人参细胞培养物中水溶性多糖的研究——分离,纯化及分子量测定

对于我国的传统珍贵药材人参(Panax ginseng)中的人参多糖的研究报道已有不少,而且已得到了应用。我们曾对人参细胞培养物中水溶性多糖(PCS)的提取、理化性质及其组成和药理进行了初步的研究,结果表明与人参多糖有许多相似之处。本文对 PCS 进行了分离、纯化及分子量测定的研究。将提取获得的 PCS 用 Sevag 法除去其中的蛋白之后,通过 Sephadex G-100柱进行分离,经洗脱,同时以蒽酮比色法鉴定多糖部位,将 PCS 分离得到了 PC_1和 PC_2。     

植物多糖对神经细胞的保护作用

多糖在自然界中含量丰富,通过糖苷键连接成醛糖或酮糖。多糖是生命活动中重要的营养物质之一,具有许多非常重要且特殊的理化特性和生理活性,如毒性小、较安全、功能多样等。已有研究表明,从植物中提取的水溶性多糖有极其广泛的药理活性,如增强免疫功能、降血糖、调节血脂、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老作用等。新近研究发现,人参、枸杞、黄芪、灵芝等水溶性多糖对神经细胞有保护作用。我们简要综述了植物多糖对神经细胞保护作用的研究进展,以期为多糖作为老年神经性疾病的补充与替代治疗药物提供理论依据。     

人参细胞悬浮培养的研究 Ⅰ、悬浮培养细胞的形态结构和繁殖

人参是一种珍贵的药材,为人所知至少有四千年的历史。对人参的研究,由来已久。然而研究人参的组织培养只是近十几年的事。罗士韦(1964)、朱蔚华等(1978)先后诱导出了人参的愈伤组织并进行了继代培养,德国(1972)、日本(1973)已有用组织培养法生产与天然人参相同成分的皂甙和甙元的专利,丁家宜等(1979)报道了人参细胞的液体培养及粗皂甙含量。但是,在悬浮培养条件下人参细胞的形态结构和繁殖方式的研究还未见报道。     

基于髓源性抑制细胞的食药用菌多糖抗肿瘤免疫作用机制

髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)是一种异质性的免疫调节细胞。在癌症机体中,MDSCs是主要的免疫抑制细胞,通过多种途径诱导T淋巴细胞衰竭和凋亡,促进肿瘤细胞逃逸,从而导致肿瘤不受控制地生长,是癌症治疗的主要障碍。目前,MDSCs是癌症药物研究的热点和关键靶点。近年来,研究报道显示多糖可下调MDSCs在癌症患者及肿瘤实验动物体内数量和比例,并诱导免疫抑制功能丧失。食药用菌多糖是天然多糖的主要来源,可以通过多种途径激活肿瘤免疫应答,其抑制MDSCs功能的研究报道逐年增多,目前研究主要集中在香菇多糖、灵芝多糖等部分种类。因此,本文简要描述髓源性抑制细胞在癌症中的免疫抑制功能,然后详细地综述食药用菌多糖对髓源性抑制细胞作用的研究进展,以期为食药用菌多糖在肿瘤免疫药物开发及辅助增强(如免疫检查点抑制剂)等免疫治疗提供新思路。     

人参皂甙对大鼠海马缺氧损伤的保护作用

人参主要的药理作用之一是对中枢神经系统的影响。人参皂甙是人参生物活性的重要成分。已有报道,人参皂甙对培养的大鼠大脑皮质神经元轴突的伸展具有促进作用。对培养的鸡胚背根节的神经元具有增加生长因子的作用。人参皂甙还能影响突触体对传递介质的摄取。也有人报道,人参皂甙可增加小鼠脑内RNA含量。以上报道表明,人参皂甙对中枢神经系统功能有活化作用,人参皂甙还能延长减压低氧动物的活存时间。本实     

培养基中有机物组份对人参细胞生长及其皂甙,多糖含量的影响

本文研究了培养基中肌醇、烟酸、甘氨酸、维生素Ｂ＿６、维生素Ｂ＿１等有机物组份对人参细胞生长及其皂甙、多糖含量的影响。结果表明,只有维生素Ｂ＿１是人参细胞生长必需的,缺少其他有机物组份对其皂甙、多糖含量无不利影响。     

亮菌多糖对肿瘤免疫效应机制的研究

亮菌是一种从发光柳树朽木上的提取出来的一种菌,又称假蜜环菌。而亮菌多糖则是亮菌在生长代谢的过程中产生出来的一种物质,然而,很多相关报道称亮菌多糖对肿瘤具有一定的免疫作用,因此,文章针对亮菌多糖对肿瘤细胞的研究,通过具体的试验方法,应用一些现代生物技术、细胞生物学以及免疫学等知识,对亮菌多糖具有肿瘤免疫效应机制进行深入研究,从而能够为亮菌多糖在肿瘤免疫机制中的应用和研究提供一种理论参考。     

