一种微量巨噬细胞吞噬功能定量检测技术

利用96孔细胞培养板作小鼠腹腔Mφ培养,观察其对抗体包被羊红细胞(EA)的吞噬能力,并以冰醋酸和SDS混合液破坏Mφ,同时使胞内红细胞溶胀,释放Hb,然后在微量板上直接作联苯胺氧化试验,在国产酶标仪上以520nm波长比色。其吸光值高低可作为Mφ吞噬功能的定量指标。用该检测系统可同时进行各种免疫调节因子的功能研究,是一个较理想的体外实验技术。     

巨噬细胞吞噬功能的新检测法

介绍一种检测巨噬细胞吞噬功能的新方法──腹腔注射蛋白胨法,该方法操作简便,快速准确,效果良好。     

慢性阻塞性肺病患者巨噬细胞功能与受体表达的关系研究

目的:研究慢性阻塞性肺病(COPD)患者气道巨噬细胞功能变化及其与受体表达的相关性。方法:将COPD患者84例按病情分为轻中度组44例,重度组40例,选取同期健康体检者40例作为对照组,获取3组诱导痰,分离痰巨噬细胞,检测3组吞噬荧光标记曲霉孢子的吞噬指数(PI),采用实时定量反转录PCR法检测3组吞噬相关受体的表达。结果:轻中度组与重度组细胞总数均多于对照组,而巨噬细胞比例却显著下降(P0.05);轻中度组与重度组巨噬细胞吞噬功能均受到抑制,3组PI比较差异有统计学意义(P0.05);3组巨噬细胞胶原结构清道夫系统(MARCO)、清道夫受体A1(SR-A1)表达量比较差异不明显(P0.05);轻中度组与对照组Toll样受体4(TLR4)表达量比较差异不明显,但重度组TLR4表达上调,与轻中度组、对照组比较差异有统计学意义(P0.05);3组MUC5A、AQP5表达量比较差异显著(P0.05);巨噬细胞PI与TLR4、黏蛋白5AC(MUC5A)表达量呈负相关(P0.05),与水通道蛋白5(AQP5)表达量呈正相关(P0.05)。结论:COPD患者巨噬细胞占细胞总数的比例下降,其吞噬功能也受到抑制,其机制可能与TLR4、MUC5A表达上调及AQP5表达下调等有关。     

巨噬细胞吞噬过程中膜磷脂流动性和受体流动性的关系

本文用ＦＲＡＰ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｒｅｃｏｖｅｒｙａｆｔｅｒｐｈｏｔｏｂｌｅａｃｈｉｎｇ）技术,测量了静息状态和刀豆素Ａ刺激不同时间后巨噬细胞膜磷脂、ＣｏｎＡ受体扩散系数和荧光恢复率的变化。结果显示ＣｏｎＡ刺激后膜磷脂和ＣｏｎＡ受体的扩散系数和荧光恢复率均较静息状态的巨噬细胞明显降低,磷脂流动性的变化与ＣｏｎＡ受体流动性的变化呈正相关。提示受体介导内吞导致的膜磷脂流动性的降低,可能是由于配体与细胞膜上受体结合形成配体－受体复合体,增加了受体的负荷,使受体的流动性降低,进而使膜磷脂的流动性降低。巨噬细胞内吞过程中膜磷脂和ＣｏｎＡ受体流动性的降低,可能还与ＣｏｎＡ刺激后巨噬细胞胞浆ｐＨ值有关。     

辐射对大鼠肺巨噬细胞Fc受体表达和特异吞噬功能的影响

以往的实验表明,巨噬细胞(Macrophages简称Mф)对一定辐射剂量内的照射表现出较强的辐射抗性。因此学者们转向研究照射后时间依赖性的Mф损伤变化。这主要是涉及照射后所致的迟发损伤效应。有关大剂量照射后,短时间观察Mф损伤效应的研究报道甚少。为此本文观察了大鼠肺巨噬细胞(AlveolarMacrophages简称AM)在体外受100—500 Gy     

弱激光通过激活Src增强巨噬细胞吞噬功能

巨噬细胞对病原菌的吞噬以及随后的降解在机体免疫防御中起重要作用.近年来,对增强巨噬细胞吞噬能力的研究越来越被重视.弱激光具有独特的生物组织学作用特征,从而调节机体多种功能.本文重点探讨了He-Ne激光(632.8 nm)照射对巨噬细胞吞噬功能的影响及分子信号调控机理.实验结果表明,弱激光能够通过激活巨噬细胞内Sre激酶...     

