被动吸烟下调大鼠卵巢雌、孕激素及其受体的表达

目的利用Wistar大鼠烟雾吸入模型,观察被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构的影响,检测生殖激素水平,分析生殖内分泌的变化,为提倡生育期妇女避免被动吸烟提供新的理论依据。方法建立大鼠烟雾吸入模型。32只健康雌性Wistar大鼠,鼠龄(60±5)d,每只体重200～250g,随机分为空白对照组和实验组,每组16只。实验组吸烟3个月,对照组正常饲养。3个月后处死两组大鼠。酶联免疫吸附试验方法 (enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA)检测雌鼠血清中雌激素(estrogen,E2)、孕激素(progesterone,P4)的水平;常规石蜡切片,免疫组织化学SP法检测各组雌鼠卵巢雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)的表达情况。所得数据采用SPSS软件作统计学处理分析,比较各组间差异程度。结果①酶联免疫吸附试验结果 :吸烟3个月大鼠血清E2水平比空白对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性;吸烟3个月大鼠血清P4水平比空白对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性。②免疫组织化学结果 :ER主要表达在大鼠卵巢组织的各级生长卵泡的颗粒细胞的细胞核内,呈棕黄色颗粒状分布,卵泡膜细胞和间质细胞也有少量表达。吸烟3个月的大鼠卵巢组织中ER的表达显著低于空白对照组。PR主要表达在大鼠卵巢组织卵泡的颗粒细胞的细胞质和细胞核中,呈棕黄色颗粒状分布,吸烟3个月的大鼠卵巢组织中PR的表达显著低于空白对照组。结论①成功的建立了大鼠被动吸烟模型。②被动吸烟可使大鼠血清中E2及P4水平明显降低,使大鼠卵巢中ER及PR的表达减少,提示被动吸烟可破坏卵巢的功能,引起生殖内分泌失调。     

不同培养时间对鸡卵泡颗粒细胞孕酮、雌激素分泌水平及FSHR、LHR基因表达的影响

目的：研究培养不同时间鸡卵泡颗粒细胞孕酮和雌激素的分泌水平,促卵泡素受体（FSHR）和促黄体素受体（LHR）的基因表达水平,推断体外培养时间对颗粒细胞激素分泌及相关受体基因表达的影响。方法：通过细胞体外培养的方法,分别于0 h、24 h、48 h、72 h、96 h收集鸡卵泡颗粒细胞上清液,采用ELISA法测定细胞上清液内的孕酮及雌激素分泌水平,并采用荧光定量PCR技术检测颗粒细胞内FSHR和LHR基因表达情况。结果：在培养初期0 h~48 h孕酮和雌激素分泌量显著降低（P < 0.05）,随着培养时间增加到72 h两种激素的分泌量又开始增加,并达到培养初期水平,培养至96 h细胞内孕酮和雌激素分泌量再次降低;颗粒细胞FSHR和LHR mRNA的表达水平则随着培养时间的增加而降低（P < 0.05）。结论：体外培养的卵泡颗粒细胞内孕酮和雌激素的分泌量随体外培养时间的延长呈先降低后升高的趋势,可能与体外培养细胞的生长状态相关,从整体上看随着培养时间的延长,细胞内孕酮和雌激素的分泌量均降低,可能与两种促性腺激素受体FSHR和LHR基因表达量下降相关。     

牦牛卵泡细胞及其卵母细胞不同发育时期的结构变化

采集成年母牦牛卵巢,通过光镜和电镜对牦牛卵泡及其卵母细胞不同发育时期的结构变化进行了观察。结果发现当卵母细胞被单层立方卵泡细胞包围时,微绒毛开始出现,而皮质颗粒、透明带则在包被2-4层卵泡细胞时开始出现。随着卵母细胞的继续发育,透明带增厚,微绒毛由粗短变为细长,密度增加;皮质颗粒、线粒体、滑面内质网等细胞器的数目不断增加,并逐渐移行到质膜下;在移行的过程中,皮质颗粒成团存在。在囊状卵泡中,卵母细胞皮质颗粒呈线形分布于质膜下,线粒体、滑面内质网又移向胞质中央。卵母细胞借助微绒毛穿过透明带与卵泡细胞胞质突起相联系。结果证明牦牛卵泡和卵母细胞不同发育时期的结构变化与其它哺乳动物的基本相似。     

