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利用PCR技术从Streptococucspyogenes的基因组DNA中扩增了链激酶的编码基因ska,并进行了序列分析 ,利用基因删除及定点位变技术获得了删除了C-末端 42个氨基酸残基编码区的突变链激酶基因skaΔC42 ,第 5 9位Lys残基突变为Glu的突变链激酶基因skaK5 9E以及删除C-末端 42个氨基酸且第 5 9位Lys残基突变为Glu的突变链激酶基因skaΔC42K5 9E ,将ska及其三种突变体分别克隆到表达载体pET 1 5b上 ,构建分别表达野生型链激酶 (SK)、C-末端缺失 42个氨基酸残基的突变体 (SKΔC42 )、第 5 9位Lys残基突变为Glu的突变体 (SKK5 9E)及C-末端缺失 42个氨基酸且第 5 9位Lys残基突变为Glu突变体 (SKΔC42K5 9E)的表达载体pSK ,pSKΔC42 ,pSK K5 9E ,pSKΔC42K5 9E ,分别转化E .coliBL2 1 (DE3) ,IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了高效表达 ,经亲和层析、离子交换层析及分子筛层析 ,获得了rSK、rSKΔC42、rSKK5 9E及rSKΔC42K5 9E ,活性分析表明rSK与其三种突变体具有相同的比活性。 相似文献
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链激酶及其在医疗上的应用进展 总被引:1,自引:0,他引:1
链激酶及其在医疗上的应用进展李华郝宏(山东医科大学生化制药教研室,济南250012)关键词链激酶构效关系免疫原性临床应用链激酶(Streptokinase,简称SK)是β-溶血性链球菌分泌的一种胞外蛋白,具有激活纤维蛋白溶酶原导致血栓溶解的活性。SK... 相似文献
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邹福强 《中国生物工程杂志》1987,7(1):60-60
经美国国家卫生院(NIH)批准,Genentech公司进行了TPA(tissue plasminogen activator,血纤蛋白溶酶原激活剂)的试验。试验报告说,TPA能溶解三分之二以上心脏病患者的凝块;而通常使用的链激酶(St-eptokinase)只能溶解37%病人的凝块。 相似文献
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Boehringer Ingelheim(西德的Ingelheim Am Rhein)请求它的竞争对手—Behringwerke(西德的Marburg)在德国血栓溶解剂市场帮助销售血块溶解药—组织纤维蛋白原激活因子(TPA)。Boehringer具有Genentech公司(加利福尼亚州的南旧金山)研制的TPA的独家许可权。而Behringwerke(Hoechst AG的一个分公司)则致力于销售链激酶。Boehringer对于销售链激酶无任何特权。终于他们做成了交易,Behringwerke将与Boehringer共同在西德销售TPA,同时停止 相似文献
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张洪伟 《现代生物医学进展》2005,5(1):41-42
有心电图ST段升高的急性心肌梗塞 (AMI)的典型患者 ,其冠状动脉中粥样硬化斑块破裂的部位形成闭塞性血栓。AMI的最佳治疗是迅速而完全地恢复心肌血液灌注。这就要求在梗塞相关冠状动脉重建开放管腔。在很多大规模的随机性的研究中已经证明 ,早期使用溶栓剂治疗可使AMI患者的病死率降低 30 % [1] 。现就目前AMI的溶栓治疗现状作一简要概述。常用溶栓剂1 常用药物 :尿激酶 (UK)是一种丝氨酸蛋白酶 ,其溶栓治疗效果与链激酶相似。链激酶 (SK)是链球菌的细菌蛋白 ,应用时常规静脉注射地塞米松 5mg,以防止过敏反应。链激酶可使AMI病死… 相似文献
