红豆草细胞悬浮培养中体细胞胚的形成

红豆草(Ooobrychis viciaefolia Scop.)为豆科蝶形花亚科红豆草属多年生草本植物。由于营养丰富,生活力强,抗旱,耐瘠薄,适合西北干旱地区种植,是农民喜爱的牧草。有的学者已对红豆草在组织培养中体细胞胚的形成     

悬浮培养中悬芹体细胞胚发生的工艺条件研究

以旱芹下胚轴切段为外植体，在ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ培养基因诱导愈伤组织，经几次固体－液体交替培养筛选后，将此胚性愈伤组织接种于ＭＳ液体分化培养基中，就摇订转速、接种量、初始ＰＨ的调控等工艺条件对体细胞胚诱导的最佳条件进行了研究。     

白Pian体细胞胚悬浮培养的动力学研究

白(ＰｉｃｅａｍｅｙｅｒｉＲｅｈｄ.ｅｔＷｉｌｓ.)是我国特有的云杉属树种,在林业生产和环境绿化中均具有重要地位。其体细胞胚胎发生的研究,一方面可用于优良种质的大规模快速繁殖,为植树造林和园林绿化提供优质苗木;另一方面可作为遗传转化的再生系统,进行树种遗传...     

青扦胚性细胞悬浮培养中影响体细胞胚发生因素的研究

试验以青扦（Ｐｉｃｅａｗｉｌｓｏｎｉ）的胚性愈伤组织为材料,以改良５９基本成分附加２４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ及ＫＴ１ｍｇ／Ｌ为培养介质,比较了液体悬浮与半固体二种培养方式对胚性愈伤组织增殖和体细胞发生的影响,研究了液体悬浮培养过程中影响体细胞胚发生的因素。结果表明：液体悬浮培养好于半固体培养,它的胚性愈伤组织的生长率为２６８％,是半固体培养的１２４倍;体细胞胚的分化率为９３％,是半固体培养的２２倍;悬浮培养较佳的培养条件为：初始细胞密度为２％（鲜重）,蔗糖浓度为２０ｇ／Ｌ,摇床转速为１００ｒ／ｍｉｎ,ｐＨ为５８。经过两个月悬浮培养,将培养物转至１／２改良５９附加ＡＢＡ１ｍｇ／Ｌ的分化培养基上,３个月后每ｇ培养物上可获得２８５个正常的子叶期体细胞胚。     

悬浮培养中旱芹体细胞胚发生的工艺条件研究

以旱芹 (Apium graveolens L.)下胚轴切段 (5～ 1 0 mm )为外植体 ,在 MS 1 .0 mg/L 2 ,4- D培养基中诱导愈伤组织 ,经几次固体—液体交替培养筛选后 ,将此胚性愈伤组织接种于 MS液体分化培养基(MS 0 .5mg/L KT 50 0 mg/L CH 50 0 mg/L Prolin)中 ,就摇床转速、接种量、初始 p H的调控等工艺条件对体细胞胚诱导的最佳条件进行了研究。结果表明 ,较佳的培养条件为 :摇床转速 1 0 0～ 1 50r/min;初始细胞密度和 p H分别为 2 .0 % (鲜重 )及 5.5左右。最后获得正常子叶期体细胞胚数为 1 30个 /m L。     

白杄体细胞胚悬浮培养的动力学研究

白(ＰｉｃｅａｍｅｙｅｒｉＲｅｈｄ.ｅｔＷｉｌｓ.)是我国特有的云杉属树种,在林业生产和环境绿化中均具有重要地位。其体细胞胚胎发生的研究,一方面可用于优良种质的大规模快速繁殖,为植树造林和园林绿化提供优质苗木;另一方面可作为遗传转化的再生系统,进行树种遗传…     

海岛棉悬浮培养体细胞胚胎发生

取海岛棉无菌苗下胚轴作外植体,接种在含有激素２,４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ和ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ的改良ＭＳ培养基上。经近２个月的诱导培养,获得淡黄色或淡灰色、松软、湿润、颗粒状的愈伤组织。将此类愈伤组织接入液体培养基进行悬浮培养,３～４个月后产生体细胞胚,获得各个时期的体细胞胚胎。胚性细胞悬浮系经适当的继代培养可长期保持成胚性。     

火炬松细胞悬浮培养体细胞胚胎发生的研究

用火炬松成熟合子胚诱导产生的胚性愈伤组织建立了胚性细胞悬浮系。研究了细胞密度,继代时间和ＡＢＡ浓度等对悬浮条件下胚性柄细胞团及体细胞胚形成的影响。结果表明：当细胞密度为６×１０＾３个／ｍｌ,继代时间为２个月,ＡＢＡ浓度为５ｍｇ／Ｌ时,最有利于ＥＳＭ及ＳＥ发生。在悬浮培养条件下,还观察到裂生胚及子叶原基的分化。     