蒙药乌力吉-18对大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴相关激素及受体表达的影响

目的:探讨蒙药乌力吉-18对大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴相关激素及受体的影响。方法:选取40只健康雌性未孕SD大鼠,随机分为空白组、对照组、乌力吉-18高、低2个剂量组,每组10只。空白组灌胃等体积蒸馏水,对照组灌胃逍遥丸,高、低剂量组分别灌胃2.0 g·kg^-1·d^-1、1.0 g·kg^-1·d^-1乌力吉-18,连续给药31学艺术d。采用酶联免疫吸附法测定血清促性腺激素释放激素(GnRH)、促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)及孕酮(PROG)的含量;免疫组化法检测下丘脑组织促性腺激素释放激素(GnRH)、垂体组织促性腺激素释放激素受体(GnRHR)的表达;以蛋白免疫印迹技术检测卵巢组织促卵泡生成素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)蛋白表达量。以实时荧光定量PCR检测卵巢组织中FSHR、LHR基因表达量。结果:与空白组比较,乌力吉-18低剂量组可明显升高血清LH含量(P<0.05),上调下丘脑组织GnRH、垂体组织GnRHR表达及卵巢组织FSHR、LHR蛋白表达(P<0.05);乌力吉-18高剂量组可显著升高血清FSH、LH、E₂含量(P<0.05),上调下丘脑组织GnRH表达及卵巢组织FSHR表达量(P<0.05),并可显著升高卵巢组织中FSHR、LHR基因表达量(P<0.05);对照组可明显升高血清E₂含量(P<0.05)。结论:蒙药乌力吉-18可明显升高血清FSH、LH及E₂的含量,促进下丘脑组织GnRH、垂体组织GnRHR及卵巢组织中FSHR、LHR的表达,表明乌力吉-18能够对下丘脑-垂体-卵巢轴相关激素及受体表达产生影响。     

褪黑激素对休情期银黑狐腔前卵泡卵母细胞超微结构的影响

为了研究褪黑激素(Melatonin,MLT)对休情期银黑狐腔前卵泡卵母细胞超微结构的影响。本研究选取健康7月龄埋植和未埋植MLT的银黑狐各5只,取其左侧卵巢共计10枚,制备超薄切片后利用透射电镜分别观察每枚卵巢的各级腔前卵泡各1-5个,并进行拍照。结果埋植和未埋植MLT的银黑狐原始卵泡卵母细胞内均有少量线粒体和高尔基体,而未埋植MLT的银黑狐卵母细胞中还可见少量滑面内质网;初级卵泡卵母细胞内,均开始形成不完整透明带,线粒体及内质网数量均有所增加,沿透明带出现少量皮质颗粒;次级卵泡阶段,未埋植MLT银黑狐卵母细胞微绒毛数量较埋植MLT的多,其余细胞器未见差异。结果表明,MLT对休情期银黑狐卵巢腔前卵泡卵母细胞的线粒体、脂滴、高尔基体、皮质颗粒等细胞器的发育没有影响,仅对初级卵泡阶段内质网的发育有抑制作用。     

营养制剂对间歇性寒冷暴露大鼠子宫、卵巢内HPO轴功能及能量代谢的影响*

目的: 观察一种自行设计的营养制剂对间歇性寒冷暴露SD雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO轴)功能及能量代谢的影响。 方法: 将雌性SD大鼠分为对照组、寒冷暴露组、营养制剂组,每组11只。对照组、寒冷暴露组每日灌胃蒸馏水,营养制剂组每日灌胃营养制剂,灌胃后寒冷暴露组、营养制剂组每日于-10℃冷舱内暴露4 h,持续14 d后,取血清、子宫、卵巢,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)等激素指标,采用比色法等检测ATP酶等能量代谢相关指标。 结果: 与对照组相比,寒冷暴露显著上调大鼠卵巢中FSHR、LHR蛋白表达,增强子宫和卵巢Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性(P<0.05);与寒冷暴露组相比,营养制剂能够下调低氧暴露大鼠卵巢FSHR、LHR蛋白的表达,抑制卵巢和子宫中Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶的活性(P<0.05)。 结论: 营养制剂可以有效改善间歇性寒冷暴露对子宫、卵巢内HPO轴相关受体表达和能量代谢的影响。     

