鳜鱼病毒病原的检出及组织病理分析

经对患暴发性传染病的鳜组织及病变组织超微切片的电镜观察,在细胞质,核及间隙中都有病毒颗粒,对该病毒进行了分离提纯,这是一种直径约为２８０ｎｍ球形病毒,将粗提病毒液接种到培养细胞中,会引起细胞病变;病毒通过人工感染健康鳜,会引起鳜发病和死亡,对患病獗进行解剖和组织病理观察,表明病鳜的５种器官都发生了病变,研究结果表明分离的鳜病毒（ＳｉｎｉｐｅｒｃａｃｈｕａｔｓｉＶｉｒｕｓ,ＳＣＶ）是引起鳜流４行的病     

反击疯牛病毒的药物研究

1997年 ,英国科学家ＳｔａｎｌｅｙＢ .Ｐｒｕｓｉｎｅｒ发现了疯牛病的病原体———朊病毒 (ｐｒｉｏｎ)而获诺贝尔奖 .人感染了朊病毒 ,会发生与病牛相似的克—雅氏病 .旧金山加州大学的ＣａｒｓｔｅｎＫｏｒｔｈ测试了广大范围的、能从血液进入脑部的化合物后 ,发现能治疗精神疾患的氯丙嗪与抗疟药阿的平具有与朊病毒战斗的效能 .Ｋｏｒｔｈ与Ｐｒｕｓｉｎｅｒ在 2 0 0 1年 8月 14日的ＰＮＡＳ上描述了他们的细胞研究 .他们在实验皿中用阿的平与氯丙嗪处理受朊病毒感染的小鼠脑细胞 ,发现处理后朊病毒便逐渐消失了 ,并且中止用该药处理后…     

关于Prion汉译名的建议

关于Ｐｒｉｏｎ汉译名的建议贲昆龙张永振（中国科学院昆明动物研究所,昆明６５０２２３）关键词ｐｒｉｏｎ汉译名１９９７年的诺贝尔生理学与医学奖授予加利福尼亚大学旧金山分校的ＳｔａｎｌｅｙＢ．Ｐｒｕｓｉｎｅｒ,表彰他在研究传染性海绵状脑病变（ｔｒａｎｓｍｉ...     

荧光素酶基因的克隆表达及其产物纯化和鉴定

利用能形成多角体的杆状病毒载体系统ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３,把萤火虫荧光素酶（Ｆｉｒｅｆｌｙｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ,Ｌｕｃ）ｃＤＮＡ克隆到转移功体质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＾＋３／３通过共转染草地夜蛾（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ,Ｓｆ）细胞得到重组毒株ＴｎＮＰＶ－Ｌｕｃ－ＯＣＣ,在该重组杆状病毒株中Ｌｕｃ基因受到合成启动子和ＸＩＶ启动子的双重调控。该重组杆状病毒株在Ｓｆ９细胞中能形成多角体,有Ｘ－     

酵母朊病毒的遗传与增殖

１９８２年,Ｐｒｕｓｉｎｅｒ等发现,在感染瘙痒病的仓鼠脑中有一种异常蛋白,名其为“蛋白质感染颗粒”（ｐｒｏｔｅｉｎａｃｅｏｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｐａｒｔｉ－ｃｌｅ）。Ｐｒｕｓｉｎｅｒ用ｐｒｉｏｎ（现译为朊病毒）这一名词把这类病原体与病毒、细菌、真菌以及其它已知的病原体区分开。后来发现这种蛋白质能够自我催化复制,且有两种构象,即正常态的ＰｒＰＣ和感染态的ＰｒＰＳＣ。两者的化学性质也不同：ＰｒＰＣ能溶于非变性洗涤剂而ＰｒＰＳＣ不溶;ＰｒＰＣ易被蛋白酶消化而ＰｒＰＳＣ则具部分抗性。在酵母中,朊病毒不…     