不同培养基质上球孢白僵菌孢子与菌丝多糖含量的变化

球孢白僵菌Beauveria bassiana(Balsamo)Vuellemin是重要的害虫生防真菌(Feng et al.,1994),其制剂在常温下长期储存是有效应用的技术瓶颈。由于菌体内源营养(如糖类)的积累是一个可控指标, 通过工艺调节内源营养积累可改善孢子的生理状态,有助于增强孢子贮存稳定性(冯明光和应盛华, 2002)。有关生防真菌孢子中糖类的研究多集中于单糖、双糖以及糖醇(Hallsworth&Magan,1994),多糖的报道仅见于芽生孢子内的糖原及其代谢的检测(Lane&Trinci,1991),不同基质对培养物多糖总量的影响还未见诸报道。本文简要报道在不同培养基质上培养的球孢白僵菌菌丝和孢子多糖的测定结果, 并就三种多糖提取方法进行了比较。     

人参毛状根生物合成熊果苷的分离与鉴定

熊果苷(arbutin),化学名称为对-羟基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷,能够竞争性抑制酪氨酸酶的活性从而抑制黑色素的形成,被国际公认为高效祛斑美白剂,是化妆品中理想的添加成分.人参(Panax ginseng C. A. Mey.)自古以来就是名贵药材,由于人参在栽培过程中存在着栽培困难、周期过长、地域限制等难题,人参的组织培养受到了广泛的重视.本实验室已建立了人参细胞大量培养体系[1]和人参毛状根培养体系[2],并把熊果苷与人参细胞配伍应用到化妆品生产中,产品深受广大消费者青睐.用植物培养物对外源底物进行生物转化,从而对其结构进行修饰,以获得更有意义的产物的研究报道很多[3～9],也是当今研究的热点.本实验室已对人参生物转化熊果苷的基本条件进行了初步探讨[10],本文在此基础上,对转化产物进行了分离鉴定.     

中国生漆化学成分研究

生漆作为天然高分子材料在我国应用已有6000多年的历史.其主要化学成分为漆酚、漆酶和漆多糖.提取分离并研究这些物质的化学组成、生物活性功能是多年来生漆化学研究的热点之一.总结了20多年来国内外关于漆酚、漆酶和漆多糖分离提取方法及漆多糖生物活性的最新研究进展.     

人参皂苷单体定向转化的生物催化及应用进展

人参是我国传统中药,药效显著、应用广泛。通过定向修饰与转化人参皂苷糖基可产生高抗癌活性稀有人参皂苷。传统化学法由于制备工艺极其复杂、成本过高,不能应用于临床,微生物及其酶系转化成为解决该瓶颈问题的最可行手段。有关全细胞催化、糖苷酶重组表达、固定化及其催化分子识别机制和溶剂工程的生物转化已有大量综述报道,但尚无在人参皂苷转化应用中的系统研究。文中通过对人参皂苷单体生物转化理论和应用研究最新进展的回顾,结合目前广泛采用的生物催化方法的讨论,系统梳理归纳了能够改善产物专一性、提高催化效率,且具有工业应用前景的人参皂苷单体定向转化方法。基于酶分子设计以及离子液体溶剂工程,对人参皂苷单体抗癌药物和食品、保健品市场的开发、规模化制备进行了展望。     

人参原生质体培养再生愈伤组织

人参原生质体培养未见报道成功。Harn(1974)曾用人参幼叶,幼根和上胚轴进行原生质体分离,但得到的数量很少,无法进行培养。本实验以人参培养细胞为材料,通过培养再生了愈伤组织。     

冬虫夏草培养及菌丝多糖的提取纯化研究初报

本文对虫草培养条件包括营养、温度、水份等以及多糖的提取工艺进行了研究,采取二级培养后菌丝提取多糖。生产工艺简便。     

冬虫夏草多糖的研究进展

对近几年来有关冬虫夏草菌丝体中提取出的虫草多糖诸方面研究工作,如提取工艺、多糖组成、药理功能等作了论述。     

青钱柳功能性多糖的研究现状及展望

青钱柳叶是一种古老茶饮,也是国家卫健委认定的新食品原料。青钱柳多糖是其主要活性成分之一,具有降血糖、降血脂、抗氧化、免疫调节等多种功能,在食品、医药和生物医学等领域应用市场潜力巨大。通过综述国内外相关研究文献报道,对青钱柳叶所含功能性多糖的提取工艺、结构特征、药理活性及开发应用的研究现状进行较系统的归纳和分析,并对青钱柳多糖未来研究方向作了展望,拟为开发高活性青钱柳多糖保健食品或药物提供理论依据及研究支撑。     

条斑紫菜粗多糖对淋巴细胞和支持细胞的增殖作用

目的:探讨条斑紫菜粗多糖的一些生物学功能,包括促进淋巴细胞增殖以及促进支持细胞生长的功能。方法:将原代培养的大鼠和小鼠脾淋巴细胞以及大鼠睾丸支持细胞分别接种于96孔板中,将不同浓度的条斑紫菜粗多糖(0.05、0.5、5、10mg/mL)加入培养,每种浓度设6个复孔,并设对照组孔。采用四氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖率。结果:条斑紫菜粗多糖能够显著地促进大鼠、小鼠脾淋巴细胞和大鼠睾丸支持细胞的增殖,增殖率随多糖浓度的提高而升高;当多糖浓度为10mg/mL时,增殖率分别为137.3%、149%和454.5%。结论:条斑紫菜粗多糖具有提高免疫力及促进生殖功能的作用,其对睾丸支持细胞的增殖作用目前还未见报道。     

