吉兰-巴雷综合征的研究进展

吉兰-巴雷综合征是一种由于感染等原因所致的自身免疫性多发性神经疾病,主要的感染菌为空肠弯曲杆菌。男性患者多于女性。目前临床较为支持的发病机制为分子模拟理论,临床最主要的两大分类是轴索型及脱髓鞘型。欧美等国家以脱髓鞘型为主,亚洲国家以轴索型为主。另外还有一些在吉兰-巴雷综合征中所占比例较低的临床特殊分型,如:Miller Fisher综合征和咽-颈-臂变异型。吉兰-巴雷综合征最有效的治疗方法为静滴丙种球蛋白与血浆置换,且这两种方法的有效性已有循证医学证据支持。激素治疗目前循证医学证据提示无效,基础支持疗法不可轻视。大部分吉兰-巴雷综合征患者为单相病程,仅极少部分患者可复发。Miller Fisher综合征临床预后较好,高龄、轴索型等预后较差。     

空肠弯曲菌感染动物模型的研究进展

空肠弯曲菌是一种全球关注的人兽共患病原菌,感染后可引起人和动物多种疾病。动物模型是开展致病机理、疫苗评价和药物开发等研究的基础。空肠弯曲菌由于培养条件苛刻以及感染实验动物的疾病相似性、经济性和重复性等因素,仍缺乏良好的感染动物模型,其致病机理迄今尚不清楚。本文对已报道的空肠弯曲菌感染实验动物模型进行综述。     

空肠弯曲菌基因组序列及相关致病基因的研究

空肠弯曲菌是1种微需氧的革兰阴性鞭毛螺旋菌,其NCTC11168基因组序列分析显示为1个超变量序列.该菌基因组序列的高变异,尤其是编码膜表面抗原性蛋白的基因序列的高变异可能与其逃逸宿主免疫系统的清除和感染后引起不同疾病有关.结合空肠弯曲菌感染后常见临床表现,本文从基因组水平对该菌趋化性、运动性、黏附力、侵袭力和定植力,以及细胞毒素产生与其感染后诱发格林-巴利综合征等致病作用进行综述.     

基于PCR-免疫试纸条法的空肠弯曲菌快速检测

空肠弯曲菌引起的食源性腹泻疾病已经成为突出的公共卫生问题之一，快速检测食品中空肠弯曲菌污染对于保障人类健康具有重要意义。本研究以空肠弯曲菌lpxA基因序列为检测靶基因，通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增产物上标记的地高辛和异硫氰酸盐(isothiocyanate,ITC)分子与试纸条上抗体特异性结合，建立了一种PCR-试纸条检测方法。所有空肠弯曲菌标准菌株均为阳性结果，其他弯曲菌以及食源性病原菌均为阴性结果，检测特异性为100%；最低检出限为3.1×10³CFU/mL；在对食品的实际检测中，该方法与现有国标检测方法结果一致。将本方法用于空肠弯曲菌的检测降低了成本，简化了操作步骤，为食源性空肠弯曲菌检测提供了一种实用、简便的手段。     

空肠弯曲菌CRISPR/Cas系统的研究进展

多数细菌都存在发挥免疫防御机制作用的CRISPR/Cas系统,在不同种属间呈现多态性。空肠弯曲菌是全球范围内重要的食源性病原菌,所致疾病也是典型的自限性疾病,其复杂的致病机制并未得到明确的解析,而空肠弯曲菌CRISPR/Cas系统的结构呈现多态性,研究两者关系仍存在诸多限制。本文从CRISPR/Cas系统在空肠弯曲菌中的结构、机制及技术应用等方面的研究进展进行综述,为探索空肠弯曲菌致病机制提供新思路。     

