心肌细胞凋亡在心力衰竭形成中的作用

近年的研究结果更新了对心力衰竭形成机制的理解 ,已认识到心肌细胞凋亡的程度是影响急性心肌梗塞面积大小的重要因素 ,在梗塞后的重塑期则决定着向心力衰竭转化的速度。在慢性压力 /容积超负荷引起的代偿性心肌肥厚向心力衰竭转化过程中 ,心肌细胞凋亡虽只起部分作用 ,但是这种作用却是关键性的。所以 ,在缺血 再灌注与代偿性心肌肥厚条件下 ,亟待探明诱导心肌细胞凋亡的因素和其信号转导通路 ,这有助于寻找预防心力衰竭形成的新方法。     

束缚应激对大鼠心肌细胞凋亡的影响及中药颐心宁的干预作用

目的 :探讨束缚应激对大鼠心肌细胞凋亡的影响及中药颐心宁抗应激性心肌损伤的作用。方法 :采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测心肌细胞凋亡。结果 :①束缚 1、2、4周时 ,应激组DNAladder心肌细胞凋亡结果阴性 ,原位细胞凋亡明显增多 ,统计学有非常显著差异 (P <0 .0 1) ;②颐心宁干预组DNAladder结果阴性 ,而原位细胞凋亡检测结果则较单纯应激大鼠显著减轻 (P <0 .0 5 ) ;③蒸馏水干预组与单纯应激大鼠比较则无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :束缚应激可诱导大鼠心肌细胞发生凋亡 ,中药颐心宁可抑制心肌细胞凋亡 ,具有抗应激性心肌损伤的作用。     

miRNA与心肌细胞凋亡研究进展

微小RNA是一种单链、非编码的内源性RNA,通常在转录后负向调节基因的表达水平。微小RNA对心肌细胞凋亡具有重要的调控作用。微小RNA可通过心肌细胞凋亡经典通路(包括线粒体凋亡通路、死亡受体凋亡通路、内质网应激凋亡通路)发挥抗心肌细胞凋亡作用或促心肌细胞凋亡作用。     

低氧与心肌细胞凋亡

细胞凋亡是心肌细胞低氧损伤的主要死亡形式之一。低氧引起心肌细胞凋亡可以通过外部的死亡受体通路以及内部的线粒体通路,两条通路之间又存在复杂的交互作用,其中,线粒体通路在低氧诱导的心肌细胞凋亡中起重要作用。另外,心肌细胞本身也具有多种内源性的凋亡抑制因子。因此,低氧时心肌细胞凋亡的产生是多种因素综合作用的结果,Bcl-2家族蛋白、线粒体通透性改变、细胞色素c的释放以及caspases的活化等参与了低氧引起的心肌细胞凋亡的调控。对低氧时心肌细胞凋亡的认识和深入研究,为人类在缺血性心脏病的防治中提供了一个新的治疗措施。     

心室重构中的心肌细胞凋亡

心力衰竭的最重要的特征是民结构和功能改变而引起的心室重构,这不仅与细胞肥大,蛋白合成及细胞外基质增多有关,而且还涉及到心肌细胞凋亡,并且认为心肌细胞凋亡可能是心肌功能进行性恶化的重要机制之一。     

死亡受体及其配体与心肌细胞凋亡

细胞凋亡是一种受基因调控的主动性细胞死亡 ,表现为凋亡信号通路的启动及相关基因的表达。在细胞凋亡的发生过程中 ,有不同的信号转导途径介导和参与 ,而直接启动凋亡的一条最具特征性的途径为死亡受体 (ｄｅａｔｈｒｅｃｅｐｔｏｒ ,ＤＲ)信号转导途径。死亡受体为位于细胞膜表面的某种蛋白质 ,能与携带凋亡信号的专一性配体结合并迅速将凋亡信号转导到细胞内而诱导细胞凋亡 ,属于肿瘤坏死因子 (ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ ,ＴＮＦ)受体基因超家族成员。这些受体均具有相似的富含半胱氨酸的胞外区 ,而且均存在一个约 80～ 90…     

不同剂量法舒地尔对压力负荷心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响

目的从细胞凋亡角度探讨不同剂量法舒地尔(fasudil)对升主动脉缩窄压力超负荷心力衰竭大鼠的影响及作用机制。方法采用升主动脉缩窄术建立大鼠心力衰竭模型。观察不同剂量fasudil治疗心力衰竭时对心肌细胞凋亡指数(AI)、bcl-2、c-myc蛋白表达水平的影响。结果fasudil干预心功能不全可以使心肌细胞凋亡指数降低,使bcl-2蛋白表达水平上调,c-myc蛋白表达水平降低,且剂量大时效果更明显。结论fasudil能有效减少心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡指数,使bcl-2蛋白表达水平上调,c-myc蛋白表达水平降低,防治心力衰竭,这是其治疗心力衰竭的重要机制之一,且剂量大时更明显。     

