兔海马乙酰胆碱敏感神经元在瞬膜条件反射不同阶段中的作用

本工作应用经典瞬膜条件反射和电生理学的方法,研究海马中的胆碱能传递在学习和记忆过程中的作用。实验在11只新西兰白兔上进行。音调和气流刺激角膜的结合训练过程中,在海马背部记录到和瞬膜条件反射的发展平行,并先于条件反射行为的神经元放电增加。在条件反射形成初期阶段,侧脑室注射胆碱受体阻断剂——QNB 后,海马的学习相关性电活动受到阻抑,瞬膜条件反射消失,但非条件瞬膜反射仍然存在。条件反射巩固后,QNB 仍然使海马的学习相关性电活动受到阻抑,但瞬膜条件反射不受影响。实验证明,在瞬膜条件反射形成过程中起主导作用的海马神经元是对乙酰胆碱敏感的神经元,但在条件反射巩固以后,海马以下水平的脑结构发展了在这种简单学习模式中的功能自主性。     

小熊猫小脑皮层的组织结构及RT-97、KGF和Bax蛋白在小脑皮层的表达

为了解小熊猫(Ailurus fulgens)小脑皮层的结构特征,观察神经丝蛋白抗体RT-97、角质细胞生长因子(KGF)及Bax蛋白在小脑皮层中的表达,利用组织学方法和免疫组织化学方法观察了小熊猫小脑皮层的显微结构,检测了RT-97、KGF和Bax蛋白的表达.结果表明,小脑皮层从外向内依次可分为分子层、Purkinje细胞层、颗粒层3层.RT-97在小熊猫小脑皮层Purkinje细胞层、颗粒层中神经细胞的轴突、分子层中颗粒细胞的轴突及小脑髓质中有阳性表达;KGF在小脑皮层分子层、Purkinje细胞层和颗粒细胞层及髓质中均有阳性表达;Bax蛋白在小脑皮层分子层、Purkinje细胞层和颗粒细胞层中有阳性表达.RT-97、KGF和Bax蛋白在小脑皮层神经结构的构筑中可能发挥着不同的功能.     

小RNAs在生殖细胞发育过程中的作用

很多动物可以产生具调节作用的小RNAs,根据产生方式和作用机制可以将它们分为三类:微小RNAs(miRNAs)、与Piwi相互作用的RNAs(piRNAs)和内源小干扰RNAs(endo-siRNAs),这些小RNAs可以在生物生殖细胞发育过程中发挥重要作用。其中miRNAs的主要作用是调节蛋白质基因的表达;piRNAs主要的作用是沉默转座因子,但piRNAs主要存在于生殖细胞中;endo-siRNAs则可能具有上述两种主要作用。该文论述了这三种小RNAs在生物生殖细胞发育过程中的作用,同时也讨论了它们在治疗生物不育及其在生物节育方面的应用前景。     

脱水在聚乙二醇诱导膜融合中的作用

随着各种诱导膜融合的因子相继发现,人们建立了各种膜融合的模型.我们通过对聚乙二醇PEG诱导脂质体融合的分析,认为膜融合的关键在于脱去膜表面的结合水,而其它作用诸如膜脂缺陷.膜脂分相以及脂多型性等尽管是不同膜体系中直接观察到的膜融合形式,都是膜脱去结合水带来的必然结果.膜表面结合水的排除是前因,本文着重讨论脱水及脱水后膜脂结构的一系列变化.     

