轮状病毒酶联免疫吸附试验

<正>用电镜技术可以对轮状病毒感染进行快速有效的诊断,但这种技术需要有一台电子显微镜,需要有技术熟练的人员掌握使用电镜并对电镜图象能正确地辩认和解释,另外,只有当病毒颗粒完整可辩时,才能用电镜得到诊断结果。 由于上述限制,人们就想到寻找一些不需要电镜的新方法来诊断轮状病毒,其中大多数都是免疫学方法,因为实验室已经可以用实验动物来制备特异性抗轮状病毒的抗体。虽然人轮状病毒与动物轮状病毒在抗原性上有明显差别,但目前所有已知轮状病毒都具有一种共同特异性的群抗原(group antigen)。用一种轮状病毒毒株制备的免疫血清     

轮状病毒酶联免疫吸附试验试剂盒研制成功

<正>急性感染性腹泻是全球性传染病,主要侵袭2岁以下婴幼儿。国内外研究资料证实轮状病毒是引起婴幼儿急性腹泻的主要病     

酶联免疫吸附测定法

酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种灵敏度、特异性和精度都十分优良的测定方法。在诊断、疾病监控以及研究用途方面得到了广泛的运用。现在还在对其进行开发，以简化工序，提高灵敏度。此讲由SRL公司试药部的原田弘智对其进行讲解。[编者按]     

酶联免疫吸附试验定量检测血清肝素酶方法的建立及应用

目的：建立一种简便、微创的血清肝素酶酶联免疫吸附（ELISA）定量检测方法,并对肿瘤患者和正常人血清肝素酶进行比较,初步探讨血清肝素酶水平与肿瘤发生、发展的关系。方法：选择鼠抗人肝素酶单克隆抗体和兔抗人肝素酶多克隆抗体,建立双抗夹心ELISA检测方法,并利用此方法检测健康献血者和肿瘤患者血清中的肝素酶水平。结果：组内数据稳定,可重复;肿瘤患者血清中肝素酶D450nm值高于健康献血者。结论：所建立的血清肝素酶ELISA检测方法灵敏、高效,可用于肿瘤的辅助诊断。     

酶联免疫吸附试验检测艰难梭菌A毒素

实验用兔单特异抗艰难梭菌Ａ毒素ＩｇＧ包被酶标板,以羊抗艰难梭菌Ａ毒素ＩｇＧ标记辣根过氧化物酶作为第二抗体,采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测艰难梭菌Ａ毒素,可检测出０．９４ｎｇ的精制Ａ毒素,对６１株菌的培养液及６５份健康人粪便标本检测发现此法具有较高的特异性。用平行线定量法对几份典型产毒培养物进行了定量测定,结果表明,在一定剂量范围内线性及平行性好,结果准确、可靠。可用于临床粪便标本中艰难梭菌Ａ毒素的筛查及定量检测。     

应用酶联免疫吸附试验诊断先天性风疹病毒感染

妊娠期风疹病毒感染的危害性,国内外均有报道,我们在开展风疹血清流行病学调查的基础上,试图以酶免疫吸附法对风疹病毒感染作出特异性诊断。     

用酶联免疫吸附试验检测肉毒毒素

<正>近年来建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)给肉毒毒素的快速检测增加了一项重要的手段。某些酶既可结合于抗原(如竞争性酶联免疫吸附试验中的毒素),也可结合于抗体(如爽心法酶联免疫吸附试验中的IgG)。考虑到肉毒毒素是一种强毒物质,故更多地用后一标记方法。藉此已对A、B、E、G型肉毒毒素及A、B、E三型混合毒素,C和D型的毒素有关抗原和毒性的关系,一些肉毒梭     

用斑点酶联免疫吸附试验检测轮状病毒抗原

我们用国产试剂和材料建立了一种以硝酸纤维素膜(NCM)作为固相载体的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),用于检测粪标本中的轮状病毒. 首先用铁笔将NCM划成5×5mm的小方格,然后将免抗人轮状病毒IgG打点至方格中心,室温凉干后,置封闭液中室温作用1小时,取出用PBST洗涤3～5次,每次5分钟,然后将膜直接浸入待检粪样、阳性抗原对照和阴性抗原对照中.置37℃ 30～60分钟,洗涤。随后将上述诊断膜浸入酶标兔抗人轮状病毒IgG中,室温45～60分钟,洗涤。用底物DAB显色数分钟,至阳性对照样本出现明显褐色斑点时,用自来水终止反应。根据斑点颜色深浅,肉眼即可判断阳性或阴性结果。     

酶联免疫吸附法的新进展

ELISA (酶联免疫吸附法)试验近两年来的进展情况可分为5部分:a.抗原包被技术,b.提高 ELISA 的灵敏度,c.提高 ELISA 的特异性,d.ELISA 的实验设计与理论,e.ELISA 的应用.从中可以看出 ELISA 的进展趋势.     

