Hoechst将在德国出售TPA

Boehringer Ingelheim(西德的Ingelheim Am Rhein)请求它的竞争对手—Behringwerke(西德的Marburg)在德国血栓溶解剂市场帮助销售血块溶解药—组织纤维蛋白原激活因子(TPA)。Boehringer具有Genentech公司(加利福尼亚州的南旧金山)研制的TPA的独家许可权。而Behringwerke(Hoechst AG的一个分公司)则致力于销售链激酶。Boehringer对于销售链激酶无任何特权。终于他们做成了交易,Behringwerke将与Boehringer共同在西德销售TPA,同时停止     

用色原及凝溶试验法测定组织型血纤维蛋白溶酶原激活剂(TPA)的效价

<正>组织型血纤维蛋白溶酶原激活剂(TPA)是一种限定特异性的丝氨酸蛋白酶,它是纤维蛋白溶酶系统最重要的生理激活剂。在血纤维蛋白存在时,TPA催化酶原纤维蛋白溶酶原转化成它的活性形式,血纤维蛋白溶酶。在体内,血纤维蛋白溶酶的主要目标是纤维蛋白。纤维蛋白溶解方面的最新进展导致了免疫反应TPA和催化部位TPA的敏感试验法的发展。测量催化活性的TPA试验似乎依赖于纤维蛋白原/纤维蛋白碎片的存在,这些碎片是用溴化     

NEJM:支架血栓切除术或为中风治疗带来重大突破

<正>近日,一篇发表于国际杂志New England Journal of Medicine上的研究论文中,来自皇家墨尔本医院的研究人员通过研究开展了一项名为EXTEND-IA的大型随机临床研究,旨在揭示一种治疗中风的新疗法的作用。文章中研究者将一种名为支架血栓切除术的微创凝块移除步骤加入到了标准的凝块溶解疗法(名为组织纤溶酶原激活剂,t PA)中,Bruce Campbell表示,我们发现新     

疱疹病毒可能引起心脏病

Minnesota大学的研究人员曾发现,疱疹单体病毒-1(HSV-1)与冠状动脉凝块有关,后者引起心脏病.这种病毒可以在体内潜伏很多年,然后突然感染机体.研究人员假设,正是在具有感染力的过程中,病毒引起冠状动脉皱褶的一系列变化,导致血凝块形成且不易溶解.     

Genentech的TPA销量下降

正如所料,Genentech(加州旧金山)公布其组织血纤维蛋白溶酶原激活因子(TPA)的销售已趋缓慢。最近的调查表明,多数可以使用这种血栓溶解药物的患者仍在使用该药。然而,当公司官员在九月下旬宣布公司第三季度的产品销量将为6000万美元(约比上季度的7500百万美元低20％)时,股东都感到惊诧。上述公告使得公司     

溶血栓酶活性测定的一种新方法

根据血栓溶解会引起吸光度下降的特性,在细胞培养板上制作小血栓,利用酶标仪同时检测多个样品的吸光度变化.发现反应初期,血栓吸光度的降低同时间呈线性关系,其回归方程的斜率k与酶活性成正比.因此可用k来表示酶活性.此方法与蛋白凝块溶解时间法(CLT法)相关性很好.该法省时,成本低,是一种较好的、实用的检测溶血栓酶活性的方法.     

TPA促进C_3H/10T1/2细胞转化及有关作用的研究

甲基胆蒽(0.1微克/毫升)不能使C_3H/10T2/1细胞发生转化,但经甲基胆蒽(0.1微克/毫升)启动的细胞,以后用TPA(0.1微克/毫升)连续作用则可以转化。说明TPA具有明显的促进细胞转化作用。TPA不能使经甲基胆蒽启动的细胞的姊妹染色单体交换进一步增加。TPA对C_3H/10T2/1细胞的DNA合成,不论是否先经甲基胆蒽启动,都表现为暂时抑制和以后明显的增强。本文对TPA的促进转化作用及其它有关的生物学作用进行了初步讨论。     

纳豆激酶的纯化及活力测定

利用SephadexG—100s柱凝胶层析法从纳豆菌（BacillusNatto）提取液中分离纯化出具有体外活性的纳豆激酶,并通过纤维蛋白平板法测定其纤溶活力,发现其具有较强的促进纤维凝块溶解的作用。     