IFN—γ诱导因子————白细胞介素18及其生物学活性

ＩＬ－１８是新近发现的种细胞因子,主要来源于单核巨噬细胞样细胞。它具有多种生物学功能,能促进外周血单个核细胞产生ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ等细胞因子,增强ＮＫ细胞的细胞毒作用,促进Ｔ细胞的增殖,在诱导Ｔｈ１细胞的分化成熟过程和Ｔｈ１细胞为主的细胞免疫反应中具有促进和调节作用,并与自身免疫病和免疫炎症反应引起的疾病密切相关。     

一种新型疱疹病毒：卡波济肉瘤相关性疱疹病毒或人类疱疹病毒8型

１９９４年从艾滋病相关的卡波济肉瘤（ＫＳ）病灶中发现了特异的疱疹病毒样ＤＮＡ序列，与γ疱疹病毒亚科核壳和包膜蛋白编码基因有相当程度的同源性。随后建立了检测该基因的多聚酶链反应（ＰＣＲ）和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法，从各种类型的ＫＳ组织中检荻该基因，故认为是ＫＳ致病的相关因子。但从无ＫＳ的艾滋病、非艾滋病的免疫缺陷病人的Ｂ细胞淋巴瘤、淋巴结及外周血单个核细胞中也检测到该病毒基因的存在，因此称之为人类疱疹     

牛泡沫病毒（BSV）3026毒株的分离及分子生物学鉴定

从一头牛免疫缺陷病毒（ＢＩＶ）检测阳性３０２６号牛外周血中,分离到一株病毒,即３０２６病毒株。体外细胞增减和反转录分析证明,此病毒是一反转录病毒。可胎牛肺细胞中引起典型的泡沫样病变,形成合胞体,ＰＣＲ扩增和Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交显示,此病毒的ＣＤＮＡ和ＰＣＲ产的均可与牛泡沫病毒（ＢＳＶ）阳性对照的ＨｉｒｔＤＮＡ杂交。３‘ＬＴＲ上游一段３３０ｂｐ的ＰＣＲ产物序理分析表明,３０２６毒株与ＢＳＶ阳性对照相比     

棉铃虫单粒包埋核型侈角体病毒在细胞系中持续感染的建立和特性

棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ａｒｍｉｇｅｒａ ｓｉｎｇｌｅ ｍｕｃｌｅｏｃａｐｓｉｃｄ ｎｕｃｌｅｏｐｏｌｙｈｅｄｒｏｖｉｒｕｄ,ＨａＳＮＰＶ）能够在棉铃虫肾卵巢细胞素ＳＦＥ－ＨＡ－８２１２中有效复制,引起细胞解体死亡。通过培养ＨａＳＮＰＶ感染后残存的细胞,建立了一株持续感染的细胞。该细胞在传代培养的６个月时间内（约２５次传代）,持续地释放有感染力的病毒粒子,培养液中病毒     

克山病病区粮低Se对大白鼠心肌线粒体Ca转运影响的研究

以低Ｓｅ克山病病区粮喂养大白鼠为动物模型,在细胞及亚细胞水平上进行了低Ｓｅ与Ｃａ转运关系的研究,同时测定了线粒体的能量转换功能。结果显示,低Ｓｅ病区粮组动物心肌线粒体Ｃａ转运呈现明显异常,但线粒体能量转换功能尚未发生明显改变。提示线粒体Ｃａ转运功能损伤先于线粒体能量转换功能损伤之前发生。心肌线粒体Ｃａ转运功能可作为更灵敏的指标用于克山病发病机理的研究。上述结果进一步表明克山病是一种“心肌线粒体病”。     

哺乳动物中蛋白质折叠异常与朊病毒病

在过去的两年中 ,有关朊病毒 (ｐｒｉｏｎ)蛋白结构的最新ＮＭＲ数据不断扩展 ,这主要是在仓鼠和人体蛋白质中取得的。另外 ,两种朊病毒蛋白的折叠动力学机制亦被阐明。目前已经得到几种朊病毒的样品 ,它们可以在溶液中采取不同的构象。近来所做的有关朊病毒蛋白链分子基础的研究工作进一步巩固了蛋白质独自致病的假说。通过对最小蛋白质片断的辨认 ,疾病与结构的相互关系的研究也取得了重要进展。1 .引言在 2 5种被确证为由动物组织中变性蛋白质沉积而引起的病症中 ,只有传染性海绵状脑病 (ＴＳＥｓ)会产生传染性物质。可能朊病毒疾病最独…     

