红豆杉的愈伤组织诱导及培养研究（初报）

以红豆杉雄球花、茎切段等为外植体诱导产生了愈伤组织。适宜愈伤组织诱导及其生长的培养基为１／２ＭＳ培养基附加２,４—Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ。在不同浓度激素配比的培养基上均未观察到愈伤组织发生再分化。     

墨西哥红豆杉愈伤组织的诱导和器官发生

1　植物名称　墨西哥红豆杉 (Ｔａｘｕｓｇｌｏ ｂｏｓａ)。2　材料类别　墨西哥州Ｐａｃｈｕｃａ县Ｈｉｄａｌｇｏ山森林中自然生长的墨西哥红豆杉成年树当年生成熟枝 ( 9月份取样 )。3　培养条件　愈伤组织诱导培养基是ＳＨ ,Ｂ5 和ＮＮ6 9基本培养基添加ＮＡＡ 2 .0ｍｇ·Ｌ     

东北红豆杉组织培养的研究 Ⅰ．叶片愈伤组织的诱导

东北红豆杉（ＴａｘｕｓｃｕｓｐｉｄａｔａＳＩＥＢＥＴＺＵＣＣ）是天然抗癌药物资源,其树皮中含有一种抗癌药物（ＴＡＸＡＬ紫杉酚）引起各国的注意。由于红豆杉生长缓馒,往往遭到砍伐,远远不能满足抗癌药物研究和医疗药用的需要;加之资源又贫乏,因此确定此项研究。开展此项研究结果表明：黑龙江省、辽宁省及哈尔滨地区采样诱导率哈尔滨居首位,采样时间以五月份愈伤组织诱导率高达５６．５％;叶片不同部位以叶前部和后部为好;叶脉方向对诱导率无明显差导。诱导愈伤组织中注意及时转移、继代、防止在培养中的褐变。克服褐变需对愈伤组织选择出组织紧密、褐变速度慢、同时在培养基中加入一些抗氧化剂,其效果明显。目前愈伤组织三颗粒状,已见绿芽点,现转入分化试验。     

冬凌草组织培养及其愈伤组织诱导研究

实验采用L9（34）正交试验方法优化冬凌草组织培养快繁培养基,筛选冬凌草增殖、生根和愈伤组织诱导的最佳培养基配方。结果表明：不定芽诱导的最适培养基为MS＋0.2 mg/L IBA＋0.1 mg/L6-BA＋0.2 mg/L NAA;生根培养基为1/2 MS＋1 mg/L IBA＋1 g/L活性炭;以冬凌草茎段为外植体诱导愈伤最佳培养基为MS＋1.5 mg/L6-BA＋2 mg/L2,4-D。     

红豆杉愈伤组织超代温保存有关因素的研究

对红豆杉愈伤组织超低温保存中几个主要因素进行了比较,试验证明：预培养时间、预培养其中蔗糖浓度、保护剂的组合以及冰冻降温方法与超低温保存后的相以细胞活力密切相关。试验结果表明,在含8％蔗糖的62号液体培养基中振荡预培养6d,红豆杉愈伤组织在超低温保存后细胞活力保持最高。有效的冷冻保护剂为10％山梨醇＋10％DMSO,冷冻方法以分步冷冻和慢冻较为适宜,而经快冻的愈伤组织复苏后活力低下。     

红豆杉愈伤组织超低温保存有关因素的研究

对红豆杉愈伤组织超低温保存中几个主要因素进行了比较,试验证明预培养时间、预培养基中蔗糖浓度、保护剂的组合以及冰冻降温方法与超低温保存后的相对细胞活力密切相关.试验结果表明,在含8%蔗糖的62号液体培养基中振荡预培养6d,红豆杉愈伤组织在超低温保存后细胞活力可保持最高.有效的冷冻保护剂为10%山梨醇+10%DMSO,冷冻方法以分步冷冻和慢冻较为适宜,而经快冻的愈伤组织复苏后活力低下.     

