氨基酸和微量元素在虫草菌感染虫草蝠蛾幼虫中的影响

本文收集了虫草蝠蛾2—6龄五个龄期组幼虫,四组处于不同发育阶段的虫草菌丝体、被虫草菌感染后的僵虫体、全虫草体及子实体共计12组样品的氨基酸,微量元素分析资料,应用聚类分析方法对各样品变量的分类单元及其贡献值进行初步探讨。结果显示:各样品间的氨基酸、微量元素组成水平各不相同,5、4龄幼虫的总体组成水平在比例关系上更接近全虫草体,虫草菌丝体愈培养至晚期就愈接近子实体的组成。分析认为,5、4龄虫易被感染与其氨基酸、微量元素的组成背景值有关;以培养至晚期的菌丝体或有性生殖孢子更易感染幼虫。     

贡嘎蝠蛾幼虫血淋巴中游离氨基酸,海藻糖的初步研究

本文报道了冬虫夏草寄主——贡嘎蝠蛾幼虫血淋巴中游离氨基酸种类、含量及海藻糖含量,并与感虫草菌和人工饲养的贡嘎蝠蛾幼虫进行了比较。     

康定虫草蝙蝠蛾幼虫食性试验

为人工培植冬虫夏草的需要,在四川康定对虫草蝙蝠蛾幼虫的食性进行了试验研究,虫草蝙蝠蛾幼虫是多食性,主要取食莎草科、禾本科、毛茛科、蓼科、水麦冬科等10科15种植物的地下根茎,而以一种植物为主的自然植物群落或混合植物草皮层饲养虫草蝙蝠蛾幼虫较好。     

三种食物喂养的黑水虻幼虫营养测定与比较

黑水虻幼虫在国内外被普遍用于处理有机废弃物,得到的黑水虻幼虫由于富含蛋白质又可用于畜禽养殖,或用于提取油脂、蛋白及甲壳素等物质.本文利用云南省昆明市宜良县汤池镇当地较多的有机废弃物(豆腐渣、鸡粪及发酵鸡粪)饲养黑水虻幼虫,15d后,对三种幼虫进行营养测定,并比较不同食物饲养幼虫营养成分的差异,可根据测定结果对不同用途幼虫选择较合适的饲养物质.结果表明豆腐渣饲养幼虫的蛋白(52.3％)、油脂(22.6％)及氨基酸(36.80％)含量均高于两种鸡粪饲养的幼虫(蛋白含量为46.9％及45.9％、油脂为5.13％及4.30％、氨基酸为23.51％及28.48％),灰分(9.89％)含量低于这两种鸡粪饲养的幼虫(23.2％及19.6％);两种鸡粪饲养的黑水虻幼虫中锌、铜及铅等部分金属元素含量较高.三种食物饲养的黑水虻幼虫营养成分存在一定差异,其中豆腐渣饲养的黑水虻幼虫营养较为丰富,且重金属含量较低,更适合用于畜禽养殖.     

油茶肉质果和肉质叶营养成分分析与评价

采用常规生化分析方法,测定了油茶（Camellia oleifera Abel.）肉质果、肉质叶基本营养成分,用原子吸收光谱法测定微量元素含量,用高效液相色谱仪测定维生素C的含量,用氨基酸全自动分析仪测定氨基酸的种类,应用模糊识别法和氨基酸比值系数法对油茶肉质果、肉质叶蛋白质营养价值进行了全面评价,并与12种常见热带、亚热带水果进行对照比较。结果表明油茶肉质果、肉质叶富含糖、酸、蛋白质、氨基酸、脂肪。其微量元素和维生素C含量高于一些常见水果。油茶肉质果、肉质叶的必需氨基酸（EAA）占氨基酸总量（TAA）的37%和35%,其蛋白营养价值要优于12种水果。因此,油茶肉质果、肉质叶的营养价值优于一些常见水果,是一种值得开发利用的优质水果。     

小碎斑鱼蛉幼虫资源成分分析及价值评价

针对小碎斑鱼蛉Neochauliodes sparsus(Liu et Yang)幼虫,进行了资源成分测定,分析。结果表明:小碎斑鱼蛉幼虫干物质中蛋白质、氨基酸、脂肪、糖类及灰分含量分别为67.69%、56.02%、10.4%、1.59%、7.05%,含有18种氨基酸,包括8种人体必需氨基酸,其必需氨基酸占总氨基酸含量的45.32%,必需氨基酸与非必需氨基酸含量的比值为82.89%,第一限制性氨基酸为色氨酸;此外,还含有Ca、P、Fe、Zn等多种矿物质和微量元素。在分析了小碎斑鱼蛉幼虫资源成分的基础上,对其开发利用价值进行了评价。     

滞育家蝇幼虫氨基酸、SOD、CAT的变化

目的 观察家蝇幼虫滞育前后血淋巴中氨基酸、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的变化,探讨家蝇幼虫滞育发生的生化机制.方法 低温诱导家蝇幼虫滞育,氨基酸自动分析仪测滞育组及非滞育组血淋巴氨基酸含量;紫外分光光度计测滞育组及非滞育组家蝇幼虫血淋巴SOD、CAT含量.结果 除滞育20 d组家蝇幼虫血淋巴内胱氨酸较非滞育组升高外,各滞育组家蝇幼虫血淋巴内氨基酸含量均低于非滞育组;各滞育组SOD、CAT均低于非滞育组,随着滞育时间的延长SOD、CAT含量逐渐增高.结论 家蝇滞育幼虫体内各氨基酸含量减少,SOD、CAT活力降低.     

