立克次体分类研究的进展

由于分子生物学在立克次体分类研究中的应用,立克次体的分类发生了很大的变化,原属立克次体科,立克次体族的罗沙利马体属和柯克斯体属,均因１６ＳｒＲＮＡ序列分析表明与其它立克次体亲椽关系较远,而建议它们不属于立克次体科,前者近年来已改称巴通体属,立克次体属中的恙虫病立克次体亦因其表型和基因型特点而有另立一新属的建议,埃立克体属中亦增加了对人致病的新成员。     

黑龙江立克次体的血清学及分子生物学研究

本文应用血清学方法和分子生物学技术,从不同角度探讨与比较ＳＦＧ立克次体种间的差异,为黑龙江立克次体的分类鉴定提供依据。ｍｉｃｒｏ—ＩＦ、ＩＥ及ｍｉｃｒｏ－ＢＡＰＳ试验表明,黑龙江立克次体的血清反应模式和国际参考株及国内分离株不同,具有独特的抗原结构。进一步应用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和免疫印迹分析,该立克次体结构多肽的数量与分子量和其它立克次体有明显差别,并具有两种特有的主要抗原多肽（２１５ＫＤ与６６ＫＤ）,提示在抗原结构上的差异性。ＤＮＡ限制片段分析证明该立克次体的酶切图谱有明显的特征性,易与己知斑点热毒株相鉴别。研究结果表明,黑龙江立克次体可能是ＳＦＧ立克次体一新的血清型式种。对人的致病力需进一步研究。     

立克次体与立克次体病的检测与鉴定

立克次体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物,已被列入生物战剂名录。立克次体病是一类严重威胁人类健康的人兽共患的自然疫源性疾病。立克次体严格的细胞寄生性决定了立克次体病的诊断不同于传统方法,需根据流行病学资料、临床症状和体征及实验室检测进行综合判断,通常实验室检测是明确诊断的主要依据。从病原体的分离和培养到目前的基因水平比对,立克次体的检测技术虽发展了100多年,但人类尚未实现早期快速诊断立克次体病的目标。本文主要综述了立克次体与立克次体病检测与鉴定的研究进展。     

应用PCR技术检测媒介恙螨体内恙虫病立克次体(英语)

本文PCR技术的引物是参考恙虫病立克次体Karp株Sta 58序列设计合成的一对DNA引物.以恙虫病立克次体DNA为模板,成功扩增长约1kb的DNA片段.该对引物首次应用于人工成虫腹内接种羔虫病立克次体(人工接种法)和幼虫叮咬恙虫病鼠(叮咬病鼠法)的我国主要恙虫病媒介地里纤羔螨的研究.PCR检测人工接种法成虫的不同时期和经卵传递的子代立克次体DNA均获满意结果,立克次体在恙螨体内生长持续360天及产卵孵出的第4代幼虫均呈阳性.叮咬病鼠法立克次体在恙螨亲代饱食蚴、若蛹、若虫、成虫及第2代子产代幼虫,PCR检测均呈阳性.结果显示PCR技术检测恙螨体内恙虫病立克次体的特异性和敏感性高;体外基因扩增检测恙螨体内及鼠宿主体内立克次体是流行病学调查的新的敏感方法.本法为恙虫病分子体流行病学调查提供了新的应用技术,亦为临床病人诊断提供了敏感方法.     

几株国内外Q热立克次体生物学特性的研究

Q热是人类和动物共患的立克次体病,其病原体是贝纳柯克氏体(Coxiella burneti),可通过多种途径进行传播。本文对几株Q热立克次体国际标准株和国内分离株的某些生物学特性进行了研究,结果如下。     

医用立克次体分类鉴定中的一些问题

医用立克次体,即对人类有致病性的病原性立克次体,按《伯杰细菌鉴定手册》(以下简称手册)主要是指立克次体族中的三个属,即立克次体属(Rickettsia)、柯克斯体属(Coxiella)及罗沙利马体属(Rochalimaea)。近年来,在世界各地陆续分离出一些新的立克次体,它们与     