睡眠剥夺对大鼠咬肌超微结构的影响

目的:应用电镜观察睡眠剥夺对大鼠咬肌超微结构的影响.方法:35只Wistar大鼠,随机分为5组:睡眠剥夺1d组、5d组、9d组、正常对照组和大平台对照组.采用改良多平台睡眠剥夺法(modified multiple plat-form method,MMPM)建立大鼠SD模型,观察咬肌超微结构的变化.结果:睡眠剥夺5d组大鼠咬肌线粒体出现水肿,基质密度降低,线粒体嵴减少,肌纤维微血管内出现充血性改变;睡眠剥夺9d组大鼠咬肌线粒体出现严重空泡性变,肌纤维微血管出现更为严重的充血性改变.结论:睡眠剥夺可导致咬肌肌纤维微血管充血性改变和线粒体损伤,这种变化随时间的延长而加重.     

沉默Smad8基因对小鼠卵泡颗粒细胞增殖的影响

SMAD8(又称SMAD9)蛋白质是TGF-β/SMADs信号通路中重要的转录因子。该研究利用RNA干扰技术沉默Smad8基因,探讨该基因对小鼠卵泡颗粒细胞增殖的影响。免疫组化技术对SMAD8在小鼠卵泡的表达进行定位,设计并合成Smad8-si RNA转染小鼠颗粒细胞,荧光定量PCR(q PCR)和Western blot检测Smad8基因沉默效率,CCK-8法分析颗粒细胞增殖能力,ELISA检测细胞上清中雌二醇(E2)和孕酮(P4)浓度,q PCR检测颗粒细胞促卵泡素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)、促黄体素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)以及与细胞增殖相关的细胞周期调控蛋白基因Cyclin D2和CDK4 m RNA水平。结果显示,SMAD8仅表达于卵泡的颗粒细胞,Smad8-si RNA有效抑制了Smad8的表达(P0.01),Smad8沉默后颗粒细胞的增殖能力明显减弱,细胞上清中E2水平显著下降,P4水平未受影响,颗粒细胞LHR、Cyclin D2和CDK4 m RNA水平明显降低,FSHR m RNA无明显变化。以上结果表明,沉默Smad8基因降低了小鼠颗粒细胞的增殖能力,其机制可能与沉默Smad8调低了颗粒细胞增殖分化相关的E2合成以及LHR、Cyclin D2和CDK4的表达下降有关。     

籽鹅不同等级卵泡生殖相关激素受体基因的表达

目的：检测籽鹅不同等级卵泡不同生殖相关激素受体mRNA的表达。方法：选用1只8月龄产蛋期籽鹅,处死后分离各级别卵泡（F1、F2、F3、F4、F5、SYF、LWF）,采用实时荧光定量PCR方法检测促卵泡激素受体（FSHR）、促黄体生成素受体（LHR）、雌激素受体α（ER α）、雌激素受体β（ER β）、生长激素受体（GHR）和胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）6种生殖相关激素受体mRNA的表达量变化。结果：SYF和LWF中LHR、GHR和IFGBP-1 mRNA表达量较低,而F1-F5级卵泡中表达量较高;SYF和LWF中ER βmRNA表达量较高,而等级卵泡中表达量较低。结论：本实验研究了不同等级卵泡FSHR、LHR、ER α、ER β、GHR和IGFBP-1 mRNA的变化规律,为研究禽类产蛋机制提供基础数据。     