表达空肠弯曲菌CfrA蛋白重组乳酸乳球菌的构建及其免疫效果北大核心CSCD

【目的】本试验将空肠弯曲菌肠菌素受体蛋白CfrA编码基因导入食品级乳酸乳球菌表达系统,然后将重组乳酸乳球菌口服免疫鸡,降低空肠弯曲菌在鸡肠道中的定殖。【方法】利用PCR分别扩增空肠弯曲菌cfrA全基因及其N端片段,插入食品级表达载体pNZ8149多克隆位点并转化乳酸乳球菌NZ3900,通过Western blot鉴定重组菌株CfrA蛋白表达情况,同时通过筛选nisin浓度、温度、时间等诱导条件优化重组蛋白表达水平;进而将重组乳酸乳球菌经口服免疫SPF鸡,免疫后分别测定乳酸乳球菌自鸡体内的排出情况、以及诱导CfrA血清抗体和粘膜抗体水平,最后将空肠弯曲菌口服攻毒免疫后的鸡,通过测定鸡泄殖腔棉拭子中空肠弯曲菌的数目来判定口服免疫效果。【结果】Western blot检测显示CfrA全基因及其N端片段均可在重组乳酸乳球菌胞内可溶性表达,不分泌,筛选的最佳诱导表达条件为nisin浓度25 ng/mL、温度37°C、时间1 h。口服乳酸乳球菌10 d内自鸡体完全排空;鸡口服免疫后可产生CfrA蛋白特异性的血清IgG和肠粘膜sIgA抗体;重组乳酸乳球菌口服免疫后空肠弯曲菌在鸡体内的增殖速度显著低于对照组。【结论】成功构建了重组CfrA蛋白的食品级乳酸乳球菌诱导表达系统;表达CfrA蛋白的重组乳酸乳球菌口服免疫鸡对空肠弯曲菌在鸡肠道的定殖具有一定的抑制作用,为研制重组乳酸菌口服家禽免疫制剂防治空肠弯曲菌奠定了基础。     

空肠弯曲菌热稳定抗原性质及与周围神经病关系的研究进展

热稳定抗原是空肠弯曲菌常用的分型基础。此菌某些血清型的核心寡糖外棱结构与人周围神经神经节苷脂的结构相似。通过交叉免疫导致周围神经损伤可能是引起格林-巴利综合征的原因。一直以来,人们普遍认为热稳定抗原的分子结构有两类：含高相对分子质量O多糖的脂多糖和缺乏高相对分子质量O多糖的低聚脂糖,但最新的研究发现：空肠弯曲菌存在荚膜结构,并认为英膜多糖可能为热稳定抗原的抗原决定子。     

鞭毛介导的空肠弯曲菌氧应激机制研究进展

空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是世界范围流行的食源性人兽共患病原菌,是革兰氏阴性微需氧菌。其对氧气、温度、pH和胆汁酸盐等环境条件极其敏感,在环境传播和宿主定殖过程中会遭受许多不利条件,包括致命的活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS),因此,抵抗活性氧自由基是空肠弯曲菌进化的一种重要策略。空肠弯曲菌为抵抗氧应激进化出了多种响应机制,其中,鞭毛及其介导的运动力也参与氧应激。本文对国内外有关空肠弯曲菌氧应激研究进展及鞭毛介导的氧应激机制进行综合阐述,以期为进一步完善空肠弯曲菌氧应激调控系统奠定基础,并为弯曲菌源头防控提供思路。     

