脂质体作为基因工程载体的研究

脂质体是由天然脂类和(或)类固醇组成的微球体,核酸分子可被包裹在微球体内部空间,通过细胞内吞作用(endocytosis)及膜融合(membrane fusion)进入细胞。由于脂质体没有毒性,制备容易,因此,脂质体作为基因载体越来越受到重视。     

阳离子脂质体与基因转移

阳离子脂质体是表达带正电的脂南体。它可与带负电的基因（ＤＮＡ或ＲＮＡ）形成带正电的脂－基因复合物,此复合物借静电作用吸附于细胞表面,通过与细胞膜融合或细胞内吞而将结合的基因导入细胞,并获得表达。阳离子脂质体转基因的操作简便、重复性好,杂效率高,在基因工程、物种培育和基因治疗研究等方面有广阔的应用前景。     

壳聚糖作为基因药物载体的研究进展

以壳聚糖及其衍生物作为基因的载体的转染效率受到许多因素的影响, 如复合物粒子大小、壳聚糖/DNA的比值、壳聚糖的分子量、脱乙酰度、转染过程中血清的浓度、介质的pH值等。对壳聚糖进行一定程度的修饰, 可以改变壳聚糖的转染效率。介绍了壳聚糖作为基因转移载体的转染条件, 转染效率和转染机制的研究情况及研究进展。     

脂质体介导基因转移的研究进展

基因转移是基因工程技术的重要环节之一,无论何种基因操作均离不开基因的转移,其最常用的方法有钙盐沉淀法、反转录病毒法、DEAE－右旋糖昔法、电融合法、显微注射法等,这些方法尽管都有其适用性,但各有缺点,如钙盐沉淀法虽然较早使用,但对细胞膜有较大的破坏性,且不易于活体动物,反转录病毒转染效率较高,却存在病毒潜在感染的危险。脂质体是由可生物降解的磷脂组成的双分子层结构,与生物膜有较大的相似性和组织相容性。自Baphanl[1]发明并做为生物膜模型研究以来,至今已应用于医学生物学的各个领域。70年代后期,Robert等将…     

无机纳米粒子作为基因载体的研究进展

转染是将具生物功能的核酸转移、运送到细胞内,并使其在细胞内维持生物功能的过程。作为现代生物化学和分子生物学中的一种主要技术手段,转染对于基因治疗有重要的意义。无机纳米粒子作为基因载体受到人们日益广泛的关注,其具有易于制备,可进行多样化的表面修饰等多种优势。本文将概述无机纳米粒子作为基因载体的现状及其对基因表达的影响。     

阳离子脂质体作为基因治疗药物载体在小鼠体内的毒性研究

目的:探讨阳离子脂质体作为基因治疗药物载体在小鼠体内的毒性。方法:采用流体动力学法,经尾静脉给小鼠注射不同剂量的阳离子脂质体,对照组注射等量5%GLU液。于注射前、注射后第1天和第3天,经眶静脉采血,用自动血球计数仪测定外周抗凝血中的白细胞(WBC)、淋巴细胞(LY%)、中性粒细胞(GR%)。用自动生化分析仪测定血浆中的清蛋白(Alb)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(CR)。同时做脏器组织切片HE染色,观察肝、肾脏组织结构的变化。结果:与对照组比较,12μl/g剂量以上组的WBC、BUN、CR均明显升高(P<0.05),ALT、Alb无显著性差异(P>0.05)。12μl/g剂量以下组无明显变化(P均>0.05)。与注射前比较,注射后第1天,WBC、BUN、CR显著升高(P<0.05),而注射后第3天除CR外均基本恢复正常(P>0.05)。而ALT、Alb无显著性差异(P>0.05)。肝肾脏组织切片HE染色,各荆量组间组织结构变化无差异。结论:阳离子脂质体对小鼠外周血相和肾脏功能的毒性作用呈剂量和时间依赖性,故使用其作为核酸药物载体用于基因治疗研究时,剂量应小于12ul/g体重,给药时间应隔1天以上。     

脂质体、免疫刺激复合物和壳聚糖作为黏膜免疫载体的研究现状

查阅国内外文献,采用整理归纳、引用和分析的方法,概述了鼻黏膜免疫载体材料脂质体、免疫刺激复合物和壳聚糖的生物学特性及其在气溶胶疫苗领域的应用。脂质体、免疫刺激复合物和壳聚糖作为气溶胶疫苗鼻黏膜免疫的载体,能够增强疫苗的免疫原性,提高机体的体液免疫和细胞免疫水平,因此,可作为疫苗抗原激发特异免疫应答的生物材料。     

一种新型的药物载体──S－脂质体

一种新型的药物载体──Ｓ－脂质体袁仕善（武汉大学生命科学学院,４３００７２）关键词药物载体,脂质体Ｓ－脂质体是指含有神经节苷脂ＧＭ１或聚乙二醇衍生物的脂质体。ＧＭ１引入了唾液酸残基增强了膜的稳定性,极大地降低了血浆成分诱发的脂质体溶解的敏感度和其内容...     

