胚胎移植前的阴道微生态对辅助生殖患者妊娠结局的影响

探讨辅助生殖治疗患者在胚胎移植前的阴道微生态对妊娠结局的影响。

选取1 420例在北部战区总医院生殖医学科经体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)治疗并接受冻融胚胎移植的不孕患者。在胚胎移植前取阴道分泌物涂片、革兰染色、显微镜镜检检查阴道微生态情况, 回顾性分析阴道微生态对辅助生殖患者妊娠结局的影响。

微生态失衡患者的HCG阳性率、临床妊娠率、胚胎种植率、流产率和早产率与微生态正常患者相比差异无统计学意义(P > 0.05)。708例微生态失衡患者中, 菌群正常功能下降335例、菌群抑制141例、白细胞异常127例、BV中间型52例、BV 30例、VVC 23例。BV患者的流产率与其他几种微生态失衡情况相比, 差异有统计学意义(P < 0.01)。

微生态失衡对辅助生殖患者的妊娠率影响有限; BV患者在胚胎移植后可能有流产的风险, 建议调整阴道微生态的平衡防止流产发生。

     

妇科恶性肿瘤患者阴道微生态状况

了解妇科恶性肿瘤患者及化疗后患者阴道微生态状况, 探讨化疗后患者阴道微生态评价的临床意义。

选取2017年8月至2019年8月在我院妇科住院治疗的60例妇科恶性肿瘤患者(肿瘤组)及同期因妇科恶性肿瘤进行化疗的40例患者(化疗组)作为研究对象, 同时以40例健康体检女性作为体检组, 取阴道分泌物进行微生态评估。

肿瘤组患者阴道菌群密集度正常(++和+++)者占58.3%, 与体检组及化疗组比较差异均有统计学意义(均P < 0.05)。肿瘤组、化疗组和体检组对象中菌群正常者分别占18.3%、5.0%、55.0%, 差异均有统计学意义(均P < 0.05)。化疗组、肿瘤组和体检组菌群抑制者分别占42.5%、35.0%、10.0%, 差异均有统计学意义(均P < 0.05)。不同类型妇科恶性肿瘤患者阴道微生态状况比较差异无统计学意义(P > 0.05)。

妇科恶性肿瘤患者阴道微生态失调率增高, 化疗后患者在阴道微生态失调率升高的同时生殖道感染风险增加。

     

细菌性阴道炎合并HPV16感染患者阴道菌群分布与局部免疫的关系

探究细菌性阴道炎（BV）合并人乳头瘤病毒16（HPV16）感染患者阴道菌群分布与局部免疫的关系。

选取2019年1月到2023年1月我院收治的83例BV合并HPV16感染患者和81例单纯BV患者,分别作为研究组和对照组,检测两组患者阴道菌群分布和宫颈阴道分泌物中T淋巴细胞亚群（CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺）和炎症因子（IL-1β、IFN-γ、IL-2）水平。

研究组乳酸杆菌数量低于对照组,加德纳菌、大肠埃希菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌数量高于对照组（P＜0.05）;研究组阴道菌群密集度Ⅲ+Ⅳ级、多样性Ⅱ+Ⅲ级、微生态失调比例均高于对照组（P＜0.05）;研究组宫颈CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺比值低于对照组（P＜0.05）;研究组宫颈IL-1β、IFN-γ、IL-2水平低于对照组（P＜0.05）。

合并HPV16感染可使BV患者阴道乳酸杆菌数量减少,阴道微生态失衡,局部免疫功能下降,应尽早检测此类患者阴道菌群和宫颈阴道局部免疫情况,进行针对性干预。

     

CIN患者阴道微生态状况与HPV感染的关系分析

分析宫颈上皮内瘤变（CIN）患者阴道微生态与人乳头瘤病毒（HPV）感染的关系。

选取326例本院收治的CIN患者,采集阴道分泌物和宫颈脱落细胞,通过形态学和功能学检测阴道微生态状况,采用PCR-反向点杂交法进行HPV分型检测,采用二分类Logistic回归分析影响CIN患者HPV感染的因素。

