木腐菌氧化酶系检定及漆酶产生的研究

采用丁香醛连氮、苯胺蓝平板脱色等4种方法,定性检测了27种真菌的木素氧化酶系组成。结果表明5个菌种同时具有漆酶(Lac)、木素过氧化物酶(Lip)和锰过氧化物酶(Mnp)3种酶的活性,5个菌种同时具有Lac和Lip2种酶的活性,8个菌种具有1种酶的活性;12个菌种具有Lac活性。选择其中生长速度快、Lac活性高的5个菌种进行Lac产生的研究,发现木蹄层孔菌Fomes fomentarius诱导、静止培养条件下产生的Lac酶活峰值高达9496U/mL,远远高于其它已报道过的菌种;静止培养条件下贝形刺革菌Hymenochaete badio-ferruginea和乳白耙菌Irpexlacteus产Lac,其峰值也分别达到了652和292U/mL,均明显高于其它培养方式,说明木蹄层孔菌等3种真菌静止培养可代替振荡培养进行Lac产生、制备等相关的后续研究。木蹄层孔菌等5种真菌对刚果红等染料脱色作用研究表明,各菌种对4类染料均具有高效广谱的脱色作用。     

一株溶磷真菌筛选鉴定及其溶磷促生效果

【目的】从高产农田筛选高效溶磷微生物菌株,为溶磷微生物肥料开发提供高效菌种资源。【方法】利用菌株的形态学特性、培养特征和ITS rDNA序列分析方法进行菌株鉴定,结合液体培养和土壤培养方法研究菌株的溶磷能力,进而采用温室盆栽和田间小区试验,明确溶磷菌P83促进作物生长和提高作物产量的作用效果。【结果】溶磷菌株P83鉴定为斜卧青霉菌(Penicillium decumbens)。液体条件下培养10 d,菌株P83表现显著高效的溶磷能力,对Ca3(PO4)2(5g/L)的溶解效果,有效磷达956 mg/L,溶解率为42.68%,对湖南永和磷矿粉的溶液效果,有效磷达到152.8 mg/L;将P83菌株分别接种于施用Ca3(PO4)2、Zn3(PO4)2和磷矿粉(RP)3种磷源的盆栽试验土壤中,结果显示,菌株P83对玉米植株促生效果比对照显著提高,玉米植株鲜重提高9.5%-89.2%、干重增加35%-231%,土壤有效磷提高2.1-40.5 mg/kg。田间小区玉米产量结果显示,溶磷菌P83增产效果最好(P=0.05),玉米子粒产量达9.2t/hm2,比不接种菌剂的对照增加2.4 t/hm2,增产率为35.3%。【结论】获得了一株溶解难溶磷的斜卧青霉菌P83,它能够活化多种难溶磷、显著增加土壤有效磷水平,对玉米生长和增加作物产量具有显著作用,是一株展现良好应用前景的高效溶磷菌种。     

不同磷水平下外生菌根真菌对铅的耐性反应

采用液体离体培养的方法,研究了不同磷和铅水平对3个外生菌根真菌生物量、ZC₁菌丝含磷量和含铅量的影响.结果表明,不同水平的磷和铅胁迫下,菌种ZC₁和ZC₂的生物量显著高于菌种GV(Gomphidius viscidus);低磷时（0.16 mmol·L^-1）,3个菌种的生物量随着铅浓度的增加都受到了抑制,在较高的磷水平下(0.81和2.42 mmol·L^-1),铅浓度的增加显著的抑制了菌种GV的生物量,但对菌种ZC₁和ZC₂的生物量没有显著抑制.GV的菌丝含铅量在各处理水平下都显著高于ZC₁和ZC₂.同一铅水平下,GV的菌丝含磷量在低磷时高于ZC₁和ZC₂,在较高磷浓度时却低于ZC₁和ZC₂;铅浓度的增加降低了菌种ZC₂和GV的菌丝含磷量,但菌种ZC₁的菌丝含磷量没有受到显著的抑制.与无污染地采集的菌种GV相比,污染地采集的菌种ZC₁和ZC₂表现出快速生长、低铅积累以及高磷吸收的特点,显示出较高的抗环境胁迫能力.     

