IgD及其受体功能和信号研究进展

自从1965年首次发现免疫球蛋白D(immunoglobulin D,IgD)以来,IgD一直是最为神秘的抗体家族成员。从鱼类到人类进化发展中,IgD一直保留并发挥重要的免疫学功能。IgD在免疫系统中兼具受体和配体的双重身份:作为膜受体,在B细胞早期发育中IgD可在IgM缺失时替代IgM的功能;在炎症和免疫平衡的监测中,IgD起到调节免疫应答和维持免疫系统平衡的作用;作为配体的IgD可以通过与其受体(IgD receptor,IgD-R)结合并激活下游信号通路,介导T细胞的活化及T、B细胞的相互作用。本文就IgD的生成过程、IgD与IgD-R的生理功能、相关的信号通路及以IgD/IgD-R为靶点的药物治疗前景等研究进展做一综述。     

鲈鱼IgM重链基因cDNA的克隆及其原核表达

采用同源克隆和RACE技术扩增到鲈鱼 (Lateolabrax japonicus) 免疫球蛋白M (Immunoglobulin M,IgM) 重链 (Heavy chain,H) 基因全长cDNA序列。鲈鱼IgM cDNA全长为1 901 bp,开放阅读框包含1 749 bp,编码582个氨基酸。根据鲈鱼IgM和其他硬骨鱼免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸序列构建的系统发育树表明IgM、IgZ和IgD分别聚为一枝,其中IgM与IgZ分支的进化关系较近,而与IgD分支的进化关系较远。RT-PCR检测IgM在鲈鱼各组织器官的表达情况,其中在头肾及脾脏中表达量最高,心脏、肌肉及脑中几乎不表达。利用已获得的鲈鱼IgM cDNA序列,构建原核表达载体pQE30-IgM,并在M15大肠杆菌中成功诱导表达了分子量为63kD的重组蛋白His-IgM,Western-blotting显示鲈鱼IgM重组蛋白能与鼠源抗6×His的单克隆抗体特异性结合,说明已经获得了基因工程表达IgM重链蛋白。     

草鱼IgM、IgD 和IgZ 的抗体制备与组织表达分析

根据已报道的草鱼免疫球蛋白IgM、IgZ 和IgD 的序列设计表达引物进行PCR 扩增, 将扩增片段克隆至表达载体pET-32a, 并在大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)中进行诱导表达。利用亲和层析法纯化表达的重组蛋白, 然后免疫日本大耳白兔, 获得兔抗IgM、IgZ 和IgD 的抗血清。经免疫印迹检测, 表明IgM、IgZ 和IgD的表达产物能够被兔多克隆抗体特异性识别。应用兔抗草鱼IgM 和IgZ 的多克隆抗体, 对草鱼多种器官、组织提取的总蛋白进行免疫印迹检测, 在肠、头肾、中肾、皮肤、脾脏、脑、鳃和血液中都检测到IgM 和IgZ的表达。       

基因工程抗体的获得

一、抗体结构和抗体基因 1.抗体结构 抗体分为五类,即IgG、IgM、IgA、IgD和IgE,其理化性质各不相同,在体内的比例、分布及代谢速率也很不一样。IgG是最重要的血清免疫球蛋白,分为四种亚型:IgG1是主要的亚型(占IgG总量的67％),其次是IgG2、IgG3、IgG4。IgA是主要的分泌型Ig,分为IgA1,IgA2两个亚型。IgM是一五聚体分子,由10条H链、10条L链和一条J链通过二硫键连接而成。它是一个多价体。在B细胞膜上的IgM作为抗原受体与B细胞成熟、分化有关。     

