仔猪副轮状病毒(C群)的检出

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,从某猪场的20份仔猪腹泻标本中检出具有副轮状病毒(C群)RNA电泳图型者11份,其检出率高达55％。该病毒经口服接种未吮初乳的新生仔猪,可致急性水样腹泻,并排出大量病毒。经轮状病毒(A群)ELISA和副轮状病毒(B群)对流免疫电泳检测证明,它与轮状病毒(A群)和副轮状病毒(B群)均无血清学交叉。本文首次证实在我国猪群中存在有与国外报道的相同的猪副轮状病毒(C群),且可引起仔猪爆发流行,是仔猪腹泻不可忽视的病原之一。     

人B组轮状病毒vp7基因的克隆和序列分析

利用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增了人B组轮状病毒WH—2vp7基因,连接到克隆载体pUCm—T,并对其基因序列进行了分析。WH—2与ADRV的同源性达98％,与印度加尔各达分离株CAL—1达92％,而与动物B组轮状病毒同源性差别较大,如与IDIR(鼠)同源性仅为58％,与WD653(牛)B组轮状病毒同源性为63％,与ATI(牛)同源性为61％。对vp7基因的二级结构分析发现其mRNA折叠形成多达18个发卡环状结构。VP7蛋白是249个氨基酸组成,分子：量为28．4kDa,含有3个潜在的N连接的糖基化位点和多个磷酰化位点,从氨基酸序列的同源性来看,WH—2与ADRV的同源性达99％,与CAL—1达95％,而IDIR仅为51％,说明了WH—2和ADRV的起源相同。此研究对了解B组轮状病毒基因的进化和变异规律具有重要意义,也将为B组轮状病毒预防性疫苗的研制提供科学的依据。     

人B组轮状病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

人B组轮状病毒曾在我国发生过散发和暴发流行,近年来在世界多个国家也均有报道。为建立一种灵敏和特异的人B组轮状病毒荧光定量RT-PCR检测方法,本研究针对人B组轮状病毒NSP3片段保守区设计和筛选特异性引物和探针,优化反应体系和反应条件,并对该方法的灵敏性、特异性、稳定性进行评价。结果显示,该方法针对人B组轮状病毒检出限可以达到6.28拷贝/μL;与多种常见和罕见的人腹泻病毒没有交叉反应;批内和批间等重复性试验变异系数均小于5%。本研究建立的人B组轮状病毒荧光定量RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强、稳定性好、检出率高,可作为一种新的技术手段应用于人B组轮状病毒的快速筛查与诊断。     

蛋白质组分析中蛋白质分步提取方法的建立

利用细胞裂解液充分溶解细胞蛋白质是成功进行蛋白质组分析的先决条件.尝试利用三步提取法,即以三种溶解性能不同的裂解液分步提取细胞中的蛋白质组,并分别进行二维聚丙烯酰胺凝胶电泳（two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis, 2-D PAGE）分离.通过对2-D PAGE蛋白质图谱的比较,发现其与常规方法相比,具有蛋白质提取率高、双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)分辨率高等优点.     

人B组轮状病毒vp7基因的克隆和序列分析

利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增了人B组轮状病毒WH-2vp7基因,连接到克隆载体pUCm-T,并对其基因序列进行了分析.WH-2与ADRV的同源性达98%,与印度加尔各达分离株CAL-1达92%,而与动物B组轮状病毒同源性差别较大,如与IDIR(鼠)同源性仅为58%,与WD653(牛)B组轮状病毒同源性为63%,与ATI(牛)同源性为61%.对vp7基因的二级结构分析发现其mRNA折叠形成多达18个发卡环状结构.VP7蛋白是249个氨基酸组成,分子量为28.4kDa,含有3个潜在的N连接的糖基化位点和多个磷酰化位点,从氨基酸序列的同源性来看,WH-2与ADRV的同源性达99%,与CAL-1达95%,而IDIR仅为51%,说明了WH-2和ADRV的起源相同.此研究对了解B组轮状病毒基因的进化和变异规律具有重要意义,也将为B组轮状病毒预防性疫苗的研制提供科学的依据.     

用反转录—聚合酶链反应检测B组轮状病毒

轮状病毒（Ｒｏｔａｖｉｒｕｓ）是属于呼肠病毒科（Ｒｅｏｖｉｒｉｄａｅ）的双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）病毒。至今已将轮状病毒分为七个组（Ａ～Ｇ）。已经发现的Ｂ组轮状病毒分别来自人、大鼠、牛、猪、羊。近十年来,通过轮状病毒的研究,轮状病毒Ｂ组已被公认为引起人...     

食管癌病人运铁蛋白(Tf)和组特异性成份(Gc)亚型分布的研究

应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法, 分析了潮汕地区216例无血缘关系、临床上诊断为食管癌的病人和216例健康人的运铁蛋白(Tf)亚型分布情况, 结果发现:食管癌病人组TfC1C1纯合子频率为0.2639,Tf*Cl基因频率为0.4745,显著低于正常人组(分别为0.4352和0.6227,均为P<0.0 01);同时,食管癌病人组TfC2C2纯合子频率为0.2278,Tf*C2基因频率为0. 4977,显著高于正常对照组(分别为0.1852,P<0.05,和0.3634,P<0.001)。应用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦结合免疫固定法,分析了潮汕地区21 7例无血缘关系的临床上诊断为食管癌病人和 217例健康人的组特异性成份(Gc)亚型的分布,发现两组间无显著性差异。     

不同阶段乙型流行性感冒病毒核酸的聚丙烯酰胺凝胶电泳图

本文应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),比较了7株不同阶段乙型流感病毒代表株的核酸电泳迁移率,发现不同阶段毒株的PAGE基因图是不同的。这种差别与乙型流感病毒血清学的结果基本相符。     

B组轮状病毒RT—PCR来源的cDNA探针核酸诊断方法的建立

近十年来,国内外学者相继报道在人以及牛、羊、猪、大鼠的腹泻粪样中检出Ｂ组轮状病毒〔１－３〕。洪涛等于１９８３年首次报道成人腹泻轮状病毒（ＡＤＲＶ）属于Ｂ组轮状病毒〔４〕。目前,轮状病毒Ｂ组已被公认为引起人及不同动物腹泻的流行病学的重要因素。由于Ｂ组轮...     

