大鼠延髓网状背侧亚核内5-羟色胺能、P物质样和脑啡肽样阳性终末的中枢起源

研究用荧光金（ＦＧ）逆行追踪与免疫荧光组化染色相结合的双标技术对大鼠脑干向延髓网状背侧亚核（ＳＲＤ）的５┐羟色胺（５┐ＨＴ）能、Ｐ物质（ＳＰ）能和亮氨酸┐脑啡肽（Ｌ┐ＥＮＫ）能投射进行了观察。将ＦＧ注入ＳＲＤ后,ＦＧ逆标神经元主要见于中脑导水管周围灰质、脑干中缝核簇（中缝背核、中缝正中核、中缝桥核、中缝大核、中缝隐核和中缝苍白核）、巨细胞网状核α部、延髓网状结构的内侧部和外侧部、延髓外侧网状核、三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核。５┐羟色胺（５┐ＨＴ）样、Ｐ物质（ＳＰ）样和亮氨酸脑啡肽（Ｌ┐ＥＮＫ）样阳性神经元主要见于中脑导水管周围灰质、脑干中缝核簇和巨细胞网状核α部;此外,ＳＰ样和Ｌ┐ＥＮＫ样阳性神经元还见于臂旁核、背外侧被盖核和孤束核。ＦＧ逆标并呈５┐ＨＴ样、ＳＰ样或Ｌ┐ＥＮＫ样阳性的双标神经元也主要见于中脑导水管周围灰质、脑干中缝核簇和巨细胞网状核α部,尤其是位于延髓中缝核团内的双标神经元数量较多。本研究的结果说明ＳＲＤ内的５┐ＨＴ样、ＳＰ样和Ｌ┐ＥＮＫ样阳性终末主要来自中脑导水管周围灰质、脑干中缝核簇和巨细胞网状核α部,向ＳＲＤ发出５┐ＨＴ能、ＳＰ能和Ｌ┐ＥＮＫ能投射的上述核团对ＳＲＤ发挥“弥漫性伤害抑     

刺激中缝背核对大鼠小脑皮层下核团神经元电活动的影响

我们首次观察了电刺激大鼠中缝背核（ＤＲ）对小脑核团（ＤＣＮ）──内侧核（ＭＮ）,间位核（ＩＮ）和外侧核（ＬＮ）神经元电活动的影响。结果表明：刺激ＤＲ可引起ＤＣＮ神经元的抑制、兴奋和双相（兴奋－抑制、抑制－兴奋）三种不同类型的反应,其中以抑制性反应为主（７６％－９０％）;反应的潜伏期为１０—８４ｍｓ,但大多数细胞呈现小于３０ｍｓ的短潜伏期反应;ＤＣＮ细胞的自发放电频率为５－１２０Ｈｚ,自发放电频率高的神经元群体对ＤＲ刺激的反应比率却比自发放电频率低的群体低;静脉注射５－ＨＴ２／１ｃ受体阻断剂ｍｅｔｈｙｓｅｒｇｉｄｅ可以阻断ＤＣＮ细胞对ＤＲ刺激的抑制性反应（６６．７％－８３．３％）。这些结果提示中缝－小脑５－ＨＴ能纤维传入系统可能通过对ＤＣＮ细胞电活动的调制作用参予小脑的感觉运动整合过程。     

蓝斑在刺激视上核镇痛中的作用

应用核团微量注射、放射免疫测定（ＲＩＡ）和高压液相（ＨＰＬＣ）观察了刺激视上核（ＳＯＮ）对蓝斑（ＬＣ）灌流液中催产素（ＯＴ）、精氨酸加压素（ＡＶＰ）、去甲明上素（ＮＥ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）的含量的变化以及斑注射Ｏ笔ＡＶＰ的拮抗剂对痛阈（ＰＴ）的影响。结果表明;刺激ＳＯＮ后３０到９０ｍｉｎ,ＬＣ灌流液中ＯＴ的含量,３０ｍｉｎＡＶＰ的含量,６０ｍｉｎ５－ＨＴ的含量明显增加,而ＮＥ的含量在３０和６０     