斑点热群立克次体的PCR／SSCP分型技术研究

本文应用PCR／SSCP技术对斑点热群立克次体国际标准株、国内各参考株及黑龙江立克农作54株、36株进行了分型鉴定。结果显示各株之间SSCP图谱差异明显,国内各参考株的SSCP,图谱与西伯利亚立克次体的图谱完全一致,黑龙江立克次作的图谱与国内各株显著不同。分析表明,我国存在2种斑点热群立克次体,即西伯利亚立克农作种和斑点热群立克次体新种－黑龙江立克次体。同时证明应用PCP／SSCP技术分析斑点热群立克农作型别,具有方法简单、经济省时、结果准确等优点。该分型技术应用于立克次体分型国内外未见报道。     

黑龙江立克次体与黑龙江蜱传斑点热研究概况

黑龙江立克次体是近年发现的斑点热群立克次体新种,由其引起的疾病为黑龙江蜱传斑点热。综述了黑龙江立克次体的发现、分离鉴定、病原学和分子生物学特征,介绍了黑龙江蜱传斑点热的流行病学、临床表现及治疗与预防。     

10年来新发现的立克次体

近１０年来国内外发现了一些属于立克次体科立克次体属、罗沙利马体属、埃立克体属的新种。本文对日本立克次体（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ Ｊａｐｏｎｉｃａ）、黑龙江立克次体（Ｒ．ｈｅｉｌｏｎｇｊｉｎａｎｇｉ）、汉赛氏罗沙利马体（Ｒ．ｈｅｎｓｅｌａｅ）、伊丽莎白罗沙利马体（Ｒ．ｅｌｉｚａｂｅｔｈａｅ）、查菲埃立克体的发现和鉴定过程,生物学特性和致病性等作一介绍。     

斑点热群新疆立克次体对宿主细胞感染过程的形态学研究

对新疆立克次体(精河株,下同)感染体外培养的人胚肾传代细胞(简写MERN)和体内鸡胚卵黄囊膜细胞的标本进行了电镜观察。发现立克次体以宿主细胞膜内翻形式进入宿主细胞,在胞浆和胞核内寄生,以二分裂方式增殖;并能察见多个立克次体的链状结构;胞浆内的菌体以核膜内翻方式进入核内,以密集成丛或散在方式生长;在感染后第5—8天的MERN中,立克次体以出芽方式释放,在第8天后通过宿主细胞解体方式释放。文中讨论了新疆立克次体感染宿主细胞过程中的有关机制。我们还发现在宿主细胞内立克次体的附近有直径为20—23nm的微管结构,其功能待深入研究。     

应用PCR技术检测病人血液标本中斑点热群立克次体DNA

本文以聚合酶链反应（PCR）,采用二次扩增法直接检测蜱传斑点热病人血液标本中斑点热群立克次体DNA,结果从7份标本中检出阳性1份,进一步的限制性片段多态性分析证明和斑点热群黑龙江立克次体基因型相同。实验证明：黑龙江立克次体对人具有致病性,同时也证明PCR技术快速、简单、敏感,用于斑点热群立克次体的早期诊断是可行的,并可作出分型鉴定。     

立克次体遗传学研究进展

立克次体遗传学研究进展庄合安,范明远（北京地坛医院病毒研究室,北京１０００１１）１引言立克次体通常是指包括立克次体（Ｒｉｃｋｅｔｔ－ｓｉａ）、罗沙利马体（Ｒｏｃｈａｌｉｍａｅａ）和柯克斯体（Ｃｏｘｉｅｌｌａ）三个属的一大类细菌,除罗沙利马体外均为专性...     

免疫金银染色鉴定斑点热群立克次体方法的建立

本文将免疫金银染色技术应用于斑点热群立克次体的鉴定,建立了方法,对4株斑点热立克次体和1株Q热立克次体的鉴定获得了初步结果,并与免疫酶标染色法进行了比较。结果表明,免疫金银染色法的特异性同免疫酶标染色法,可将不同种斑点热立克次体区分开;而前者的效价一般高于后者2—8倍。文中还讨论了洗涤、显色、衬染等条件对结果的影响。     