ARC蛋白调控心肌细胞肥大和凋亡

中国科学院动物研究所以大鼠乳鼠的原代心肌细胞为模型,系统研究了ARC蛋白在心肌细胞肥大和心肌细胞凋亡中的调控作用。ARC是一个在心肌细胞中高表达的抗细胞凋亡蛋白,对于心肌细胞具有保护作用。     

PUMA与心肌细胞凋亡的研究进展

p53上调的凋亡调节物(p53 upregulated modulator of apoptosis,PUMA)是新近发现的一种具有促凋亡作用的p53靶基因.与以往发现的其他p53靶基因比较,PUMA在促凋亡作用中有两个重要的特点:一是PUMA几乎介导p53依赖的所有凋亡信号;二是PUMA不仅介导p53依赖的凋亡信号,而且还可以介导p53非依赖的凋亡信号.也就是说,尽管PUMA是p53靶基因,但是其在p53非依赖细胞凋亡中也发挥重要作用.由此可见,PUMA是一个强大的促凋亡因子.在心肌细胞,PUMA参与缺血/再灌注、内质网应激、阿霉素等多种刺激诱导的细胞凋亡.因此,PUMA在心肌细胞凋亡中发挥重要作用.     

慢性心力衰竭合并贫血的研究进展

心力衰竭是是临床上常见的急症,也是心血管疾病当中许多器质性心脏病晚期的并发症,其有较高的发病率和死亡率,并且严重影响着心血管疾病患者的生活质量。近些年来越来越多的国内外研究证明慢性心力衰竭患者常合并贫血,并且发病率随着心脏损害程度加重而增加。贫血与慢性心衰患者的生活质量及预后密切相关,其发病原因是多因素且较复杂的,治疗也是多方面的,本文主要概括近些年来国内外研究对慢性心力衰竭合并贫血有关的认识和进展。     

大鼠心肌细胞凋亡的保护作用

为探讨p53上调凋亡调制物(p53 up-regulated modulator of apoptosis, PUMA)在大鼠心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenatio, H/R）损伤中的作用,本 研究将靶向PUMA的siRNA（si-PUMA）转染大鼠心肌细胞以建立PUMA沉默表达模型,观察其对心肌细胞H/R损伤的影响.RT-PCR和Western印迹结果表明,最适转染浓度50 nmol/L si-PUMA能靶向抑制H/R损伤心肌细胞的PUMA表达;MTT法检测心肌细胞存活率及培养基乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）活性测定结果发现,si-PUMA 组细胞存活率较H/R 6 h模型组明显提高,培养液中LDH活性显著降低（P<0.01）;分光光度法及Annexin V-FITC/PI联合染色流式细胞凋亡检测结果显示,si-PUMA组caspase-3活性较H/R 6h组明显下调,细胞凋亡率明显降低（P <0.01）;RT-PCR结果 提示,与H/R 6 h组相比,si-PUMA组Bax及Bcl-2表达分别出现显著下调及上调（P <0.05）.以上结果表明,靶向PUMA的siRNA转染能明显增强心肌细胞耐受H/R损伤的能力,对心肌细胞具有较好的保护作用;PUMA介导H/R诱导的心肌细胞凋亡,是心肌缺血/再灌注损伤基因治疗的一个潜在靶点.     

卡托普利对心力衰竭大鼠心肌细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨卡托普利对慢性压力负荷性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法:90只SD大鼠随机分为3组(n=30):假手术组(SH)、腹主动脉缩窄组(CAA)、卡托普利治疗组(CAP)。采用腹主动脉缩窄法复制模型,于第6、10周,检测各组心衰大鼠心肌细胞凋亡相关基因Bax,Bcl-2蛋白的表达。结果:造模后6周、10周结果均显示,CAA组较SH组心肌细胞凋亡基因Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax比例表达显著下降(P<0.01),Bax蛋白表达显著升高(P<0.01)。CAP组较CAA组Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax比例表达显著升高(P<0.01),Bax蛋白表达显著降低(P<0.01)。CAP组10周时较6周Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05),Bax蛋白表达显著降低(P<0.01),Bcl-2/Bax比例显著升高(P<0.01)。结论:卡托普利能增加Bcl-2、降低Bax蛋白的表达,上调Bcl-2/Bax比率,从而抑制心肌细胞凋亡改善心功能。     

