时接种相应疫苗。检测免前、全程免后28 d血清中脊灰中和抗体滴度,计算阳转率及GMT。结果 6个序贯免疫组免前各项指标分布均匀,各型脊灰抗体阳性率、抗体水平及分布均无明显差异。共有518例免前和免后配对血清抗体检测结果的研究对象进入免疫原性分析。s IPV+2b OPV组与2s IPV+b OPV组Ⅱ型抗体、2s IPV+t OPV(糖丸)组Ⅲ型抗体免前阴性和免前阳性者接种疫苗后阳转率差异均有统计学意义;s IPV+2b OPV(糖丸)组Ⅲ型抗体,2s IPV+b OPV(糖丸)组与2s IPV+b OPV(液体)组Ⅱ型抗体,2s IPV+t OPV(糖丸)组Ⅰ、Ⅱ型抗体的免前阳性与免前阴性者接种疫苗后的GMT差异均有统计学意义;2s IPV+t OPV(糖丸)Ⅰ型抗体组与2s IPV+t OPV(液体)Ⅱ型抗体组中,免前8~32、≥32两种滴度水平的免后GMT差异均有统计学意义。结论脊灰疫苗序贯免疫效果受脊灰母传抗体干扰。