红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响

探讨红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响,为从微生态角度研究红茶在人体肠道菌群形成过程中的作用机制奠定基础。

利用宏基因组测序技术检测4周龄新生幼鼠（4weeks组,n = 30）、12周龄正常对照组小鼠（control组,n = 15）和12周龄喂饲红茶水实验组小鼠（teadrink组,n = 15）的肠道菌群分布,分析3组样本的菌群差异情况,探求红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响。

与control组相比,teadrink组小鼠肠道拟杆菌门（t = −7.711,P＜0.001）、拟杆菌科（t = −3.411,P = 0.009）、长尾嗤菌体科（t = −2.515,P = 0.036）、拟杆菌属（t = −2.693,P = 0.027）、邓肯菌属（t = −2.434,P = 0.041）、居海事城球杆菌属（t = −3.327,P = 0.029）、迪博邓肯菌（t = −2.679,P = 0.028）、普通居海事城球杆菌（t = −3.401,P = 0.027）和Duncaniella_sp._C9（t = −3.104,P = 0.035）相对丰度显著增加,厚壁菌门（t = 8.952,P＜0.001）、乳杆菌科（t = 13.102,P＜0.001）、消化链球菌科（t = 3.665,P = 0.021）、爱格菌科（t = 4.481,P = 0.002）、理研菌科（t = 3.626,P = 0.022）、乳杆菌属（t = 5.542,P = 0.004）、黏液乳杆菌属（t = 6.334,P = 0.002）、龙包茨菌属（t = 3.785,P = 0.005）、阿德勒菌属（t = 4.504,P = 0.002）、约氏乳杆菌（t = 4.282,P = 0.011）和罗伊氏粘液乳杆菌（t = 6.156,P = 0.003）相对丰度显著减少。与4weeks组相比,teadrink组小鼠肠道菌群分布差异大于control组。

红茶对新生幼鼠肠道菌群的形成能够产生影响,不同丰度的菌群可能通过调节碳水化合物代谢等途径来达到改善肠道菌群结构、增强肠道稳态的目的,具体代谢机制有待深入研究。

     

氨基酸型肠内营养制剂支持后克罗恩病患者肠道微生物和非靶向代谢组学指标的分析

探讨氨基酸型肠内营养制剂支持后克罗恩病患者的肠道微生物和非靶向代谢组学指标的变化,为该类患者的治疗提供参考。

选择我院收治的20例克罗恩病活动期患者作为研究对象,所有患者均采用氨基酸型肠内营养制剂进行支持治疗。比较患者治疗前后肠道菌群结构、菌群多样性以及非靶向代谢组学检测结果的差异。

治疗后,患者肠道乳杆菌属（t=5.200,P＜0.001）、大肠埃希菌（t=11.974,P＜0.001）、克雷伯菌属（t=15.033,P＜0.001）、糖单胞菌（t=12.166,P＜0.001）、恶臭假单胞菌（t=31.063,P＜0.001）、肠球菌属（t=28.867,P＜0.001）数量均显著升高;同时患者肠道菌群OUTs（t=40.435,P＜0.001）、Observed species（t=5.475,P＜0.001）、Chao1指数（t=12.348,P＜0.001）、Simpson指数（t=2.961,P=0.005）、Shannon指数（t=3.330,P=0.002）均显著升高。相比治疗前,治疗后患者血清以及粪便中的氨基酸、多肽、脂肪酸、胆固醇及碳水化合物水平均显著改善。

氨基酸型肠内营养制剂支持后,克罗恩病患者肠道菌群丰度提高,同时患者脂质代谢的改善可能与氧化应激反应通路相关联。

     

变应性鼻炎患者肠道微生态变化及其与T淋巴细胞亚群的关系

探讨变应性鼻炎患者肠道微生态变化及其与T淋巴细胞亚群的关系。

回顾性分析2019年4月至2020年4月医院收治的64例变应性鼻炎患者的资料, 记为A组; 另回顾性分析同期在该院体检的58例健康者的资料, 记为B组。对比A组和B组研究对象肠道菌群多样性和丰富度的变化, 对比A组和B组研究对象血清T淋巴细胞亚群水平, 分析变应性鼻炎患者肠道菌群相对丰度与血清T淋巴细胞亚群水平的相关性。

