苹果原生质体培养及植株再生

用苹果（Ｍａｌｕｓ ｐｕｍ ｉｌａ Ｍｉｌｌ）胚珠诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系。用２％ 纤维素酶、０．５％ 果胶酶的混合酶液分离悬浮培养物,可得到５．４×１０６ 个／ｇ ｆｒ． ｗ ｔ有活性的原生质体。这些原生质体在改良的ＭＳ、Ｋ８ｐ、Ｄ２ 培养基中均可发育成细胞团,在含２．０ ｍ ｇ／ＬＩＡＡ、２．０ｍ ｇ／ＬＮＡＡ、０．１ ｍ ｇ／ＬＢＡ 的ＭＳ固体培养基上形成愈伤组织,更换几次不同的培养基后,在分化培养基上分化出不定芽,在生根培养基上生根形成完整植株。     

玉米原生质体超低温保存后芽和根的分化

植物细胞的超低温保存,已逐步发展成为一个有效的种质保存方法。近年来,随着原生质体再生植株种类的不断增多,禾谷类的主要农作物比如水稻、玉米、小麦等     

红芽大戟愈伤组织诱导及分化研究

以野生红芽大戟茎段、叶片和嫩芽为材料,经消毒灭菌后,接种于含不同激素组合的MS固体培养基上,分别进行愈伤组织诱导和分化,结果表明,在茎段、叶片和嫩芽3种外植体中,嫩芽的愈伤组织诱导率最高,生长最好,最佳诱导愈伤组织激素组合为MS+6-BA2.0mg·L~(-1)+NAA0.4 mg·L~(-1)。该研究旨在筛选出适合红芽大戟诱导分化的培养体系,进一步解决生产中繁殖率低的问题,为红芽大戟组织培养快速繁殖、种质资源保存提供重要参考依据。     

栀子带芽茎段愈伤组织诱导分化及丛生芽增殖和生根研究

以栀子带芽茎段为试材,对其愈伤组织诱导分化及丛生芽增殖与生根进行初步研究。结果表明,栀子带芽茎段愈伤组织快速诱导和分化最佳培养基是MS+KT 1 mg/L+NAA 0.05 mg/L;栀子带芽茎段丛生芽增殖和生根最佳培养基是MS+KT 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L。     

白桦愈伤组织的高效诱导和不定芽分化

选出白桦愈伤组织诱导的最适培养基为 :IS 6 BA 5 .0mg·L-1 KT 0 .5mg·L -1(茎段 ,叶柄 ) ;IS 6 BA 2 .0mg·L-1 NAA 0 .2mg·L-1(叶片 )。分化培养基为 :IS 6 BA 0 .4～ 0 .5mg·L-1,蔗糖浓度 2 0 g·L-1。愈伤组织诱导率和不定芽分化率分别达到 73 %和 90 %以上。     

禾本科植物原生质体培养及研究进展

植物原生质体培养是高等植物细胞工程和基因工程的重要基础之一。许多遗传操作,如体细胞杂交、细胞质重组和直接的 DNA 摄入等,都依赖于原生质体的再生。这种再生在双子叶植物中已不是一件困难的事。然而,多年来禾本科植物原生质体培养一直被认为是个十     

附地菜叶肉原生质体的分离、培养和分化

研究了附地菜叶肉原生质体的分离条件,得到了大量的有活力的原生质体。用改良的NT培养基做液体静置培养,41.7％的原生质体可以分裂,进而形成细胞团,转移到MS固体培养基后形成愈伤组织。最后在MS分化培养基上分化出芽和根。经一年继代培养的愈伤组织,分化能力无明显减弱。     