大鼠脑内5-HT能神经元对咽肌的支配及调控

用ＰＲＶ和５－ＨＴ免疫组织化学双标记方法研究脑内５－ＨＴ能神经元对咽肌的神经支配及调控。观察到中缝核群的中缝苍白核、中缝隐核、中缝大核、中缝桥核、中缝正中核、中缝背核、和中缝尾侧线形核等部位有ＰＲＶ和５－ＨＴ双标记细胞,直接证明中缝核群的５－ＨＴ能神经元投射到支配咽肌的疑核运动神经元和孤束核中的前运动神经元,调控咽肌的运动。并推测脑干中缝核群中的５－ＨＴ能神经元对咽肌运动的调控可能经由５ＨＴ３和５ＨＴ１Ａ两种受体介导。     

刺激中缝背核调制小脑间位核神经元电活动

刺激中缝背核（ｄｏｒｓａｌｒａｐｈｅｎｕｃｌｅｕｓ,ＤＲ）可以引起小脑间位核（ｉｎｔｅｒｐｏｓｅｄｎｕｃｌｅｕｓ,ＩＮ）神经元抑制,兴奋和双相（抑制－兴奋和兴奋－抑制）３种不同类型的反应,其中以抑制反应为主（７６．０％）,多数细胞的反应潜伏期〈３０ｍｓ。ＩＮ细胞的自发放电频率为５－１２０Ｈｚ,自发放电频率高的神经元群体对ＤＲ刺激的反应率却比自发放电频率低的群体低。静脉注射５－ＨＴ２／１ｃ受体阻断剂     

刺激中缝背核对视交叉上核光敏神经元单位放电的影响

本实验观察刺激中缝背核对大鼠视交叉上核光敏神经元单位放电的影响,并进行药理学分析。结果表明,刺激ＤＲ能明显抑制ＳＣＮ神经元光诱发放电,这种抑制作用能被单胺氧化酶抑制剂优降宁增强,能被５－ＨＴ合成抑制剂对氯苯丙氨酸减弱,还能被５－ＨＴ受体拮抗剂赛庚啶阻断。结果提示,５－ＨＴ参与了刺激ＤＲ对ＳＣＮ光敏神经元放电的抑制。     

5—HT和NA增强大鼠骶髓后连合核神经元甘氨酸门控Cl^—通道电流由蛋白激...

用制霉菌素穿孔膜片钳方法研究５－ＨＴ和ＮＡ对急性分离的大鼠骶髓后连合核神经元甘氨酸门控氯离子通道电流（ＩＧｌｙ）的调控作用及其胞内机制。发现：（１）５－ＨＴ激活与非胰岛激活蛋白（ＩＡＰ）敏感型Ｇ蛋白偶联的５－ＨＴ２受体亚型,激活磷脂酶Ｃ（ＰＬＣ）,增加甘油二酯（ＤＡＧ）的生成。ＤＡＧ增强不依赖Ｃａ＾２＋的新型ＰＫＣ（ｎＰＫＣ）的活性,从而增强ＩＧｌｙ;（２）ＮＡ激活与ＩＡＰ敏感型Ｇ蛋白偶联的α２受     