钙与心肌缺血再灌注诱发的心肌细胞凋亡

细胞凋亡 ( Apoptosis)是最基本的细胞死亡过程 ,是一种普遍存在的生命现象。细胞凋亡与细胞增殖的动态平衡是多细胞生物维持其结构稳定及内环境动态平衡和生长发育所必有的最基本的生物学现象。不适当的细胞凋亡所致的凋亡失调性疾病( Disease of Disregulated Apoptosis,DDA)正受到人们的关注 [1]。这些疾病包括细胞凋亡减弱性疾病和细胞凋亡增强性疾病 ,前者如肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染及慢性炎症性疾病。后者包括神经元退行性疾病、造血衰竭性疾病、缺血性损伤等。在心血管系统疾病中 ,心肌梗塞、心肌缺血再灌注损伤、心肌炎、…     

中药诱导肿瘤细胞凋亡的基因调控机制研究进展

近年来,细胞凋亡已作为评估抗肿瘤药物疗效的一个重要指标,中药单体和中药复方制剂对恶性肿瘤细胞凋亡的研究是目前中药抗肿瘤作用的研究热点之一。通过对中药单体和中药复方制剂对恶性肿瘤细胞凋亡的基因调控机制研究进展的综述,探索凋亡诱导基因p53基因与凋亡抑制基因bel-2,c-myc等在细胞凋亡中的表达规律,为中药防治恶性肿瘤的研究提供思路。     

慢性心力衰竭相关生物学评价指标的研究进展

随着我国人口老年化进程的日益加快,老年慢性病的发病率呈走高态势。慢性心力衰竭(chronic heart failure, CHF)作为心血管系统常见的一种疾病,仍是老年人最主要的死亡原因之一。虽然医疗技术在不断提高,但目前CHF的诊治仍存在一定的问题,因此迫切需要寻求新的诊断、分层及预后的评价指标。由此,本文将对近年来CHF的相关新的生物标记物予以综述,为后期新指标的探索提供参考。     

小剂量过氧化氢对大鼠心肌细胞钙瞬变及凋亡的作用

目的:探讨小剂量过氧化氢导致的氧化应激对大鼠心肌细胞钙瞬变及细胞凋亡的作用。方法:解剖取出成年大鼠心脏,应用langendorff方法分离心肌细胞,加入fluo-3荧光指示剂后,应用不同浓度的过氧化氢作用于心肌细胞,在共聚焦显微镜下测定心肌细胞内钙瞬变。分离并培养新生大鼠心肌细胞,观察过氧化氢处理心肌细胞后其形态的变化,从而评价小剂量过氧化氢对心肌细胞的凋亡作用。结果:应用0.125 mmol/L、0.25 mmol/L及0.375 mmol/L的过氧化氢作用于心肌细胞后,心肌细胞内钙瞬变幅度明显升高,并呈时间剂量依赖性。在培养的大鼠原代心肌细胞中加入0.25 mmol/L的过氧化氢后,心肌细胞发生凋亡的形态变化。结论:小剂量过氧化氢可开放心肌细胞L-钙通道,明显增加心肌细胞内钙瞬变,并导致心肌细胞凋亡。     

内皮素-1致低氧心肌细胞凋亡的作用及其机制研究

目的:观察内源性内皮素-1(ET-1)在低氧所致心肌细胞凋亡中的作用及受体机制。方法:培养的新生乳鼠心肌细胞分为低氧对照组和内皮素受体拮抗剂预处理+低氧组,前者仅给DMEM液,后者给予ETA受体拮抗剂BQ610或BQ123及ETB受体拮抗剂BQ788后低氧培养24 h,TUNEL和AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况。结果:TUNEL检测显示低氧24 h对照组心肌细胞凋亡百分数为24.2%±2.2%,BQ6105μmol/L+低氧24 h组为13.2%±3.7%,显著低于低氧24 h组(P<0.01)。流式细胞术检测显示BQ123(0.04,0.2,1.0μmol/L)浓度依赖性地抑制低氧引起的心肌细胞凋亡及浓度依赖性提高低氧培养心肌细胞存活率,而BQ788对低氧引起的心肌细胞凋亡及存活率的降低无明显影响。结论:内源性ET-1参与促进低氧引起的心肌细胞凋亡,该作用主要是通过ETA受体介导。     