硬骨鱼新型免疫球蛋白的研究进展

鱼类是最早出现免疫球蛋白的动物,鱼类免疫球蛋白在鱼类的特异性体液免疫应答中发挥重要的作用。一直以来,人们认为在硬骨鱼中仅存在IgM和IgD两种免疫球蛋白,而2005年以来,陆续在斑马鱼、虹鳟鱼及鲤鱼等硬骨鱼中发现了新型免疫球蛋白,分别命名为IgZ、IgT及IgM-IgZ等。这些新型免疫球蛋白不仅在基因结构上很特别,而且呈现出多样性,在不同种的硬骨鱼中的功能也不完全相同,同一种鱼中的IgT也呈现多样性。虽然目前对于鱼类新型免疫球蛋白的研究刚刚起步,对其功能了解较少,但有研究表明IgT在硬骨鱼的粘膜免疫中发挥重要的作用,且认为它与IgA是同源的。该文拟对硬骨鱼中发现的新型免疫球蛋白的结构特点、基因组成和分布模式及功能差异作一简要综述。     

问题解答

问:血清的免疫功能是什么? 答:血清在人的免疫功能中有很重要的作用,它可以帮助机体消灭和排除外界病原体的感染,从而维持机体生理功能的正常进行。血清的主要成分除水外,在血清中还含有对人体免疫起重要作用的许多抗体或免疫球蛋白。血清中免疫球蛋白(简称Ig)共有五种:IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。其中IgG在血清中含量最多,人体中约有40—5％的IgG存在于血清中,占血清中免疫球蛋白总量的80％。IgG是抗感染性抗体、它是唯一能通过胎盘进入胎儿体内的抗体,对初生儿的抗感染力有很大的影响。IgA主要以单体型存在于血清中,占总IgA的85％,占血清免疫球蛋白总量的13％。IgM则全部存在于血清中,含量占血清免疫球蛋白总量的6％,IgD主要存在于血清中,含量占血清免疫球蛋白总量的1％。     

IgG、IgM、IgA与结核分枝杆菌感染

抗结核分枝杆菌抗体是机体受到分枝杆菌生长繁殖过程中产生的代谢物、菌体蛋白和毒素等物质刺激后产生的免疫球蛋白,包括IgG、IgM、IgA、IgD和IgE等。其中,结核病患者血清中的抗结核IgG、IgM和IgA抗体检测常用于临床辅助诊断,我们主要叙述这3种抗体亚型与结核分枝杆菌感染及诊断之间的关系。     

新生儿如何从母体获得免疫力?

人体能产生5种抗体IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。在个体发育过程中,IgM合成最早,在胚胎发育后期就能够合成了。IgG是在出生后3个月开始合成的,IgA是在出生后4～6个月开始合成的,IgD、IgE开始合成的时间更晚,并且IgD、IgE在Ig中所占比例很小。所以,新生儿出生后3个月内主要依靠从母体得到IgG、IgA以获得免疫力。     

免疫球蛋白的结构与功能

免疫球蛋白(简称Ig),在人体上已发现有五类:IgG、IgA、IgM、IgD及IgE。根据结构和功能的差异,有的又细分为若干亚类,如IgG分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4等。五类Ig中,IgG含量最多,功能了解得最详尽,结构也研究得最清楚。60年代,基于化学法和酶解法的研究,提出Ig分子的四链化     

B淋巴细胞刺激因子（BLyS）研究进展

B淋巴细胞刺激因子（BLyS）是1999年新发现的一种重要的细胞因子,属于肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员.在体液免疫调控中起重要作用.它能强烈地刺激B淋巴细胞的增殖和分化并分泌大量免疫球蛋白(主要为IgM);在体外其过量表达能促进多种B系肿瘤细胞的生长.BLyS转基因小鼠出现严重的红斑狼疮样症状.对BLyS的基因和蛋白质结构、免疫调控功能、受体和信号通路及其在自身免疫性疾病和恶性肿瘤中的作用进行了综述.     