甲胎蛋白的酶联免疫吸附分析法

本文介绍用酶联免疫吸附分析法,测定人体血清甲胎蛋白的技术。采用了双抗体夹心法,以聚苯乙烯管为包盖抗体的支持物,用亲和层析提纯的马抗甲胎蛋白抗体,与辣根过氧化物酶交联制得酶标抗体,以邻苯二胺为底物,显色后进行定量分析测定,可获得较高的敏感度(5毫微克/毫升以下)。本文还对影响实验的一些因素及这项技术的发展前景进行了讨论。     

甲胎蛋白的酶联免疫吸附分析法

本文介绍用酶联免疫吸附分析法,测定人体血清甲胎蛋白的技术。采用了双抗体夹心法,以聚苯乙烯管为包盖抗体的支持物,用亲和层析提纯的马抗甲胎蛋白抗体,与辣根过氧化物酶交联制得酶标抗体,以邻苯二胺为底物,显色后进行定量分析测定,可获得较高的敏感度(5毫微克/毫升以下)。本文还对影响实验的一些因素及这项技术的发展前景进行了讨论。     

酶联免疫吸附试验在传染病血清学方面的作用

<正>血凝抑制(HAI)、间接血凝(IHA),补体结合试验(CF),病毒中和试验(VN)或琼脂扩散试验已经成为应用于传染病中定量测定特异性抗原或抗体的常规方法。然而,这些方法都受到许多限制。操作程序复杂,需要较长时间,各种试剂和样品的预先处理或滴定,同时各个实验室之间缺乏统一的标准。     

酶联免疫吸附测定中固相化方法概述

酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是一项应用广泛的固相酶免疫测定技术。抗原或抗体等反应物的固相化在ELISA检测系统中有着十分重要的作用,可直接影响检测结果。应用稳定性好、固相化物质变性率低及固定效率高的ELISA操作体系,可显著提高检测分析的灵敏性、特异性和可靠性。现就ELISA技术中不同固相介质和固相化方法作一概述。     

应用酶联免疫吸附试验检测马铃薯卷叶病毒

以辣根过氧化物酶标记马铃薯卷叶病毒抗体,采用双抗体夹心ELISA方法鉴定了马铃薯和洋酸浆的茎、叶、根及马铃薯块茎中的马铃薯卷叶病毒(Potato Leafroll Virus,PLRV),结果表明,对提纯的PLRV可测出的最低浓度为25ng/ml,当包被抗体浓度为40μg/ml、酶标记抗体稀释度为1/120时,可测出马铃薯茎、叶和根汁液中的PLRV,感染PLRV的洋酸浆茎、叶和根汁液的消光值,均比无病对照者高二倍以上,虽然感染PLRV的马铃薯休眠块茎维管束组织汁液的消光值高于无病毒对照,且脐部维管束组织消光值高于顶端,但测定打破休眠的感病块茎顶端维管束组织的阳性结果更为可靠和明显。     

酶联免疫吸附试验夹心法检测解脲脲原体方法的建立

目的为了提高解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)检测的快速性。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法检测UU抗原并与传统的培养法相比较。结果ELISA夹心法敏感度为92.6%,特异度为97.4%,最低能够检测出蛋白含量为5～10ng/ml的UU抗原。结论ELISA夹心法是一种敏感、方便、快捷、适合大规模标本检测解脲脲原体的方法。     

样品预处理对HCV-cAg酶联免疫吸附试验特异性的影响

目的:探讨血液样品预处理后对控制酶联免疫吸附试验中假阳性的效果.方法:向稀释血清样品中加入适量的C2H6OS和IgM抗体后,以HCV-cAg酶联免疫方法检测60份血清样品中丙型肝炎病毒核心抗原的阳性情况;与常规样品处理方法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测结果为标准进行比较分析.结果:60份血清样品,采用常规的样品处理方法检测出的阳性例数为34例,假阳性率迭25%;采用改良法检测出的阳性例数为23例,假阳性率达6.7%,二者相比差别具有统计学意义(P(≦) 0.05).结论:改良法血清样品预处理可提高ELISA法检出丙型肝炎病的特异性.     

花椰菜花叶病毒的酶联免疫吸附分析

我们用酶联免疫吸附分析(ELISA)的双抗体夹心法,研究了花椰菜花叶病毒(CaMV)的定量测定。以提纯的CaMV免疫家兔,得到教价为1：2000的抗血清。经硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素(DE-32)离子交换层析纯化了IgG抗体。用于标记的酶为辣根过氧化物酶。该酶经硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素(DE一32)离子交换层析、刀豆球蛋白A-琼脂糖4B(ConcanavalinA-Sepharose 4B)亲和层析纯化,使RZ值达2.6。标记抗体制备用过碘酸盐氧化法。     

酶联免疫吸附检测法的应用研究进展

酶联免疫吸附检测法(ELISA)由于具有灵敏、特异、简单、快速及易于自动化操作等优点而得到了快速发展,并且被广泛应用于多个领域.本文对ELISA检测法应用现状及优缺点进行综述,为今后ELISA检测法的更为广阔的应用与发展提供参考.     

间接酶联免疫吸附试验快速检测无毒唐菖蒲试管苗

本文利用间接酶联免疫吸附试验检测了从北京地区栽种的唐菖蒲上分离到的一株病毒的提纯制品和唐菖蒲试管苗的病叶粗提液。用提纯的病毒免疫家兔,抗血清的滴度为1：62500。提纯病毒的最适包被浓度为2．5μg/ml。能检测提纯病毒的最低浓度为4ng／ml。侵染性试验检测提纯病毒的最低浓度为30Ⅱg／mI。在间接酶联免疫吸附试验中,该病毒与烟草花叶病毒普通株有血清学相关性。     

酶联免疫吸附试验检测A型产气荚膜梭菌肠毒素

本实验建立了双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测产气荚膜梭菌肠毒素的实验体系。以家兔单特异ＩｇＧ包被酶标板,辣根过氧化物酶标记的绵羊ＩｇＧ作为指示物,可检测出１．２５ｎｇ／ｍｌ（０．１２５ｎｇ）的产气荚膜梭菌肠毒素,线性范围大,重复性及稳定性好,对培养上清及粪便滤液检查无非特异反应。是产气荚膜梭菌食物中毒实验室诊断的一种快速可靠的检测方法。