涡虫神经纤维的硫酸铜-硝酸银显示法

整体染色:(1)在10毫升福末林(普通的);45毫升95％乙醇;2毫升冰醋酸組成的混合剂內固定24—48小时。(2)不用洗滌,轉入70％乙醇內3—10天。(3)在蒸餾水內洗滌一小时。(4)在50℃下,在10％硫酸銅(CuSO_4·5H_2O)內浸3小时。(5)不經洗滌,在50℃下,轉入1％硝酸銀內1.0—1.5小时。(6)在蒸餾水內洗3分钟,連續三次,每次一分钟。(7)在40—45℃时水浴內,在下述显影剂內还原,显影剂配法:1％連苯三酚10毫升;56％乙醇(一般为60％)     

应用~3H-胸腺嘧啶核苷测定血淋巴细胞转化的方法

本文介绍了应用微量血液测定DNA合成的方法:0.1毫升肝素抗凝血液灌入3毫升含PHA的Fagle’s生长培养液中,培养54小时后注入~3H-TdR 0.6微居里,再培养16小时,吸弃上清液,沉淀用生理盐水洗涤两次,5％三氯醋酸洗一次。然后沉淀加0.5毫升5％三氯醋酸置90℃水浴15分钟,离心后吸取上清液0.2毫升加到5毫升闪烁液中进行测量。闪烁液配方:PPO 3克,POPOP 0.4萘克、110克、二氧六环1000毫升。10例健康人血平均~3H-TdR掺入率为10.8％。     

在组织切片中肥大细胞的证明及迅速记数的简单方法

肥大细胞的选择性染色法如下:1)薄片新鲜组织(3—5毫米厚)于下液固定18—24小时,但标本置于此液至少一周尚无显明害处。配法:福尔马林液10毫升;95%酒精90毫升;醋酸钙1克。2)组织以95%酒精洗2次,每次1小时。3)以常法制做石蜡切片(8—12微米厚),粘片,脱蜡,经纯酒精至95%酒精。4)在室温于下液内染1小时。配法:甲苯胺蓝(toluidine blue)0.25克;70%酒精100毫升;浓盐酸     

酚-次氯酸钠显色法测定大鼠脑中游离氨-N含量

本文介绍一种用酚-次氯酸钠试剂直接测定动物组织样品中游离氨-N含量的方法,此法简便、灵敏、省时,最小检测量为0.05微克氨-N。酚-亚硝基铁氰化钠试剂:取酚0.6克、亚硝基铁氰化钠5毫克、加水至50毫升,放置24—48小时后使用。次氯酸钠试剂:Na_2HPO_4·12H_2O 1.79克、Na_3PO_4·12H_2O 1.9克、氢氧化钠0.5克、次氯酸钠原液1毫升,加水至50毫升,贮于棕色瓶内。硫酸铵标准液(1毫升=0.05     

实验8 质粒DNA的提取

一、氯化铯超速离心提取法 1.在LB培养基(10克蛋白胨,5克酵母膏,10克氯化钠,15克琼脂粉,溶解于水后,用1N NaOH调节pH至中性,加水至1,000毫升,高压蒸汽灭菌)上划线接种含有待抽提的质粒的细菌。37℃培养过夜。如果质粒上带有抗性基因,则在培养基内加入相应的抗菌素,例如20微克氨苄青霉素/毫升,12.5—15微克四环素/毫升。 2.挑出单菌落接种在10毫升LB培养液(除不加琼脂粉外,成份与LB培养液相同)中,37℃培养过夜。     

玉米雄性不育的基因表达与调控

前文我们已报道了玉米RNA聚合酶B对 克隆化玉米mtDNA 的离体转录Ul。本文介绍 对克隆化玉米线粒体DNA (mtDNA）有高转 录活性的玉米RNA聚合酶B的制备方法。从 萌发,天的玉米芽中提取RNA 聚合酶的粗提 物,再经过离心、硫酸按沉淀、DEAE一纤维素及 Sephadex-G 100柱层析、甘油梯度离心等步骤, 使酶纯化了1,000倍,回收率为27%（表1     

介绍一种培养衣藻的新方法

最近,我用琼脂培养基培养衣藻效果很好,其配方如下:硝酸钾1克、氯化钾0.25克、硫酸镁0.25克、磷酸氢二钾0.25克、1％的硫酸亚铁0.2毫升、水1000毫升。以上各盐类溶于1000毫升水中,再加10克琼脂,加热溶解后,倒入试管中(占1/4)高压(1.5kg/cm)灭菌40分钟,取出摆成斜面,自然冷却后在无菌条件下,用接种环将衣藻接种在斜     