A组研究对象肠道菌群Chao1指数和Shannon指数均低于B组(P < 0.05), A组肠道菌群门水平拟杆菌门、变形菌门、厚壁菌门的相对丰度均高于B组(P < 0.05), 放线菌门的相对丰度低于B组(P < 0.05), 属水平毛螺菌属、链球菌属的相对丰度均高于B组(P < 0.05), 肠球菌属、双歧杆菌属、棒状杆菌属的相对丰度均低于B组(P < 0.05)。主成分分析显示2组菌群样品均能明显分开, 横纵坐标的贡献率分别为48.9%和16.7%, 两坐标轴总共解释了不同细菌群落差异的65.6%, 2组群落结构差异明显(P < 0.05)。A组CD3⁺比例、CD4⁺比例和CD4⁺/CD8⁺比值高于B组(P < 0.05), CD8⁺比例低于B组(P < 0.05);采用Pearson相关性检验, 变应性鼻炎患者肠道菌群门水平拟杆菌门、变形菌门和厚壁菌门的相对丰度分别与CD3⁺、CD4⁺比例和CD4⁺/CD8⁺比值呈正相关(P < 0.05), 分别与CD8⁺比例呈负相关(P < 0.05), 放线菌门的相对丰度分别与CD3⁺、CD4⁺比例和CD4⁺/CD8⁺比值呈负相关(P < 0.05), 与CD8⁺比例呈正相关(P < 0.05);属水平毛螺菌属和链球菌属的相对丰度分别与CD3⁺、CD4⁺比例和CD4⁺/CD8⁺比值呈正相关(P < 0.05), 分别与CD8⁺比例呈负相关(P < 0.05), 肠球菌属、双歧杆菌属和棒状杆菌属的相对丰度分别与CD3⁺、CD4⁺比例和CD4⁺/CD8⁺比值呈负相关(P < 0.05), 分别与CD8⁺比例呈正相关(P < 0.05)。

变应性鼻炎患者肠道菌群多样性降低, 门、属水平菌群比例均发生改变, 菌群结构差异明显, 血清CD3⁺、CD4⁺水平和CD4⁺/CD8⁺比值升高, CD8⁺水平降低, 变应性鼻炎患者肠道菌群相对丰度与血清T淋巴细胞亚群水平相关。

     

内毒素血症对新生鼠肠道菌群的影响

利用高通量测序技术分析内毒素血症新生鼠肠道菌群的变化, 探究肠道菌群与内毒素血症的关系, 为临床诊治提供思路。

复制新生大鼠内毒素损伤模型, 注射LPS后第24小时、第3天、第7天分别处死新生大鼠, 留取粪便并将对照组(C1组6只、C3组5只、C7组7只)和LPS组(L1组5只、L3组5只、L7组5只)按处死天数各分为3组。高通量测序分析各组间菌群多样性及相对丰度差异。

(1) Alpha多样性分析提示对照组和LPS组菌群多样性及丰度有显著差异, C3组较L3组Shannon指数均值小(t=-3.386 8, P=0.009 5), Simpson指数均值大(t=3.102 4, P=0.014 6);C7组较L7组Shannon指数均值大(t=2.459 4, P=0.033 7), Simpson指数均值小(t=-2.475 6, P=0.032 8)。(2)物种组成分析表明LPS组的菌群结构发生改变, 在门水平LPS组较对照组变形菌门相对丰度高, 厚壁菌门相对丰度低; 在属水平上LPS组较对照组埃希菌-志贺菌属相对丰度高, 乳杆菌属相对丰度低; 且随着天数的递增LPS组埃希菌-志贺菌属呈递增趋势, 红球菌属呈递减趋势。

内毒素血症可以改变新生鼠肠道菌群的组成, 并与肠道菌群失调有一定的关系。

     

川崎病及川崎病冠状动脉病变患儿肠道菌群变化

研究川崎病及川崎病冠状动脉病变患儿肠道菌群变化情况, 为调节其肠道菌群提供参考。

选择我院2018年7月至2020年5月纳入的97例川崎病患儿作为观察对象, 依据超声心动图检查将其中出现冠状动脉病变的45例患儿作为研究组, 另外52例单纯川崎病患儿作为对照组, 检测两组患儿肠道菌群情况。

