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脱脂奶溶蛋白琼脂扩散试验检测 AhECP 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了脱脂奶溶蛋白琼脂扩散试验新方法,用于检测嗜水气单胞菌(AeromonashydrophilaAh)J-1株两种培养基培养的去菌体上清中的胞外蛋白酶(ECP),同时用经典底物法进行了检测,两种方法所得结果相符。与底物法相比,脱脂奶溶蛋白琼脂扩散试验操作简便、敏感性高、重复性好。 相似文献
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本文报道烙铁头(Trimeresurusmucrosquamatus)蛇毒纤维蛋白原溶酶(TMVFg),眼镜王蛇(Ophiophagushannah)蛇毒纤维蛋白原溶酶(ohS1),竹叶青(Trimeresurusstejnegeri)蛇毒专一纤溶酶原激活剂(sv-pA)对5种小分子多肽底物的底物专一性,及这些蛇毒丝氨酸蛋白酶对各种凝血因子(第X因子、凝血酶原、纤溶酶原、蛋白C)的作用,并和其它蛇毒丝氨酸蛋白酶如矛头蝮(Bothropsatrox)蛇毒凝血酶样酶(Batroxobin)、铜头蝮(Agkistrodoncontortrixcontortrix)蛇毒蛋白C激活剂ACC-C、蝰蛇(Viperarusselli)毒第Ⅴ因子激活剂RVV-V进行比较研究。通过酶标偶联免疫反应研究了抗sv-PA抗体与各种丝氨酸蛋白酶的免疫交叉反应,并对蛇毒丝氨酸蛋白酶及相应功能的哺乳动物蛋白酶进行了序列比较分析。从底物专一性多样性及已知序列结构分化上对这一类蛇毒丝氨酸蛋白酶的结构与功能进行了探讨和研究。 相似文献
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耐甲氧西林葡萄球菌检测方法的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检测大致分为3个方面,药敏试验、meeA基因和青霉素结合蛋白2a(PBP2a)检测,药敏试验易受实验体系中多种因素影响,自动化检测仅属定性筛选试验,E-Test法操作简便,准确性好,因价格昂贵,临床应用受限。meeA基因检测耗时短,特异性、敏感性高,但meeA基因阳性的菌株,其表型不一定就 耐药株,琼脂筛选法仍是检测的金标准。PBP2a含量分析在一定程度上解决了表型与 相似文献
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迄今为止,对纤溶活性蛋白(fibrinolytic protein)的检测主要有4种方法:纤维平板法(fibrin plate method)、显色底物法(colorimetric assay using chromogenic substrates)、反相纤维蛋白自显影法(reverse fibrin autography)和纤维蛋白酶谱法(fibrin zymography)。纤维平板法可以用来快速判断样品是否具有纤溶活性,同时,纤维平板法和显色底物法也可以用来对纤溶活性蛋白进行半定量分析。反相自显影法和纤维蛋白酶谱法则是两种较新的技术,主要用来对纤溶活性蛋白进行定性分析。详细阐述了这几种技术的发展过程、原理、优缺点和应用范围。 相似文献
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本文报道烙铁头蛇毒纤维蛋白原溶酶,眼镜王蛇蛇毒纤维蛋白原溶酶,竹叶青蛇毒专一纤溶酶原激活剂对5种小分子多肽底物的底物专一性,及这些蛇毒丝氨酸蛋白酶对各种凝血因子(第X因子、凝血酶原、纤溶酶原、蛋白C)的作用,并和其它蛇毒丝氨酸蛋白酶如矛头蝮蛇毒凝血酶样酶、铜头蝮蛇毒蛋白C激活剂ACC-C、蝰蛇毒第V因子激活剂RVV-V进行比较研究。通过酶标偶联免疫反应研究了抗sv-PA抗体与各种丝氨酸蛋白酶的免疫 相似文献
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厌氧条件下微量琼脂糖弥散法抑菌试验的建立及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
作者建立了在厌氧条件下两种微量而敏感的抑菌试验,可用于鉴定蛋白质或多肽类抑菌物质。(1)琼脂糖弥散法:可检测抗菌蛋白抑菌活性,(2)电泳凝胶弥散法:可直接确定存在于PAGE凝胶中抗菌蛋白条带。应用这两种方法,作者首次鉴定出血链球菌培养上清液中存在抑制牙周可疑致病菌的抗菌蛋白。 相似文献