绿藻保色液的配制和使用方法

一、无鞭毛绿藻保色液的配制和使用方法1、保色液的配制取醋酸汞(HgACO)10克、中性醋酸铅(Pb(ACO)_2)10克,溶于1000毫升90%酒精(C_2H_2OH)中,混匀后静置24小时,取澄清液即得绿藻保色液。2、使用方法无鞭毛藻类如礁膜、刺松藻等,它们的植物体较大,处理较简单。只要把植物体冲洗干净,去掉杂藻,而固着物体大小适中,即可移入保色液中,一星期以后换液一次,然后蜡     

用哈栖木霉(Trichoderma harzianum)的细胞壁分解酶从指状青霉(Penicillium digitatum)的菌丝中制备原生质体

用哈栖木霉ATCC48131的细胞溶壁酶从指状青霉的菌丝体中制备原生质体。将指状青霉ATCC10030于27℃培养在马铃薯右旋糖液体培养基中,静止培养24小时,菌丝用Whatman 1号滤纸过滤收集,然后用0.6％的氯化钠冲洗3次。原生质体是从0.8克分子甘露糖醇溶液(pH5.5～6.0)的菌丝悬液(50～100毫克/毫升)中,用5～7％(W/V)对哈栖木霉中得到的细胞壁溶解酶,在每分钟100转的往复式摇床上,30℃下,摇4小时浸提。采用二相梯度离心,从剩余菌丝体碎片中分离出原生质体。1毫升1M硫酸镁同1毫升粗制原生质悬     

小鼠骨髓细胞的染色体制备

在实验教学中,我们借鉴有关方法,经过多次实践,证明用小鼠骨髓细胞作动物染色体的制备实验,方法简便可靠,结果明显.现介绍如下,供高等院校或中学生物学实验参考. 1.前处理实验用小白鼠(重25克左右),腹腔注射0.1毫升0.1％的秋水仙素溶液. 2.取材注射后2.5—3小时,用乙醚将小鼠麻醉(或直接处死小鼠),立即取出股骨,剔净肌肉. 3.低渗用剪刀将股骨两端剪开,用注射器吸入1毫升0.05M氯化钾低渗液,插入一端,冲洗出骨髓细胞,滴于培养皿中的载玻片上(载玻片置于二根玻棒之上).再加入适量的低渗液,并用滴管展开.盖上培养皿,在37℃下低渗处理20分钟. 4.固定低渗后,往培养皿中缓缓注入甲醇、冰醋酸固定液(3:1),盖上培养皿,固定100分钟.换入无     

甲拌磷乳剂浸、拌棉种防治棉蚜试验

为了减少用药治蚜次数,了解甲拌磷乳剂浸、拌棉种的防蚜效果,我们在任邱县的宗家佐公社、吕公堡公社和县农业科学研究所的棉花地里,进行了甲拌磷乳剂浸、拌棉种防治棉蚜试验。现将试验资料整理如下,以供参考。 材料及处理方法 供试材料:天津农药总厂产品甲拌磷乳剂,含有效成分75％。 修理方法:0.225％甲拌磷乳剂液浸种12小时。将500克棉籽放入用净水1000毫升与75％甲拌磷乳荆3毫升的稀释液中,浸12小时后捞出阴干播种。同样用0.375％、0.563％、0.75％甲拌磷乳液浸种,用75％甲拌磷量分别力5、7.5、10毫升,处理方法同前。 0.75％、1.5％、2.25％甲拌磷乳剂液拌种。将已选好之棉种500克用清水泡9小时,捞出晾至半干(3     

鱼类染色体的观察

在早春到市场上买性成熟的活雄鲤一条,取其精巢(性腺已发育到第Ⅳ期),做染色体的观察。 1.固定将精巢放入Carnoy固定液(无水酒精3份,冰醋酸1份),固定3小时,再换入70％酒精中。 2.染色用镊子和解剖针仔细取出精巢内的精细小管(细如白发),一小段,放手掌上剔去周围异物之后,放置载玻片上,加醋酸洋红(45％醋酸100毫升加洋红1克煮沸、冷却、过滤即成),染色2-3小时。     

标本采集、实验观察材料准备工作月历(8月)