CIN患者HPV阳性共256例,占78.5%,HPV阴性共70例,占21.5%。HPV阳性CIN患者白细胞计数＞10个/高倍视野、阴道清洁度Ⅲ-Ⅳ度、VVC阳性、AV阳性、BV阳性、pH值＞4.5、白细胞酯酶阳性、过氧化氢阳性占比高于HPV阴性患者,微生态正常者占比低于HPV阴性患者（P＜0.05）。二分类Logistic回归分析显示,VVC、BV、微生态正常和pH值为CIN患者HPV感染的影响因素。

CIN患者HPV感染率较高,且感染后存在阴道微生态失调,VVC、BV、微生态异常和pH值是CIN患者HPV感染的影响因素。

     

妇科门诊阴道镜检查人群阴道微生态改变与人乳头瘤病毒感染的相关性

初步探讨妇科门诊阴道镜检查人群人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）感染与其阴道微生态改变的相关性,以了解妇科疾病患者病原体感染与其阴道稳态和生殖道健康的关系。

随机选择2020年4月到2022年4月在我院妇科门诊行阴道镜检查的患者130例,均进行阴道微生态和宫颈HPV检测。根据HPV DNA基因分型结果进行分组,检测HPV感染组和未感染组人群阴道分泌物的清洁度、病原体和阴道微生态相关指标,对阴道微生态改变和HPV感染的相关性进行统计学分析。

130例研究对象中,HPV感染者101例（77.69%）。101例HPV感染者中,以单一感染（76例,58.46%）为主,其中又以单一HR-HPV（high-risk HPV）感染（72例,55.38%）为主。101例HPV感染者中,有21种HPV亚型被检出,排名前5位的亚型分别为HPV16、HPV52、HPV58、HPV53、HPV18,占比分别为16.15%、9.23%、8.46%、6.92%、5.38%。101例HPV感染者和29例HPV未感染者相比,阴道清洁度、阴道pH值、白细胞数量异常、白细胞酯酶活性和唾液酸苷酶阳性率差异均有统计学意义（均P＜0.05）,H₂O₂阳性率组间差异无统计学意义（P＞0.05）。HPV阴性组的阴道乳杆菌异常率及各菌群阳性率均显著低于HPV多重感染组和HPV单一感染组。HPV多重感染组患者乳杆菌异常率、衣原体和解脲脲原体阳性率均高于HPV单一感染组（均P＜0.05）。

阴道微生态失调严重影响患者HPV感染率,且HPV感染与阴道清洁度、菌群密集度、pH值异常和白细胞酯酶阳性率异常有关。

     

腹腔镜联合GnRH-a治疗后Ⅲ-Ⅳ期子宫内膜异位症患者妊娠情况与阴道微生态的相关性

探讨腹腔镜联合GnRH-a治疗后Ⅲ-Ⅳ期子宫内膜异位症（EMS）患者妊娠情况与阴道微生态的相关性。

经腹腔镜联合GnRH-a治疗后的196例EMS患者根据妊娠情况分为妊娠组（n = 98）和未妊娠组（n = 98）,比较两组阴道微生态差异。将已成功妊娠的患者按照阴道微生态情况分组探讨阴道微生态对妊娠结局的影响和相关性。

治疗前未妊娠组与妊娠组的pH值、H₂O₂值、菌群密集度、菌群多样性、Nugent评分、AV评分差异无统计学意义（P＞0.05）,但治疗后未妊娠组上述指标异常的病例比例显著高于妊娠组（P＜0.05）。在已成功妊娠的EMS患者中,阴道微生态异常的患者发生不良妊娠结局的比例显著高于阴道微生态正常的患者（P＜0.05）。pH值、H₂O₂值、菌群密集度和多样性、Nugent评分和AV评分的异常可导致不良妊娠结局。

阴道微生态失衡是经腹腔镜和GnRH-a联合治疗后的Ⅲ-Ⅳ期EMS患者不能成功妊娠或妊娠后发生不良妊娠结局的重要原因。

     