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人微小纤溶酶原基因在甲醇营养型酵母中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
用PCR方法扩增人微小纤溶酶原(Microplasminogen,mplg)cDNA,与分泌型酵母表达载体pHILD8重组,构成受醇氧化酶基因(AOX1)的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,然后转化GS115酵母菌,经表型筛选、PCR扩增筛选阳性克隆,然后以甲醇诱导表达,mplg分泌至培液,以酪蛋白琼脂糖平板溶圈法、发色底物法检测,mplg显示出纤溶活性。 相似文献
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经过 75% 饱和度硫酸铵沉淀、 Sephadex G 75 凝胶过滤层析、 Lys Sepharose 4 B 亲和层析和电泳制备洗脱,从华广虻( Tabanus am aenus W alker)腹部组织匀浆液中分离纯化出分子量约为 67k D 的溶纤活性蛋白 T A F P经纤维蛋白平板测定表明, T A F P 只具有纤溶酶作用,不具有激活纤溶酶原的作用;但 T A F P 能分解纤溶酶原激活剂的生色底物—— Chrom ozym U K 及 S 2288还能水解胰蛋白酶专一底物 Bz Phe Val Arg N A 及 C B Z Gly Pro Arg N A,表明 T A F P具有类胰蛋白酶活性,专一水解精氨酸形成的酰胺键(或肽键) T A F P无胰凝乳蛋白酶活性 相似文献
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应用DIG标记探针杂交检测IBDV 总被引:3,自引:0,他引:3
本试验用地高辛(Digoxigenin,DIG)标记的探针建立了核酸杂交检测传染性法氏囊病病毒(IB-DV)的方法,并在敏感性方面同琼脂扩散试验进行了比较。探针来源于IBDVSTC-ll9和STC-243cDNA。杂交方法的敏感性试验表明,核酸杂交可以检测到0.1pg的IBDVRNA;与多个毒株核酸的杂交则显示出标记的探针可以作为通用试剂用于IBDV早期感染的诊断;而同琼脂扩散试验的比较则说明,杂交方法比常规的免疫沉淀反应敏感104倍以上。除此之外,由于杂交方法特异以及非放射性探针操作方便,因而具有很大的应用前景。 相似文献
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耐甲氧西林葡萄球菌3种检测方法的实验比较及临床应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 通过对200株临床分离的葡萄球菌耐苯唑西林的检测,比较3种表型检测法的阳性率并对其临床实用性进行评价。方法 采用美国NCCLS 2004年制订的头孢西丁-纸片扩散法、VITEK32微生物鉴定仪检测及苯唑西林盐琼脂法测试mecA介导的葡萄球菌耐药。结果 200株被检测的葡萄球菌中,头孢西丁-纸片扩散法检出耐苯唑西林的阳性率为68%(136/200);苯唑西林盐琼脂法的阳性率为67.5%(135/200);VITEK32仪的阳性率为68.5%(137/200);且耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的耐药率(86.2%)高于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(26.23%)。3种检测方法结果经χ^2检测差异无显著性。结论 3种方法操作都简便,但各有优缺点,VITEK32仪器检测葡萄球菌耐笨唑西林费用高,一般小型医院不具备条件;盐琼脂筛选法判读直观,但要掌握好孵育时间;NCCLS2004版的纸片扩散法较经济实用,不仅可检测被检菌是否耐笨唑西林,同时还可获得大环内酯-林可霉素-链阳霉素(MLSB)结果,但是当头孢西丁的判断折点在临界时应当复检,建议与盐琼脂筛选法同步检测。 相似文献
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伤寒杆菌SOD抗体对小鼠腹腔吞噬细胞杀灭伤寒杆菌的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