哮喘气道重塑大鼠气道上皮细胞及线粒体超微结构变化

目的探讨哮喘气道重塑大鼠气道上皮细线粒体超微结构变化,为哮喘的治疗寻求新的理论基础。方法雌性Wistar大鼠6只、随机分为2组,采用卵蛋白吸人法制作哮喘气道重塑大鼠模型;取两组大鼠气管制作电镜切片,观察两组大鼠气道纤毛上皮,气道上皮细胞问胶原沉积及细胞内线粒体超微结构改变。结果哮喘组大鼠气道多层纤毛上皮层,纤毛脱落,杯状细胞增多,排列不整齐,上皮细胞中线粒体基膜密度下降,线粒体峡减少,上皮细胞细胞核多切迹,形状不规则;气道上皮细胞间胶原沉积;板层小体和线粒体空泡化。结论哮喘大鼠气道上皮细胞出现早期凋亡改变,线粒体失去正常形态。     

白介素-18在被动吸烟诱导的慢性阻塞性肺疾病大鼠中的表达

目的 研究白介紊-18(Interleukin-18,IL-18)在被动吸烟诱导的慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠中的表达变化.方法 将20只大鼠随机分为2组,即正常对照组和COPD模型组.应用单纯被动吸烟法建立大鼠COPD模型,香烟烟雾暴露时间为6个月.利用酶联免疫吸附法测定2组大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(bronchoal veolar lavage fluid,BALF)中的IL-18浓度,用实时定量RT-PCR法测定BALF中IL-18 mRNA的表达水平,用HE染色法观察肺组织形态学改变,用免疫组织化学染色法检测IL-18在肺组织中的表达.结果 1.COPD模型组血清和BALF中的IL-18浓度较正常对照组显著增加(P＜0.01);2.COPD模型组BALF中IL-18 mRNA的表达水平较正常对照组显著增高(P＜0.01);3.COPD模型组肺组织中IL-18的表达较正常对照组显著增加(P＜0.01).结论 被动吸烟诱导的COPD大鼠外周血和肺部均高表达IL-18,提示IL-18在吸烟所致的COPD发病机制中可能起重要作用.     

Captopril increased mitochondrial coenzyme Q10 level, improved respiratory chain function and energy production in the left ventricle in rabbits with smoke mitochondrial cardiomyopathy.

The aim of the study was to show whether the ACE inhibitor captopril is able to protect the heart against the deleterious effect of passive cigarette smoking on left ventricular mitochondria. Four groups of rabbits were investigated: control (C), passive smoking of three cigarettes twice daily/30 minutes (S), control + captopril (7.5 mg/kg body weight twice daily) (Cap), and smoking + captopril (SCap) as in group 2 and 3. Three weeks lasting passive smoking impaired oxidative phosphorylation, diminished cytochrome oxidase activity and increased the mitochondrial F1-ATPase protein concentration. Moreover, the level of coenzyme Q10 (CoQ10) and coenzyme Q9 were decreased. Simultaneous treatment with captopril prevented partly the decrease of CoQ10 level, deterioration of oxidative phosphorylation, diminution of cytochrome oxidase activity and enhancement of F1-ATPase level. We conclude that captopril protected the myocardium against the harmful effect of passive smoking in rabbits.     

腹腔镜卵巢囊肿剥除术中序贯式止血法对卵巢功能的影响研究

目的:探讨腹腔镜卵巢囊肿剥除术中序贯式止血法对卵巢功能的影响。方法:选取良性卵巢囊肿患者120例,随机分成对照组及观察组,每组60例,对照组术中采用传统的双极电凝止血法,观察组术中采用序贯式止血法。观察两组患者术前及术后3个月雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)以及促卵泡激素(FSH)水平变化,采用kupperman改良评分法比较两组患者月经和妊娠情况,并且统计两组患者术前及术后3个月卵巢功能正常以及卵巢储备功能下降的发生率。结果:术后3个月对照组E2、LH及FSH水平较术前变化较大,差异均有统计学意义(P0.05),而观察组E2、LH及FSH水平较术前变化较小,仅FSH差异有统计学意义(P0.05),术后3个月两组E2、LH及FSH水平差异均有统计学意义(P0.05);观察组月经改变、围绝经期综合症的发生率与治疗后距妊娠时间均显著少于对照组,差异有统计学意义(P0.05);而妊娠率明显高于对照组患者,差异有统计学意义(P0.05);术后3个月观察组患者卵巢功能正常率显著高于对照组,并且卵巢储备功能下降率显著低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:腹腔镜卵巢囊肿剥除术中采用序贯式止血法对患者的卵巢功能影响较小,有利于患者术后正常生理功能的恢复,值得在临床上推广应用。     