高级别上皮内瘤变和不同型别人乳头瘤病毒感染患者阴道微生态特征分析

探讨高级别上皮内瘤变（high level squamous intraepithelial lesion,HSIL）患者阴道微生态的特征及不同型别人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）感染对阴道微生态的影响。

收集我院健康女性（对照组,n=54）和HSIL患者（HSIL组,n=54）的阴道分泌物样本,提取其DNA,通过HPV试剂盒检测HPV型别,并使用16S rRNA基因高通量测序分析阴道菌群的组成结构及特征。

HSIL组女性HPV阳性率为88.9%,对照组女性HPV阳性率仅有11.1 %。与对照组相比,HSIL组女性阴道乳杆菌属相对丰度降低,加德纳菌属、普雷沃菌属、双歧杆菌属相对丰度增多,但差异均无统计学意义（均P＞0.05）。与HPV Others组相比,HPV CR组女性阴道阿托波菌属相对丰度显著降低（t=2.067,P=0.043）;加德纳菌属、链球菌属、肠球菌属相对丰度降低,双歧杆菌属相对丰度升高,但差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

HSIL患者HPV感染率升高,不同型别HPV感染会对阴道微生态产生影响,提示对阴道微生态进行干预可能对宫颈病变产生调节作用。

     

育龄期妇女阴道微生态平衡与宫颈息肉的相关性

观察育龄期妇女阴道微生态平衡与宫颈息肉的相关性, 旨在为宫颈息肉的预防提供参考意见。

回顾性分析广西医科大学附属武鸣医院2019年1月至2020年12月收治89例宫颈息肉患者资料纳入宫颈息肉组; 回顾性分析广西医科大学附属武鸣医院同期91例健康体检育龄期妇女的临床资料纳入对照组。记录2组研究对象阴道微生态指标, 分析育龄期妇女阴道微生态平衡与宫颈息肉的关系, 并检验阴道微生态指标对宫颈息肉发生风险的评估价值。

初步比较宫颈息肉组、对照组研究对象阴道微生态指标后, 经回归分析检验结果显示, 育龄期妇女白细胞酯酶(LE)、唾液酸苷酶(SNA)、乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)、清洁度、上皮细胞、白细胞、线索细胞、短杆菌及阴道微生态菌群异常与宫颈息肉的发生有关(OR=2.587、4.404、3.164、41.250、3.312、9.796、5.312、6.789、5.372, P=0.002、＜0.001、0.005、＜0.001、＜0.001、＜0.001、0.001、＜0.001、0.033);Kendall′s W相关性分析检验结果显示, 育龄期妇女LE、SNA、NAG、清洁度、上皮细胞、白细胞、线索细胞、短杆菌及阴道微生态菌群异常状况均与宫颈息肉发生呈正相关(r=0.333、0.278、0.316、0.449、0.389、0.424、0.357、0.373、0.331, 均P＜0.001);绘制受试者工作曲线(ROC), 育龄期妇女LE、SNA、NAG、清洁度、上皮细胞、白细胞、线索细胞、短杆菌及阴道微生态菌群异常情况用于评估宫颈息肉发生的曲线下面积(AUC)分别为0.617、0.613、0.586、0.715、0.644、0.686、0.591、0.664和0.566, 其中清洁度对宫颈息肉发生有中等评估价值, AUC＞0.70。

育龄期妇女阴道微生态平衡与宫颈息肉发生密切相关, LE、SNA、NAG、清洁度、上皮细胞、白细胞、线索细胞、短杆菌及阴道微生态菌群异常均与宫颈息肉发生有关, 其中清洁度可用于评估宫颈息肉的发生, 临床可根据患者阴道微生态平衡状况, 制定针对性措施。

     

B族链球菌感染及微量元素营养干预对产妇阴道微生态的影响

分析产妇阴道微生态失衡的发生情况和B族链球菌（GBS）感染及营养相关因素在正常与微生态失衡产妇中的差异,同时检验不同干预的效果。

选取2020年1月—2021年6月本院就诊的105例产妇作为研究对象,采用随机数字表法将其分为观察组（51例）和对照组（54例）。对照组患者接受常规医疗照护干预,观察组在对照组基础上接受个体化营养干预（视产妇具体血清微量元素水平情况）,比较两组产妇阴道菌群分布、GBS感染、血清微量元素分布和新生儿情况。