突变作用使TPA抗血纤维蛋白溶酶原活化因子抑制剂

美国德克萨斯大学西南药物中心(达拉斯)的研究者们,利用定点突变作用使组织型血纤维蛋白溶酶原活化因子(TPA)的结构发生了改变,有效地延长了其半衰期.这种改进的TPA使该酶对由血纤维蛋白溶酶原活化因子抑制剂-1(PAI-1)所引起的抑制作用的敏感性大幅度下降,因而延长了TPA激活血块消散酶血纤维蛋白溶酶原的能力.     

持续水分胁迫对丹参茎叶酚酸含量及其抗氧化活性的影响北大核心CSCD

丹参种植中产生大量废弃茎叶,造成巨大的资源浪费,干旱显著影响药用植物活性成分的产生和积累。该研究以‘川丹参1号’为材料,采用土壤水分胁迫法,探讨长期水分胁迫对丹参茎叶的总酚酸(TPA)、8种主要酚酸含量和乙醇提取物抗氧化活性的影响,以初步明确丹参茎叶中酚酸及其抗氧化能力对土壤水分胁迫的响应特征,为丹参茎叶的开发利用提供理论依据。结果表明:(1)丹参茎叶TPA对土壤水分响应敏感,8、9、10月份样品(SL-8、SL-9和SL^(-1)0)的TPA含量随着土壤相对含水量(SRWC)降低而增加,且不同月份间差异显著;在相同SRWC下,SL-9的TPA含量最低,仅为SL-8的41.4%~91.1%和SL^(-1)0的24.0%~79.9%。(2)长期土壤水分胁迫下,丹参茎叶中迷迭香酸、丹酚酸B、咖啡酸和原儿茶醛明显积累;干旱增加了TPA和单一酚酸的含量,但严重缺水(SRWC为35%)会降低酚酸含量。(3)丹参茎叶乙醇提取物具有很强的抗氧化活性,其DPPH·和ABTS·+清除活性随着SRWC的降低而增强,与TPA含量变化趋势一致。研究发现,适度干旱胁迫能显著增加丹参茎叶酚酸含量及抗氧化活性,在丹参种植中可以通过科学灌溉技术来增加茎叶中酚酸含量,促进丹参的综合利用。     

Genentech与东洋纺织公司共同开发克隆化肝实质细胞生长因子

美国Genentech公司(南圣弗朗西斯科)从日本东洋纺织公司引入肝实质细胞生长因子(HGF)技术,并开始共同开发。这两家公司虽然正在大阪地方法院就血栓溶解剂——组织血纤维溶酶原激活剂(TPA)的开发问题激烈地进行日本第一件专利诉讼,但是现在对于HGF,则不记怨仇,进行了合作。肝实质细胞具有广泛的机能,如解毒、分解老废物、合成血清蛋白等,HGF是能特异地使肝实质细胞增殖的生长因子,同肝脏的再生有密切关系。因此,它有针对慢性肝     

重组TPA在日本获准生产

东洋纺公司等宣布利用基因重组生产的TPA在厚生省中央药事审议会的调查会上获批准.这次通过的生产厂家是东洋纺和第一制药、以及三菱化成和协和发酵等.1990年12月该审议会的特别会刚批准了旭化成和兴和研制的TPA.继旭化成、兴和的细胞培养生产的TPA(估计今春销售)之后,今年下半年将有重组TPA出台.目前还不清楚山谁来经销三菱化成的重组TPA.     

剪切力激活的纳米制剂用于药物靶向溶栓治疗北大核心CSCD

由血栓引起的重要血管的堵塞已在全球成为死亡的首要原因。现有的方法需要灌注溶解血栓的药物,而药物的定位成为了主要的问题。发表在《Science》上的这篇文章研究了一种由剪切力激活的纳米治疗,通过药物与纳米颗粒结合,在血管中流体剪切力作用下在特定部位溶解凝块,为心血管疾病的治疗提供了新的途径。     