猪和牛轮状病毒抗原和抗体的检测

应用ELISA直接双抗体夹心法检查轮状病毒抗原,24份仔猪和29份犊牛的腹泻粪样,分别有12和16份阳性。用病毒RNA电泳分析检查阳性粪样,各出现两种病毒RNA电泳型,用中和试验检查17份成年牛和16份成年猪血清,分别有16和15份病毒抗体阳性。将其与ELISA间接法和结合法进行了比较。     

植物凝集素(PHA)对小鼠白细胞及血清乳酸脱氢酶同工酶的影响

本文就 PHA 在不同时间内对小鼠白细胞及血清 LDH,同工酶的影响进行了观察,结果表明,PHA 对小鼠白细胞及血清的 LDH 酶活性有一定的影响,24h,48h,72h 三个不同时间组均与对照组有显著性差异(P<0.01),其中以48h 组酶活性最强,同时淋巴细胞的酶活性明显高于粒细胞;血清同工酶谱也有明显的变化,LDH_(1-4)均低于正常(P<0.01),LDH_5明显增高(P<0.01),同时出现了 LDH_5(?)亚带.     

流行性乙型脑炎病毒减毒株和野毒株在聚丙烯酰胺凝胶电泳上的表现

乙型脑炎病毒减毒株(2-8株)和野毒株(SA14株)在生物学性质上有明显的不同,特别是嗜神经毒力方面,2-8株已丧失了对小白鼠、马,猴等敏感动物的脑内致病力。为了探讨这些生物学性质变化的物质基础,我们开展了乙脑强、弱毒株聚丙烯酰胺凝胶     

六种疫霉菌体可溶性蛋白质和酯酶的聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究*

本文对槐生疫霉(Phytophthora robinicola)、掘氏疫霉(P.drechsleri)、樟疫霉(P.cinnamomi)、烟草疫霉(P.nicotianae)、棕榈疫霉(P.palmivora)及辣椒疫霉(P.capsici)等6种疫霉81株菌菌体可溶性蛋白质和酯酶进行了聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究。结果指出,种间蛋白质图谱差异明显,种内菌株间基本一致。就酯酶图谱来说,种内菌株间存在一定差异,但种间差异更为显著。因此,本试验进一步支持槐生疫霉新种的建立。同时表明,菌体可溶性蛋白质电泳图谱在疫霉种的鉴定和分类上具有重要意义,而酯酶电泳图谱在一定程度上也有助于疫霉种的研究。     

六种疫霉菌体可溶性蛋白质和酯酶的聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究

本文对槐生疫霉(Phytophthora robinicola)、掘氏疫霉(P.drechsleri)、樟疫霉(P.cinnamomi)、烟草疫霉(P.nicotianae)、棕榈疫霉(P.palmivora)及辣椒疫霉(P.capsici)等6种疫霉81株菌菌体可溶性蛋白质和酯酶进行了聚丙烯酰胺凝胶平板电泳研究。结果指出,种间蛋白质图谱差异明显,种内菌株间基本一致。就酯酶图谱来说,种内菌株间存在一定差异,但种间差异更为显著。因此,本试验进一步支持槐生疫霉新种的建立。同时表明,菌体可溶性蛋白质电泳图谱在疫霉种的鉴定和分类上具有重要意义,而酯酶电泳图谱在一定程度上也有助于疫霉种的研究。     

应用酶联免疫吸附试验检测不同类型乙型肝炎中激活补体类HBsAg循环免疫复合物

本文以抗人C_(?)的羊IgG为包被抗体,以HRP-HBs抗体为指示抗体,建立了可检测激活补体类HBsAg循环免疫复合物(HBsAg/C3-CIC)的C_3捕捉法酶联免疫吸附试验。检测了236例六种类型临床诊断为乙型肝炎的病人血清标本,其阳性率分别为:无症状携带者(ASC)12.9％(4/31),急性肝炎(AH)36.7％(22/60),慢性迁延性肝炎(CPH)33.3％(7/21),慢性活动性肝炎(CAH)59.6％(34/57),重型肝炎(SH)77.8％(14/18),肝炎后肝硬化(PLC)67.3％(33/49),阳性率与肝损严重程度明显相关(P<0.01)。认为HBs-Ag/C3-CIC可能在乙型肝炎病毒引起的慢性活动性肝炎、重型肝炎和肝炎后肝硬化的发病过程中起重要作用,并可作为乙型肝炎的诊断、临床分型和预后判断的指标之一。     

金针菇品系间酯酶同工酶标记筛选研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳,研究了不同生长发育期,不同组织对金针菇酯酶同工酶电泳表型的影响,筛选出不受生长发育期及常规培养条件等影响的酯酶标记区带。标记区带分所有品系的出现的基本带和部分品系出现的识别带。酯酶同工酶标记区带电泳表型显示出多态性。