云南大叶茶体细胞胚发生及体细胞胚苗形成体系的建立

利用云南大叶茶(Camellia sinensis var.assamica Kitamura)胚性细胞系(CL_1)中悬浮培养物,建立了高频率同步化体细胞胚发生及体胚苗形成体系。以改良的MS为基本培养基,将CL_1中培养物由液体保持培养基(0.1mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA)继代转入液体诱导培养基(0.05mg/L 2,4-D 0.50mg/L6-BA),暗培养诱导28d,转入不含任何激素的液体分化培养基中再培养28d,获得了不同发育时期的体细胞胚,其发生频率为81.5％。不同发育时期的体细胞胚用不同目的细胞筛收集,在液体生长培养基(1/2 MS 1.0mg/L GA_3 0.5mg/L 6-BA)中培养发育成熟。ABA有利于高质量体细胞胚的形成。20～70月大小的体细胞胚在固体生长培养基中成苗转换率为75％。在液体悬浮培养条件下观察记录了体细胞胚发育过程,证实其过程与合子胚的形态发生过程相似。     

沙打旺悬浮培养细胞原生质体的体细胞胚胎发生再生植株

Protoplasts from 4-day-old embryogenic cell suspension cultures of Astragalus adsurgens, when cultured in KM8P medium which ammonium concentration was reduced to 2.5 mmol/L and supplemented with 0.5 mg/L NAA, 1.0 mg/L 2, 4-D, 0.7 mg/L BA and 0.4 mol/L glucose, underwent cell sustained divisions and formed cell colonies at a frequency of 16%-20%. Preplasmolysis or low temperature treatment of suspension cells prior to enzyme incubation enhanced colony formation. Following proliferation on MS medium containing 1.0 mg/L 2, 4-D and 0.5 mg/L BA, cell colonies were cultured on MS medium containing 0.1 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA, where approximately 40% of colonies produced somatic embryos ranging in number from 20 to 40 per colony. No significant decrease was found in the potential of somatic embryogenesis when protoplast colonies were obtained from long-term cell suspensions. On hormone-free 1/2 MS medium, somatic embryos developed into intact plants, which showed normal morphology and stable chromosome number.     

青扦胚性愈伤组织悬浮培养动力学及体细胞胚胎发生

在含１ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ,１ｍｌ／Ｌ,ＫＴ,３０ｇ／Ｌ蔗糖的５９液体培养基上建立了生长旺盛的瑶扦胚性愈伤组织悬浮系,并对胚性愈伤组织悬浮系生长,体细胞胚胎发生,底物消耗,ｐＨ值,电导率的动力学过程及各参数的相关性进行了研究。     

防风悬浮培养中的体细胞胚发生

将防风（Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａ ｄｉｖａｒｉｃａｔａ （Ｔｕｒｃｚ．） Ｓｃｈｉｓｃｈｋ．）试管苗幼根接种在含０．５ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ 的ＭＳ培养基上诱导出愈伤组织,继而在含１０％ 椰子乳和０．５ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ的ＭＳ液体培养基中振荡分散建立了细胞悬浮物。至胚性细胞团产生后转至无激素培养基中形成体细胞胚。观察了从单细胞直到球形胚发生的显微及超微结构的变化。在胚性细胞团阶段细胞内出现周质内质网,它的出现可能与细胞团向原胚过渡时的特殊代谢相联系。从单细胞至原胚各阶段细胞内均含有圆球体,到原胚时数量大增,而且其中央电子致密的基质变小变浅,周边部分扩大并更加透明,暗示圆球体在胚胎发生早期起着贮藏蛋白或脂蛋白的作用,后来消耗于原胚的建成而衍生为脂滴。球形胚阶段,在很多细胞的液泡中出现团块状的液泡蛋白。此外还观察到,悬浮培养时单细胞的聚集能促进体细胞胚的发生     

沙打旺悬浮培养细胞原生质体的体细胞胚胎发生再生植株(英文)

以继代培养5—24代的沙打旺(Astra-galus adsurgens Pall.)胚性悬浮系为材料,从生长4d的细胞培养物中可游离出大量有活力的原生质体。细胞预质壁分离或低温预处理对原生质体得率和活力没有影响,但可提高原生质体培养的植板率。预处理的原生质体培养在NH_4NO_3浓度降至2.5mmol/L,并附加0.5mg/L NAA、1.0mg/L 2,4-D、0.7mg/L BA和0.4mol/L葡萄糖的KM8P培养基中,经持续分裂形成细胞克隆,植板率高达16%—20%。细胞克隆在附加1.0mg/L 2,4-D和0.5mg/L BA的MS培养基中增殖后,转至含0.1mg/L NAA和1.0mg/L BA的MS分化培养基中可形成体细胞胚,平均体细胞胚发生频率约为40%,每个克隆产生20—40个体细胞胚。在无激素的1/2MS培养基中,体细胞胚发育成形态正常和染色体数稳定的小植株。