中缝大核在刺激视上核镇痛中的作用

运用核团灌流液的放免测定和高压液相色谱法以及核团内注射拮抗剂,观察了化学刺激下丘脑视上核（ＳＯＮ）对中缝大核（ＮＲＭ）灌流液内催产素（ＯＴ）、精氨酸加压素（ＡＶＰ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）含量的影响以及ＮＲＭ内注射ＡＶＰ、５－ＨＴ或ＯＴ受体拮抗剂对痛阈（ＰＴ）的影响。结果表明：ＳＯＮ内注射Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）１０μｇ后动物痛阈明显升高,ＮＲＭ灌流液中ＯＴ和５－ＨＴ的含量明显高于对照组水平,ＡＶＰ的含量仅有一过性增加。ＮＲＭ内注射ｏＴ或５－ＨＴ拮抗剂可逆转化学刺激ＳＯＮ引起的镇痛作用;而ＡＶＰ的Ｖ＿(１／２)受体拮抗剂也轻度抑制这种镇痛作用,但Ｖ＿１拮抗剂对此作用无影响。以上结果提示：在刺激ＳＯＮ镇痛中,ＯＴ起着重要作用,Ｌ－Ｇｌｕ刺激ＳＯＮ的ＯＴ细胞释放ＯＴ,作用于ＮＲＭ细胞的ＯＴ受体和Ｖ＿２受体而产生镇痛作用,５－ＨＴ在此过程中也发挥重要作用。     

5-HT和NA增强大鼠骶髓后连合核神经元甘氨酸门控Cl~-通道电流由蛋白激酶介导

用制霉菌素穿孔膜片钳方法研究５－ＨＴ和ＮＡ对急性分离的大鼠骶髓后连合核神经元甘氨酸门控氯离子通道电流（ＩＧｌｙ）的调控作用及其胞内机制。发现：（１）５－ＨＴ激活与非胰岛激活蛋白（ＩＡＰ）敏感型Ｇ蛋白偶联的５－ＨＴ２受体亚型,激活磷脂酶Ｃ（ＰＬＣ）,增加甘油二酯（ＤＡＧ）的生成。ＤＡＧ增强不依赖Ｃａ２＋的新型ＰＫＣ（ｎＰＫＣ）的活性,从而增强ＩＧｌｙ;（２）ＮＡ激活与ＩＡＰ敏感型Ｇ蛋白偶联的α２受体,抑制腺苷酸环化酶（ＡＣ）,减少ｃＡＭＰ的生成,使ＰＫＡ活性降低,从而增强ＩＧｌｙ。     

中国树鼩下丘脑视上核和室旁核内加压素和催产素能神经元的比较分布

应用PAP-PAAP双重免疫组化染色程序在同一切片上进行两种肽能物质的定位,观察了中国树鼩下丘脑视上核和室旁核内VP能和OT能神经元的比较解剖学分布,发现:视上核被视束分成主部和交叉后部。在视上核主部,其头侧部几乎仅含OT能神经元胞体,中间部VP能胞体出现并逐渐增多,尾侧部VP能胞体数目明显超过OT能胞体。在明显含有两种胞体的中间部和尾侧部,OT能胞体多位于背内侧,VP能胞体多位于腹外侧;在视上核交叉后部,其头侧部以VP能胞体为主,且多位于背外侧,OT能胞体多位于腹内侧。中间部OT能胞体多位于内侧,VP能胞体多位于外侧。尾侧部OT能胞体多位于背、腹两侧,VP能胞体则多位于中间;在室旁核,其头侧部几乎全由OT能胞体构成。中间部,VP能胞体出现并逐渐增多,OT和VP能胞体分别主要位于内、外侧。尾侧部两种神经元胞体较明显地分为内、外两群,内侧群主要为OT能胞体,外侧群几乎全为VP能胞体,该群的头侧半又可分为背腹两个亚群,至尾侧半,此二亚群渐合并。本文讨论了OT和VP能神经元在中国树鼩和大鼠视上核和室旁核内的比较分布。     

中缝背核参与下丘脑弓状核对蓝斑伤害性反应的抑制

实验在56只水合氯醛麻醉的成年雄性大鼠上进行。实验结果表明:电刺激中缝背核(DR)能减慢蓝斑(LC)大多数神经元自发放电频率;而损毁DR则增加大多数LC神经元的自发放电频率。电刺激下丘脑弓状核(ARC)能抑制LC神经元对外周坐骨神经伤害性刺激的反应。刺激DR可增强此种抑制作用;相反,损毁DR能部分减弱此种抑制效应。结果提示,DR对LC神经元有紧张性抑制作用,并对刺激ARC抑制LC神经元伤害性反应起着调制作用。     