应用两种方法诱导SH-SY5Y 细胞分化的研究

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)处理和ATRA与十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)序贯处理(ATRA/TPA)对人类神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞增殖抑制和形态分化的影响。方法:应用10μM ATRA处理6天和10μM ATRA处理3天继以80 nMTPA处理3天这两种方法使SH-SY5Y细胞分化;用倒置光学显微镜动态观察SH-SY5Y细胞形态学变化;并用MTT比色法比较两种分化方法对SH-SY5Y细胞的体外抗增殖作用。结果:ATRA处理和ATRA与TPA序贯处理对SH-SY5Y细胞都有抗增值和诱导细胞分化作用,细胞形态发生明显的变化,分化成神经元表型,前者主要表现为两端带有长突起的纺锤体样细胞形态,而后者主要是由细胞体延伸出多个突起的多边形的细胞。ATRA分化6天的细胞的存活率下降为78.7%±2.0%。当去除ATRA后,继续培养1天的细胞存活率上升为89%±0.2%,而继续培养2天的细胞存活率为86.3%±1.4%;ATRA与TPA序贯分化6天细胞存活率下降为75.9±0.4%。当去除TPA后,继续培养一天的细胞存活率为75.5±0.7%,继续培养2天的细胞存活率为74.9±1.0%。结论:维甲酸(ATRA)处理和ATRA与十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)序贯处理(ATRA/TPA)均能明显诱导SH-SY5Y细胞分化。这两种分化细胞为神经科学的研究提供了优良的体外培养模型细胞,尤其是ATRA与TPA序贯处理能获得分化完全而稳定的神经元样细胞。     

PKC对小鼠受精卵发育的调控作用

为研究 TPA及 PKC的反义寡核苷酸对 1 -细胞期鼠受精卵发育的影响 ,采用免疫细胞化学法标记 PKC(α及 β亚型 ) ,并用激光扫描共聚焦显微镜测定卵内 PKC荧光强度 ;同时利用显微注射法注射 PKC的反义寡核苷酸 ,观察其对受精卵分裂的影响 . 1 0 0 μg/ L TPA对 1 -细胞期受精卵的发育具有完全抑制作用 .TPA处理 1 2 h后 ,对照组受精卵停留在 1 -细胞期 ,而未经 TPA处理的1 -细胞期卵可以分裂到 2 -细胞期 .共焦激光显示实验组与对照组相比 ,PKC(α、β亚型 )荧光强度均有下降 (P<0 .0 1 ) .显微注射 PKC antisenseα及 antisenseβ的受精卵 ,分别只有 1 4 .2 %和 3.33%的卵可以发育到 2 -细胞期 .与对照组 (注射 M2培养液 )差异显著 (P<0 .0 1 ) .结果表明 ,(1 ) TPA长期处理 1 -细胞期受精卵 ,抑制 1 -细胞期卵分裂到 2 -细胞期 ;(2 ) PKC的反义寡核苷酸 (α及β亚型 )可以抑制小鼠 1 -细胞期卵的发育     

促癌物TPA诱导小鼠表皮鸟氨酸脱羧酶mRNA表达和维甲类化合物对该表达的影响

強皮肤促癌物十四烷酰佛波醋酸酯(TPA)局部应用时可触发一系列的生物化学改变,其中最明显的事件之一就是对ODC活性的短暂而急到的诱导,而这种诱导作用与其促癌作用密切相关。利用Northern印迹分析和条带(Slot)印迹分析证明,10nmol/L TPA一次局部处理小鼠背部皮肤可刺激ODC mRNA(2.0kb大小)表达,在4h左右最为明显,随后逐渐降低。10nmol/L TPA多次处理小鼠皮肤(每2天一次,共4次)也有类似的促进作用,但却在6h左右最为明显。在二甲基苯蒽和巴豆油诱发的二阶段小鼠皮肤乳头瘤和癌组织中也观察到了相同大小的ODC mRNA的高水平表达,尤以癌组织最高。新维甲类化合物R8605虽能明显抑制巴豆油诱导的ODC活性,但却未见对TPA诱导的ODC mRNA增加有明显抑制作用。     