空肠弯曲菌细胞致死性肿胀毒素单克隆抗体的制备与鉴定

【目的】原核表达空肠弯曲菌细胞致死性肿胀毒素B蛋白(CdtB),制备其单克隆抗体(mAb),并研究mAb抗毒性作用。【方法】扩增空肠弯曲菌cdtB基因并将其构建到pET-30a(+)和pGEX-6p-1表达载体,以原核表达的GST-CdtB蛋白为免疫原,应用杂交瘤技术进行细胞融合;采用间接ELISA方法测定细胞上清和mAb腹水效价,Dot-ELISA、Western blot分析mAb特异性,并以CaCo-2和HD-11细胞为模型,鉴定mAb抗毒性能力。【结果】成功构建重组原核表达质粒pET-30a(+)-cdtB和pGEX-6p-1-cdtB,并融合表达rHis-CdtB和rGST-CdtB蛋白。获得5株稳定分泌CdtB抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1F3,1F5,2E4,2E11,2F2。抗体Ig类和亚类检测显示2E11 Ig亚类为IgG2b,其他4株均为IgG1。抗体效价高达1:(1×108)。Dot-ELISA试验表明5株mAb均能与空肠弯曲菌标准株发生特异性反应,与非空肠弯曲菌呈阴性反应;Western blot法分析表明5株mAb均能与纯化蛋白rGST-CdtB有良好的反应性。基于CaCo-2细胞的黏附和侵袭实验表明mAb能显著降低细菌的黏附和侵袭能力(P0.01)。【结论】成功制备了针对空肠弯曲菌CdtB蛋白的mAb。为进一步研究空肠弯曲菌致病机制,以及为研制治疗性类药物奠定了基础。     

糖皮质激素联合免疫球蛋白治疗机械通气的吉兰巴雷综合征的临床疗效分析

目的:分析糖皮质激素联合免疫球蛋白治疗需要机械通气的吉兰巴雷综合征的临床疗效。方法:回顾性分析2008年1月至2016年7月西安市六家医院收治的采用机械通气的吉兰巴雷综合征患者的临床资料,并对其进行随访,比较单用免疫球蛋白与糖皮质激素联合免疫球蛋白的疗效差异。结果:两组在出院时及出院后6个月的总有效率(MRC及HFGS的改善率)、死亡率、机械通气时间、住院时间、在ICU住院时间、出院时及出院后6个月的MRC总得分和HFGS得分以及并发症发生率比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:对于机械通气的吉兰巴雷综合征患者,在使用免疫球蛋白的基础上增加糖皮质激素的使用,对其短期(出院时)及较长期(出院后6个月)的临床疗效和安全性均无显著影响。     

高致病性冠状病毒感染导致宿主免疫应答异常

近二十多年，全球范围内先后爆发了由严重急性呼吸综合征冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus，SARS-CoV）、中东呼吸综合征冠状病毒（middle east respiratory syndrome coronavirus，MERS-CoV）和严重急性呼吸综合征冠状病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）3种高致病性冠状病毒导致的疫情。这3种高致病性冠状病毒感染通常伴随着免疫系统功能失调，临床表现有淋巴细胞减少症、细胞因子风暴、急性呼吸系统窘迫综合征，甚至多器官衰竭而导致死亡。揭示高致病性冠状病毒在免疫应答中的作用机制，对于预防与控制冠状病毒感染具有重要意义。本文总结了SARS-CoV、MRES-CoV和SARS-CoV-2的进入机制和受体特征、固有免疫应答和适应性免疫应答失调方面的研究进展，强调了高致病性冠状病毒与宿主免疫应答之间的复杂相互作用，以期为防治冠状病毒感染提供参考。     

慢性重型肝炎患者股静脉双腔导管细菌培养分析

目的分析慢性重型肝炎患者股静脉双腔导管培养的菌群分布、药敏试验,与留置时间的相关性,探讨有效的防范措施。方法对慢性重型肝炎患者行股静脉双腔导管尖端增菌培养,并同时进行外周血培养。结果双腔导管细菌培养阳性25例,64％的病原菌为葡萄球菌属。留置时间10d以上细菌培养阳性率明显增加。结论慢性重型肝炎患者导管相关性感染发生率高,严格的无菌操作和精心护理是防治导管感染的关键。     