p35Nck5a基因重复性打靶载体的构建和ES细胞基因打靶研究

为了在小鼠胚胎于细胞（ＥＳ）中引起神经细胞ｃｄｃ２类激酶调节亚基ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因的定点 重复,采用常规的分子克隆技术,构建得到长约１２．２ｋｂ的基因重复性打靶载体ｐＧＤＴＶ。用电 穿孔法将线性化的ｐＧＤＴＶ载体转入ＥＳ细胞,经过Ｇ４１８和ＧＡＮＣ分组药物选择,获得２４５个 双药物抗性的细胞克隆,细胞存活率为６．２２ × １０－５。经ＰＣＲ和基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定,２个 ＥＳ细胞克隆发生了ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因的重复,同源重组率为５．０８×１０－７、负向选择系统的应用使 同源重组事件的富集效率提高了７倍。为建立Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病的转基因小鼠模型打下了基础。     

应用亲和层析法是纯鸡马立克氏病病毒PP38基因重组产物

利用鸡马立氏病病毒（ＭＤＶ）Ｉ型特异单克隆抗体Ｈ１９致敏Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ－ＣＮＢｒ,从感染重组病毒ＢＰ３８Ⅱ的昆虫细胞中提纯鸡马立克氏病毒ＰＰ３８基因重组产物,获得良好效果,提纯的蛋白质的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中表现出一条分子量约为３８ｋＤａ的蛋白质条带,在免疫印迹试验中该蛋白质带也能被单克隆抗体Ｈ１９识别。利用该提纯的重组ＰＰ３８免疫小鼠,所制备的小鼠抗血清在免疫荧光染色试验中不仅能与感染重组病     

Se和V_E与克山病

以克山病病区粮配成基础饲料,另在基础饲料中分别补充Ｓｅ或ＶＥ,或Ｓｅ＋ＶＥ喂养大鼠,在细胞及亚细胞水平上以Ｃａ代谢为主研究并比较了Ｓｅ和ＶＥ在克山病病因中的作用。测量了心肌细胞和心肌线粒体的Ｃａ代谢及有关指标、心肌线粒体能量转换功能及心肌组织自由基含量。结果表明,在低Ｓｅ病区粮中补充Ｓｅ或ＶＥ均能在一定程度上预防病区粮中致病因素对心肌细胞及线粒体的损伤;并且补充Ｓｅ或ＶＥ均能使心肌组织中自由基含量减少。提示Ｓｅ和ＶＥ是通过清除体内过量自由基预防细胞和线粒体的损伤的。但值得注意的是,实验中所用病区粮ＶＥ含量不低于甚至高于非病区对照粮,在低Ｓｅ情况下,所补ＶＥ的量需要相当大（如本实验中补充２００μｇ／ｇ）才能较明显地预防心肌细胞和心肌线粒体的损伤。通过对这些结果的分析,进一步肯定低Ｓｅ是克山病形成的重要因素之一。     

种子脱水改变豌豆种传花叶病毒在子叶细胞中的稳定性与分布方式

作为种传病原物,豌豆种传花叶病毒（ＰＳｂＭＶ） 必须能承受种胚的干燥脱水过程方能在胚细胞中存活并种传。为了研究ＰＳｂＭＶ承受种胚干燥脱水的机制,比较了该病毒在豌豆（ Ｐｉｓｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．） 新鲜胚与干燥胚子叶细胞中的稳定性与分布方式。在新鲜的、未成熟胚的子叶细胞中,ＰＳｂＭＶ的外壳蛋白（ＣＰ） 受到部分降解,该病毒粒体及其ＣＰ在细胞质内呈环核分布。在干燥、成熟的胚的子叶细胞中,ＰＳｂＭＶ的外壳蛋白未受到任何降解,其粒体和ＣＰ不再呈环核分布,而是存在于位于细胞质边缘的多聚体中。免疫金标记电镜检查证明这类多聚体中含有ＰＳｂＭＶ的粒体。很明显,种胚的干燥脱水过程可改变ＰＳｂＭＶ在子叶细胞中的稳定性与分布方式,粒体多聚体的形成可能有助于ＰＳｂＭＶ在干燥脱水的胚细胞中的稳定与存活     

