无氧状态下产生的活性自由基中间体的ESR检测

在药物及有害物质的自由基代谢机理研究中,经常需要弄清生物体系反应的引发或中间过程,而避免氧气进入反应体系进一步作用是观察反应中间产物的必要条件。酶及其自由基代谢过程的电子自旋共振(ESR)研究通常采用两种技术,即连续流动法和低温     

四种阿片受体激动剂对大鼠腹腔巨噬细胞释放过氧化氢的影响

本实验观察了四种阿片受体亚型的激动剂对大鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)释放过氧化氢(H_2O_2的影响。吗啡、β-内啡肽和κ受体激动剂NDAP能抑制Mφ释放H_2O_2。纳洛酮能翻转吗啡和β-内啡肽的这一作用,κ受体阻断剂nor-BNI能拮抗NDAP的作用。δ受体激动剂DADLE仅在高浓度时才抑制Mφ释放H_2O_2。以上结果表明,Mφ上可能存在若干类型阿片受体,其中μ、ε和κ受体对Mφ释放H_2O_2具有明显的调节作用。     

沙棘果皮多糖清除氧自由基的活性研究

沙棘(Hippophae rhamnosides)果皮经80℃恒温水浴提取,乙醇沉淀得粗多糖.Sevag法去蛋白,经50%和70%乙醇分级,得3种级分沙棘多糖H1、H2和H3;以Fenton反应,即H2O2/Fe2 /水杨酸为·OH产生和检测体系;以邻苯三酚/EDTA/Tris-HCl为O2-.产生体系,对沙棘多糖H1、H2和H3进行抗氧自由基活性研究.结果表明,沙棘多糖对·OH和O2-.有较显著的清除能力.不同级分多糖H1、H2和H3浓度达200μg·mL-1时,对·OH的清除率分别为44.9%、49.0%和26.4%,抗O2-.活性分别为36.9%,15.4%和23.1%.多糖质量浓度增大时,两种自由基清除率增加,且呈量效关系.     

沙棘果皮多糖清除氧自由基的活性研究

沙棘(Hippophae rhamnosides)果皮经80℃恒温水浴提取, 乙醇沉淀得粗多糖。Sevag法去蛋白,经50%和70%乙醇分级, 得3种级分沙棘多糖H1、H2和H3; 以Fenton 反应, 即H2O2/Fe2+/水杨酸为.OH产生和检测体系; 以邻苯三酚/EDTA/Tris-HCl为O2 -. 产生体系, 对沙棘多糖H1、H2和H3进行抗氧自由基活 性研究。结果表明, 沙棘多糖对.OH和O2 -. 有较显著的清除能力。不同级分多糖H1、H2和H3浓度达200mg.mL-1时, 对.OH的清除率分别为44.9%、49.0%和26.4%, 抗O2-. 活性分别为36.9%,15.4%和23.1%。多糖质量浓度增大时,两种自由基清除率增加, 且呈量效关系。     

大鼠肺泡巨噬细胞的前列腺素分泌

肺泡巨噬细胞(AM)除有吞噬、溶菌等防御功能外,还参与许多调节活动,如抑制肺纤维化,免疫调控,气道阻力调节等。近年来注意到AM这些功能的发挥与前列腺素(PG)有关。本研究拟观察大鼠AM分泌某些PG的动态变化及其特点,以期为探讨AM的功能提供参考。 1 材料和方法 1.1 AM培养上清液制备 健康Wistar大鼠,体重150g左右,雌雄不拘。洗肺法收集AM,台盼蓝排斥法计数存活率在92％以上,分类计数AM纯度     

大鼠肺泡巨噬细胞对人胚肺成纤维细胞增殖的抑制作用

实验采用[^3H]TdR掺入标记法测定微量培养人胚肺成纤维细胞的增殖,观察到健康大鼠的肺泡巨噬细胞（alveolar macrophage,AM)可抑制成纤维细胞增殖。经调理的酵母多糖激活后,AM的抑制作用加强;而经消炎痛处理的AM,抑制作用转为被促进增殖作用所取代;测定AM上清液中前歹腺素E（prostaglandin E,PGE)含量,显示其抑制作用与PGE含量相关。结果提示,AM有抑制作促进肺成纤维细胞增殖的双重作用,正常时以抑制作用占优势;PGE可能是AM产生的主要的肺纤维化抑制因子。     