RECK基因在兔颈动脉壁损伤后再狭窄过程中的表达

目的:通过建立动物损伤模型,分析RECK基因在兔子颈动脉球囊损伤术后的表达与动脉内膜变化和官腔狭窄的相关性。方法:兔子手术损伤侧的动脉血管设置为实验组,未进行手术操作的一侧动脉作为对照组。建立动脉模型的四个时间点7、14、21、28 d,在麻醉状态下处死模型动物。取得所需长度的损伤动脉血管及对照组动脉血管。将取得的标本进行HE病理染色,通过计算机图像计算软件观察标本动脉内膜随时间的变化;同时通过western-blot方法测定RECK蛋白表达水平、real-time PCR测量RECK基因表达量。结果:血管手术损伤后,血管内膜面积在随着术后日期的增长呈逐渐增厚变化,血管内膜与中层比值逐渐增大,同对照实验组比较,有统计学意义(P0.05)。实验组及对照组的中膜无显著增生。结论:RECK基因在组织中表达变化影响MMPs基因表达。实验论证了在动脉损伤后RECK基因参与了血管再狭窄,为血管再狭窄研究寻得新的研究方向。     

功能膜微域在七烯甲萘醌合成过程中的作用解析

功能膜微域(functional membrane microdomains, FMMs)是细菌细胞质膜上富含脚手架蛋白和聚异戊二烯类物质的结构域,参与细胞生命活动的多个过程。本研究主要聚焦于揭示FMMs与MK-7之间的相关性,并对MK-7合成进行代谢调控。首先,通过荧光标记初步确定FMMs和MK-7在细胞膜上存在相关性;其次通过分析FMMs破坏前后细胞膜上MK-7含量的变化以及细胞膜有序度的变化情况,明确MK-7是FMMs的聚异戊二烯类关键组分;接下来,采用可视化分析探究MK-7合成过程中部分关键酶的亚细胞定位,并通过FloA将胞内游离的途径酶Fni、IspA、HepT和YuxO定位至FMMs中,进而实现MK-7合成途径的区室化,最终成功获得一株高产MK-7的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株BS3AT,摇瓶水平MK-7产量达到300.3 mg/L,3 L发酵罐中MK-7产量为464.2 mg/L。     

小反刍兽疫病毒H和F蛋白在细胞融合中的作用

【目的】研究小反刍兽疫病毒囊膜糖蛋白(血凝素蛋白和融合蛋白)在病毒囊膜和宿主细胞膜融合过程中所发挥的作用。【方法】制备构建成功的小反刍兽疫病毒囊膜糖蛋白和病毒受体SLAM、Nectin4的真核表达质粒pCMV-HA-H、pCAGGS-Flag-F、pCMV-Myc-SLAM和pCMV-Myc-Nectin 4,将其组合转染至CHO-K1细胞,通过显微观察和间接免疫荧光技术分析小反刍兽疫病毒H和F蛋白在病毒融合过程中的功能。【结果】除空白对照组和重组质粒单独转染组细胞中没有发现合胞体外,其余组细胞中均出现了合胞体,而且F和H蛋白共转染组合胞体的数目明显较多;并在共表达H、F蛋白的细胞中观察到了蛋白分布极化的帽子现象。【结论】PPRV F蛋白是病毒囊膜和细胞膜融合的必需蛋白,但需要与PPRV H共同作用才能使病毒成功入侵靶细胞。     

微电泳给予回苏灵对家兔小脑皮层单位放电的影响

文献报道呼吸复苏剂回苏灵(dimefline,DIM)的作用可能是阻断 GABA 受体。本工作选择 GABA 受体密集的小脑皮层用微电泳方法对此加以验证。用五管玻璃微电极记录了16只家兔小脑皮层100个自发放电单位。除8个单位对 GABA、DIM 均不敏感外,有92个单位对 GABA 敏感。微电泳给予 DIM 能使这些单位的放电出现兴奋,阻遏及先兴奋后阻遏等不同效应。在75个 GABA 敏感的单位中,有71个单位 DIM 能对抗 GABA 的阻遏效应或使该单位对 GABA 的敏感性下降,未能对抗 GABA 作用的单位只有4个。静脉注射 DIM 能产生相似的结果。在35个 GABA 敏感的单位中,比较了荷包牡丹碱(bicuculline,BIC)与DIM 对 GABA 阻遏效应的影响。其中两者均能对抗 GABA 效应的有21个,两者都不能对抗的有3个,还有11个单位则 BIC 不能对抗而 DIM 能对抗。本工作提示,DIN 能对抗GABA 的阻遏效应,可作为 GABA 受体的阻断剂。     