植物细胞组织及原生质体培养

940099形成甘薯不定苗植株的有益效离体再生方法〔会,英〕/prakash,C.S.…了Hortscience一1993,25(4)。一262仁译自DBA,1993,12(16),93-09290〕 筛选出27种甘薯基因型,经鉴别其中5种具有高繁殖性(315546一s、PI531i43、HIDry、Roj-oblanco和Beauregard)。将来自离体苗顶部的具完整叶柄的叶外植体置于补加0.2现/12,4一D的MS培养基上培养3夭,然后转到含。.Zmg/1玉米素核昔的培养基上,30天内高频增殖形成苗(60一80%)外植体。此外,用o.Zmg/1 thidiazuron取代玉米素核昔,可由叶柄(0.5一Icm)外植体增殖出苗。’叶柄外植体能有效(8。~90%)…     

苹果胚性细胞原生质体培养获得再生新梢

苹果原生质体再生愈伤组织已有报道,但再生植株的报道仅有一例。以往的工作,多采用茎、叶、叶愈伤组织或悬浮培养物分高原生质体,培养成愈伤组织后不易发生器官分化。本文首次报道从新红星苹果胚珠愈伤组织建立的胚性悬浮细胞系分离原生质体,经培养获得无根绿苗的结果。 1.材料及悬浮细胞系的建立试材为中国农科院果树所果园内14年生新红星苹     

巴什拜羊骨骼肌卫星细胞分离培养及诱导分化

为了获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,本研究采集出生1日龄巴什拜羔羊后肢骨骼肌组织,采用两步酶消化法结合差速贴壁法分离纯化巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,并对分离获得的骨骼肌卫星细胞进行了鉴定、传代培养及诱导分化等研究。结果表明,本研究采用的分离纯化方法可以高效获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,RT-PCR检测结果表明骨骼肌卫星细胞标志性基因pax7、Myf5、MyoD、desmin和c-Met均呈阳性表达。获得的骨骼肌卫星细胞具有较强的增殖能力,连续传代12代,细胞的形态仍保持正常,且细胞的克隆形成率仍保持在50%以上,但是当细胞传代至第18代时,逐渐表现出较为明显的衰退。细胞的生长符合典型的"S"型生长曲线,且第2代和第8代细胞的生长曲线没有明显的差异,至第14代时细胞的增殖速度逐渐降低。采用低浓度马血清培养体系,可成功诱导巴什拜羊骨骼肌卫星细胞向肌管方向分化,诱导培养至第5天时,骨骼肌卫星细胞分化标志基因MyHC呈阳性表达。由此得出结论,本研究采用的骨骼肌卫星细胞分离纯化体系高效、可靠,可以满足较高纯度巴什拜羊骨骼肌卫星细胞的分离培养。     

鼻黏膜间充质干细胞的培养、鉴定及诱导分化

目的建立Sprague Dawley(SD)大鼠鼻黏膜间充质干细胞(NM-MSCs)的获取、分离、培养方法,初步了解其生物学特性。方法通过SD大鼠鼻黏膜贴壁法体外分离、培养NM-MSCs,光镜下细胞形态学观察,用免疫荧光技术检测间充质干细胞和神经干细胞标记物,用流式细胞术检测细胞表面标记物,再诱导其向骨组织及脂肪组织方向分化,最后对其进行细胞周期检测及分析。结果分离培养的NM-MSCs光镜下以梭形与多角形细胞为主,呈放射状排列,且生长旺盛;免疫荧光染色显示NM-MSCs同时表达STRO-1和Nestin;第4代NM-MSCs不表达CD19、CD31、CD34、CD45及HLADR细胞表面标记物,但表达CD90、CD105基质细胞标记物;NM-MSCs经成骨、成脂诱导后,茜素红染色和油红O染色均呈阳性;细胞周期分析显示NM-MSCs符合干细胞生长的特性。结论 SD大鼠NM-MSCs组织块贴壁法获取容易,操作简单,且可大量扩增用于细胞实验研究,经体外诱导后具有多向分化潜能,具有间充质干细胞的一般生物学特性。SD大鼠鼻黏膜组织块贴壁法为组织细胞工程研究提供了充足的种子细胞来源。     

蛇瓜芽的诱导

蛇瓜的茎尖和腋芽以MS分别加入0.5～2.0 mg*L-1的6-BA和0.5～1.0 mg*L-1的6-BA与不同浓度的2,4-D、NAA、IAA组合培养时,以1.0 mg*L-1的6-BA以及6-BA与0.1～1.0 mg*L-1的IAA组合对芽的诱导效果最好.     