The role of 5-HT1B receptors in the regulation of serotonin cell firing and release in the rat brain

The release of 5-HT in terminal areas of the rodent brain is regulated by 5-HT1B receptors. Here we examined the role of 5-HT1B receptors in the control of 5-HT output and firing in the dorsal raphe nucleus (DR), median raphe nucleus (MnR) and forebrain of the rat in vivo. The local perfusion (30-300 microM) of the selective 5-HT1B receptor agonist CP-93,129 to freely moving rats decreased 5-HT release in the DR and more markedly in the MnR. Likewise, 300 microM CP-93,129 reduced 5-HT output in substantia nigra pars reticulata, ventral pallidum, lateral habenula and the suprachiasmatic nucleus. The effect of CP-93,129 was prevented by SB-224289, but not by WAY-100635, selective 5-HT1B and 5-HT1A receptor antagonists, respectively. SB-224289 did not alter dialysate 5-HT in any raphe nuclei. The intravenous administration of the brain-penetrant selective 5-HT1B receptor agonist CP-94,253 (0.5-2.0 mg/kg) to anesthetized rats decreased dialysate 5-HT in dorsal hippocampus and globus pallidus, increased it in MnR and left it unaltered in the DR and medial prefrontal cortex. SB-224289, at a dose known to block 5-HT1B autoreceptor-mediated effects (5 mg/kg), did not prevent the effect of CP-94,253 on MnR 5-HT. The intravenous administration of CP-94,253 (0.05-1.6 mg/kg) to anesthetized rats increased the firing rate of MnR, but not DR-5-HT neurons. The local perfusion of CP-94,253 in the MnR showed a biphasic effect, with 5-HT reductions at 0.3-3 microM and increase at 300 microM. These results suggest that 5-HT cell firing and release in midbrain raphe nuclei (particularly in the MnR) are under control of 5-HT1B receptors. The activation of 5-HT1B autoreceptors (possibly located on 5-HT nerve endings and/or varicosities within DR and MnR) reduces 5-HT release. The effects of higher concentrations of 5-HT1B receptor agonists seem more compatible with the activation of 5-HT1B heteroreceptors on inhibitory neurons.     

束缚应激对大鼠下丘脑室旁核、视上核一氧化氮合酶活性的影响

目前已知下丘脑是应激反应的关键性调节中枢,下丘脑内一氧化氮是否参与应激反应尚未见报道。本文运用ＮＡＤＰＨ－ｄ酶组化技术和计算机图象分析方法,对束缚应激大鼠下丘脑室旁核（ＰＶＮ）和视上核（ＳＯＮ）一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元的相对切面面积和平均灰度进行了分析。结果显示,大鼠在急性束缚应激４小时后,其下丘脑ＰＶＮ和ＳＯＮ内的ＮＯＳ阳性神经元的平均灰度值与正常大鼠比较均明显降低（Ｐ＜０．００１）;ＳＯＮ的ＮＯＳ阳性神经元的相对切面面积明显大于正常大鼠（Ｐ＜０．００１）,但ＰＶＮ的ＮＯＳ阳性神经元的相对切面面积未见明显改变（Ｐ＞０．０５）。以上结果说明束缚应激使大鼠下丘脑ＰＶＮ和ＳＯＮ的ＮＯＳ活性增强     

下丘脑外侧区微量注射赛庚啶对束旁核痛敏单位放电的影响

实验用SD大鼠,记录丘脑束旁核(pf)的痛敏单位放电。下丘脑外侧区(LHA)微量注射赛庚啶(cyproheptadine,3μg/μl)后观察到:1.pf痛敏单位的自发放电与(痛)诱发放电频率明显增加,且诱发放电时程延长;2.部分痛敏单位自发放电由注射前散在的单脉冲形式转变为注射后的散状间簇状或完全的簇状式放电;3.LHA注射等量配药液对pf痛敏单位放电无明显影响。本实验结果提示:LHA局部的内源性5-HT参与该区对丘脑水平痛信息的抑制性调控过程。     