大鼠大脑皮质星形胶质细胞条件培养液促进小脑皮质神经元的生长

本研究从大鼠大脑皮质分离、纯化星形胶质细胞,再经培养后收集星形胶质细胞的无血清条件培养液。用盖玻片培养法与快速自动比色微量分析法研究了星形胶质细胞条件培养液对小脑皮质神经元生存以及神经元活力的影响。发现星形胶质细胞条件培养液能够明显提高小脑皮质神经元的体外存活率,增强神经元的活力。表明星形胶质细胞具有神经营养性作用。     

刺激中缝背核区对猫小脑皮层浦肯野细胞电活动的影响

本文研究了刺激外周神经及中缝背核区对猫小脑皮层浦肯野细胞(Purkinje Cell,PC)电活动的影响。在清醒的去大脑猫上记录刺激桡深神经(NRP)及腓深神经(NPP)时PC的电变化,并观察刺激中缝背核区对PC自发放电以及肢体神经传入冲动诱发活动的影响。结果表明,刺激NPP和NRP均可引起小脑皮层第Ⅴ和第ⅦA小叶的PC产生兴奋或抑制反应。刺激中缝背核区对PC自发放电以及诱发活动主要起抑制性影响。     

隐神经C类纤维传入诱发小脑皮层电反应

当弱刺激只引起隐神经A类纤维传入时,小脑皮层出现A-CEP,由潜伏期为11.8±3.5ms的早成分和312.1±17.5ms的晚成分组成;当强刺激同时引起A类和C类纤维传入时,出现AC-CEP类似A-CEP;用极化电流选择性阻断A类纤维传导后,只让C类纤维传入时,出现潜伏期为134.2±18.4ms的C-CEP。在Ⅵ小叶蚓部原裂附近C-CEP以正波为主,幅值最大,并在深层位相倒转。C-CEP的潜伏期较长,频率响应较低,幅值较小,随C类纤维传入量而变化,且对镇痛剂较敏感。结果表明C-CEP是由单纯C类纤维传入引起的,在小脑皮层内产生,是小脑皮层对慢痛信息传入的反应。提示C类纤维传入可以到达小脑皮层,引起诱发电位。当A和C类纤维同时传入时,C-CEP不出现,可能是被A类纤维传入所抑制。     

乙酰胆碱在刺激SⅡ区影响C类纤维传入诱发的SI区电反应中的作用

电刺激猫大脑皮层体感Ⅱ区(SⅡ)对隐神经C类纤维传入引起的体感Ⅰ区(SⅠ)诱发电位(C—CEP)有抑制和易化作用。在SⅠ区局部用阿托品能部分地阻断电刺激SⅡ区对C—CEP的抑制作用,但对易化作用的影响不明显;而用六烃季铵(C_6)能阻断易化作用,但对抑制作用的影响却不明显。在SⅠ区局部应用0.01％乙酰胆碱(ACh)对C—CEP有易化作用,用0.1％ACh则有抑制作用。结果提示,ACh可能参与SⅡ区对SⅠ区C—CEP的影响,通过SⅠ区的胆碱能M受体起抑制作用,通过N受体起易化作用。     