微量元素对虫草蝠蛾幼虫生长发育的影响

按月采样,分析测定虫草蝠蛾幼虫体微量元素的组成。应用Q模式系统聚类方法,分析了幼虫受环境影响引起的元素代谢变化。结果表明虫体所含元素与环境温度的变化及自身的生理活动密切相关。5、10月份幼虫组的元素含量相近,前者正当幼虫结束休眠后恢复活动的时期,后者是幼虫处于准备进入越冬的前期,两组幼虫此时均处于取食高峰期。3、4月份组的亦较接近,幼虫正渐恢复活动但不取食。8月份幼虫蜕皮前后,消耗较大,需摄取大量食物。计算结果表明7、9月份的元素含量接近,这与上述现象有一定联系;应用对应因子分析法得到的结果是:元素Fe、P对10、11月份幼虫组的贡献值显著;Na、Ca、Mg对8、9月份的贡献值显著;Cu、Zn、Co、Cd、Si对4、5月份的贡献值显著。     

不同饲料饲养洋虫对其体内成分的影响

比较分析饲喂普通粮食与名贵中药材对洋虫Palembus dermestoides (Fairmaire)体内蛋白质、脂肪、糖类、灰分、氨基酸、矿物质和微量元素等的影响。结果表明:饲喂粮食和中草药的洋虫都含有丰富的营养成分。用粮食或中药材饲养对洋虫的氨基酸和粗蛋白、粗脂肪和灰分影响不大,粮食组和中药组EAA/TAA分别为46.94%和46.19%,EAA/NEAA分别为88.47%和85.84%;第一限制性氨基酸为含硫氨基酸,即蛋氨酸和胱氨酸。必需氨基酸(EAAI)分别为99和92mg/g;可见洋虫可以作为一种优质蛋白质保健食品,而且建议用粮食饲喂。中药组饲养的洋虫中微量元素与矿物质均明显高于粮食组饲养的洋虫,因此中药组饲喂的洋虫可以作为滋补品或药品原料。     

小菜蛾感染球孢白僵菌后血淋巴游离氨基酸的测定

通过高效液相色谱（HPLC）对感染球孢白僵菌后小菜蛾血淋巴游离氨基酸含量进行测定,结果表明染菌后小菜蛾幼虫体内氨基酸含量明显低于对照组,主要是由于菌株在虫体内营养生长消耗和虫体内的养分所致;小菜蛾幼虫体内具有菌株营养生长所必需的氨基酸,因此可以认为小菜蛾是白僵菌的敏感寄主;各处理组间各种游离氨基酸在量上存在一定的差异,是由于不同发育阶段的虫体与菌株及不同类型菌株营养生长所必需的游离氨基酸含量不同所造成的。     

黑水虻幼虫氨基酸及其微量元素分析

黑水虻具有较高的营养价值,是一种重要的环境友好型资源昆虫.本研究采用凯氏定氮法、茚三酮柱后衍生离子交换色谱法和微波消解-电感耦合等离子质谱法(ICP-MS)等多种分析技术,测定了厨余垃圾饲喂的黑水虻幼虫蛋白质、氨基酸和微量元素的组成及含量.研究结果表明,黑水虻幼虫中蛋白质的含量为40.60 g/100 g.在测定的16...     

rhIL-12二硫键、N-糖基化位点及C端氨基酸序列分析

重组人白细胞介素12（rhIL-12）是一种已经用于治疗肿瘤,寄生虫、病毒性感染及造血障碍等疾病研究的异二聚体糖蛋白。结构确证是质量控制的重要内容,此研究对CHO细胞表达的rhIL-12二硫键配对方式、N-糖基化位点以及C端氨基酸序列进行了分析,使用Trypsin、Chymotrypsin和Glu-C三种酶分别对rhIL-12进行非还原酶解,尽可能地在其所有半胱氨酸残基之间断裂而形成二硫键相连的肽段,然后使用LC-MS/MS对酶解后的肽段样品进行分析,确定了rhIL-12样品中存在和理论配对方式相符的7对二硫键。将rhIL-12二硫键还原后并烷基化修饰保护,分别采用Trypsin,Chymotrypsin和GluC进行酶解,并用LC-MS/MS对酶解后肽段进行了质谱肽图及C端氨基酸序列分析,确定了rhIL-12 p35亚基C端氨基酸序列的8个氨基酸、p40亚基C端氨基酸序列的15个氨基酸。对rhIL-12样品还原及烷基化后用Trypsin变性酶解,所得肽段在H₂O及H₂¹⁸O水中分别用PNGase F糖苷酶处理酶切产物。并通过二级质谱分析脱糖后糖肽段分子量变化,从而确定了rhIL-12的3个N糖基化修饰位点,分别为p35亚基的71位和85位以及p40亚基的200位。通过建立酶解结合二级质谱鉴定的方法,证明了新药rhIL-12的二硫键位点、C端氨基酸序列和糖基化位点与理论一致。     