超氧自由基与嘧啶碱基及其核苷反应的ESR研究

用自旋捕集技术和ＥＳＲ方法,以ＭＮＰ为捕集剂,研究了紫外线辐照核黄素产生超氧自由基等活性氧与嘧啶碱基及其核苷的反应,确定了尿嘧啶,胞嘧啶和胸腺嘧啶及其核苷所产生的自旋加合物自由基的类别,讨论了自由基的形成机制,揭示了超氧自由基与嘧啶碱基及其核苷的反应是不是直接进行的,而是通过羟基自由基来实现的。     

辐射对大鼠肺巨噬细胞Fc受体表达和特异吞噬功能的影响

以往的实验表明,巨噬细胞(Macrophages简称Mф)对一定辐射剂量内的照射表现出较强的辐射抗性。因此学者们转向研究照射后时间依赖性的Mф损伤变化。这主要是涉及照射后所致的迟发损伤效应。有关大剂量照射后,短时间观察Mф损伤效应的研究报道甚少。为此本文观察了大鼠肺巨噬细胞(AlveolarMacrophages简称AM)在体外受100—500 Gy     

大鼠肺泡巨噬细胞的更新时间

在估算吸入放射性核索致肺巨噬细胞的剂量以及分析有害因子对它的损伤效应时,肺泡巨噬细胞的更新时间是重要的生物参数。本文用颈静脉点滴的方法给大鼠注入~3H-TdR,剂量为4.64×10~4Bq/g体重,在注入后1—41天期间分批活杀,用0.02％EDTA-PBS洗肺获取肺泡巨噬细胞,用放射自显影方法测定标记的肺泡巨噬细胞％。注入后1天标记细胞为5.1％,第5天达峰值8.4％,以后随时间延长,标记细胞％降低,到41天降至0.6％。标记细胞％与注入后时间之间的关系,可拟合二项指数函数,相关系数0.9990。56％的细胞更新一半的时间为0.9天,44％的细胞为14天。文内还就本实验得到的结果与国外报道的资料进行了比较与讨论。     

金属硫蛋白对大鼠红细胞膜受羟自由基损伤保护作用的自旋标记—ESR研究

用自旋标记物5NS,16NS及MSL分别插入红细胞膜脂及标记膜蛋白,发现金属硫蛋白(10~(-5)mol/L)对羟自由基引起的膜运动性减弱和膜蛋白构象改变有明显抑制作用,说明金属硫蛋白对大鼠红细胞膜的羟自由基损伤有保护作用,并且,对于低剂量的羟自由基损伤,保护作用更为明显。     

金属硫蛋白对大鼠红细胞膜受羟自由基损伤保护作用的自旋标记—ESR研究

用自旋标记物5NS,16NS及MSL分别插入红细胞膜脂及标记膜蛋白,发现金属硫蛋白(10~(-5)mol/L)对羟自由基引起的膜运动性减弱和膜蛋白构象改变有明显抑制作用,说明金属硫蛋白对大鼠红细胞膜的羟自由基损伤有保护作用,并且,对于低剂量的羟自由基损伤,保护作用更为明显。     

用ESR技术研究含硒蛋白抗羟基自由基作用的活性

用ＥＳＲ技术研究含硒蛋白抗羟基自由基作用的活性。与ＳＯＤ、茶多酚相比较,含硒蛋白对羟基自由基的清除也有显著作用。找到了一种有实用价值,天然无毒,抗羟基自由基的新资源。     

含硒银杏叶清除羟基自由基的ESR研究

利用电子自旋共振技术(ESR)研究了含硒银杏叶提取物对H_2O_2-Fe~(2 )体系产生的羟基自由基的清除作用.与SOD、茶多酚相比,含硒银杏叶提取物对羟基自基也有很强的清除效果.增添了有实用价值的天然、无公害的清除羟基自由基的新资源.     