精河株斑点热立克次体在非洲钝缘蜱体内的分布

本文报告用乙二醇甲基丙烯酸(GMA)包埋、切片和姬姆萨染色观察精河株斑点热立克次体在非洲钝缘蜱(Ornithodoros moubata)体内的分布情况。接种立克次体后2天,即可从蜱的血淋巴涂片中查见立克次体,但各器官和组织的切片6天后才开始出现阳性,尤以中肠最迟。叮咬感染的蜱的中肠感染较早也较严重。无论接种或叮咬感染,除睾丸和精子外,所查的器官和组织包括涎腺、基节器、中肠、直肠、卵巢以及雄蜱的附腺和贮精囊等切片中都查见立克次体。有的蜱感染很严重,立克次体充满了许多器官和组织的细胞。     

用胰酶消化法浓缩纯化恙虫病立克次体

用不同感染材料和方法进行了浓缩纯化恙虫病立克次体的试验。结果证明以0．25％的胰蛋白酶消化感染鸡胚卵黄囊膜,可获得形态完整的立克次体;浓缩纯化的立克次体保持活性;用于补体结合试验,抗原滴度可达1：128。经冰冻干燥保存后,仍能保持其形态的完整性。     

立克次体病的检疫和诊断(续二)

<正> (三)血清学鉴别诊断 血清学是鉴别诊断细菌、病毒、立克次体等微生物及其疾病的重要力法。熟练而准确地运用血清学技术才能做出正确、可靠的实验诊断。应用于立克次体和立克次体病的血清学诊断方法很多,最常用的有:补体结合试验、立克次体凝集及外斐氏凝集试验、间接血凝和反相血凝及其抑制试验、中和试验等。近年来免疫萤光抗体染色、酶免疫吸附及细胞免疫试验也常被采用。本文着重立克次体学上最常用的几种方法做一介绍。 血清学诊断的基本原则:(1)是应用已知的某种病原体或抗原去测知未知抗体的存在和滴度,以确定系由何种病原体而感染。当人或动物被某种病原体感染后,常在患者     

感染小鼠组织中Q热立克次体的分子病理学检测

腹腔注射Q热立克次体悬液感染BALB／c小鼠,发病后解剖,取主要组织脏器,应用免疫组化和原位杂交检测感染小鼠体内Q热立克次体的抗原分布和DNA在靶细胞中的表达,探讨Q热病变规律及致病机理。结果显示阳性信号多位于单核-巨噬细胞系统细胞胞浆内。结果提示免疫组化和原位杂交技术可以作为Q热特异性的诊断方法,并为致病机理的研究提供线索。     

类立克次体侵染中华绒螯蟹神经组织的光镜和电镜观察

对患颤抖病的中华绒螯解（Eriocheir sinensis）神经和肌肉组织进行光镜和电镜观察,结果显示类立克次体广泛存在于胸神经节中的神经胶质细胞、结缔组织以及细胞间隙中。在神经细胞与步足肌肉细胞连接处,即运动终板部位有大量类立克次体侵染,并且侵染方式与在胸神经节中一样,均以聚集成团的形式存在。胸神经节是支配步足的神经丛,而颤抖病是以步足颤抖为病症的疾病。类立克次体大量侵染胸神经节和运动终板部位,表明该微生物与病蟹步足颤抖的病症有密切关系,进一步证明类立克次体是颤抖病的致病微生物。     

恙虫病立克次体补体结合抗原的研究

本文介绍应用兔睾丸单层细胞制备恙虫病立克次体补体结合抗原的方法,并初步探讨了影响鸡胚卵黄囊膜抗原效价的一些因紊。鸡胚卵黄囊膜抗原产量大、效价高、特异性较好。但有些恙虫病立克次体株在鸡胚中不易繁殖。而在组织培养中很易繁殖,第一代即能获得大量立克次体,有利于同时制备多株恙虫病立克次体抗原。本文同时介绍了制备豚鼠及家兔免疫血清的简便方法。     

免疫电镜对实验感染小鼠体内Q热立克次体的检出

近年来用免疫电镜技术发现和鉴定病毒的报道日益增多。免疫电镜技术的特点是,利用电镜高度的放大率和分辨能力,能直接看到抗原抗体之间的特异性反应和免疫复合物的形态学特征,故具有高度的敏感性和特异性。这对于发现和鉴定病毒与立克次体是十分有用的。为寻求Q热的快速和敏感的实验诊断方法,我们作了免疫电镜技术检出实验动物中Q热立克次体的初步研究,现将结果报告如下。