植物生长调节剂对南方红豆杉愈伤组织培养和紫杉醇合成的影响

通过不同种类和水平植物生长调节剂对南方红豆杉(Taxus chinensisvar.mairei)愈伤组织诱导、生长和紫杉醇合成能力影响的研究发现:诱导培养初期,以无植物生长调节剂的MS为基本培养基,在附加不同植物生长调节剂组合作用下愈伤组织产生的时间和生长、在相同植物生长调节剂组合作用下不同外植体愈伤组织的产生时间和生长均表现出较显著差异,2,4-D/NAA高于0.4时,不利于南方红豆杉愈伤组织的诱导。转换到附加不同植物生长调节剂组合的B5培养基上后,随培养继代次数的增加,生长差异逐渐缩小,直至不显著,表明参考不同文献报道最优配方所设计的各植物生长调节剂组合对南方红豆杉愈伤组织的生长均较适宜,有利南方红豆杉愈伤组织生长的植物生长调节剂优化组合没有唯一性。但不同调节剂组合作用下的同源愈伤组织中、相同调节剂作用下不同源愈伤组织中紫杉醇含量均存在着极显著差异,适当水平(2 mg/L)的2,4-D单用,或与适当水平的KT、6-BA、KT GA配合使用,对南方红豆杉愈伤组织紫杉醇的合成较有利,NAA则不太有利,幼茎和叶愈伤组织产紫杉醇的水平较其它愈伤组织为高。     

火龙果愈伤组织诱导与植株再生

为了建立火龙果愈伤组织诱导与植株再生体系,以火龙果茎段、幼苗和子叶为外植体进行离体培养试验。结果表明：茎段诱导愈伤组织的最优培养基为1／2MS＋2,4-D2．0mg·L^-1＋6-BAO．5mg·L^-1,诱导子叶愈伤组织的最适培养基是1／2MS＋2,4-D2．0mg·L^-1＋6-BA1．0mg·L^-1,诱导愈伤组织分化的最优培养基为1／2MS＋6-BA4．0mg·L^-1＋NAA0．5mg·L^-1,最佳生根培养基为1／2MS＋6．BA1mg·L^-1＋NAA0-3mg·L^-1。     

驱蚊草组织培养及其愈伤组织诱导研究

运用正交设计方法,利用植物组织、细胞培养技术,成功地建立了驱蚊草组织培养快繁技术体系。研究出:不定芽诱导的最适培养基为MS 6-BA0.2mg/L NAA0.3mg/L,增殖倍数为6.73;生根培养基为1/2MS NAA0.4mg/L,平均每株生根数为11.2条,生根率为90.0%。通过对其离体茎段的培养研究实验,得出驱蚊香草的最适愈伤组织诱导培养基为MS 2,4-D0.5mg/L 6-BA2.0mg/L NAA0.3mg/L,发愈率为93.3%,愈伤组织多为淡黄色,质地疏松。     

秦艽体细胞愈伤组织诱导及继代研究

本文报道了秦艽取叶、幼苗为外植体诱导愈伤组织试验。结果表明,取幼苗６７－Ⅴ培养基,２４－Ｄ２５ｍｇ／Ｌ,ＮＡＡ０５ｍｇ／Ｌ,诱导频率最优,可高达１００％。继代培养,以６７％培养基,ＮＡＡ０５ｍｇ／Ｌ,２４－Ｄ（１－１５）ｍｇ／Ｌ最优     

云南红豆杉培养细胞系的建立

紫杉醇(Taxol)最初是从红豆杉属植物短叶红豆杉(Taxus brevifolia)树皮中分离出的一种二萜类化合物^[1]．对卵巢癌,转移性乳腺癌和恶性黑色寮瘤等患者疗效显著^[2],全世界红豆杉属植物有近11种,都含紫杉醇成分．但含量很低,加之现存数量很少,生长极为缓慢．造成了紫杉醇原料供应的危机^[3]。紫杉醇化学合成已经成功^[4-6],但繁杂的反应过程及前体化合物来源的限制使得它们无法实现商业化生产。最近从短叶红豆杉中分离出一种生产紫杉醇的内寄生真菌Tgromyer andreanae^[7]．由于紫杉醇含量仅为24～50ng/L．没有实用价值。植物细胞和组织培养可能是解决天然抗肿瘤药物长期供应的有效方法之一^[8]。自1991年Christen等人申请利用红豆杉细胞培养物生产紫杉醇专利以来^[9]．有关红豆杉细胞培养的研究已有不少报^[10-12]。但云南红豆杉(T.yunnanensis)仅见愈伤组织诱导的报道^[13]。本文报道云南红豆杉愈伤组织诱导和细胞培养的初步结果,并分析了细胞培养物中紫杉醇含量。     