两组患儿肠道菌群多样性相比差异无统计学意义(P > 0.05), 但研究组患儿肠道菌群丰度高于对照组(P < 0.05)。研究组患儿肠道厚壁菌门占35.85%, 低于对照组的54.06%(P < 0.05)。研究组患儿肠道拟杆菌门占33.57%, 高于对照组的21.30%(P < 0.05)。研究组患儿肠道变形菌门占24.39%, 与对照组的25.21%相比差异无统计学意义(P > 0.05)。研究组患儿肠道乳杆菌属、拟杆菌属、韦荣球菌属分别占3.87%、25.03%、2.75%, 与对照组的21.23%、16.23%、17.95%相比差异均有统计学意义(均P < 0.05)。

川崎病冠状动脉病变患儿肠道菌群状况与单纯川崎病患儿存在显著差异, 合并冠状动脉病变的患儿肠道菌群紊乱更为显著, 应受到临床重视。

     

急性脑卒中患者肠道菌群研究

通过粪便标本检测急性脑卒中患者肠道菌群变化情况, 探讨急性脑卒中患者肠道菌群结构。

通过高通量二代测序技术对10例健康者(对照组)及10例急性脑卒中患者(疾病组)粪便样本进行菌群结构测序分析。

与对照组比较, 急性脑卒中患者粪便样本中物种OTU信息量显著增加(P < 0.01), 菌群多样性指数(Shannon)和物种均一度指数(Evenness)也有所增加但差异无统计学意义(均P > 0.05)。门水平上, 疾病组患者肠道Bacteroidetes数量较对照组显著增加, Firmicutes数量显著减少(均P < 0.05)。属水平上, 疾病组患者肠道Bacteroides、Bilophila、Butyricimonas比例较对照组显著升高, 而Collinsella、Coprococcus、Clostridium等比例较对照组显著降低(均P < 0.05)。

急性脑卒中患者肠道菌群结构与健康人存在显著差异。

     

基于16S rRNA基因测序研究蜥蜴胃康方对胃癌肝转移裸鼠肠道菌群的影响

观察不同剂量蜥蜴胃康方对胃癌肝转移裸鼠肠道菌群的影响。

60只裸鼠随机分为正常对照组(10只)和造模组(50只), 造模组用HGC-27胃癌细胞通过脾脏注射制备胃癌肝转移模型, 造模4周时, 随机取正常对照组1只与造模组5只, 取裸鼠肝组织通过病理切片对比验证造模是否成功。随后剩余造模组45只裸鼠随机分为模型组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组以及蜥蜴胃康方高(2.6 g/mL)、中(1.3 g/mL)、低(0.6 g/mL)剂量组, 每组9只。取最后一次灌胃2 h后各组裸鼠新鲜粪便进行16S rRNA基因测序。

16S rRNA测序结果显示, 与正常对照组相比模型组裸鼠肠道菌群在门水平表现为拟杆菌门、厚壁菌门丰度下降, 放线菌门、蓝藻菌门丰度富集。属水平表现为Muribaculaceae丰度显著降低(t=3.514 4, P=0.024 6), 拟普雷沃菌属丰度显著富集(t=-4.660 1, P=0.009 6), 副拟杆菌属丰度显著富集(t=-4.284 7, P=0.012 8), 瘤胃球菌属丰度显著降低(t=3.342 7, P=0.028 8)。经蜥蜴胃康方干预后, 胃癌肝转移裸鼠的肠道菌群结构得到了改善, 门水平表现为厚壁菌门丰度增加, 放线菌门丰度降低, 各组间差异有统计学意义(H=11.619 9, P=0.040 4);蓝藻菌门丰度降低, 组间差异有统计学意义(H=11.433 1, P=0.043 4)。属水平表现为Muribaculaceae丰度升高, 拟普雷沃菌属、副拟杆菌属丰度降低; 瘤胃球菌属(H=14.658 4, P=0.011 9)、乳杆菌属(H=11.386 0, P=0.044 2)丰度显著富集, 各组间差异有统计学意义(P < 0.05)。