卵巢囊肿剥除术对卵巢囊肿患者术后卵巢储备功能的影响

目的:探究卵巢囊肿剥除术对卵巢囊肿患者术后卵巢储备功能的影响。方法:选取我院收治的卵巢囊肿患者42例,按照随机数字表法分为实验组和对照组。对照组20例,采用经腹卵巢囊肿剥除术;实验组22例,采用经腹腔镜下卵巢囊肿剥除术。对比两组术后6个月血清中的抗苗勒管激素(AMH)、卵泡刺激素(FSH)及雌二醇(E2)水平,超声下卵巢体积(Vol),窦状卵泡数(Fo)水平等。结果:治疗后,实验组总有效率为(95.5%)高于对照组总有效率(75.0%),差异有统计学意义(P0.05);与治疗前相比,两组患者术后第6个月血清FSH、E2水平及Vol、Fo水平无明显变化,差异无统计学意义(P0.05);与治疗前相比,两组患者血清AMH水平较低,差异有统计学意义(P0.05),且组间比较差异无统计学意义(P0.05)。与对照组相比,实验组术中出血量较低,手术时间较少,下床活动时间短(P0.05)。结论:卵巢囊肿剥除术对于卵巢储备功能的恢复具有积极作用,有利于保证育龄女性卵巢功能的完整,促进各基础性激素水平的恢复,尤其是采用腹腔镜卵巢囊肿剥除术出血少损伤小,病变清除彻底,术后恢复好。     

Lack of an Association between Passive Smoking and Incidence of Female Breast Cancer in Non-Smokers: Evidence from 10 Prospective Cohort Studies

Background

Several case-control studies have suggested that passive smoking may increase the incidence of female breast cancer. However, the results of cohort studies have been inconsistent in establishing an association. The present study evaluated the association between passive smoking and incidence of female breast cancer through a meta-analysis of prospective cohort studies.

Methods

Relevant articles published before August 2012 were identified by searching the electronic databases PubMed, Embase, and Web of Science. Pooled relative risks (RRs) were determined with either a fixed or random effects model and were used to assess the strength of the association. Sensitivity and subgroup analyses according to ethnicity, menopausal status, and the period and place of exposure to passive smoking were also performed.

Results

Ten prospective cohort studies involving 782 534 female non-smokers were included in the meta-analysis and 14 831 breast cancer cases were detected. Compared with the women without exposure to passive smoking, the overall combined RR of breast cancer was 1.01 (95% confidence interval: 0.96 to 1.06, P = 0.73) among women with exposure to passive smoking. Similar results were achieved through the subgroup analyses. No evidence of publication bias was observed.

Conclusion

The results suggest that passive smoking may not be associated with increased incidence of breast cancer. However, the present conclusion should be considered carefully and confirmed with further studies.     

胎儿生长受限模型及其胎盘的病理学观察

目的证实胎儿生长受限大鼠模型的建立方法;观察胎儿生长受限(FGR)大鼠胎盘的组织形态及超微结构特征。方法健康Wistar雌鼠24只,按妊娠先后顺序随机分为两组:正常对照组(正常组)、模型组(烟酒处理组),采用烟酒混合因素建立大鼠FGR模型;比较两组胎鼠的体重、鼻臀长度、体重系数及FGR发生率,两组胎盘组织行HE染色,并应用光镜和电镜观察其病理变化。结果①模型组胎仔平均体重、鼻臀长度、体重系数较正常组分别减轻46.0%、21.9%、35.0%(P0.01)。对照组FGR发生率仅为12.5%,模型组FGR发生率为79.3%,显著高于对照组(P0.01)。②模型组胎盘形态学明显改变。结论通过烟酒干预的方法,成功建立缺血缺氧性FGR孕鼠模型。烟酒可导致胎盘形态结构的改变,这种病理改变是造成FGR胎盘功能减退的形态学基础。     