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尿激酶原或尿激酶型纤溶酶原激活剂具有特异性溶解血栓作用,引起人们的极大兴趣。西方国家1986年开始进行临床研究,A-74187或Sp2/0表达的糖基化尿激酶原以及大肠杆菌表达的非糖基化尿激酶原治疗急性心肌梗死阻塞相关血管开通率为70%~80%。德国Grünenthal公司用大肠杆菌表达的非糖基化尿激酶原(Saruplase)治疗急性心肌梗死研究采用20 mg推注,60 mg/60 min滴注,分别与重组组织型纤溶酶原激活剂、尿激酶、链激酶进行比较,并做了1698名心肌梗死患者的开放性临床试验,梗塞相关血管的开通率达到70%~80%。Saruplase与链激酶在104个临床研究中心,入组3089名急性心肌梗死患者进行大规模临床试验。结果表明,Saruplase对阻塞相关血管开通率、30天死亡率、出血合并症等副作用与链激酶没有明显差异,而出血性中风发生率高于链激酶,欧盟未批准Saru plase上市。国产重组人尿激酶原也进行了探索研究,用于治疗急性心肌梗死给药剂量为30~60 mg,给药时间为30或60 min,阻塞相关血管开通率为63.4%~80.0%,而尿激酶为52.2%~66.7%(平均58.0%)。此外,国外用重组人尿激酶原治疗深层静脉血栓和缺血性中风进行了探索研究,但病例数较少,尚须进一步研究。 相似文献
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心血管疾病特别是急性心肌梗塞是严重威胁人类健康的疾病,近十多年来,大量研究溶栓治疗药物的作用。溶栓剂可分两类: 1.非特异性,对血栓或循环中纤溶系统均有作用。如链激酶(SK)、尿激酶(UK)、乙酰化纤溶酶-链激酶激活剂复合物(APSAC)、蛇毒溶栓剂(包括去纤酶、溶栓酶和抗栓酶)和蚓激酶(蚯蚓产物)等。 2.选择性作用于血栓部位的纤维蛋白, 相似文献
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Phillips 石油公司(巴特尔斯维尔,俄克拉何马州)的一些研究人员用一种甲基营养酵母,即巴斯德毕赤酵母(Piehia pasforis)作为寄主。利用 Pichia rDNA 高水平表达系统的这项研究是由 Phillips 公司和 Salk 生物技术和工业联合研究所(SIBIA)共同进行的。链激酶可用于溶解静脉和动脉血管内血块和导致急性心肌梗塞有关的血块。研究表明,只要心脏病发作后能立即服用该酶,还能减少继发的心脏肌肉损伤。产链激酶的细胞量所以能达到前所未有的水平,与 Phillips 公司的一项高细胞密度培养 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923659链激酶发醉的动力学分析及模型建立〔英〕/Stueb-ner,K.…了Aeta Bioteehnol一1991,11(5)一467~477〔译自DBA,1902,11(7),。2- 03774〕 研究了厌氧等温等容批量培养过程中链激酶生产的动力学。发酵在CHEMAP发酵罐中进行,培养基含酵母自溶物(氮源)、葡萄糖(碳源)和无机盐。在发酵罐中进行5个实验流程,每1或2 hr移去培养液中样品,并根据生物量、细胞计数、消光值和糖浓度进行分析。动力学特性鉴定表明生长受初始产物的限制,该产物呈S形行为、在专性底物降解与乳酸形成比率间呈线性相关,蛋白形成和底物降解间呈线性相关。提出了具… 相似文献
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血栓性疾病,尤其是急性心肌梗塞严重威胁着人类的生命与健康,目前国内外临床应用的溶血栓药物主要有:链激酶(streptokinase,SK)、尿激酶(urokinase,UK)以及近年来开始广泛研究和初步应用的纤溶酶原激活因子(PA)。 相似文献
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蝮蛇毒(清栓酶)静脉给药治疗急性心肌梗塞13例分析 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,国内外对急性心肌梗塞(AMI)采用溶栓疗法的报道日趋增多,且大部分采用冠脉内直接给药,静脉内给药国内作过尝试。国外报道了二种给药途径的疗效。溶栓剂均采用尿激酶,链激酶等,个别作者用组织型纤溶酶原激活剂(t-pA),我们自1989年开始对急性心肌梗塞选择性地应用蝮 相似文献
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开发中的抗栓剂——水蛭素及其12肽 总被引:1,自引:0,他引:1