混合培养提高菌株解磷解钾能力的探讨

沈阳农业大学的微生物实验室保藏菌种中得到互相不拮抗的根瘤菌S-2、溶磷菌P-3和硅酸盐细菌K-5,对这3株菌进行两两复合及三菌复合,分别测试其溶磷、解钾能力。结果表明:3株菌在第10天时溶磷、解钾能力最强。溶磷能力:两两复合培养的溶磷能力比各菌单独培养溶磷能力要提高25.50%、51.54%、26.99%,并且三菌复合培养具有1+1+13的溶磷效果。解钾能力:两两复合培养时S-2与P-3组合溶解钾长石的能力增强,但S-2与K-5、P-3与K-5的组合并无明显的促进作用,三菌复合虽较各菌株单独培养时高,但未表现出1+1+13解钾效果。     

青藏高原多年冻土区解磷菌筛选及抗逆能力评价

【目的】本研究旨在从青藏高原多年冻土区土壤中分离筛选高效解磷菌,为青藏高原土壤中难利用性磷的活化提供菌株资源。【方法】以青藏高原唐古拉山口附近的多年冻土区土壤为研究对象,利用有机磷和无机磷选择性培养基通过平板划线法分离解磷菌,通过16S rRNA基因系统发育分析对菌株进行鉴定,并对解磷菌的解磷能力和抗逆能力进行评价。【结果】分离筛选的5株解磷菌应归于假单胞菌属(Pseudomonas),包括3株解无机磷菌(i5、i6、i9L)和2株解有机磷菌(Qb和Qo);30 ℃培养条件下,Qb和Qo上清液有效磷含量分别为534.8 mg/L和723.7 mg/L,显著高于i5、i6、i9L上清液有效磷含量(166.9–210.5 mg/L);利用不同浓度的聚乙二醇(PEG6000)对菌株进行模拟干旱培养,5株解磷菌在PEG6000处理下均可正常生长,而且Qo上清液有效磷含量最高(519.7–683.0 mg/L);不同培养温度下,Qb和Qo在5 ℃和10 ℃培养下解磷能力要强于其他菌株的解磷能力。【结论】菌株Qo的耐低温和干旱能力强于其他4株菌,是青藏高原等高寒地区菌肥开发和植被恢复研究重要菌种资源。     

两株溶磷真菌的筛选、鉴定及溶磷效果的评价

【目的】从作物根围土壤中筛选高效溶磷菌株。【方法】结合溶磷圈筛选法和钼锑抗比色法评价菌株的溶磷能力;利用菌株的形态学特性、培养性状和微管蛋白β-tubulin基因序列分析方法进行菌株的鉴定;采用气相色谱-质谱法(GC-MS)对溶磷菌的产酸物质进行分析;并用平板亲和性实验测定菌株间的兼容性。【结果】筛选得到2株高效溶磷菌株P1-1、P2-2;经鉴定,菌株P1-1为黑曲霉(Aspergillus niger),P2-2为塔宾曲霉(A.tubingensis)。2株溶磷菌株的产酸物质相同,均为草酸、葡萄糖酸、乳酸和甘油酸。这2株溶磷菌与杀线虫功能菌株淡紫拟青霉(Purpureocillium lilacinum)、橄榄色链霉菌(Streptomyces olivaceus)和苍白杆菌(Ochrobactrum pseudogrignonense)兼容性好。2菌株分别在Ca_3(PO_4)_2、Zn_3(PO_4)_2、羟基磷灰石为磷源的无机磷固体培养基中25°C培养5 d,测定溶磷圈的直径(D)与菌落直径(d),通过计算其比值D/d的大小对比,以及在Ca_3(PO_4)_2、Zn_3(PO_4)_2、羟基磷灰石为磷源的液体培养基中培养5 d,测定发酵液中有效磷含量进行比较后判定,这2株溶磷菌溶解磷的能力强且效果相当。【结论】获得了2株高效的溶磷真菌。它们能活化多种难溶性磷源,同时伴随挥发性酸性物质的产生;2个菌株与1组杀根结线虫微生物菌群兼容性均良好。     