全部受试对象阴道内优势菌群前5位依次是菌群抑制无优势菌、非典型乳杆菌类革兰阳性杆菌、革兰阳性短杆菌、革兰阳性大杆菌、革兰阳性球菌。阴道微生态指标检测结果显示,阴道微生态失衡产妇共49例,阴道微生态正常产妇共56例。阴道微生态失衡产妇的GBS感染率更高（30.61% vs 5.36%）,且微量元素锌和硒缺乏情况更为严重（P＜0.05）。营养干预后,观察组阴道菌群的分布异常情况改善优于对照组,且菌群多样性正常比例、锌和维生素D水平高于对照组,而GBS感染率低于对照组（P＜0.05）。

GBS感染可加重产妇阴道微生态紊乱,增加不良妊娠结局发生风险,而营养相关干预能够减低GBS感染率并提高微量元素的血清水平,有利于产妇健康,值得临床推广。

     

急性脑卒中患者肠道菌群研究

通过粪便标本检测急性脑卒中患者肠道菌群变化情况, 探讨急性脑卒中患者肠道菌群结构。

通过高通量二代测序技术对10例健康者(对照组)及10例急性脑卒中患者(疾病组)粪便样本进行菌群结构测序分析。

与对照组比较, 急性脑卒中患者粪便样本中物种OTU信息量显著增加(P < 0.01), 菌群多样性指数(Shannon)和物种均一度指数(Evenness)也有所增加但差异无统计学意义(均P > 0.05)。门水平上, 疾病组患者肠道Bacteroidetes数量较对照组显著增加, Firmicutes数量显著减少(均P < 0.05)。属水平上, 疾病组患者肠道Bacteroides、Bilophila、Butyricimonas比例较对照组显著升高, 而Collinsella、Coprococcus、Clostridium等比例较对照组显著降低(均P < 0.05)。

急性脑卒中患者肠道菌群结构与健康人存在显著差异。

     

4 630例绝经后妇女阴道微生态状况分析

目的 分析绝经后妇女阴道微生态状况,为临床诊疗提供实验室依据。 方法 以2018年1月至2019年9月在我院妇科门诊就诊的4 630例绝经后妇女作为研究对象,对其阴道微生态检查结果进行回顾性分析。 结果 4 630例患者中阴道微生态正常者409例(8.83%),阴道微生态异常者4 221例(91.17%)。阴道微生态异常者中不能通过镜检明确病原菌者1 758例(37.97%),包含优势菌异常1 406例(30.37%)、菌群抑制351例(7.58%)、菌群增殖过度1例(0.02%);通过镜检明确病原菌者2 463例(53.20%),包含细菌性阴道病(BV)1 237例(26.72%)、需氧菌性阴道炎(AV)1 001例(21.62%)、外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)159例(3.43%)、滴虫性阴道炎(TV)66例(1.43%)。不同年龄段绝经后妇女阴道微生态构成存在差异,其阴道清洁度(Ⅲ/Ⅳ)、菌群密集度(未见/Ⅰ)、菌群密集度(Ⅳ)、菌群多样性(未见/Ⅰ)、菌群多样性(Ⅳ)、优势菌(无)、优势菌(G+大杆菌)、优势菌(G-弧形菌)、优势菌(G+球菌)、VVC、TV、β 氨基半乳糖苷酶(+)、唾液酸苷酶(+)、过氧化氢(+)、阴道pH>4.5、微生态异常发生率在不同年龄段之间的分布差异均有统计学意义(均P结论 阴道微生态异常在妇科门诊绝经后妇女中发生率较高,且不同年龄段妇女阴道微生态异常构成存在差异,提示应结合年龄治疗阴道疾病,同时积极恢复阴道微生态环境。     