脂质体及其应用研究进展

脂质体是一种人工制备的磷脂类生化物质,属携有双层包膜的脂质小囊.它作为药物载体具有许多优良的特性:可以保护药物,提高药效;减小药剂对机体的毒性;可将治疗药剂准确地命中病变部位、组织和细胞.近年来,国内外在这方面进行了大量的研究,并取得了一些进展.简要概述了这方面的一些研究进展.     

细菌作为肿瘤基因治疗载体的研究进展

营养缺陷型细菌能够侵袭肿瘤细胞并外源基因的特性提示我们可以将其设计成新型的肿瘤基因治疗载体。本文综述了细菌作了肿瘤基因治疗载体的历史与现状、机制以及存在的问题。     

磁性纳米颗粒作为载体在基因转染中的研究进展

磁性纳米颗粒具有很强的结合、浓缩与保护DNA的作用,具有超顺磁性、较高的安全性和低的免疫原性,可以结合大片段DNA,在外加磁场的作用下可实现安全、高效的基因靶向性运输,提高外源基因的转染效率。由于磁性纳米颗粒的独特性质,使得其作为非病毒载体在基因治疗中的应用进展迅速。我们简要介绍磁性纳米材料的特点、种类及结构,磁性纳米基因载体的特点,以及磁性纳米颗粒作为载体在基因转染中的应用情况。     

病毒性载体介导的基因转移研究进展

病毒性载体介基因转移研究进展迅速,并率先用于临床基因治疗试验。目前研究重点在其进一步完善和发展,以及发现新的适于基因治疗的病毒性载体,已获部分突破性进展,大大加速了基因治疗研究的进程,但也存在一些限制因素,尚需深入研究。     

引人注目的脂质体

说起导弹,人们便会想到它具有专一地追踪,摧毁目标的功能。经过多年的艰苦探索,一种新型的超微型生物导弹,已经研制问世。这种生物导弹就是脂质体(liposome)。脂质体是由磷脂双分子层人工膜在水溶液中形成的微囊。双分子层是生物膜结构的重要组成部分,而制备脂质体采用的磷脂和胆固醇均是天然存在的物质,所以脂质体膜近似天然的生物膜。脂质体具有亲水性,又具有亲脂     

DNA—处理的精子作为基因转移载体

继１９８９年首次报道成功地利用精细胞作为载体把ＤＮＡ转入小鼠胚胎及随后ＤＮＡ整合入小鼠基因组后,现又取得了一些进展和新的发现。据报道,ＤＮＡ可结合或掺入不同种类的动物和昆虫的精子中,包括小鼠、猪、山羊、绵羊、牛、鸡、鲤鱼、海胆、蜜蜂和丽蝇类等。通常,人们用脂质体或电激法来促进ＤＮＡ进入精细胞。这些研究出现的一个意外结果是质粒转基因作为染色体外遗传因子的持久性。１９９５年,澳大利亚研究人员在《动物生物技术》杂志上曾发表了一篇用ＤＮＡ处理的精子人工授精生产转基因牛的报道。经Ｓｏｕｔｈｅｍ印迹分析表明…     

硅纳米颗粒作为基因转染载体的研究

通过不同浓度的NaCl、NaI修饰硅纳米颗粒,用琼脂糖凝胶电泳分析硅纳米颗粒与DNA结合力及对DNA的保护作用,同时用绿色荧光蛋白基因作报告基因,以硅纳米颗粒作为基因转染的载体,转染HT1080细胞。经电镜观察证实硅纳米颗粒进入细胞内;硅纳米颗粒与DNA结合后,能对DNA起保护作用;并且硅颗粒作为基因转染的载体,将绿色荧光蛋白基因导入HT1080细胞,用荧光显微镜观察到发绿色荧光的细胞。结果表明,硅纳米颗粒可作为基因转染的载体。     

磁性纳米颗粒作为基因转染载体的研究

通过扫描电子显微镜和Zeta电位仪对磁性纳米颗粒的形貌、粒径、表面电位等进行了表征。利用凝胶电泳阻滞试验分析磁性纳米颗粒与DNA的结合情况,研究磁性纳米颗粒对DNA的保护效果,运用MTT和流式细胞术分析磁性纳米颗粒对细胞的毒性。以绿色荧光蛋白基因为报告基因进行293T细胞的转染,研究磁性纳米颗粒与质粒DNA不同比例条件下对293T细胞的转染效率,并与脂质体(Lipofectamine2000)介导的转染进行比较分析。结果表明,磁性纳米颗粒与DNA可以稳定结合,可以保护DNA免受酶的消化作用,当磁性纳米颗粒与DNA比为1 1时,转染效率最高,优于脂质体(Lipotamine2000)介导的转染,且对细胞的毒害作用小于Lipotamine2000。