蜥蜴胃康方能增加厚壁菌门丰度, 降低放线菌门、蓝藻菌门丰度, 提高益生菌乳杆菌属、瘤胃球菌属丰度, 降低致病菌肠杆菌属、梭状芽胞杆菌属丰度。其中以蜥蜴胃康方高剂量组对肠杆菌属、梭状芽胞杆菌属的抑制作用最显著, 并能有效提高乳杆菌属丰度, 从而调节胃癌肝转移裸鼠肠道菌群的平衡, 增强肠黏膜免疫屏障, 激活免疫细胞释放肿瘤坏死因子来发挥对胃癌的抑制作用。

     

喂养方式对西安地区0～2个月婴儿肠道菌群的影响

探讨母乳和混合喂养方式对西安地区婴儿肠道菌群的影响。

收集24例0～2月龄西安地区健康婴儿粪便样本,根据婴儿的喂养方式,将样本分为母乳喂养组（17例）和以奶粉为主的混合喂养组（7例）。利用16S rRNA基因测序技术对不同喂养方式的婴儿肠道菌群进行测序,比较不同喂养方式对婴儿肠道菌群多样性和菌群差异的影响。

母乳喂养组婴儿粪便样本Ace指数和Chao1指数显著高于混合喂养组（t = 4.886,P＜0.05;t = 6.855,P＜0.05）,Shannon指数显著低于混合喂养组（t = 2.126,P＜0.05）。门水平上,2组样本均以放线菌门、厚壁菌门、变形菌门和拟杆菌门为主,但比例存在差异。相比混合喂养组,母乳喂养组婴儿粪便样本放线菌门和拟杆菌门丰度显著升高（U = 6,P＜0.05;U = 0,P＜0.05）,厚壁菌门和变形菌门丰度显著降低（U = 24,P＜0.05;U = 16,P＜0.05）。属水平上,母乳喂养组婴儿粪便样本双歧杆菌相对丰度（72.04%）显著升高,同时发现罗氏菌属和葡萄球菌属相对丰度也高于混合喂养组（U = 17,P＜0.05;U = 28,P＜0.05）;而混合喂养组婴儿粪便样本中,克雷伯菌属、肠球菌属及韦荣球菌属相对丰度显著升高（U = 19,P＜0.05;U = 12,P＜0.05;U = 28,P＜0.05）。

母乳喂养可能通过提高婴儿肠道菌群丰富度和部分益生菌相对丰度,同时降低条件致病菌比例等方式影响婴儿肠道菌群。

     

慢性肾衰竭患者肠道菌群改变与肾小球滤过率的关系

探究慢性肾衰竭患者肠道菌群结构改变与肾小球滤过率的关系。

选取2017年3月至2020年3月我院收治的202例慢性肾衰竭患者作为试验组, 并选取198例同期健康体检者作为对照组。收集两组入选者粪便标本并进行检测, 对比两组入选者肠道菌群数量; 同时对比两组入选者体质量、肾小球滤过率、血肌酐、血尿素氮、血胱抑素C水平, 采用Pearson相关性分析肠道菌群改变与肾小球滤过率的相关性。

相比于对照组, 试验组患者肠道双歧杆菌(t=21.915, P < 0.001)、大肠埃希菌数量显著降低(t=18.220, P < 0.001), 肠球菌数量显著增高(t=16.782, P < 0.001)。相比于对照组, 试验组患者肾小球滤过率(t=147.035, P < 0.001)显著降低, 血肌酐(t=43.129, P < 0.001)、血尿素氮(t=170.206, P < 0.001)、血胱抑素C(t=22.432, P < 0.001)水平显著增高。Spearman相关性分析显示, 慢性肾衰竭患者肠道双歧杆菌(r=-0.695, P < 0.001)和大肠埃希菌(r=-0.631, P < 0.001)与肾小球滤过率呈负相关。Logistic回归分析显示, 双歧杆菌、大肠埃希菌、肠球菌、血肌酐、血尿素氮和血胱氨酸均是慢性肾衰竭患者肾小球滤过率降低的独立危险因素。

慢性肾衰竭患者肠道双歧杆菌和大肠埃希菌数量降低、肠球菌数量升高, 且与肾小球滤过率呈显著负相关。

     