妊娠中晚期阴道微生态失调及乳酸菌胶囊干预对不良妊娠结局的作用

目的 观察妊娠中晚期妇女阴道微生态状况,探讨应用乳杆菌活菌胶囊纠正阴道微生态失调对不良妊娠结局的预防价值。方法 选择孕13~36周单胎妊娠期妇女560例,取其阴道分泌物,经革兰染色后油镜下观察,进行阴道微生态（阴道菌群的密集度、多样性、优势菌、炎症反应等）状况评价,检测阴道分泌物成分、阴道病原菌类型。对阴道微生态失调孕妇,根据是否接受乳杆菌活菌胶囊治疗分为治疗组和对照组,治疗组给予乳杆菌活菌胶囊,对照组不采用药物干预。追踪随访所有孕妇的妊娠情况,比较阴道微生态正常组、微生态失调治疗组及微生态失调对照组的不良妊娠结局。结果 560例研究对象中,阴道微生态正常 335 例（59.82%）,微生态失调225例（40.18%）。225例微生态失调孕妇中,细菌性阴道病（bacterial vaginosis,BV）32例（14.22%）,阴道假丝酵母菌病（vulvovaginal candidiasis,VVC）56例（24.89%）,滴虫性阴道炎（triehomonal vaginitis,TV）11例（4.89%）,BV和VVC混合感染4例（1.78%）,BV和TV混合感染3例（1.33%）,菌群增殖过度75例（33.33%）,菌群抑制44例（19.56%）。微生态失调组pH值>4.5、过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶阳性比例均明显高于微生态正常组（χ2=55.59~340.06,Ps0.05）。结论 妊娠中晚期容易导致阴道微生态失调,造成不良妊娠结局,乳杆菌活菌胶囊纠正阴道微生态失调对于改善不良妊娠结局有较好的预防作用。     

宫颈高危型HPV感染后的转归与阴道微生态的相关性分析

对宫颈高危型HPV HR-HPV感染后的转归进行阴道微生态及其危险因素分析, 以探讨宫颈高危型HPV感染后的转归与阴道微生态的相关性。

选取2019年7月至2020年9月在中山市博爱医院妇科门诊就诊的进行机会性宫颈癌筛查女性, 对其中符合研究纳入标准及排除标准的291例HR-HPV阳性者进行阴道微生态分析并随访, 在排除宫颈病变后, 6~12个月后再次进行HR-HPV检测, 若再次阳性者为持续感染组, 转阴性者为病毒清除组。分析2组的阴道微生态是否存在差异, 并进一步分析HR-HPV持续感染的危险因素。

符合研究纳入标准及排除标准的291例HR-HPV阳性者中持续感染组173例, 占59.45%, 平均年龄43.02岁±9.16岁(22~64岁); 病毒清除组118例, 占40.55%, 平均年龄40.26岁±9.00岁(24~66岁)。2组间年龄比较差异无统计学意义(F=0.041, P=0.839)。2组的阴道微生态分析表明, 病毒持续感染组的细菌性阴道病感染率、乳杆菌异常率、pH值异常率、白细胞酯酶阳性率分别为15.03%、41.62%、74.41%和22.54%, 这4项指标均大于病毒清除组, 2组间差异有统计学意义(χ²=7.088、14.369、9.585、4.487, P=0.008、＜0.001、0.002、0.034)。而2组在外阴阴道假丝酵母菌感染、滴虫性阴道炎、菌群密集度、多样性、过氧化氢酶、唾液酸苷酶、β-葡萄糖醛酸苷酶和乙酰氨基葡萄糖苷酶等指标方面的差异无统计学意义。Logistic回归分析显示乳杆菌异常、pH值异常是HR-HPV持续感染的危险因素, 其OR值分别为2.076(95%CI: 1.156~3.728)、2.121(95%CI: 1.218~3.688)(P＜0.05)。

宫颈HR-HPV感染后的转归与细菌性阴道病、白细胞酯酶阳性、乳杆菌异常及pH值异常存在一定的相关性, 尤其是乳杆菌异常、pH值异常是HR-HPV持续感染的危险因素, 需要重视。同时, 临床工作中可以考虑通过积极治疗下生殖道感染性疾病, 重建阴道微生态平衡, 以利于HR-HPV的清除, 降低宫颈病变的发生率。