异质性荧光染色的巨噬细胞功能研究I．异质性荧光染色的巨噬细胞吞噬活性

利用淀粉多糖和免疫促进剂（白喉类毒素和卡介苗）诱导和活化小鼠腹腔巨噬细胞,观察了四种异质性荧光染色的巨噬细胞非特异性和特异性吞噬活性。实验证明,深蓝色和淡蓝色荧光的巨噬细胞是分化程度低的幼稚细胞,非特异性吞噬功能较弱,但在特异性吞噬过程中呈现了活跃的吞噬活性,特别是在免疫促进剂的活化下,它们的特异性吞噬功能显著增强、淡蓝绿色荧光的巨噬细胞是分化程度较高、非特异性和特异性吞噬功能最旺盛的巨噬细胞,而黄色荧光的巨噬细胞是分化程度最高、特异性吞噬功能较减退的巨噬细胞。     

小鼠巨噬细胞吞噬功能测定方法的改进及应用(英文)

对巨噬细胞吞噬鸡红细胞活性的体内检测方法进行改进.收集小鼠腹腔巨噬细胞,加入不同浓度甘草多糖、鸡红细胞于37℃共同孵育1 h,在倒置显微镜下观察吞噬状态,统计吞噬百分率和吞噬指数.并将改进后的体外吞噬方法用于检测酵母多糖对小鼠腹腔巨噬细胞形态和吞噬功能的影响.结果表明:改进后的体外吞噬法测定的结果与传统的体内吞噬法比较,两者具有显著的相关性(n=6,P<0.01).酵母多糖对巨噬细胞刺激1 h后,与对照组相比,其吞噬功能显著性增强;巨噬细胞形态上出现被活化的特征.应用改进后的方法研究巨噬细胞吞噬鸡红细胞,不需染色,在模拟生理条件下进行,保持了细胞活性,有简便、成本低以及准确率高的特点,适用于普通实验室的科研和教学.     

巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞及吞噬诱导巨噬细胞死亡的实时动态观察

巨噬细胞有效地吞噬清除凋亡的中性粒细胞,对急性炎症的消退、恢复机体的稳态至关重要.但目前对巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞的动态过程以及巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞后的命运转归还知之甚少.本研究动态观察了巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞的全过程,发现巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞过程也可分为识别黏附、内吞、消化和残体外排等阶段,同时观察记录了吞噬凋亡中性粒细胞后巨噬细胞被诱导激活死亡的动态过程.通过透射电子显微镜、激光共聚焦扫描显微镜以及特殊染色法显示,吞噬凋亡中性粒细胞诱导巨噬细胞死亡的方式有自噬、凋亡和胀亡等,其中自噬率为(8.00±2.00)%、凋亡率为(12.33±2.08)%、胀亡率为(3.66±1.50)%.这些结果表明,巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞后自身也经历自噬和凋亡过程,可能是巨噬细胞参与免疫反应的新机制.     

子宫内膜异位症小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的变化规律

目的研究子宫内膜异位症发生进程中腹腔巨噬细胞吞噬功能的变化规律。方法构造小鼠子宫内膜异位症模型,用流式细胞术检测造模前后腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球数,计算吞噬率和吞噬指数代表巨噬细胞的吞噬能力。结果巨噬细胞吞噬率和吞噬指数分别为：未造模组[（10．1±0．82）％,0．17±0．01]、造模后第1d[（32．78±2．43）％,0．60±0．02]、第2d[（33．82±1．23）％,0．61±0．02]、第3d[（35．93±2．81）％,0．72±0．03]、第4d[（27．92±1．24）％,0．51±0．03]、第5d[（24．34±0．91）％,0．40±0．02]、第6d[（17．91±1．03）％,0．28±0．01]、第9d[（17．56±0．80）％,0．26±0．01I、第12d[（19．42±1．02）％,0．36±0．01]、第15d[（26．78±2．05）％,0．54±0．02]、第18d[（27．46±1．61）％,0．50±0．02]、第21d[（25．99±2．31）％,0．54±0．03]。造模后的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力均显著高于未造模组,且呈现出三个阶段的改变：第1—5d为第1阶段,第6-12d为第2阶段,第15—21d为第3阶段,第1和第3阶段显著高于第2阶段（P〈0．01）。结论 子宫内膜异位症小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能增强,且随时间呈现规律性变化特征,可能与子宫内膜的清除和异位存活有关。     