从废水中快速除去生物磷

“废水生物净化除磷”问题会议论文集的目录有:1.法国有关废水除磷问题。自然水中的磷含量及生物除磷方法。2.生物净化水除去磷酸盐时胞内多磷酸的转化。3.强化从废水中除去磷酸盐的生物学方法的生化观点。4.在用菌细胞培养物同化磷酸盐时的多磷酸激酶的活性。生物脱磷的动力学。5.污泥的生物降解部分:该部分对由废水中除去磷的影响。6.在由废水中生物去磷时不同种类微生物的相互作用。7.参与积聚磷酸盐的微生物分离新动向。8.用肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)和乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)培养物同化磷。9.积聚大量磷酸盐的不动杆菌培养物的生理特性。10.在有活性污泥参与的过程中,细菌代谢磷酸盐对提高除磷速度的贡献。11.刘活性污泥中不动杆菌培养物的     

接种不同VA菌根真菌对红三叶草利用不同磷源的影响

以红三叶草为材料,利用三室隔网培养方法,研究了施用不同磷源条件下,接种VA菌根真菌(Glomusmosseae和Glomusversiforme)对外加有机磷源及土壤有机磷的利用效率.植物生长10周后,测定植株干物重、含磷量、菌根侵染率及根系长度.结果表明接种菌根真菌能明显增加植株干物重和含磷量.接种条件下无机磷(KH2PO4)对植株生长的促进作用大于有机磷(Na-phytate)处理,接种Glomusversoiforme的作用明显大于接种Glomusmosseae.接种Glomusmosseae,植株对磷酸二氢钾中磷的吸收量明显大于植酸钠,而接种Glomusversiforme时则植株对植酸钠的磷吸收量明显高于磷酸二氢钾.上述结果说明接种两菌种对不同磷源的作用不同,接种Glomusmosseae可提高磷酸二氢钾中磷的利用率,接种Glomusversiforme则可提高对植酸钠的磷利用率.     

正常人耵聍中马拉色菌菌种构成研究

目的研究正常人耵聍中马拉色菌菌种构成及同一宿主耵聍中菌种是否一致。方法采集45名健康志愿者双侧耵聍,0.1%曲拉通X-100溶解稀释后接种于含菜籽油培养基,生化及形态学方法鉴定到种,同时提取菌种DNA,用真菌通用引物ITS1/ITS4做PCR扩增并测序鉴定。结果有44例(97.78%)双侧耵聍中均培养出马拉色菌(共分离出88株菌),菌种构成:糠粃马拉色菌29株(32.95%)、斯洛菲马拉色菌23株(26.14%)、合轴马拉色菌18株(20.45%)、球形马拉色菌11株(12.50%)、限制性马拉色菌7株(7.95%)。44例(88株菌)中双侧耵聍菌种相同者有38例(76株菌)(一致率86.36%)。结论正常人耵聍中马拉色菌菌种分布较广,主要菌种为糠秕马拉色菌。同一宿主双侧耵聍中马拉色菌菌种具有一定的一致性。     

用丙烯腈氧化菌处理腈纶废水

生化处理废水时,一般接入活性污泥作为菌种来源。为了提高有毒废水的处理效果,扩大生化法处理废水的种类和缩短生物膜培养时间,我们在塔式滤池中比较了接种活性污泥、活性污泥与人工筛选菌种混合物(按体积1:1)、不接种(不加菌直接用废水培养)和接入人工筛选菌种4种方法的处理效果,从实践中     

蔗叶堆肥中一株泡盛曲霉溶磷能力的鉴定及其对辣椒的促生效果

[目的]从甘蔗叶堆肥中分离筛选具有高效溶磷及促生功能的菌株,为微生物肥料制备提供一种可利用的菌种资源.[方法]以Ca3(PO4)2和Zn3(PO4)2为磷源,进行平板溶磷筛选实验;采用形态学特征和ITS rDNA序列分析法进行菌种鉴定;采用液体摇瓶培养测定菌株的溶磷能力;将溶磷菌接种至辣椒幼苗根部分析其促生效应.[结果...     