大鼠脑内小胶质细胞神经营养素受体的表达

神经营养素在神经元的生长、发育中的重要作用已有许多报道,但对神经胶质细胞的作用及其作用机制却知之甚少。在本研究中,我们着重对体外培养的小胶质细胞所表达的神经营养素受体进行了分析。首先,利用酚-氯仿法提取了总的细胞RNA,然后通过特异引物采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增得到cDNA,再用琼脂糖凝胶电泳、DNA印迹法和免疫细胞化学染色法对神经营养素受体(Trks)进行了测定。实验结果表明:体外培养的大鼠脑小胶质细胞表达高亲和力神经营养素受体TrkA、TrkB和TrkC,以及低亲和力NGF受体LNGFRp75。因此推断,神经营养素对小胶质细胞的生理及调节作用可能是通过它们相应的受体(Trks和LNGFRp75)介导的。这些结果为进一步研究神经营养素在神经系统中的作用机制及小胶质细胞的生理功能提供了资料。     

羊肚菌多糖提取分离及生物活性研究进展*

羊肚菌(Morchella spp.)是一种珍稀食药用真菌,从羊肚菌中提取的多糖在抗癌、抗氧化、降血糖、降血脂及免疫调节等方面具有良好的生物活性,在食品、药品和保健品开发方面具有广阔的应用前景。羊肚菌多糖的有效提取是对其进行结构解析和生物活性研究的基础,不同的提取方式对羊肚菌多糖的结构和生物活性具有一定影响。羊肚菌多糖的结构特性如分子量、单糖组成、一级结构等,对其生物活性具有很大影响,因此研究羊肚菌多糖的结构对揭示其生物活性及作用机制具有重要意义。针对羊肚菌多糖进行综述,总结羊肚菌多糖提取分离、结构解析及生物活性的研究进展,分析羊肚菌多糖生物活性的作用机制,并对今后研究方向提出展望,以期为羊肚菌多糖的研究与开发提供理论基础。     

人参多糖对低温应激大鼠颗粒细胞与卵母细胞的调节

目的 应用体外细胞培养观察人参多糖对低温应激大鼠卵巢卵母细胞发育与颗粒细胞蛋白合成的影响,为研究人参多糖对低温应激大鼠卵巢功能的变化,提高机体耐寒能力提供科学实验解释.方法 培养Wistar大鼠卵巢卵母细胞与颗粒细胞,设37℃对照组,0、-15、-25与-35℃低温应激实验组,观察细胞计数.采用放免分析法测定3H-TdR与3H-Leu CPM值.结果 带卵泡卵母细胞低温应激实验组与对照组比较,生发泡破裂百分率57.14%/36.70%,人参多糖组68.97%/41.13%;带卵丘卵母细胞低温应激实验组与对照组比较,生发泡破裂百分率75.71%/41.14%,人参多糖组71.21%/39.28%,P＜0.05.3H-TdR掺入量人参多糖为参照与对照组比较,人参多糖实验组为1279±191与913±212,低温人参多糖实验组均值为651±211与499±116.低温应激为参照与对照组比较低温实验组均值为499±116与913±212,低温人参多糖实验组均值为651±211与1279±191,P＜0.05.3H-Leu掺入量人参多糖为参照与对照组比较,人参多糖实验组为889±153与617±119,低温人参多糖实验组均值为431±1144与300±119.低温应激为参照与对照组比较低温实验组均值为300±119与617±119,低温人参多糖实验组均值为431±144与889±153,P＜0.05.结论 低温应激抑制卵母细胞发育与颗粒细胞蛋白合成,人参多糖能促进卵母细胞成熟,能使低温应激大鼠卵巢颗粒细胞蛋白合成增加,而对带卵丘的卵母细胞无作用.     

利用氯化苄提取适于分子生物学分析的真菌DNA

随着生物技术的飞速发展,更加需要简便、快速地提取高质量的DNA。以往报导的提取真菌DNA的方法大都采用液氮研磨或酶解破坏细胞壁和膜的方式,从而导致繁琐、复杂和费时的提取过程。根据氯化苄在弱碱条件下与多糖上的羟基反应形成醚从而使多糖长链断裂的事实,我们发展了一种全新的真菌DNA提取方法,该方法使氯化苄在pH9.0时与细胞壁多糖作用,破坏细胞壁,基因组DNA因而得以从细胞中释放出来。新方法具有简便、快速、价廉的优点,得到的DNA蛋白质污染少、质量较高、产量稳定。对该法提取的DNA作进一步的分子生物学分析,如限制性内切酶酶解、RFLP分析、RAPD扩增,都取得了令人满意的结果。利用氯化苄提取真菌DNA的研究,迄今在国际、国内均尚未见报道。