┌──┬─────────────────────┬──┬──┬─────┬───┬────────┐│准备│工作内容和方法 │所需│使用│用途 │使用 │备注 ││时间│ │时间│时间│ │方法 │ │├──┼─────────────────────┼──┼──┼─────┼───┼────────┤│/又 │ 1.雨后在林间采到花褚伞(狗尿台),浸在固 │ │月 │认识几种 │课后 │供明年观察用 ││月 │定液固定(福尔马林4毫升、翻酸3克、水 │ │下 │食用与有 │观察 │ ││上 │400毫升),然后放在保存液中(12一1…     

肺血管注射石蜡切片

通过卡红明胶液进行血管注射,而不经过其他染色方法,直接石蜡切片,可清楚地显示毛细血管在泡壁上的分布及其毗邻关系。卡红明胶液的配制 1.取卡红6克加入50毫升蒸馏水中,逐渐滴加氨水,直至完全溶解,过滤备用。 2.取精制明胶20克与200毫升蒸馏水混合,过夜,置水浴锅中滆水加热溶解。随即取卡红液入明胶液中,搅拌混合,逐步滴加醋酸,至     

介绍一种新的鱼类胚胎原色标本制作法

大麻哈鱼胚胎标本固定于下面溶液中,保持自然色达10年之久未有改变。 固定液配方 福尔马林 16毫升 硼砂 1克 冰醋酸 1毫升 白糖 50克     

纸层析法测定庆丰霉素

我们通过试验,找到了一种测定庆丰霉素的纸层析法,此法简易、快速、较准确。现介绍如下。一、试剂层析溶剂:正丁醇:冰乙酸:蒸馏水=2.8:1:1。显色剂:0.3克茚三酮,5毫升吡啶用95%的乙醇定容为100毫升配成。春雷霉素溶液(作定量标准用):贮备液为2毫克/毫升,用时以蒸馏水稀释为500微克/毫升。贮备液可在冰箱中保存三个月。     

简易制作蟾蜍骨骼标本法

先将蟾蜍的皮剥去,再将骨骼上附着的肌肉初步拿掉(不必细作),后将蟾蜍放入烧杯内用开水约煮一刻钟取出。这时可用镊子仔细的将肌肉除去(因为煮后肌肉疏松很容易取掉),即可放入调配好的氢氧化钠(氢氧化钠1毫升,水100毫升)里,约浸两小时取出,即用清水洗干净氢氧化钠(因为氢氧化钠是碱性的,若不洗干净则漂白     

从国内现有菌株制备磷酸转乙酰酶

磷酸转乙酰酶(PTA),最早由Stadtman用克氏梭状孢子杆菌制备,但菌体培养烦难。1967年和1970年,Abiko报道了由大肠杆菌B制备PTA,并用以测定辅酶A。我们在Abiko工作的基础上,用大肠杆菌1.505制备PTA,获得较好的结果。大肠杆菌1.505菌种,是由中国科学院微生物研究所提供的。菌体培养条件如下:斜面培养基的成分是:1％蛋白胨,0.5％氯化钠,2％琼脂加蒸馏水至1,000毫升,趁热用绢布或纱布过滤分装,121℃,15磅灭菌30分钟,在无菌操作下将大肠杆菌1.505-环接种到斜面培养基上,37℃培养15小时。种子培养基的成分是1％葡     

绿色植物保存法的一点经验

在制作绿色植物浸渍标本时我们研究出下列方法可得满意的结果,兹介绍如后。保色液的配制:硫酸铜20克、浓盐酸2或3滴、水100毫升。将植物材料放入保色液中,如热至95℃左右,经半小时(视材料大小而略有增减)后,取出,在清水内充分洗净,然后放入5—10%福尔马林或70%酒精中保存即可。     

小剂量渐加滴药法测定淡色库蚊及致乏库蚊幼虫对丙体666的敏感度研究

龚坤元等曾提出用低剂量连续喷洒法测定野外家蝇的抗药性。他指出用此方法所得到的时间死亡曲线分布情况,可以测知防治中心、防治中间和防治边绿区域。作者根据此原理,测定淡色库蚊Culex pipiens pallens Coq.及致乏库蚊Culex atigans Wied.幼虫的抗药性。简报如下。 一、测定方法 工业666原粉用丙酮(分析纯)配成含丙体6660.05％的溶液,然后选取四龄蚊幼虫100条,放于1,000毫升曾放置24小时以上的自来水中。在水中滴加药液1毫升,1小时后检查麻痹的虫数,用尖头镊子或昆虫针触动其身体不能迅速逃避者为麻痹。将麻