黄颡鱼免疫球蛋白M重链基因原核表达研究

在前期研究克隆得到黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)全长cDNA的基础上, 为进一步研究黄颡鱼免疫球蛋白M(IgM)重链的生物学功能, 设计特异性引物PCR扩增获得了编码成熟免疫球蛋白M重链基因的编码序列。将该基因编码片段连接到原核表达载体pQE30中, 构建黄颡鱼IgM重链的重组表达质粒IgM-pQE30。该重组质粒经酶切和测序鉴定后, 转入表达宿主大肠杆菌M15中诱导表达, 在30℃下, 经0.2 mmol/L IPTG诱导表达8 h, 可获得大量以包涵体形式存在的黄颡鱼IgM重链蛋白, 经SDS-PAGE电泳和Western blotting 分析表明, 新增的62 kDa蛋白条带与预期值相符, 且能与鼠源抗6×His的单克隆抗体特异性结合, 证明黄颡鱼IgM重链基因获得了高效原核表达。为进一步纯化该蛋白制备特异抗体, 研究其生物学功能奠定了基础。     

葡萄球菌生物被膜的基因调控机制研究进展

摘要:细菌的耐药性问题是目前医学临床面临的严峻问题,其中细菌生物被膜的形成是引起细菌持续性感染的主要致病机制之一。细菌生物被膜的形成过程十分复杂,受多种因子和多基因的共同调控,且不同的因子和基因在生物被膜形成的不同阶段所起的作用不同。本文重点对引起院内感染的主要致病菌葡萄球菌的生物被膜形成的基因调控机制,以及药物抑制葡萄球菌生物被膜的研究现状进行综述,旨在为解决医学临床中存在的细菌感染,研制抗生物被膜药物和疫苗等提供参考。     

T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白3在多种疾病中的作用机制

T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白基因编码的蛋白是一类具有共同基序的跨膜糖蛋白,其基本结构包括一个信号肽区、免疫球蛋白样区、黏蛋白样区、跨膜区和有磷酸化位点的胞内区。人类的TIM基因家族包括3个成员(Tim-1,Tim-3,Tim-4),定位于与哮喘、过敏和自身免疫性疾病等有关的染色体5q33.2区域。研究表明,TIM-3与其配体Gal-9相互作用调节T细胞凋亡和免疫耐受,并在过敏性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤、感染及母胎界面方面发挥重要作用。虽然,Tim-3在调节机体的天然免疫和特异性免疫应答方面起着重要作用,但是其还有很多作用机制需要进一步研究,为疾病的临床治疗提供理论指导。     

肺炎支原体肺炎患儿血清免疫球蛋白变化及其临床意义

目的 探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清免疫球蛋白变化的临床意义.方法 随机抽取2010年6月~2012年6月在我院儿科就诊的50例肺炎支原体肺炎患儿和50例普通肺炎患儿,分为支原体感染组(MPP 组)和非支原体感染组(nMPP组),同时选取同期在我院体检的健康儿童50例作为对照组,分别对3组儿童的血清免疫球蛋白水平进行检测,比较其差异.同时根据症状轻重对支原体感染组患儿的血清免疫球蛋白水平进行比较.结果 MPP组和nMPP组血清免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平均高于对照组;MPP组IgM、IgG水平均高于nMPP组;重症组IgA、IgM、IgG水平均高于轻症组,以上差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 体液免疫紊乱在MPP中发挥了重要作用,免疫球蛋白水平的检测为MPP的诊断和发病程度的判断提供一定的临床依据.     

BLyS研究进展

B淋巴细胞刺激因子是新发现的属于TNF超家族成员的细胞因子,它能刺激B细胞增殖,分化并分泌IgG,IgA和IgM等免疫球蛋白,在体液免疫反应中发挥着重要作用,过表达BlyS的转基因小鼠呈现自身免疫性疾病症状。本文对B淋巴细胞刺激因子及受体的基因和蛋白结构、生物学功能,可能的作用机理及临床应用前景进行综述。     