高校女性日常能耗与肠道菌群的相关性研究

探讨高校女性日常能耗及肠道菌群结构特征,分析不同能耗指标与特征肠道菌群之间的相关性。

基于智能可穿戴设备人体运动能耗检测仪对广州两所大学的青年女性（Y组,n=30）、中年女性（M组,n=30）进行48 h能耗监测,统计分析日常能耗的组间差异。采集调查对象清晨粪便进行16S rRNA基因测序,运用多元统计学分析中青年女性肠道菌群结构特征。将目、属水平的特征菌群与能耗指标进行相关性检验及回归分析。

Y组人群的日均步数（t=4.250,P＜0.001）、每日能耗值（t=3.590,P＜0.001）、日均中高强度活动时长（t=4.357,P＜0.001）均显著高于M组;两组人群肠道菌群的目、属水平的丰度差异菌群主要为乳杆菌目（Lactobacillales）（t=2.537,P=0.014）、小杆菌属（Dialister）（t=2.904,P=0.005）、布劳特菌属（Blautia）（t=3.246,P=0.002）,其中Lactobacillales和Dialister与多项能耗指标呈正相关,Blautia与多项能耗指标呈负相关。

日均步数、每日能耗值、日均中高强度活动时长的能耗指标可用于预测更好的身体机能;一定条件下,增加低、中、高强度活动时长可能提高Lactobacillales和Dialister的丰度,进而延缓身体机能下降。

     

枳术丸汤剂中枳实不同剂量配伍对慢传输型便秘小鼠肠道菌群多样性的影响

基于攻补兼施法探讨在大剂量生白术的配伍下不同枳实剂量配伍的作用及枳术丸（ZZW）对慢传输型便秘（STC）小鼠肠道菌群的影响。

将65只SPF级别昆明（KM）小鼠随机分为空白对照组10只与模型组50只,空白对照组正常喂养,模型组使用番泻叶0.8 g/kg灌胃7 d,制成脾虚模型后禁食禁水,隔天喂食生大米,饮水0.5 h,连续8 d建立脾虚便秘模型。15 d后将模型组随机分为5组,每组10只,即模型组、西药组、ZZW低剂量组、ZZW中剂量组、ZZW高剂量组。ZZW低、中、高剂量分别为9.7 g/kg、11.6 g/kg、13.7 g/kg,西药组给予莫沙必利2.5 mg/kg。空白对照组和模型组灌胃同等量蒸馏水。治疗1周后收集肠道内容物,行16S rRNA测序,取结肠组织HE染色行病理形态学观察。

ZZW高剂量组能够显著提高肠道推进率（P＜0.05）。结肠切片肉眼观察发现小鼠结肠组织黏膜光滑,未见充血、糜烂及器质性损伤。HE病理学检查结果显示,模型组存在轻微水肿,腺体不齐现象,其余各组小鼠结肠黏膜无变薄、固有层炎症浸润,结肠腺体形态正常。16S rRNA测序结果显示,STC小鼠肠道菌群物种丰富度和均匀度显著下降（P＜0.05）,菌群多样性升高（P＜0.01）。门水平上,与空白对照组比较,模型组拟杆菌门相对丰度升高、厚壁菌门相对丰度降低,但差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型组比较,ZZW低剂量组较模型组拟杆菌门相对丰度显著降低（P＜0.01）,厚壁菌门、变形菌门相对丰度升高（P＜0.05）,ZZW高剂量组较模型组拟杆菌门相对丰度降低（P＜0.05）,厚壁菌门相对丰度升高（P＜0.05）。属水平上,模型组较空白对照组Prevotellamassilia、葡萄球菌属、拟杆菌属、丁酸弧菌属相对丰度升高（P＜0.05）,螺杆菌属、另枝菌属相对丰度显著降低（P＜0.01）,经治疗后ZZW低剂量组Prevotellamassilia、葡萄球菌属、拟杆菌属相对丰度降低（P＜0.05）,ZZW中剂量组丁酸弧菌属相对丰度降低（P＜0.05）;ZZW高剂量组Prevotellamassilia、葡萄球菌属相对丰度显著降低（P＜0.01）。此外,与模型组比较,ZZW低剂量组狄氏副拟杆菌属相对丰度降低（P＜0.05）。