为了制备伤寒要直菌SOD抗体,研究该抗体对小鼠腹腔吞噬细胞杀灭伤寒杆菌的影响,探讨SOD与伤寒杆菌抗吞噬作用的关系。采用纯化的伤寒杆菌(Stwl)Fe-SOD免疫农兔制备兔抗Fe-SOD抗体。利用EALISA法检测抗体的效价。免疫电泳、双向琼脂扩散试验和抗体对酶活性抑制试验分析抗体的特性。用不同浓度的抗体预先处理伤寒杆菌,然后进行小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬杀菌试验。试验结果抗体的ELIS攻疚价为1:1 相似文献
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目的:比较琼脂稀释法和纸片扩散法对鲍曼不动杆菌的药敏试验结果。方法:随机挑选的300株鲍曼不动杆菌,检测其标本及科室的分布情况,并采用琼脂稀释法和纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌对环丙沙星(CIP)、庆大霉素(CN)、阿米卡星(AK)、头孢他啶(CAZ)、头孢吡肟(FEP)、左氧氟沙星(LEV)、氨苄西林-舒巴坦(SAM)、妥布霉素(TOB)、美洛培南(MEN)、米诺环素(MH)、头孢哌酮-舒巴坦(SCF)11种抗菌药物的敏感性,比较两种检测结果的差异。结果:300株鲍曼不动杆菌主要分布在痰液标本中,共214株,占71.3%,主要来源于ICU 101株(33.7%)及脑外科59株(19.7%)。药敏检测结果显示,两种检测方法所得的SCF和MH的敏感性差异具有统计学意义(P0.05),其他9种抗菌药物的药敏检测结果差异没有统计学意义(P0.05)。结论:琼脂稀释法和纸片扩散法对鲍曼不动杆菌药敏试验结果并不完全一致,临床用药时尤其要注意SCF和MH这两种药物药敏结果的可靠性。 相似文献
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纤维蛋白自显影法检测不同分子量的纤溶酶原激活剂 总被引:2,自引:0,他引:2
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)纤维蛋白显影方法是经SDS-PAGE将不同分子量的纤溶酶原激活剂(PA)分开,然后再转溶纤维蛋白板使之产生溶带而检测PA物质活性及分子大小的方法。此法与Western印迹方法比具有检测更简便、灵敏、快速的特点,且是活性检测,但其分子量分析精度不如Western印迹法。本研究用SDS-PAGE纤维蛋白自显影方法对本室表达的重组组织型-pA(rt-PA)及突变体Nll7Q/Nl84Q/△(K296——G302)及标准尿激酶(UK)和rt-PA进行了分析鉴定。 相似文献
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采用在碱性条件下正丁醇抽提的人胎盘膜上的碱性磷酸酶(ALP)作底物, 检测血清中糖基磷脂酰肌醇- 特异性的磷脂酶D (GPI-PLD) 的活性水平. 这种ALP 含疏水的GPI锚定膜结构(anchor), 与血清保温后能被其中的GPI-PLD降解成亲水的不含GPI-锚定的ALP. 采用Triton X-114 二相分离法和梯度凝胶电泳法来分离含GPI的ALP和不含GPI的ALP, 计算出转化率(% ), 用来表示GPI-PLD酶活性. 对这两种方法进行比较后, 表明在一般实验室条件下, 二相分离法更为简便, 并对其影响因素进行了全面探讨. 相似文献
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目的了解琼脂扩散法(K-B法)及肉汤稀释法检测嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性,了解两种方法的差异及为临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌提供药敏结果。方法对28株临床分离嗜麦芽窄食单胞菌进行K-B法及肉汤稀释法检测,了解扩散直径及每株菌的MIC值。结果多西环素、米诺环素对嗜麦芽窄食单胞菌的药敏结果较好;K-B法及肉汤稀释法所得结果相关性好。结论临床上可以选择多西环素、米诺环素治疗嗜麦芽窄食单胞菌感染;可以应用K-B法检测嗜麦芽窄食单胞菌对四环素类抗生素的药物敏感性。 相似文献