模拟室内高浓度PM2.5对大鼠血清和组织VEGF蛋白表达的影响

目的:采用"密闭环境熏烟法"模拟PM2.5高浓度环境,建立大鼠被动吸烟模型,观察模拟公共场所室内高浓度PM2.5对正常大鼠血清血管内皮生长因子(VEGF)以及心、脾、肺三种组织VEGF蛋白表达的影响。方法:将20只6月龄雄性健康Wistar大鼠按体重分层随机分为实验组和对照组。并且两组大鼠均于相同的环境下(温度,湿度,光照)进行饲养。对照组不做任何处理,实验组进行为期6周的密闭环境烟熏。末次烟熏结束24-36小时内,用ELISA检测两组大鼠血清VEGF水平的变化,用Western blot检测心、脾、肺三种组织VEGF蛋白表达的变化。结果:与对照组比较,实验组心、脾VEGF1、2以及肺VEGF1蛋白表达水平均显著下降,而肺VEGF2和血清VEGF水平无显著变化。结论:6周模拟公共场所室内高浓度PM2.5能显著降低大鼠心、脾、肺VEGF蛋白表达水平。     

人参皂甙Rb1对环磷酰胺所致卵巢早衰大鼠的保护作用

目的探讨人参皂甙Rb1对化疗所致卵巢早衰(Premature ovarian failure,POF)大鼠的Bcl-2及Bax基因表达的影响。方法选用30只2-3月龄具有正常动情周期雌性Wistar大鼠随机分3组,分别为对照组,治疗组和模型组。采用免疫组化和免疫印迹方法分别观察和半定量检测POF大鼠卵巢凋亡调节基因Bcl-2和Bax的蛋白表达情况,同时对比观察人参皂甙Rb1对其表达的影响。结果模型组卵巢颗粒细胞Bax蛋白的平均光密度值较对照组明显增高(P0.05);模型组Bcl-2蛋白的表达量较对照组明显下调(P0.05)。Rb1治疗后Bcl-2蛋白表达明显升高,Bax蛋白表达明显下调(P0.05)。结论 Rb1可能是通过下调bax蛋白水平减少卵巢颗粒细胞的凋亡,对化疗所致卵巢早衰起到治疗的作用,进而延缓卵巢衰老。     

GnRH-antagonist mediated down-regulation of the estrous cycle in marmosets

BACKGROUND: Because of its small size and unproblematic captivity behavior the marmoset monkey is an attractive New World primate model for early developmental questions. However, superovulation protocols used in Old World monkeys and women are not successful in the female marmoset. A novel protocol is needed to utilize these New World monkeys as an efficient animal model for in vitro fertilization experiments or embryo stem cell research. METHODS: To create such a protocol we first examined the effects of long-term estrous cycle control, secondly, in a dose-finding study, we determined the length of a down-regulation protocol with a gonadotropic releasing hormone (GnRH)-antagonist. Twenty-nine female marmosets were grouped according to the number of estrous cycles, which had been controlled for a period of 12 months in which 88 cycles were monitored. Application of PGF2alpha in the mid-luteal phase led to immediate onset of the follicular phase. The blood progesterone concentration rapidly declined and increased again on day 9-11. RESULTS: The results show that the controlled ovarian cycle length and progesterone response are not altered by the number of PGF2alpha injections. The rapid decline was similar in all groups, indicating that all animals, independent of the number of controlled cycles, react equally to multiple PGF2alpha injections. To determine the proper dosage for a GnRH-antagonist (Cetrorelix), 12 animals in three groups of four female marmosets were treated with two different dosages and a sham dosage. Cetrorelix was applied in the mid-luteal phase, three times over 2 days. In both Cetrorelix-treated animal groups the early progesterone levels matched those in the controls. In the low-dose treatment group [0.01 mg/100 g body weight (BW)] the expected progesterone rise on day 10 was delayed between 9 and 15 days whereas in the high-dose treatment group (0.1 mg/100 g BW) the progesterone rise was delayed between 21 and 41 days. In the low-dose group the steepness of the slope from day 20 onwards was almost identical to that of the control group. This was reflected in the bioCG levels measured. CONCLUSIONS: Based on the GnRH-antagonist studies, complete ovarian down-regulation in female marmosets can be achieved by applying a low-dose regimen, and intrinsic gonadotropins would not interfere with an ovarian superstimulation protocol.