攻补兼施代表方ZZW能明显缓解STC小鼠便秘症状,以ZZW高剂量组效果最佳,但治疗效果与枳实剂量不存在量效关系,其治疗机制可能与ZZW水煎液调整菌群丰度、多样性及菌群物种数目,恢复正常肠道生态环境有关。

     

首发抑郁症患者肠道菌群特征及其与健康人群肠道菌群结构的差异

比较首发抑郁症患者与健康人群肠道菌群的差异,探讨抑郁症患者肠道菌群和抑郁症状间的关系,为抑郁症的发病机制研究及治疗提供一定的理论依据。

选择2019年10月至2020年9月我院收治的首发抑郁症患者及健康人群为研究对象,分为抑郁组（n = 23）和健康组（n = 31）。对研究对象肠道菌群16S rRNA基因中V4−V5区域片段进行基因测序,使用汉密尔顿抑郁量表对两组对象抑郁症状进行评估。检测两组对象肠道菌群α多样性、β多样性和组间差异。

首发抑郁症患者与健康人群肠道菌群多样性差异无统计学意义（均P＞0.05）。两组对象肠道拟杆菌门和拟杆菌纲的相对丰度差异有统计学意义（均P＜0.05）。两组对象芽胞杆菌目等的相对丰度差异有统计学意义（P＜0.05）。在属水平和种水平上,两组对象分别有28个菌属和40个菌种的丰度差异有统计学意义（均P＜0.05）。LEfSe分析显示,拟杆菌科、艾克曼菌科等10种菌科是造成两组对象肠道菌群差异的主要细菌。

首发抑郁症患者与健康人群肠道菌群多样性未发现显著差异,但抑郁症患者肠道菌群结构与健康人群相比发生了改变,主要体现在拟杆菌属等细菌在抑郁症患者肠道中的相对丰度显著上升。

     

加味甘麦大枣汤对气血两虚型产后抑郁症患者肠道菌群和血清5-HT的影响

观察加味甘麦大枣汤对气血两虚型产后抑郁症（PPD）患者肠道菌群和血清5-羟色胺（5-HT）水平的影响。

选取2022年10月至2023年8月就诊于甘州区妇幼保健院且符合纳入标准的气血亏虚型产后抑郁症患者60例作为研究对象,按其就诊顺序随机分为观察组、对照组,每组各30例。对照组给予西医常规治疗,观察组在西医常规治疗基础上联合加味甘麦大枣汤治疗,疗程4周。分别于治疗前和治疗后采用中医证候积分和汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评价治疗疗效。通过高通量测序法检测两组患者治疗前后粪便中的菌群多样性和各分类学水平分布。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测两组患者血清5-HT水平。

与本组治疗前比较,治疗后两组患者中医证候积分和HAMD评分均明显下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,与对照组比较,观察组的中医证候积分和HAMD评分显著下降（P＜0.05）。观察组临床有效率为96.7%,高于对照组的76.7%（χ²=8.967,P=0.030）。观察组肠道菌群在治疗后的Simpson指数和Shannon指数较治疗前升高（P＜0.05）,拟杆菌门（Bacteroidetes）、瘤胃菌科（Ruminococcaceae）、拟杆菌属（Bacteroides）和双歧杆菌属（Bifidobacterium）相对丰度显著高于对照组（P＜0.05）,变形菌门（Proteobacteria）、肠杆菌科（Enterobacteriaceae）、粪球菌属（Coprococcus）和志贺菌属（Shigella）相对丰度显著低于对照组（P＜0.05）。两组患者血清5-HT水平治疗后均明显升高（P＜0.05）,观察组5-HT水平升高的更明显（P=0.010）。

加味甘麦大枣汤可辅助临床治疗改善PPD患者的临床症状,调节患者肠道菌群,提高血清5-HT水平。

     

鸟苷酸环化酶C激动剂对便秘小鼠肠道菌群的影响

通过动物模型和16S rDNA高通量测序,探究鸟苷酸环化酶C（guanylate cyclase C,GC-C）激动剂（利那洛肽）对便秘的治疗作用和肠道菌群的影响,以期为便秘的治疗提供理论依据。