两株好氧反硝化聚磷菌的筛选、鉴定及水质净化研究

旨在从环境样品中筛选对富营养化水体具有良好脱氮除磷效果的好氧反硝化菌。采集福州某养猪场污水处理池中的水样。通过反硝化细菌培养基培养、BTB培养基平板分离、硝酸盐还原试验和蓝白斑筛选法、异染颗粒以及聚-β-羟基丁酸(PHB)颗粒染色试验,筛选获得两株具有脱氮除磷特性的菌株,命名为N1和N2。经16S r RNA基因序列分析,N1和N2分别属于无色杆菌属(Achromobacter.sp)和短波单胞菌属(Brevundimonas.sp)。将菌株N1和N2复配,获得脱氮除磷复合菌FIM-1。考察了菌株对人工合成污水和富营养化水体脱氮除磷的效果。结果表明,两株菌在含磷量较低的水体中,对磷的去除率较高,相对于单菌,复合菌表现出更佳的脱氮除磷效果。     

长期连作对大豆根际土壤镰孢菌种群的影响

利用中国科学院海伦农业生态试验站大豆连作长期定位试验区,进行了大豆根际土壤镰孢菌分离鉴定及大豆根腐病致病力检测,结合核酸序列和限制性片段长度多态性(RFLP)的系统发育分析,研究了长期连作(20年)较短期连作(3年)对大豆根际土壤镰孢菌种群密度和结构、致病力及遗传多样性的影响.结果表明： 3年连作大豆根际土壤镰孢菌种群密度为6.0×10⁴ CFU·g^-1,且以强致病力的尖镰孢菌、禾谷镰孢菌、轮枝镰孢菌及中等致病力的腐皮镰孢菌为优势种;连作20年大豆根际土壤镰孢菌种群密度和优势菌的优势度均显著低于3年连作,其中尖镰孢菌、禾谷镰孢菌和腐皮镰孢菌的种群密度仅为3年连作的36%、32%和22%,没有分离到致病力最高的轮枝镰孢菌,而种群多样性和均匀度显著高于3年连作;仅分离自20年连作土壤的三线镰孢菌、砖红镰孢菌及燕麦镰孢菌均为非致病菌种,且与强致病力镰孢菌种在基于转录间隔区(ITS)和转录延长因子(EF-1α)序列的聚类分析中显示了系统进化亲缘关系的差异性.因此,大豆20年连作会导致根际土壤镰孢菌种群生长受抑制、使其种群结构和遗传多样性发生改变,同时降低大豆根腐病菌种群致病力.     

关于细菌的生长繁殖和营养要求

細菌个体在生长成熟时以中腰咬断一变为二的簡单的分裂方式进行繁殖。細菌的繁殖速度在良好的条件下(合适的溫度,酸险度和营养料)細菌的繁殖速度是惊人的;許多细菌每15—20分钟即可分裂一次。按这种速度繁殖下去,虽然細菌是很微小,按其平均大小为1×2微米計算,只要經过五天,即足以充滿整个世界的海洋。但实际上不会如此。因为外界条件对細菌的繁殖有种种的限     