养殖梭子蟹血卵涡鞭虫感染的初步研究

2004年7—9月,浙江舟山人工养殖梭子蟹相继发生一种被当地渔民称为"牛奶病"的流行性疾病,并引起大量死亡。病蟹蟹体消瘦,肌肉白浊,蟹盖内可见大量乳白色液体。对带有典型病症的濒死病蟹进行细菌分离,未分离到细菌。组织病理学观察发现,病蟹血淋巴急剧下降,代之以大量的寄生原虫,该寄生虫在病蟹的肝胰腺、鳃、心脏、肌肉等部位大量侵袭,并引起这些组织发生以坏死为主的变质性病变,其病理特征主要表现为:细胞肿胀、变性、坏死,某些细胞的细胞核固缩、碎裂或崩解。电镜观察乳白色体液及病变组织,可见大量寄生原虫,该寄生虫大小约5—7μm,多数呈卵圆形,单核或多核,具有2根鞭毛。进一步通过分子生物学方法,确定该寄生虫为血卵涡鞭虫Hematodinium sp.,初步认定其是引起养殖梭子蟹"牛奶病"的一种重要病原。     

酵母的蛋白粒子病毒:是无需DNA的遗传吗?

酵母的蛋白粒子病毒：是无需ＤＮＡ的遗传吗？被认为引起疯牛病、人克雅氏病和其它神经学上麻烦的感染性蛋白粒子——蛋白粒子病毒，看来正在酵母中迅速蔓延。在今年８月２日出版的Ｓｃｉｅｎｃｅ６２２页上，芝加哥大学的遗传学家ＳｕｓａｎＬｉｎｄｑｕｉｓｔ及其同事揭...     

谷氨酸对海马神经元钙信号的影响

细胞内游离钙作为一种重要的第二信使 ,与细胞功能、细胞代谢和信号转导密切相关 ,细胞内钙信号的失调会引起细胞功能异常。这也是某些神经系统疾病的重要环节 ,如癫痫、Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病、脑水肿、细胞凋亡等。谷氨酸的毒性作用诱发的Ｃａ2 跨膜内流和细胞内游离钙平衡的失调可能参与癫痫的病理过程。本实验应用单细胞Ｃａ2 显微荧光测量技术 ,对其进行了初步研究。1　材料和方法(1)试剂　胎牛血清、ＨＥＰＥＳ、ＥＧＴＡ、Ｆｕｒａ 2 /ＡＭ、胰蛋白酶、ＭＫ 80 1(Ｓｉｇｍａ产品 ) ,16 40培养基 (Ｇｉｂｃｏ产品 ) ,其它的试剂为国…     

人乳铁蛋白基因在昆虫细胞中的表达

将人乳铁蛋白ｃＤＮＡ（ｈＬＦｃ）克隆在质粒ｐＢａｃＰＡＫ８的ＢａｍＨＩ和ＳａｃＩ位点,构建成转移质粒８ｈＬＦｃ。该质粒ＤＮＡ与ＡｃＮＰＶ ＢａｃＰＡＫ６病毒株基因组ＤＮＡ经共转染草地夜峨培养细胞Ｓｆ２１,在培养的贴壁细胞中挑出空斑,经过３轮纯化,结合斑点杂交筛选,获得重组病毒。用蛋白质免疫印迹法检测到在重组病毒感染的Ｓｆ－２１细胞中存在乳铁蛋白基因的表达产物。酶联免疫检测结果表明：重组人乳铁蛋白在     

白鲢出血性败血症病理组织学研究

白鲢暴发型出血病是以出血性败血症为基本表现形式的急性传染病，组织病理变化表现为病鱼全峰的小血管受损，引起的多发性出血、充血和水肿，并伴有重要器实质细胞的变性与坏死。