随机将30只雄性C57BL/6小鼠平均分为对照组、便秘模型组及治疗组,每组10只。其中对照组小鼠给予生理盐水灌胃,便秘模型组和治疗组小鼠给予洛哌丁胺灌胃构建便秘模型,造模成功后治疗组小鼠给予GC-C激动剂灌胃。干预结束后检测各组小鼠粪便含水率、首粒黑便排出时间、小肠推进率以及血清中P物质（Substance P,SP）、血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide,VIP）水平;使用16S rDNA高通量测序分析3组小鼠肠道菌群特点和差异。

与便秘模型组相比,治疗组小鼠粪便含水量、小肠推进率显著提升（t = 3.418,P = 0.003 1;t = 3.141,P = 0.005 6）,首粒黑便排出时间缩短（t = 4.756,P = 0.000 2）;血清VIP水平降低（t = 4.894,P = 0.000 5）,SP水平有升高趋势。与对照组相比,便秘模型组小鼠肠道菌群多样性显著降低,门水平上,Firmicutes丰度升高和Bacteroidetes丰度降低;属水平上,便秘模型组小鼠Muribaculaceae、Lachnospiraceae、Akkermansia丰度降低（均P＜0.050 0）,Allobaculum、Turicibacter、Clostriclium丰度升高（均P＜0.001 0）,通过GC-C激动剂干预可以改善便秘引起的菌群改变,并显著提高了Lactobacillus丰度（P = 0.030 5）。

GC-C激动剂可能通过影响血清中SP、VIP水平,并调节便秘小鼠的肠道菌群趋于正常,增加Lactobacillus、Muribaculaceae等产短链脂肪酸菌群丰度,提高肠道动力,从而起到改善便秘的作用。

     

基于16S rDNA测序分析枳术丸水煎液对慢传输型便秘脾虚证模型小鼠肠道菌群的影响

基于16S rDNA测序分析慢传输型便秘（STC）脾虚证小鼠肠道菌群结构特征,初步探讨枳术丸对STC肠道菌群的可能干预机制。

40只小鼠随机分成正常组、模型组、枳术丸组与莫沙必利组。造模组（模型组、枳术丸组与莫沙必利组）采用番泻叶灌胃,随后控制饮食饮水采用饥饱失常的方法造成脾虚便秘小鼠模型。造模成功后,枳术丸组给予中药水煎剂灌胃,莫沙必利组给予莫沙必利悬浊液灌胃,正常组与模型组给予蒸馏水灌胃。连续给药7 d后测定小鼠肠道推进率和血清D−木糖水平,采集小鼠结肠内粪便进行16S rDNA检测,分析样本菌群的多样性与丰度,分析门、属、种水平的物种组成。

模型组肠道菌群丰富度指数（Chao1指数）与多样性指数（Shannon指数）较正常组均显著降低（P＜0.05）,说明STC发病过程中伴随肠道菌群物种丰富度水平和菌群物种数目的降低以及菌群多样性水平的降低。在门水平上,正常组与模型组均以厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌门（Bacteroidetes）为主;在属水平上,模型组肠鼠杆菌属（Muribaculum）、拟杆菌属（Bacteroides）、乳杆菌属（Lactobacillus）和粪杆菌属（Faecalibaculum）丰度显著升高（P＜0.05）,Lachnoclostridium和艾森伯格菌属（Eisenbergiella）丰度降低（P＜0.05）;在种水平上,模型组产酸拟杆菌（Bacteroides acidifaciens）、Faecalibaculum rodentium和约氏乳酸杆菌（Lactobacillus johnsonii）丰度较正常组显著升高（P＜0.05）,Eisenbergiella sp.丰度显著降低（P＜0.05）。以上提示STC脾虚证小鼠肠道菌群多样性发生改变。经枳术丸治疗后,枳术丸组肠鼠杆菌属、拟杆菌属、乳杆菌属、粪杆菌属、Faecalibaculum rodentium和约氏乳酸杆菌丰度显著降低（P＜0.05）,Lachnoclostridium、艾森伯格菌属和Eisenbergiella sp.丰度升高（P＜0.05）。

枳术丸对STC脾虚证小鼠肠道菌群多样性改变有明显的调节作用,并且其作用机制与调节特定菌群有关。