肝素钠粗品工业化高效生产工艺的探讨

本文从原料的选用、工艺的综合应用和后产品的处理等方面对肝素钠粗品的生产进行了探讨。结果显示,二次盐解可提高收率16．5％,二次吸附提高19．3％,三次洗脱增加13．0％,4℃沉淀和冷冻干燥分别减少活性损失1．4％和1．0％,在沉淀剂YNB99－1和Na2SO3的保护下,后产品肝素钠的酸化处理收率达98％。     

商陆浆果红色素提取工艺及毒素的清除

以垂序商陆（ＰｈｙｔｏｌａｃａａｍｅｒｉｃａｎａＬ．）浆果为原料,采用水提取醇沉杂质甲乙混合液清除皂甙类物质的方法进行红色素的提取,色素粗品得率为４８５％,其中甜菜苷含量为３６９％;色素粗品质量初步检验结果为,总糖含量１１２％,还原糖７５％,铅浓度４１．３μｇ／ｇ,溶解性４２ｓ,分散性（Ａλ５２０）０３２３,吸湿性较强;经氯仿硫酸显色法和紫外扫描法检测,表明色素中皂甙类物质（即所谓“商陆毒素”）已基本清除。     

利用大孔吸附树脂提取蜀葵花色素的研究

研究利用大孔树脂吸附和分离蜀葵(Althaearosea(L．)Cavan)花红色素,比较了D-072、D-401、D-301-G、D-101、NKA-9、D-290、D-110七种树脂对该色素的静态吸附情况以及不同极性解吸剂对吸附色素的树脂洗脱的效果,从中选择出吸附和解吸效果最佳的树脂以及较适的解吸剂。结果表明：用D-401大孔吸附树脂作吸附剂,色素吸附率达91％;解吸剂用含0．1％HCl的60％酸化乙醇,色素可被充分洗脱下来,解吸效果较好;树脂通过回收再生后可重复利用。大孔吸附树脂法精制蜀葵花色素工艺相对简单,原料、试剂利用率较高。     

提取细胞色素C的研究

本文报道了以猪心为原料提取细胞色素Ｃ的小批量实验结果。通过十批次的实验,经含量、活性和收率等指标的测定,平均收率为１９８．５６ｍｇ／ｋｇ,活性在９６～１１０％之间。此收率稍高于国内报道的提取细胞色素Ｃ最高水平（１９８．２３ｍｇ／ｋｇ）,超过省内生产厂家的标准。提示用本文采用提取精制细胞色素Ｃ的方法是可行的。     

活性炭柱层析法分离姜黄素

利用７５％的乙醇从姜黄原料中提取姜黄素,提取率９１．３７％;提取液直接流经活性炭层析柱后测得活性炭的对姜黄素的吸附容量约为８％;分别利用碱性水、碱性乙醇和碱性丙酮洗脱被吸附的姜黄色素,发现碱性丙酮的洗脱效明显优于其余两种洗脱剂（Ｐ〈０．０１）;最终的结果显示,色素的产品率为２．３６％,产品纯度９２．３３％,色素总收率７９．６２％。     

大孔吸附树脂纯化亚麻木酚素

以纯化亚麻木酚素粗品为目的,比较了X-5、D101和AB-8三种大孔吸附树脂对木酚素的吸附性能,筛选出X-5大孔树脂最合适。通过动态吸附、解吸实验确定了上样浓度与上样量。在上样浓度10 mg/m L,上样量25 m L时分离效果最佳。同时,重点考察了梯度洗脱和等度洗脱两种解吸方式对木酚素产品纯度和收率的影响。等度洗脱采用30%乙醇水溶液,木酚素纯度可达85.49%,收率为57.59%;采用60%乙醇水溶液洗脱,木酚素纯度为59.30%,收率最高为75.05%。梯度洗脱可得到不同纯度产品,过程总收率为77.63%。     

蒺藜中甾体皂苷TTS-12提取分离工艺研究

对蒺藜全草中-抗真菌甾体皂苷：替告皂苷元3-O-β-D．吡喃木糖(1→2)-[β-D-吡喃木糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)．[α-L-吡喃鼠李糖(1→2)]-β-D-吡喃半乳糖甙苷(TTS-12)进行提取分离工艺研究,采用70％乙醇提取后,沉淀部分经乙酸乙酯处理再进行硅胶柱层析,粗品重结晶后得到TTS-12纯品,HPLC-ELSD法测定TTS-12含量,TTS-12的收率为86．5％,产品纯度为97．1％。本工艺简便实用,收率稳定,产品纯度高,适合中试生产TTS-12。     

一种溶高等担子菌细胞壁酶的制备

我们试图以高等担子菌（主要是食用菌）为 材料进行原生质体融合,以期获得新型杂种菌 株。我们先后采用过制备植物原生质体的纤维 素酶（上海东风生化试剂厂生产和从日本进 口）、制备酵母菌原生质体的蜗牛酶（来源于中 国科学院生物物理研究所）、和制备细菌原生质 体的溶菌酶（上海禽蛋二厂生产）单独或混合酶 解担子菌菌丝,均难以获得担子菌原生质体。其 原因可能是它们的细胞壁的成分不同所致^[1]     