植物原生质体培养研究进展及应用

综述了原生质体培养的研究进展。原生质体培养在理论研究上的应用有３个方面：（１）细胞生理现象的研究;（２）细胞与细胞质相互关系的研究;（３）病毒侵染与复制机理的研究。在原生质体培养中可通过遗传操作和突变体的筛选对品种进行改良,创造优异品种。     

植物原生质体培养

六十年代初英国植物生理学家 Cocking首先用酶解方法降解细胞壁,获得了蕃茄根尖细胞的原生质体。由于酶解方法能获得遗传性状和生理性状较一致的原生质体群体,为从植物细胞获得大量原生质体开辟了新的途径,并已为国内外科研工作者广泛采用。现用酶解法     

表油菜素内酯诱导沙达旺下胚轴外植体分化芽

油菜素内酯是从油菜花粉中分离得到的新植物甾体激素,它能诱导细胞的分裂和延伸,并与生长素和赤霉素有加成效应。目前关于油菜素内酯在组织培养中生理效应的研究重视不够,而涉及油菜素内酯对外植体器官分化的研究也未见报道;这可能与天然的油菜素内酯在植物体中的含量极微,分离提取颇为困难有关。近年来成功地合成了油菜素内酯及其类似物,这将会促进油菜素内酯作用的研究。     

苎麻原生质体培养及植株再生

用苎麻（Ｂｏｅｈｍ ｅｒｉａ ｎｉｖｅａ）子叶诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系． 用４．５％ 纤维素酶、０．８％ 离析酶、０．８％ 半纤维素酶的混合酶液分离悬浮培养细胞,可得到２×１０６ 个／ｇ ｆｒ．ｗｔ的原生质体．这些原生质体以海藻酸钠包埋方式培养在附加２,４－Ｄ ０．５ ｍ ｇ／Ｌ、ＫＴ ０．５ ｍ ｇ／Ｌ 的ＫＭ８ｐ 培养基中,５０ ｄ 左右可形成肉眼可见的小愈伤组织．愈伤组织经过扩增,在不同的分化培养基上可诱导芽、根的形成,再生出完整植株． 子叶原生质体则仅能进行几次有限的分裂     

植物激素对大岩桐愈伤组织诱导和芽分化增殖的影响

以大岩桐(Sinningia specioca)的幼嫩茎、叶片为外植体,通过正交实验的方法探讨不同浓度和比例的植物激素对愈伤组织诱导和芽分化增殖的影响。实验结果表明:大岩桐愈伤组织的形成最佳激素组合为2,4二-氯苯氧乙酸2.0 mg/L 6苄-基嘌呤0.1 mg/L 萘乙酸0.3 mg/L;芽分化的最佳激素组合为6苄-基嘌呤0.5mg/L 萘乙酸0.1 mg/L。     

亚麻原生质体培养及植株再生

试验分别采用四个纤维用亚麻(Linumusitatissimum)品种7309,948,Belinka和Viking的无菌苗的茎尖为材料游离原生质体。以萌发10天的无菌苗茎尖游离获得的原生质体得率和活性最高,分别达到1．8×106／gFW和85．5％。以V-KM为培养基,采用琼脂岛法培养的原生质体,可在培养3天后发生第一次分裂,10天后统计细胞分裂频率为36％,20天后统计植板率达到5．2％。品种7309和Belinka再生的愈伤组织接种在均附加o．6mg/L6-BA和0．1mg／LNAA的B5-1和MS3固体培养基上,都有芽苗分化,并分别获得再生植株。品种Viking和948分别仅分化获得了不定根或叶状体。