贵州两处茶园溶磷青霉菌的筛选、鉴定及溶磷能力分析

为维持土壤自然完整性、活化利用土壤中难溶性磷,从贵州名茶产地都匀、贵定茶园土壤中筛选高效溶磷真菌,为制备真菌肥料提供菌种资源。利用溶磷指数(SPI)、形态特征和ITS rDNA序列筛选、鉴定菌株,并采用液体摇床培养实验测定鉴定菌株在以磷酸钙、磷酸铁或磷酸铝为唯一磷源的无机磷液体培养基中的溶磷能力。共筛选到7个高效溶磷菌落,经形态观察分属2种菌株,鉴定为微紫青霉(Penicillium janthinellum)和赭绿青霉(Penicillium ochrochloron)。液体培养基接种、摇床培养15 d,微紫青霉菌在以Ca3(PO4)2、Fe3(PO4)2或AlPO4为唯一磷源的上清液中有效磷含量分别为73.47 mg·L^-1、30.93 mg·L^-1和14.00 mg·L^-1,4℃继续保存至30d后对Fe-P和Al-P的溶解量分别达到72.20 mg·L^-1、32.84 mg·L^-1;赭绿青霉菌培养15d的溶磷量分别为30.72 mg·L^-1、4.14 mg·L^-1和1.51 mg·L^-1,30d对Fe-P和Al-P的溶解量分别达到35.19 mg·L^-1和10.98 mg·L^-1。微紫青霉菌溶解无机磷能力明显优于赭绿青霉菌,有望应用于地区缺磷茶园土壤真菌肥料的制备。     

污损生物膜细菌Pseudoalteromonas issachenkonii YT1305-1的鉴定及其代谢物化学成分分析

【目的】对污损生物膜细菌YT1305-1进行菌种鉴定;研究其作为污损生物膜优势菌之一的代谢产物。【方法】通过16S rRNA基因序列分析,结合系统进化树和细菌生理生化实验对菌种进行鉴定,通过硅胶柱层析分离方法和核磁共振检测技术分析其代谢物的化学成分。【结果】发现生物膜中存在明显的优势菌株,假交替单胞菌属为优势菌属之一。16S rRNA序列比对分析表明Pseudoalteromonas issachenkonii为优势菌种之一,将目标菌种命名为Pseudoalteromonas issachenkonii YT1305-1,对其代谢物化学成分进行分析,共得到10个化合物,其中包括5个二酮哌嗪(DKPs)类信号分子,环(甘氨酸-丙氨酸)(1)、环(脯氨酸-甘氨酸)(2)、环(脯氨酸-酪氨酸)(3)、环(4-羟基-脯氨酸-亮氨酸)(4)和环(4-羟基-脯氨酸-丙氨酸)(5),以及尿嘧啶(6)、胸腺嘧啶(7)、胸腺嘧啶脱氧核苷(8)、己二酸二(2-乙基己)酯(9)和邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(10)。【结论】污损生物膜中存在明显的优势菌,其中之一为P.issachenkonii YT1305-1,在其代谢产物中发现了疑似信号分子的物质DKPs,有研究表明该物质能调控生物膜的形成,进而影响生物污损的形成,为探究生物污损现象奠定了物质基础。     

聚磷菌的诱变选育及其生长特性

方法:采用氮离子注入技术对巢湖底泥中筛选出的一株细菌进行辐照诱变处理,选育出2株高效聚磷菌,并对这两株菌的生长特性进行了研究,根据生理生化及生长试验,并参照《伯杰氏细菌手册》进行菌种分类鉴定,这两株菌被鉴定为假单胞菌属细菌(Pseudomonas sp),并研究了菌量、温度、pH、氧、碳源对两株假单胞菌(Pseudomonas sp)的生长特性及聚磷代谢的影响。结果:试验表明,诱变后的聚磷率明显高于试验出发菌,为出发菌的1.43~3.89倍。两株菌的最适生长温度为30℃,最适pH和菌量分别为6、8和OD=0.6、0.4。最适菌量在厌氧条件下出现放磷现象,好氧条件下过量摄磷现象,经过先厌氧条件的培养其去磷率明显高于直接好氧培养条件下的去磷率,以乙酸钠为碳源时其聚磷率高于乳糖、甲醇、乙醇为碳源时的摄磷量。     