兔孤束核腹外侧区微量注射谷氨酸钠及甘氨酸对弓状核诱发电位的影响

实验在６６只麻醉、制动,断双侧颈迷走神经和人工通气的家兔上进行。通过微量注射神经元胞体兴奋剂谷氨酸钠和神经元胞体抑制剂甘氨酸,改变孤束核腹外侧区神经元兴奋活动,探讨对下丘脑弓状核诱发电位的影响及其可能的机制和意义。实验结果如下：（１）孤束核腹外侧区微量注射谷氨酸钠,可使膈神经放电显著增加和使弓状核诱发电位Ｐ２及Ｎ２波幅显著降低;而微量注射甘氨酸则使膈神经放电显著减少和使弓状核诱发电位Ｐ２及Ｎ２波幅显著增大。（２）静脉注射纳洛酮对谷氨酸钠引起的膈神经放电兴奋效应无明显影响,但能翻转谷氨酸钠对弓状核诱发电位Ｐ２及Ｎ２波幅的抑制效应。提示：孤束核腹外侧区呼吸神经元的兴奋活动可扩散至弓状核,并对弓状核诱发电位产生影响,此影响可能是由内源性阿片系统参与而实现的。     

胃肠道伤害性刺激诱导中缝背核触液神经元Fos表达

本文以ＣＢ－ＨＲＰ逆行追踪和原癌基因ｃ－ｆｏｓ表达技术相结合,观察胃肠道伤害性刺激后中缝背核触液神经元Ｆｏｓ的表达。在中缝背核发现三种标记神经元,包括ＣＢ－ＨＲＰ逆行标记神经元（３０８）、Ｆｏｓ阳性神经元（４２）和ＣＢ－ＨＲＰ／Ｆｏｓ双重标记神经元（５）。本研究提示中缝背核含有一些具有双重功能的神经元,它们既在脑－脑脊液神经体液回路中传递信息,又在胃肠道伤害性刺激的中枢传递和功能调控中起一定的作用     

In vivo efflux of serotonin in the dorsal raphe nucleus of 5-HT1A receptor knockout mice

In the dorsal raphe nucleus (DR), extracellular serotonin (5-HT) regulates serotonergic transmission through 5-HT1A autoreceptors. In this work we used in vivo microdialysis to examine the effects of stressful and pharmacological challenges on DR 5-HT efflux in 5-HT1A receptor knockout (5-HT1A-/-) mice and their wild-type counterparts (5-HT1A+/+). Baseline 5-HT concentrations did not differ between both lines of mice, which is consistent with a lack of tonic control of 5-HT1A autoreceptors on DR 5-HT release. (R)-(+)-8-Hydroxy-2-(di-n-propylamino)tetralin hydrobromide (8-OH-DPAT, 0.5 mg/kg) reduced 5-HT levels to 30% of basal values in 5-HT1A+/+ mice, but not in 5-HT1A-/- mice. The selective 5-HT1B receptor agonist 1,4-dihydro-3-(1,2,3,6-tetrahydro-4-pyridinyl)-5H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-5-one dihydrochloride (CP 93129, 300 micro m) reduced dialysate 5-HT to the same extent (30-40% of baseline) in the two genotypes, which suggests a lack of compensatory changes in 5-HT1B receptors in the DR of such mutant mice. Both a saline injection and handling for 3 min increased DR dialysate 5-HT in mutants, but not in 5-HT1A+/+ mice. Fluoxetine (5 and 20 mg/kg) elevated 5-HT in a dose-dependent manner in both genotypes. However, this effect was markedly more pronounced in the 5-HT1A-/- mice. The increased responsiveness of the extracellular 5-HT in the DR of 5-HT1A receptor knockout mice reflects a lack of the autoinhibitory control exerted by 5-HT1A autoreceptors.