思连康对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数的影响

目的 研究双歧杆菌四联活菌片（商品名：思连康）对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率及吞噬指数的影响。方法 将SPF小鼠30只随机分成三组,每组10只,Ⅰ组灌胃生理盐水,Ⅱ组灌胃婴儿双歧杆菌菌悬液,Ⅲ组灌胃双歧杆菌四联活菌片菌悬液,每天给药0.5 mL,菌液浓度为1.0×108 CFU/mL,连续给药10 d后小鼠腹腔注入2%鸡红细胞悬液1 mL（红细胞数量为2×108个/mL）,30 min后处死,取小鼠腹腔洗液,观察并记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数及被吞噬的鸡红细胞数,计算吞噬率及吞噬指数。结果 与Ⅰ组相比,Ⅱ组和Ⅲ组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数均显著升高（Ps＜0.05）,其中Ⅲ组高于Ⅱ组（P＜0.05）。结论 双歧杆菌四联活菌片及其婴儿双歧杆菌通过提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数提高机体的免疫力。     

一种简单的巨噬细胞体内吞噬试验

巨噬细胞能吞噬鸡红细胞。我们采用小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬鸡红细胞试验,来观察巨噬细胞内的鸡红细胞的形态,并计算吞噬鸡红细胞的巨噬细胞的百分比和吞噬指数,效果很好。据此判断巨噬细胞的吞噬功能和消化功能。提示巨噬细胞体内吞噬鸡红细胞试验,是一种观察巨噬细胞吞噬功能的简捷的方法。     

氦氖激光对离体小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

为探索低功率激光照射治疗的机理,本实验用氦氖激光照射离体小白鼠腹腔巨噬细胞观察其吞噬鸡红细胞折功能。当照射１５分钟时,巨噬细胞蚕噬功能达到最大值,以后开始下降,照射至４０分时,巨噬细胞吞噬功能下降至对照组以下,出现抑制现象。     

戴氏虫草抗紫外线及对巨噬细胞吞噬功能影响

采用孔雀绿比色法研究了戴氏虫草菌丝体水提物在体外对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,同时采用紫外线辐射的方法测定了其对金黄色葡萄 球菌,大肠埃希氏菌,铜绿假单胞菌,枯草芽胞杆菌抗紫外线辐射的保护效应,其结果表明：戴氏虫草菌丝体水提物在较高浓度下能够抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,但在较低浓度下却能拮抗氧化可的松对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制,对金黄色葡萄球菌,大肠埃希氏菌,铜绿假单胞菌,枯草芽胞杆菌抗紫外线辐射具有一定的保护效应。     

猪圆环病毒2型与猪细小病毒共感染对猪肺泡巨噬细胞吞噬功能及其干扰素表达水平的影响

【目的】分析猪圆环病毒2型(PCV2)与猪细小病毒(PPV)共感染对猪肺泡巨噬细胞(PAM)吞噬功能及其干扰素表达水平的影响,为进一步阐明猪断奶后多系统衰减综合征的发病机制提供实验依据。【方法】将48头5周龄健康仔猪随机分为PCV2组、PPV组、PCV2/PPV组和对照组,每组12头。PCV2和PPV组经口鼻途径分别接种PCV2或PPV,PCV2/PPV组同时接种PCV2和PPV,对照组接种细胞营养液。感染后3、7、14和35d(dpi)从每组随机选择3头剖杀,检测PAM的存活率、吞噬活性及其α1型干扰素(IFN-α1)、γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达水平。【结果】PCV2组和PCV2/PPV组PAM的存活率于3、7、14dpi均低于对照组,35dpi均与对照组PAM的存活率接近,PCV2与PCV2/PPV两组之间差异不显著(P>0.05);3个病毒感染组PAM的吞噬功能均显著下降(P<0.01),其中PCV2/PPV组的吞噬功能低于PCV2组(P<0.05);PCV2/PPV组PAM中IFN-α1和IFN-γ mRNA的水平持续低于PCV2、PPV组和对照组的水平(P<0.01)。【结论】PCV2与PPV共感染没有引起PAM的活力进一步下降,但导致其吞噬功能及IFN-α1和IFN-γmRNA的表达水平持续降低。     

巨噬细胞表面的结构分枝杆菌受体

本广袤地近年来发现的多种参与摄取结核分枝杆菌（结核杆菌）的巨噬细胞表面受体的种类和功能作了综述,着重阐述了各受体导结核杆菌内吞的机制,受体多样性和受体联合以及受体介导对后续事件的影响。     

伴刀豆球蛋白A与巨噬细胞膜上受体作用下膜变形性及细胞吞噬能力变化

本文采用图像分析、相差显微、生物活性测定等技术,研究ConA与巨噬细胞膜受体结合后对细胞行为与功能的影响. ConA与受体结合后巨噬细胞膜面积增大、变形性和吞噬能力增强、细胞产热量增加,表明细胞膜结构与功能发生变化.本实验是将图像分析技术用来研究相对图像采集速度要慢得多的活细胞特性的一次成功尝试.