血管紧张素II诱导培养的成年大鼠心肌细胞凋亡

研究血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）诱导培养的成年大鼠心肌细胞（ＡＲＶＭｓ）凋亡。酶灌流消化法分离培养ＡＲＶＭｓ,不同处理后,光镜观察形态改变,琼脂糖凝胶电泳定性分析ＤＮＡ降解程度。结果发现培养的ＡＲＶＭｓ经ＡｎｇⅡ１０μｍｏｌ／Ｌ处理４８ｈ后,大部分细胞变圆,胞浆浓缩;电泳显示核酸断裂片段“梯形”结构,上述改变在７２ｈ更为明显。上述作用可被氯沙坦、维拉帕米和ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ所取消。这表明Ａｎｇ     

吡格列酮诱导心肌细胞凋亡和抑制心肌细胞肥大的作用及其机制研究

摘要 目的：探讨吡格列酮诱导心肌细胞凋亡和抑制心肌细胞肥大的作用及其机制研究。方法：选取1-3日龄的健康新生SD大鼠,采用酶学分离心肌细胞并培养。将心肌细胞分为4组：对照组、吡格列酮10 μM组、吡格列酮20 μM组、阿帕替尼2 μM组。采用自动细胞计数器（BioRad）计数吡格列酮和阿帕替尼对心肌细胞增殖的影响,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,[3H]-亮氨酸掺入法评估心肌细胞的肥厚,用相差显微镜检测心肌细胞直径。蛋白免疫印迹试验检测VEGFR-2,磷酸化VEGFR-2,蛋白激酶B （Akt）,磷酸化人体抑癌基因（P53）,兔抗人单克隆抗体（Bax）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）表达水平。免疫组织化学检测心肌细胞VEGFR-2、Bcl-2及Bax阳性指数。结果：吡格列酮和阿帕替尼均能抑制心肌细胞活力,其中吡格列酮以剂量依赖的方式抑制心肌细胞活力,即吡格列酮剂量越大,其抑制心肌细胞活力越强。吡格列酮或阿帕替尼治疗后,心肌细胞凋亡率显著增加,表明两者均诱导心肌细胞凋亡。吡格列酮或阿帕替尼治疗后,血管紧张素II（Ang II）诱导的[3H]-亮氨酸掺入量显著减少,心肌细胞直径减小,表明两者均抑制心肌细胞肥大。吡格列酮显著提高了新生大鼠心肌细胞中Bax和磷酸化-P53的蛋白表达,降低了mTOR、Akt、VEGFR-2、Bcl-2和磷酸化-VEGFR-2蛋白表达。与对照组比较,吡格列酮和阿帕替尼治疗后,VEGFR-2阳性指数和Bcl-2阳性指数显著降低,Bax阳性指数显著升高（P＜0.05）。结论：吡格列酮通过调节VEGFR-2信号通路诱导心肌细胞凋亡,抑制心肌细胞肥大。     

蛋白激酶Cδ可能参与肥大心肌细胞转向凋亡

为了探讨肥大心肌细胞对凋亡刺激的易感性及蛋白激酶Cδ(protein kinase Cδ,PKCδ)在其中的作用,以内皮素-1 (endothelin-1,ET-1)处理原代培养的新生大鼠心肌细胞,诱导心肌细胞肥大;再用血管紧张素Ⅱ(angiotensin II,Ang II)作为细胞凋亡诱导因子,采用鬼笔环肽(phalloidin)荧光染色与细胞面积测量两种方法检测心肌肥大,Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡。结果显示：(1)1与10 nmol/L ET-1作用48h,心肌细胞肌原纤维排列整齐、染色增浓,随ET-1浓度增加而愈加明显,心肌细胞表面积分别增加42．5%和67．3%,以此作为轻度和中度心肌细胞肥大模型。(2)正常、轻度肥大与中度肥大心肌细胞受1nmol/L AngⅡ处理24h后,凋亡率分别为(15．54±1．32)%、(20．65±1．40)%与(29．33±3．52)%,三组之间有显著差异(P＜0．05)。(3)受AngⅡ刺激后,PKCδ特异性抑制剂rottlerin不影响正常心肌细胞的凋亡率,却有效抑制了轻度和中度肥大心肌细胞的凋亡。肥大心肌细胞凋亡易感性明显高于正常心肌细胞,抑制PKCδ可以抑制肥大心肌细胞凋亡,提示PKCδ参与肥大心肌细胞凋亡过程。