NGAL基因新型TPA反应元件结合蛋白的研究

以往研究发现,食管癌细胞的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)基因的过表达具有明显的12-O-十四烷酰佛波醇-13-醋酸酯(12-O-tetradecanoyl phorboi-13-acetate,TPA)诱导性,在启动子-152～-60 区段存在着一种新型的TPA反应元件(TPA response element,TRE),但是该元件的结合蛋白尚未被鉴定出来.采用寡核苷酸DNA亲和层析法(oligonucleotide trapping)从食管癌细胞中分离纯化了NGAL基因TRE结合蛋白;经SDS-PAGE进一步分离,银染显示目标蛋白带.人工切取各目标蛋白带进行MALDI-TOF-MS分析,通过Mascot软件搜索NCBI数据库,根据蛋白质的功能、细胞定位和分子质量大小等指标确定8个核蛋白因子:C19、KIAA1949、TDRD1、RXRβ、FAM54A、KLF15、KLF10和YY-1.最后,利用RT-PCR验证了这些核蛋白因子表达的TPA反应性,结果表明C19、KIAA1949、TDRD1、RXR β和KLF15等编码基因的转录表现出了明显的TPA反应性,提示可能是食管癌细胞中应答TPA刺激,参与NGAL基因过表达的转录激活因子.     

TPA对原代白血病细胞的诱导分化作用

本文报告了TPA对32例不同类型白血病细胞的体外分化诱导结果。TPA(1.6×10~-7M)可诱导急性非淋巴细胞(ANLL)白血病细胞迅速出现单核巨噬细胞分化标志:细胞贴壁、胞浆丝状伪足形成,具有类似巨噬细胞的形态改变及相应的细胞化学反应特征。急性淋巴细胞白血病(ALL)和桨细胞白血病(PCL)细胞不发生上述变化,表现为细胞聚集成闭现象。慢性淋巴细胞白血病(CLL)出现桨细胞样形态转化。初发与复发病例的诱导反应相类似。TPA体外诱导分化实验,有助于了解病人白血病细胞的分化潜能,对于鉴别粒单系和淋巴系两类白血病,尤其对于用常规方法分型困难的低分化白血病有一定的临床诊断意义。     

FOS／JUN介导佛波酯对内皮素基因表达的诱导作用

利用凝胶电泳迁移率改变实验、RNA印迹和蛋白质印迹分析分别检查了c-jun抗体对内皮素-1(ET-1)基因AP-1位点与核蛋白结合的影响及肿瘤促进剂佛波酯(TPA)对c-fos/c-jun基因表达的作用.结果发现,c-jun抗体可使AP-1位点-核蛋白复合物的电泳迁移率发生改变,TPA显著促进c-fos/c-jun基因表达和血管内皮细胞的AP-1结合活性.实验表明,TPA对ET-1基因表达的诱导作用是通过促进AP-1转录因子c-fos/c-jun合成来介导的.     

佛波酯促进NIH3T3细胞的铺展和聚焦粘附激酶的酪氨酸磷酸化

100nmol/L佛波酯(12-O-tetradecanoylphobol-13-acetate,TPA)能明显促进NIH3T3细胞在纤连蛋白(Fn)上的铺展,该作用能分别被酪氨酸激酶(tyrosinekinase,TK)抑制剂4′,5,7-三羟基异黄酮(genistein)和蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)抑制剂calphostinC和神经鞘氨醇(sphingosine)所抑制.TPA作用于结合到Fn上的NIH3T3细胞,使其聚焦粘附激酶(focaladhe-sionkinase,FAK)的酪氨酸磷酸化程度较未处理细胞升高,于30min时达对照的204.0%,并存在浓度依赖性;该变化分别被上述抑制剂所拮抗;未经TPA处理的NIH3T3细胞和纤连蛋白结合诱导的FAK酪氨酸磷酸化亦分别被上述抑制剂所抑制.细胞松弛素D则无论TPA作用与否,都能完全阻断NIH3T3细胞的铺展和FAK的酪氨酸磷酸化.以上结果提示,TPA促进NIH3T3细胞在Fn上铺展的信号转导机制,与PKC的激活有关,进一步则可能通过影响FAK的酪氨酸磷酸化来实现,同时需要细胞骨架的参与;NIH3T3细胞和Fn结合并诱导FAK酪氨酸磷酸化的过程亦依赖于PKC和完整的细胞骨架.