Anti-GM1 antibodies as a model of the immune response to self-glycans

Glycans are a class of molecules with high structural variability, frequently found in the plasma membrane facing the extracellular space. Because of these characteristics, glycans are often considered as recognition molecules involved in cell social functions, and as targets of pathogenic factors. Induction of anti-glycan antibodies is one of the early events in immunological defense against bacteria that colonize the body. Because of this natural infection, antibodies recognizing a variety of bacterial glycans are found in sera of adult humans and animals. The immune response to glycans is restricted by self-tolerance, and no antibodies to self-glycans should exist in normal subjects. However, antibodies recognizing structures closely related to self-glycans do exist, and can lead to production of harmful anti-self antibodies. Normal human sera contain low-affinity anti-GM1 IgM-antibodies. Similar antibodies with higher affinity or different isotype are found in some neuropathy patients. Two hypotheses have been developed to explain the origin of disease-associated anti-GM1 antibodies. According to the "molecular mimicry" hypothesis, similarity between GM1 and Campylobacter jejuni lipopolysaccharide carrying a GM1-like glycan is the cause of Guillain-Barré syndrome associated with anti-GM1 IgG-antibodies. According to the "binding site drift" hypothesis, IgM-antibodies associated with disease originate through changes in the binding site of normally occurring anti-GM1 antibodies. We now present an "integrated" hypothesis, combining the "mimicry" and "drift" concepts, which satisfactorily explains most of the published data on anti-GM1 antibodies.     

Pathogenic mechanisms of invasive group A Streptococcus infections by influenza virus–group A Streptococcus superinfection

Group A Streptococcus (GAS) are pathogenic bacteria of the genus Streptococcus and cause severe invasive infections that comprise a wide range of diverse diseases, including acute respiratory distress syndrome, renal failure, toxic shock‐like syndrome, sepsis, cellulitis and necrotizing fasciitis. The essential virulence, infected host and external environmental factors required for invasive GAS infections have not yet been determined. Superinfection with influenza virus and GAS induced invasive GAS infections was demonstrated by our team in a mouse model, after which clinical cases of invasive GAS infections secondary to influenza virus infection were reported by other investigators in Japan, USA, Canada, UK China, and other countries. However, the pathogenic mechanisms underlying influenza virus‐GAS superinfection are not yet fully understood. The present review describes the current knowledge about invasive GAS infections by superinfection. Topics addressed include the bacteriological, virological and immunological mechanisms impacting invasion upon superinfection on top of underlying influenza virus infection by GAS and other bacteria (i.e., Streptococcus pneumoniae and Staphylococcus aureus). Future prospects are also discussed.

     

慢性阻塞性肺疾病合并糖尿病患者肺部真菌感染病原学及易感因素分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并糖尿病患者肺部真菌感染的病原学及易感因素。方法对58例COPD合并糖尿病肺部真菌感染患者进行病原学及预后分析,并与无糖尿病的COPD真菌感染患者76例进行比较。结果 2组患者病原菌均以白色念珠菌占首位,研究组真菌发病率高于对照组,预后较对照组更差。抗生素、年龄、糖皮质激素和营养状态等因素对2组患者真菌感染的影响差异无统计学意义。结论白色念珠菌仍是COPD患者肺部真菌感染的主要致病菌。糖尿病增加COPD患者感染真菌的风险,并且加重病情,影响预后。     

细菌与自噬的抗争——死亡或重生

自噬是一种高度保守的细胞内成分的降解过程,不仅维持细胞的代谢稳定,还与机体对抗各种病原菌感染有着密切关系。自噬能协助机体清除病原体,但有些细菌进化出多种策略干扰自噬信号通路或抑制自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体来逃避自噬的降解,甚至利用自噬来促进其生长增殖。文中从自噬的分子机制出发,讨论多种致病菌与宿主细胞自噬关系的最新进展,以及自噬与病原菌感染的作用和意义,以期为病原菌感染导致的自噬研究提供参考。     

Possible pathogenetic role of antiphospholipid antibodies in a clinical case of human immunodeficiency virus infection with peripheral polyneuropathy and arterial thrombosis

Human immunodeficiency virus (HIV) infection can be associated with many autoimmune disorders such as antiphospholipid antibody syndrome. The most common neurologic complication is represented by peripheral neuropathies, but its pathogenesis is still unknown. We report the clinical case of a 44-year-old woman with HIV infection, peripheral polyneuropathy and arterial thrombosis, in which high serum levels of antiphospholipid antibodies were repeatedly documented. We suggest that the evaluation of serum antiphospholipid antibodies levels in HIV infection is fundamental both from an exploratory point of view and for starting the best treatment.     