丛枝菌根通过调节碳磷代谢相关基因的表达增强植物对低磷胁迫的适应性

丛枝菌根(AM)共生体系对于植物适应低磷胁迫具有重要作用。AM不仅直接调节宿主植物对低磷胁迫的响应,还可能通过分泌物影响相邻的非菌根植物。该研究采用分室培养系统,以玉米(Zea mays)和AM真菌Rhizophagus irregularis为试验材料,考察低磷(10 mg·kg~(–1))和高磷(100 mg·kg~(–1))条件下,菌根共生体系对植物生长、磷营养以及碳磷代谢相关基因表达的影响,以揭示AM调节植物低磷胁迫响应的生理机制。分室培养系统由0.45μm微孔滤膜分隔成供体室、缓冲室和受体室3个分室,以供体室菌根化植物为AM分泌物来源,通过微孔膜阻止菌根真菌对未接种受体植物的直接影响,但允许AM分泌物在分室间的扩散。采用实时荧光定量PCR技术分析玉米以及AM真菌自身碳磷代谢相关基因的表达情况。试验结果表明,低磷条件下接种AM真菌显著提高了供体植物干质量和磷浓度,上调了玉米碳磷代谢相关基因的表达。AM真菌磷转运蛋白基因和碳代谢相关基因在低磷条件下的表达水平显著高于高磷水平;对于受体植物而言,仅高磷处理显著提高了玉米植株干质量和磷含量,而接种处理显著上调了受体植物磷转运蛋白基因和碳代谢相关基因的表达水平。该研究表明,低磷胁迫下AM可能通过分泌物调控植物碳磷代谢相关基因的表达,进而调节植物对低磷胁迫的生理响应。     

磷对外生菌根真菌松乳菇和双色蜡蘑草酸、氢离子和磷酸酶分泌的影响

在液体培养基中设置无磷、低磷、中磷和高磷四种磷浓度,离体培养松乳菇Lactarius deliciosus的3个株系Ld-01、Ld-02、Ld-03和双色蜡蘑Laccaria bicolor S238N,分别测定外生菌根真菌的生长量、草酸、氢离子和酸性磷酸酶分泌速率。结果表明,在中磷的条件下,外生菌根真菌的生长最好,无磷、低磷或高磷对它们的生长产生抑制作用,抑制程度因菌种(株)不同而异。草酸、氢离子和酸性磷酸酶的分泌速率顺序为:无磷(0gNaH2PO4/L)>低磷(0.229gNaH2PO4/L)>中磷(1.147gNaH2PO4/L)>高磷(5.735gNaH2PO4/L),表现出明显的种(株)间差异,看来外源磷的供应状况可能有调节外生菌根真菌活化土壤无机磷和有机磷的作用。在缺磷和低磷条件下,外生菌根真菌具有较强的活化作用,在足磷的条件下活化作用减小,由此有效地利用土壤中的磷。     

石油烃降解菌的筛选与鉴定

从胜利油田的石油污染土壤中经富集培养分离出50株细菌,其中33株菌在以石油为惟一碳源和能源的选择性培养基中生长良好.采用紫外分光光度法对菌株的降解能力进行测定,结果有16株菌在石油初始浓度为2 500 mg·L-1的培养液中振荡培养4 d降解率超过30%,其中PU-34、PU-15、PU-2、PU-4、PU-1降解能力较高,4 d能够使石油烃类含量分别减少58.38%、55.55%、55.17%、53.09%、52.36%,在生物修复石油污染技术中具有应用前景.结合形态特征观察、生理生化特性和16S rDNA序列分析的方法对这5株菌进行菌种鉴定,确定PU-34为假黄单胞菌(Pseudoxanthomonas sp.),PU-15和PU-2为戈登氏菌(Gordonia sp.),PU-4为红球菌(Rhodococcus sp.),PU-1为假单胞菌(Pseudomonas sp.).