表皮葡萄球菌SarA对atlE、lipA和zinC基因表达调控的研究

表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermids)是一种条件致病菌,SarA(StaphylococcalaccessoryregulatorA)是该菌中一个全局性调控因子,它控制着细胞中许多与毒性相关的基因表达.报道了SarA在转录水平直接调控atlE、lipA和zinC基因的表达.RT-PCR和lacZ报告基因的分析结果显示,在表皮葡萄球菌ATCC35984中,SarA对atlE(自溶酶基因)表达起负调控作用,而对lipA(脂肪酶基因)和zinC(膜相关锌金属蛋白酶基因)的表达则有正调控作用.生物信息学分析表明,SarA控制atlE,lipA和zinC3种基因表达可能是通过与被调控基因上游的特定DNA序列的结合来实现的,该DNA结合区保守并富含AT碱基.根据已报道的金黄色葡萄球菌中SarA的结合位点序列,利用Omiga软件分析并推测了SarA结合atlE,lipA和zinC的可能区域.基于SarA是一种多功能的毒素相关调控因子,结果提示,SarA能调控众多因子,可以作为防治表皮葡萄球菌感染的一个药物筛选靶点.     

染色体重构与免疫球蛋白的V(D)J重组

免疫球蛋白是由B细胞合成、分泌的．它的可变区特异结合抗原,恒定区发挥免疫球蛋白的生物学功能,介导体液免疫反应。编码免疫球蛋白可变区的V、D、J基因片段互相分开、以胚系形式存在。在B细胞发育过程中．胚系基因片段通过DNA重组相连,组装成育转录活性单位。V(D)J重组是严格调控的。其中,B细胞染色体的乙酰化修饰,引起局部染色体的结构改变是一重要机制。     

第21次临床检验师国家考试

<正>血清学 问 1 在IgA和IgM中具有共同性的是哪条? a 分子量约为90万。 b 不能通过胎盘。 c 在分泌物中含有多量。 d 具有M蛋白。 ① 仅a ② 仅b,c ③ 仅b,d ④ 仅a,c,d ⑤ 上述1～4以外 答 为③项。免疫球蛋白有IgG,IgM,IgA,lgD和lgE五种,IgM和IgA的共同性是不能通过胎盘,以及都是聚合体,以J链联结Fc部分。所有的免疫球蛋白都具有M蛋白,分子量IgA约17万,分泌型IgA为40万,IgM约90万。     

鸡白痢沙门氏菌生物被膜形成相关基因rpoE的鉴定

【目的】通过鸡白痢沙门氏菌基因表达和缺失株生物特性的测定,鉴定其生物被膜形成的相关σ因子。【方法】利用结晶紫染色定量法测定沙门氏菌生物被膜形成能力;通过触酶试验测定rpo S活性,确定rpo S基因依赖性和非依赖性生物被膜形成株;利用建立的荧光定量PCR方法比较rpo S基因非依赖株在指数期和生物被膜形成期6个σ因子的基因表达差异;运用Red同源重组系统构建所鉴定σ因子基因缺失株,并测定野生株和基因缺失株对于环境应激的抵抗力差异。【结果】鸡白痢沙门氏菌S6702能够形成生物被膜,触酶试验阴性,确定S6702为rpo S基因非依赖性生物被膜形成株;荧光定量PCR检测显示,培养4-24 h后S6702中rpo E基因表达量最高;与野生株相比,Δrpo S缺失株保留了生物被膜形成能力,而Δrpo E缺失株不能形成生物被膜。rpo S和rpo E基因缺失株对于环境应激的抵抗力均显著降低。【结论】在rpo S基因非依赖性生物被膜形成株中,rpo E基因为参与生物被膜形成调控的σ因子之一,这一发现可用于进一步研究沙门氏菌生物被膜形成的调控机制。     

鲈血清免疫球蛋白分离纯化及部分特性分析

采用硫酸铵盐析、透析和Sephadex G-200凝胶过滤的方法纯化出鲈(Lateolabrax japonicus)血清免疫球蛋白,利用高效液相色谱(HPLC)结合SDS-PAGE的方法分析其性质。HPLC结果表明：纯化得到的IgM在经巯基乙醇处理后解离形成轻链和重链两个亚单位,SDS-PAGE确定其分子量分别为72ku和28ku。实验说明,HPLC的检测方法具有广阔的应用前景;而对鲈IgM的分析为鱼类免疫球蛋白的比较研究提供了基础资料。