电子顺磁共振法测定清栓酶在沙鼠脑缺血再灌流损伤中的抗自由基作用

本文设计了沙鼠脑缺血再灌流实验模型,以清拴酶作脑缺血后静脉注射再灌流模型和非药物再灌流模型组对照,用电子顺磁共振法(ESR)测定脑组织自由基波谱,结果清栓酶组出现自由基信号很弱,接近正常组,显著区别于未用药脑缺血再灌流30分钟和60分钟组(P<0.01),证明清栓酶有抗自由基和再灌注损伤的作用.     

利多卡因对人中性粒细胞释放氧自由基的影响

目的：研究利多卡因对人中性粒细胞释放氧自由基的影响。方法：分别用５、１０、２０、５０μｇ／ｍｌ利多卡因与中性粒细胞孵育３０ｍｉｎ（３７℃）,再用趋化寡肽（ｆｍＬＰ）或佛波酯（ＰＭＡ）刺激,用化学发光法测定ｆｍＬＰ或ＰＭＡ介导的中性粒细胞化学发光反应。结果：上述各浓度的利多卡因对ｆｍＬＰ介导的中性粒细胞化学发光反应有显著的抑制作用,其抑制率分别为４７２２％、７６６３％、８４４３％、８６７２％。当用ＰＭＡ刺激时,利多卡因显著抑制其介导的中性粒细胞化学发光反应。结论：利多卡因能抑制人中性粒细胞释放氧自由基     

卵巢激素对肺泡巨噬细胞趋化活性的影响

为探讨卵巢激素对非性器官肺脏的防御功能有无影响,本研究以肺泡巨噬细胞（ＡＭ）趋化活性为指标,观察了卵巢激素对成年雄性大鼠离体ＡＭ的趋化活性的作用。结果显示：不同浓度的酵母多糖激活血清与ＡＭ在体外培养３．５ｈ,对ＡＭ趋化性有良好的线性关系。雌二醇能抑制ＡＭ的趋化活性,量效关系显著（ｒ＝－０．９２８０,Ｐ＜０．０１）;而孕酮则促进ＡＭ的趋化活性,亦具有剂量依从性（ｒ＝０．９９７５,Ｐ＜０．０１）。提示：卵巢激素除参与性器官功能的调节外,对于非性器官肺脏的防御功能亦具有一定的调控作用。     

肺泡巨噬细胞对肺表面活性物质分泌的调控

为了观察肺泡巨噬细胞(AM)对肺表面活性物质(PS)分泌的影响,本实验以激活的AM培养上清液对离体非灌流肺进行持续灌洗,观察肺内PS含量的变化。结果表明,由调理酵母多糖(OPZ)激活的AM上清液,能使肺磷脂释放量(PL)和肺磷脂释放指数(b)增大,与激活物(OPZ)对照组及细胞对照组比较,有显著差异,P<0.01。用消炎痛预处理AM 30min后,再用OPZ激活AM,PL值和b值减少;而用细胞松弛素B预处理AM30min后,再用OPZ激活AM,则PL值和b值增大。以上两组与对照组比较,P<0.01。这表明激活AM增强肺PS分泌的作用能被消炎痛所抑制,而被细胞松弛素所增强,提示激活AM增强肺PS分泌可能是以前列腺素为中介的。激活AM能使PS分泌增加,这对于在生理和病理情况下稳定肺泡表面张力和增强肺的防御机能有重要意义。     

大鼠心脏低温保存及高钾停跳保护作用的ESR研究

用ESR研究大鼠离体心脏低温长时间缺血后再灌注时产生的自由基,并观察心肌超微结构的变化;对临床心脏直视手术中常用的高钾停跳液的保护作用机理进行了分析。实验结果表明超氧自由基信号强度随缺血温度的降低而明显减弱。高钾停跳液保护的大鼠离体心脏于低温(4℃)缺血后再灌15s,4h内超氧自由基信号强度变化不明显。缺血4h后再灌注,实验组心脏全部于15s内自动复跳,超微结构的变化轻微。以上改变与对照组比较有明显的差异。本实验为低温保存心脏及高钾停跳液的临床应用提供了实验依据。