NA和5－HT对小脑脑片浦肯野细胞自发及诱发电活动的影响

在大鼠小脑脑片上观察了ＮＡ和５－ＨＴ对浦肯野细胞（ＰＣ）的自发放电活动及由白质刺激所引起的诱发放电活动的影响。结果表明：（１）ＮＡ使ＰＣ产生抑制、兴奋和双相反应,以抑制反应为主（７９．８％）;５－ＨＴ引起ＰＣ兴奋和抑制反应,以兴奋反应略多（５７．８％）。（２）先后灌流ＮＡ和５－ＨＴ对同一个ＰＣ自发放电的影响主要为抑制（ＮＡ）－兴奋（５－ＨＴ）（５３．８％）。（３）ＮＡ对ＰＣ的诱发复杂锋电位（ＣＳ）和简单锋电位（ＳＳ）反应,主要产生增强效应（５７．１％和６２．８％）;５－ＨＴ对ＰＣ诱发ＣＳ和ＳＳ反应则主要产生压抑作用（６０．０％和６８．２％）。（４）先后灌流ＮＡ和５－ＨＴ对同一个ＰＣ的诱发ＣＳ和ＳＳ反应,主要表现为ＮＡ对这两种诱发反应的增强和５－ＨＴ的压抑效应（６０．０％和５２．９％）。这些结果提示,ＮＡ能和５－ＨＴ能传入纤维可以通过释放ＮＡ和５－ＨＴ调节ＰＣ的兴奋性水平并改变ＰＣ对爬行纤维和苦状纤维突触传入的反应敏感性,影响小脑皮层神经元网络的感觉运动整合过程。     

短暂性缺血对小脑皮质影响的组织化学研究

为了探讨全脑短暂性缺血对小脑皮质蒲肯野细胞的影响 ,实验用组织化学方法对家兔全脑缺血 5分钟 (B组 )、 10分钟 (C组 )及缺血再灌 (D、 E组 )后蒲肯野细胞的酶组织化学变化进行了观察。结果显示 ,缺血 10分钟及缺血再灌后蒲肯野细胞的 SDH、Mg2 + - ATP活性及 PAS反应均降低 (P<0 .0 5 ) ,L DH增高 (P<0 .0 1)。结果提示家兔全脑缺血 10分钟和缺血再灌可损害小脑皮质蒲肯野细胞的能量代谢酶的活性     

猫小脑皮质浦肯野细胞超微结构的年龄相关变化

目的比较观察青年猫（1-3岁）和老年猫（12-13岁）小脑皮质浦肯野细胞（Purkinje cell,PC）的超微结构,探讨其年龄相关变化的生理意义。方法常规电镜包埋、切片、染色,透射电镜下观察并拍照。结果老年组PC粗面内质网碎裂,核糖体解离;线粒体膨解,嵴减少;高尔基复合体扁平囊扩张,极性退化;脂褐素聚积;膜性髓样结构与空泡变性出现;核膜内陷,染色质固缩;生物膜系统结构破坏等。结论衰老过程中细胞器结构退化可能影响老年PC物质合成、能量供应、信息传递及神经元的结构稳定,导致衰老PC死亡,推测与老年个体运动调节和运动学习等小脑功能退化有重要联系。     

LOCALIZATION OF THE THY-1 ANTIGEN IN THE CEREBELLAR CORTEX OF RAT BRAIN BY IMMUNOFLUORESCENCE DURING POSTNATAL DEVELOPMENT

Abstract— At birth in the rat brain the Thy-1 antigen was present at 10% of the adult level and increased rapidly to reach near adult levels after 3 weeks. Localization studies by immunofluorescence on sections of rat cerebellar cortex during this period showed that at day 5 there was weak fluorescence associated mainly with the molecular layer and some fibre-like structures in the centre of the folium; no fluorescence was found around the cells of external granular layer. From 5 to 16 days there was a rapid increase in Thy-1 immunofluorescence with noticeably higher levels associated with the white matter than the molecular layer. However, by 21 days the reverse was found' with lower levels in white matter than in the molecular layer with a similar distribution to that observed previously in adult rat cerebellum. Small rings and patches of fluorescence were observed in the molecular and granular layers. The results indicated that Thy-1 was present on axons, mature neurons and their processes. In addition, Thy-1 immunofluorescence was found in the pia-arachnoid until around day 16.     

大鼠大脑皮层细胞核体外转录模型

本文用改良的 Giuffrida法分离纯化大鼠大脑皮层细胞核,产率为41—52％,具有很高的体外转录活性。参照Blatti硫酸铵浓度法建立了大鼠大脑皮层细胞核体外转录模型,能分别测定真核基因三类 RNA聚合酶转录活性,并对有关问题进行了讨论,指出本系统具有操作简便、省时、省实验材料等优点,适用于大脑皮层细胞核体外转录调控的研究。