人艰难梭菌感染的致病机制与防治策略研究进展

艰难梭菌是一种非常重要的医院感染病原菌,其感染占抗菌素相关腹泻的10．25％,占抗菌素相关肠炎的50．75％,占抗菌素相关伪膜炎的90．100％。而且越来越多的证据表明艰难梭菌的感染与其它疾病,如活性关节炎、婴儿突发性死亡、溶血性尿毒症、坏死性肠炎、希施斯普龙病等有关。更糟糕的是艰难梭菌存在着复发性感染,15—20％的病人在成功治愈后会复发。近年来,随着强毒株的出现,艰难梭菌的感染率和发病率逐年上升,病情也越来越严重,由艰难梭菌感染引起的死亡率也成倍增加。到目前为止,艰难梭菌发病率升高的原因及其致病机制还有待进一步研究。由于艰难梭菌是一种孢子产生菌,对大部分抗菌素都有抗性,目前用于艰难梭菌防治的主要抗菌素甲硝唑和万古霉素的治疗效果也在不断下降,所以正确认识艰难梭菌的感染与流行,进一步了解其致病机制,寻找新的替代疗法已是迫在眉睫。本文对艰难梭菌感染和流行的病因进行了较为全面的分析,对其致病机制进行了深入的总结,并探讨了艰难梭菌防治的最新策略和方法,将有利于更好的认识和研究艰难梭菌,为艰难梭菌的防治提供新思路。     

An efficient method to make human monoclonal antibodies from memory B cells: potent neutralization of SARS coronavirus

Passive serotherapy can confer immediate protection against microbial infection, but methods to rapidly generate human neutralizing monoclonal antibodies are not yet available. We have developed an improved method for Epstein-Barr virus transformation of human B cells. We used this method to analyze the memory repertoire of a patient who recovered from severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) infection and to isolate monoclonal antibodies specific for different viral proteins, including 35 antibodies with in vitro neutralizing activity ranging from 10(-8)M to 10(-11)M. One such antibody confers protection in vivo in a mouse model of SARS-CoV infection. These results show that it is possible to interrogate the memory repertoire of immune donors to rapidly and efficiently isolate neutralizing antibodies that have been selected in the course of natural infection.     

血液或无菌体液培养阳性标本中病原菌检测结果分析

目的：了解血培养（包括血液、无菌体液培养,下同）阳性标本中病原菌的分布及阳性报警时间,为临床及时明确病原菌和正确用药提供参考依据。方法：无菌条件下采集血培养标本注人相应的培养瓶,经仪器扫描后放入血培养仪进行检测,报警后及时进行菌种鉴定和药敏试验。结果：364例阳性报警标本中真阳性标本为176例,其中革兰阳性菌占61．7％,革兰阴性菌占35．0％,真菌占3．3％;188例为假阳性标本,其中革兰阳性菌占54％,革兰阴性菌占41．9％,真菌占4．0％;新生儿科的感染阳性率最高;不同种类病原菌的阳性报警时间多重叠;临床医生经验用药正确或根据药敏结果更换用药的百分比为78．2％。结论：本院引起血液、无菌体液感染的病原菌以革兰阳性细菌为主,病原菌种类较多,存在一定的污染;当新生儿有局部感染时要警惕脓毒血症;单独靠血培养仪报警时间来鉴定区分病原菌与污染菌不一定可靠,及时了解血培养结果及标准药敏结果可以辅助找出感染性疾病的病因,尽早正确合理的使用抗菌药物,从而优化抗菌治疗。