红豆杉组织培养中褐变问题的研究

本研究针对红豆杉组织培养中经常遇到的褐变问题,采取多种方法进行试验,力求最大限度地避免或减轻褐变。结果表明,选择合适的外植体、培养基和培养条件是至关重要的,此外,抗氧化剂、金属离子螫合剂、热激处理和活性碳处理等方法可在一定程度上减轻褐变的程度。综合考虑各种因素,经过筛选可以获得生长良好的不发生褐变的组织。     

云南红豆杉离体胚的培养

在MS培养基上生长的云南红豆杉离体胚的萌发率较高,达80％;成熟种子胚的萌发率高于未成熟胚;胚的萌发率随着种子贮存时间的延长而下降;胚乳有助于胚的萌发。胚培养1个月左右可获得正常的红豆杉幼苗,成苗率15％～20％。幼苗中的紫杉醇含量为0.004％,远远低于成年树皮中紫杉醇的含量(0.02％)。     

云南红豆杉细胞的悬浮培养

在云南红豆杉细胞悬浮培养中,适宜的培养基为B5,接种量为0．5～0．8g干重细胞／100ml培养基,2,4－D浓度为1．0mg／L;培养细胞的生长周期约30d;培养基中较高浓度的蔗糖（40g／L）可提高紫杉醇含量;添加的椰子汁（CM）、酪蛋白氨基酸（C）和水解乳蛋白（LH）3种有机添加剂均能提高培养细胞中紫杉醇的含量,但只有CM和CA能促进细胞的生长。于B5培养基中添加不同浓度的NH4NO3对培养细胞无明显影响。     

红豆杉组织培养及其产物紫杉醇研究进展

该文对红豆杉组织培养过程中外植体的选择、培养基、培养方法等方面研究进展进行了综述。获取抗癌药物紫杉醇主要途径有:红豆杉组织培养途径、人工种植途径、化学合成及微生物生产途径等。     

枣树组织培养研究进展

综述了枣树的器官培养、愈伤组织培养、花药培养、胚与胚乳培养、原生质体培养以及影响枣树组织培养的其他因素。营养器官培养报道的最多,其他外植体的培养相对较少,研究尚处于起步阶段。还针对枣树组织培养存在问题提出了今后的研究方向。     

菘蓝两种外植体愈伤组织诱导研究

为寻找菘蓝愈伤组织诱导的最佳外植体,最佳培养基及愈伤组织继代增殖的最佳培养基,选用叶片和叶柄两种外植体,在添加不同种类植物激素处理组合的培养基上,对不同外植体进行愈伤组织的诱导和继代增殖研究.结果表明叶片比叶柄愈伤组织的诱导能力强,表现为出愈时间早,诱导率高,出愈多且质量好.叶片愈伤组织诱导培养基:MS 6-BA1.0mg/L 2,4-D0.3～0.5mg/L;继代增殖培养基:MS 6-BA0.5mg/L 2,4-D0.3mg/L.因此,采用菘蓝叶片为外植体,能高效的诱导出愈伤组织并能快速增殖.     

濒危植物珙桐愈伤组织的诱导及悬浮细胞培养初探

以珙桐（Davidia involucrate）无菌苗的下胚轴为外植体,以LSD分析和正交设计与分析为主要研究方法。诱导和筛选愈伤组织,进行悬浮培养,初步建立了珙桐悬浮培养体系,并对珙桐悬浮培养中生物量和pH值的变化进行了初步研究。结果表明：KT和2,4-D的组合诱导出的愈伤组织更适合进行细胞悬浮培养,最佳愈伤组织诱导培养基为WPM＋KT 1.0 mg/L＋2,4-D 0.5 mg/L＋Vc 1.0 mg/L;悬浮细胞培养中,接种量和Ca2＋浓度是影响生物量的主要因素,最佳接种量为25 g/L,最佳Ca2＋浓度为标准WPM培养基中Ca2＋浓度的2倍;黑暗条件下,珙桐悬浮培养生物量变化曲线呈＂S＂型,在21 d时可获得最大生物量;pH值的变化与生物量的变化有一定的相关性。