肝素钠精制工艺研究

为提高肝素钠粗品效价,改善产品色泽,采用二次盐解、双氧水氧化和脱色等工艺对肝素钠粗品进行精制,并探讨工艺条件对产品效价、收率的影响。结果得到最佳精制工艺条件：盐解质量浓度为2％,盐解pH为8．0,醇沉体积浓度45％,氧化剂(双氧水)体积分数为3％。该精制工艺能够有效地提高效价(平均比粗产品提高1．5倍),收率较高,并具有操作简便、省时等特点。     

维生素E拮抗急性二(噁)英对小鼠肝脏细胞色素P450酶和抗氧化物酶基因转录的影响

为了探讨维生素E对急性2,3,7,8-四氯代二苯并二噁英（TCDD）染毒小鼠肝脏细胞色素P450酶（CYP450）基因和抗氧化物酶基因转录的影响,我们设计了对照组、TCDD（30μg／kg）染毒组和染毒同时给予100mg／kg维生素E组（实验组）3组实验。用Real—Time PCR法检测小鼠细胞色素P450酶1A1、1A2、181、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）基因表达的变化。结果显示：1）急性TCDD染毒小鼠肝脏细胞色素P450酶1A1、1A2、181mRNA水平与对照组相比明显升高,100mg／kg的维生素E具有部分拮抗肝脏细胞色素P450酶1A1、1A2、181 mRNA水平升高的作用;2）急性TCDD染毒小鼠肝脏SOD和GSH-PX mRNA水平呈现降低的趋势,CAT的mRNA水平明显降低,染毒并给予100mg／kg维生素E,SOD和CATmRNA水平与染毒组相比明显升高,GSH．PxmRNA水平也有升高的趋势。上述结果表明：TCDD能影响或部分影响小鼠肝脏细胞色素P450酶1A1、1A2、181、SOD、CAT、GSH-Px的基因转录,而维生素E能在一定程度上缓解TCDD的作用[动物学报54（6）：1038—1043,2008]。     

细胞色素bc1复合物的结晶和显微红外光谱研究

研究了一种简便的适于膜蛋白结晶的好方法,并已用这种方法得到了较大的牛心线粒体细胞色素bc₁复合物的红色晶体.它们封装在玻璃毛细管中放置在冰箱中其形状可长期保持不变.首次用显微Fourier变换红外光谱研究了细胞色素bc_1复合物结晶的结构.参照细胞色素c的红外光谱,对细胞色素bc₁复合物的红外特征频率进行了经验式的归属和指认.不同部位,不同取向结晶的红外频率和相对强度存在明显差异,说明这种膜蛋白结晶的红外光谱特征与其结构的对称性和取向有关.实验结果表明,细胞色素bc₁复合物结晶中存在着磷脂.膜蛋白可能以不对称方式跨接在线粒体膜的磷脂双层中.     

鸡冠花食用色素安全性的研究

目的：应用卫生毒理学原理,对鸡冠花(Gelosia cristata L．)色素的食用安全性进行研究。方法：采用原子吸收分光光度法对色素中有害微量元素As、Pb、Hg和Cu进行检测;利用小鼠急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验和小鼠睾丸染色体畸变试验等进行毒理学研究。结果：鸡冠花色素粗品、鸡冠花红色素和橙黄色素中,有害微量元素含量均低于国家食品卫生标准。急性毒性试验表明,鸡冠花色素粗品属于无毒级物质;鸡冠花红色素和橙黄色素为实际无毒级物质。而且毒理学试验检测表明：均呈阴性,无致突变性。结论：鸡冠花色素具有较好的食用安全性,可以作为天然食用植物色素使用。     

藉异氰化物把蛋白偶联到红细胞上:一种用被动血凝检查和测定抗体的敏感而又温和的方法

<正>把蛋白吸附到红细胞上做为试剂用于被动血凝试验曾报导过很多方法。基本上有两种途径: 1.用醛类,磺基水扬酸或柔酸固定红细胞,然后用吸附法或使用交联剂把蛋白吸附到细胞表面。     

细叶十大功劳叶中总生物碱大孔树脂纯化及抗氧化研究

为确定细叶十大功劳(Mahonia fortunei)叶中总生物碱大孔树脂分离纯化的最佳工艺条件及抗氧化活性，该研究通过比较6种大孔吸附树脂对总生物碱的静态吸附和解吸附效果，优选出最佳树脂并考察其动态纯化总生物碱的工艺条件，并采用DPPH法对纯化前后的总生物碱抗氧化性能进行评价。结果表明：(1)AB-8型大孔吸附树脂纯化效果最好，其最佳工艺条件为上样浓度50 mg·mL^-1(生药浓度)、上样量26 BV、上样液流速2 BV·h^-1;吸附完成后，以3 BV水洗后再以4 BV 50%乙醇洗脱，在此条件下得到的总生物碱含量由13.33%提高到56.64%。(2)各样品对DPPH自由基的清除能力为对照品Vc(IC₅₀=10.39μg·mL^-1)>总生物碱纯化品(IC₅₀=39.08μg·mL^-1)>总生物碱粗品(IC₅₀=55.28μg·mL^-1)。综上表明，AB-8型大孔吸附树脂可有效富集细叶十大功劳叶中总...     

肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖的提取纯化及其对细胞免疫活性的影响

采用液体深层培养得肺炎克雷伯氏菌Kp9株发酵液,研究确立了菌体快速裂解条件:NP40 1%和胰蛋白酶25 0IUg菌体,50℃作用1h ,然后加入溶菌酶80μg/mL ,56℃作用1h ;裂解液经超滤浓缩和有机溶剂沉淀获得多糖粗品;多糖粗品先后经CTAB吸附分离,DEAE-SepharoseFastFlow离子交换和SephacrylS 30 0HR凝胶过滤纯化,得分子量分布相对均一的多糖纯品,产品得率为0.25 1g/L。采用淋巴细胞转化实验分别探讨了多糖粗品和纯品的免疫活性,研究显示荚膜多糖具有高效的体外细胞免疫活性,并具有典型的双向免疫调节作用。研究结论为肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖的开发奠定了前期基础。     

不同组织来源透明质酸的分离纯化及其鉴定

以猪牛眼玻璃体、鸡冠、人脐带为原料,利用水浸提,乙醇沉淀的方法,提取透明质酸粗品,经ＤＥＡＥ－纤维素纯化,获得高纯度的透明质酸．经测定,其蛋白含量０．３８％～０．６３％,分子量７．９×１０~４～４．７×１０~５,收率０．６４％～２．４％,红外扫描图谱与文献报道一致     

杜仲含胶细胞的整体观察

用常现石蜡制片法及变性试剂（澳一碘一冰醋酸）处理,虽然可以观察到杜仲含胶细胞在植物体中的分布部位、密度及直径等,但很难观察到含胶 细胞的整体特征。采用整体透明法,可对合胶细胞整体特征进行观察以获得比较满意的效果,现将制片过程介绍如下：1．配制溶液配制10％的Na0H溶液和澳．碘冰醋酸试剂（碘2．5克,漠1．25克,冰醋酸加至100毫升）。2．取材及变性处理取新鲜的杜仲叶片,用清水冲洗干净,根据观察要求切成小块,放入盛有变性试剂的瓶中（变性试剂大约为材料的20－30倍）,处理48小时,为加速渗透可抽气约5分钟。3．透…     

固相法合成多肽AN-M的工艺研究

目的:探讨生物活性肽AN-M的固相合成工艺,并为工业化合成目的肽提供理论依据。方法采用固相法,以Fmoc-保护基保护的α-氨基酸和Wang树脂为原料,经1—氧—3—双二甲胺羧基苯骈三氮唑四氟化硼盐(TBTU)、1—羟基苯并三氮唑(HoBt)、二异丙基乙胺(DIEA)缩合,20%哌啶的DMF溶液脱保护,用切割试剂将AN-M粗品从Wang树脂上切割下来。结果经反相高效液相色谱分析纯化,可得目的肽的得率大于67．00%,最终成品的纯度在98．78%以上,经质谱鉴定其分子量与理论值一致。结论该合成方法步骤简便、便于操作、产品得率高,可用于大规模合成目的肽。     

栀子蓝色素的发酵及分离纯化工艺的研究

以宇佐美曲霉AS3．758为发酵菌株、栀子黄废液为原料,以液态发酵方式生产栀子蓝色素,通过正交试验法优选栀子蓝色素的最佳工艺条件。结果为：培养温度为29％、发酵液pH为6．5、发酵培养时间为36h,发酵结束后经水解、过滤,滤液中加入谷氨酸钠,反应后得栀子蓝色素液,转化率达98．43％。色素液经D301离子交换树脂吸附,再用1.0mol／L盐酸洗脱,洗脱液经低温干燥得到的栀子蓝色素,色价E1cm ^1%（590nm）达55．6。     

右旋糖酐酶的底物吸附

用35％乙醇保护,底物占旋糖酐能对右旋糖酐酶有效地吸附。采用0．2mol／L pH8．0的KzHPO4-KH2PO4缓冲液(内含30％乙醇)进行解吸,总同收率在80％以上。粗酶液经此过程提纯了9倍。低温对吸附有利。 在酶稳定范围内,pH对吸附影响不大。酶浓度过高,吸附效率下降。对稀酶液可连续多次吸附以达到浓缩目的。1．5％(W／V)的右旋糖酐使可得到满意的吸附效果,对五种不同来原的右旋糖酐酶吸附率都很高,但不同来源的底物适用情况差别很大。