     

阴道微生态异常与高危型人乳头瘤病毒感染及宫颈病变的关系

目的 探讨阴道微生态异常与高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染及宫颈病变的相关性。方法 选取2015年1月至2017年6月在十堰市妇幼保健院妇科门诊接受宫颈病变筛查的562例患者为研究对象,分别进行阴道微生态、HR-HPV检测、宫颈脱落细胞检查和组织病理学活检,对检查结果进行分析。结果 562例患者中,宫颈病变发生率为16.01%,液基薄层细胞检测（TCT）阳性率为19.93%,HR-HPV感染率为28.47%,阴道微生态失调发生率为30.78%,其中细菌性阴道病（BV）、滴虫性阴道炎（TV）、外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）、需氧菌性阴道炎（AV）和乳杆菌减少检出率分别为24.02%、3.20%、12.28%、8.54%和28.47%。宫颈病变患者微生态失调率为67.78%,明显高于正常组的23.73%（P<0.05）。宫颈病变患者其BV、VVC、AV和乳杆菌减少检出率分别为66.67%、30.0%、22.22%和75.56%,均明显高于正常者的15.89%、8.90%、5.93%和19.49%（P<0.05）;宫颈病变患者HR-HPV阳性率为75.56%,明显高于正常者的19.49%（P<0.05）。HR-HPV阳性患者BV、VVC、AV和乳杆菌减少的检出率分别为51.88%、24.38%、16.88%和62.5%,明显高于HR-HPV阴性患者的12.94%、7.46%、5.22%和14.93%（P<0.05）。结论 阴道微生态环境的改变与高危型HPV感染及宫颈病变的发生具有一定关系。     

阴道微生态评价指标监测下治疗细菌性阴道病

目的 了解BV及RBV患者的阴道微生态被彻底恢复与未被彻底恢复停药后的远期复发率差异.方法 137例BV患者(其中RBV 48例)被随机分成A、B两组.A组67例(其中RBV 19例),B组70例(其中RBV 29例).A组治疗至Amsel正常、Nugent评分≤3分、阴道菌群密集度Ⅱ～Ⅲ度且乳酸杆菌占明显优势、H2O2≥2μmol/L时停药;B组治疗至Amsel正常时停药.A、B两组停药后均随访6个月.结果 A组随访6个月复发率为22.39％、但B组高达63.08％.A组中BV患者随访6个月复发率为18.75％、B组为33.33％.A组中RBV患者随访2个月复发率为31.58％、但B组高达86.21％,随访3个月时B组全部复发.结论 动态监测阴道微生态评价指标,能客观指导临床BV治疗.BV患者、尤其RBV患者经个体化治疗,积极彻底恢复阴道微生态环境,明显降低了其远期复发率.     

宝鸡市阴道微生态检测平台的初步应用

目的 采用我院阴道微生态诊断平台对妇科门诊就诊者阴道微生态状况进行分析,为妇科疾病（阴道炎）的诊断提供依据。方法 收集我院2018年1-4月妇科门诊患者阴道微生态检测资料,根据菌群密集度和多样性、优势菌、Nugent评分及五项菌群功能及炎症反应指标进行结果判定,采用描述性流行病学分析评价结果。结果 共对6 326例就诊者进行了阴道微生态检测,其中阴道菌群正常者占10.40%,菌群正常但功能下降者占15.81%,阴道微生态失调者占73.79%。阴道微生态失调者中菌群异常者占40.48%,细菌性阴道病患者占9.63%,外阴阴道假丝酵母菌病患者占10.28%,滴虫性阴道病患者占1.82%,混合性阴道炎患者占0.85%。阴道微生态失调病例主要集中于40~49岁的女性（35.58%）,但外阴阴道假丝酵母菌病患者中30~39岁者占比较高（33.8%）。结论 阴道微生态诊断平台有助于全面评价女性阴道微生态状况,客观的反映致病病原体存在程度,有利于指导妇科疾病的临床诊治。