血栓病是严重危害人类生命与健康的疾病,多年来人们一直在致力于寻找和研制治疗血栓病的有效药物。至今,已有尿激酶、链激酶,组织型纤溶酶原激活剂以及尿激酶原等溶栓药物。与此同时人们也一直在寻找效果更好的抗栓药物。水蛭素就是一种正在开发的抗栓药物。早在1884年就发现了水蛭素,但直到 相似文献
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目的: 评价重组葡激酶的溶栓效力,并与相同作用方式的重组链激酶进行比较。方法: 30只中国实验小型猪分成5组,分别为溶剂对照组、阳性药对照组和三个重组葡激酶组,每组6只,采用麻醉动物、手术开胸、直流电刺激形成冠脉血栓;在冠脉血栓形成30 min后开始静脉给药,采用先推注、再蠕动泵恒速输注的方式给药;溶剂对照组静脉推注对照液,阳性药对照组静脉给予重组链激酶4 mg·kg-1,三个重组葡激酶组分别静脉给予4 mg·kg-1、2 mg·kg-1、1 mg·kg-1重组葡激酶,静脉推注体积为5 ml,1 min内注毕,输注速度为0.5 ml·min-1,60 min内输毕,120 min后放血处死动物。于给药前及给药后30、60、120 min取静脉血,实验结束后取血栓形成部位的冠脉血管段,分别检测优球蛋白溶解时间(ELT)、血纤维蛋白原含量(Fbg)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)和伤口出血量,检测冠脉血栓溶解率、心肌缺血程度及缺血范围。结果: 与溶剂对照组相比,试验组ELT明显缩短(P<0.05或P<0.01),FDP 明显升高(P<0.05或P<0.01),较少量实验动物Fbg降解超过20%,对小型猪血压及心率无明显影响。与对照组相比,试验组高、中2个剂量组,最大血栓面积分别减少34.3%、15.4%(P<0.05)。与等剂量的重组链激酶相比,重组葡激酶对电刺激引起的冠脉血栓具有更强的溶栓作用(P<0.05或P<0.01),引起的出血副反应少。结论: 重组葡激酶对小型猪冠脉血栓有较好的溶栓作用,相比重组链激酶,溶栓速度快、具有更高的纤维蛋白专一性,出血副反应较少。综合比较, 2 mg·kg-1重组葡激酶具有较好的临床疗效和安全性保障。 相似文献
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《中国生物工程杂志》2007,27(6):137-139
我国生物药研究进入创新阶段我国生化与生物技术药物的研究和开发起步于20世纪70年代,到上世纪90年代已经有很多产品产业化,有预测表明,未来生化与生物技术药物产值的年增长率不会低于12%。目前,国内市场的生物技术药物主要是基因工程乙肝疫苗、重组胰岛素、重组链激酶、重组表 相似文献
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溶栓剂的蛋白质工程孙天霄,徐长法(北京大学生命科学院北京100871)一、前言溶栓剂是治疗急性心肌梗塞(AcuteMy-ocardialInfarction,AMI)最有效的药物。目前AMI的治疗方法有三种:第一,外科手术,这种方法要求条件复杂,费用高;第二,保守疗法,即只给患者长期服用阿斯匹林等抗凝药物;第三,溶栓疗法,即注射链激酶(streptokinase,SK)、尿激酶(urokinase,UK)或组织型纤溶酶原激活剂(tissue-typeplasminogenactivator,t-PA)一等溶栓剂使血管再通。 相似文献
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今后20年,我国将步入老龄化社会,血栓病是中老年人的高发病,是对死亡威胁最大的疾病之一,血栓性疾病,尤其是急性心机梗塞严重威胁着人类的生命与健康.目前,溶解血栓是治疗这一类疾病的重要手段,当今用于临床治疗的药物包括链激酶(streptkinase简称SK)、尿激酶(Urokinase,简称UK)、组织血纤溶酶原激活剂(t-PA)、单链尿激酶型血纤溶酶原激活剂(SCUPA)、化学修饰的血纤溶酶-链激酶激活剂复合物(APSAC)等.这些药物均为激活血液中的血纤溶酶原,从而降解纤维蛋白而间接地起作用.在实际应用上,它们都是注射或滴注用药物,有可能引起病人产生全身性内出血,而且在血液中的半衰期很短(3~20 min),因此在使用这些药物时必须长时间的滴注用药,很不方便,且来源紧缺,造价高.因此,开发新型溶血栓药物成为当前重要研究课题之一. 相似文献