玉龙蝠蛾生殖的观察

玉龙蝠蛾Hepialus yulongensis Liang也是我国名贵药材虫草的重要寄主。对其生殖生物学的研究不仅为鳞翅目昆虫的演化有着重要意义,而且能为冬虫夏草的人工饲养繁殖提供基础资料。 观察实验在冬虫夏草主产区之一的云南省迪庆藏族自治州白马雪山(海拔3850m)中国科学院昆明动物研究所虫草组研究基地进行。供实验用材料采自云南丽江玉龙雪山虫草花园(海拔4300—4380m)处的老熟幼虫和蛹。将羽化后刚交配的蛾子引入观察笼内,或将羽化未交配的雌雄蛾按1:1,1:2比例放入观察笼内饲养观察,记录成虫羽化、交配、产卵、成虫死亡及卵孵化日期和数量。死亡的雌蛾解剖观察体内余腹卵数和交配授精情况。其结果如下:     

人工培养蛹虫草与野生冬虫夏草氨基酸含量的比较

对人工培养蛹虫草与青海产野生冬虫夏草的氨基酸含量进行测定,结果表明:野生冬虫夏草中所含有的各种氨基酸,在人工培养虫草的子实体及菌丝体中都有存在;且后者的精氨酸及脯氨酸含量明显高于野生冬虫夏草。由此为鉴定人工培养虫草的质量,进一步为工业规模开发与利用人工培养虫草,提供了科学理论依据。     

蝙蝠蛾鳞翅虫草Samsoniella hepiali模式菌株线粒体基因组系统发育分析

蝙蝠蛾鳞翅虫草Samsoniella hepiali是重要的药用虫生真菌,根据现代分类系统,隶属于虫草科Cordycipitaceae鳞翅虫草属Samsoniella。本研究对蝙蝠蛾鳞翅虫草模式菌株(ICMM 82-2)线粒体基因组进行测序、组装和注释,发现其线粒体基因组成闭合环状,大小为24 246 bp。基因区域占比为85.10%,共编码42个基因,包括15个蛋白质编码基因(PCGs)、2个rRNA基因和25个tRNA基因。15个PCGs均以ATG为起始密码子,以TAA为终止密码子,偏好密码子为UUA。各氨基酸使用频率具有较大差异,其中亮氨酸(Leu)出现频率最高。25个tRNA基因可转运全部20种氨基酸,其中19个tRNA基因二级结构为三叶草结构。本研究基于线粒体基因组中14个PCGs基因串联数据集,构建肉座菌目6科50个物种的系统发育树,进一步证实蝙蝠蛾鳞翅虫草模式菌株系统发育位置隶属于肉座菌目Hypocreales虫草科Cordycipitaceae鳞翅虫草属Samsoniella。通过虫草科线粒体基因组共线性分析,发现其中12个物种有5个同源区,3个物种存在6个同源区,同源区域A和B长度变异较大。与其他虫草科物种相比,蝙蝠蛾鳞翅虫草线粒体基因组较小,同源区域相对较短。蝙蝠蛾鳞翅虫草模式菌株线粒体基因组信息有助于鉴别其物种特异性,确定其系统发育关系,将为虫草系统发育研究提供新思路,为继续研究鳞翅虫草属物种药用价值提供系统发育依据。     

虫草属真菌中虫草素的超声波提取及其毛细管电泳测定

比较了虫草素的四种提取方法,确定了超声波作用的时间、提取溶剂和样品预处理方式。利用高效毛细管电泳分离、测定了虫草属真菌虫草素的含量,首次报道了九州虫草中虫草素的存在。     

洋虫营养成分分析

分析洋虫Palembus dermestoides(Fairmaire)成、幼虫体内的营养成分,并对氨基酸的质量进行了评价。结果表明:洋虫成虫和幼虫都具有丰富的营养,其中粗蛋白48.31%和54.94%、粗脂肪17.64%和18.24%、粗灰分3.0%和2.8%、总糖31.05%和24.08%,TAA为39.03 g/100 g和47.4 g/100 g、EAA/TAA为46.29%和47.14%,含有丰富的矿物质和微量元素,尤其是Zn的含量达到101.00 mg/kg和186.00 mg/kg,且不含有对人体有害的Cd,Hg,Pb。对幼虫进行氨基酸评价,其必需氨基酸指数为114.71。与目前常见的蛋白源相比较,洋虫是一种高蛋白、低脂肪、氨基酸含量较全面且富含矿物质和微量元素的昆虫资源。     

主成分分析法用于西洋参样品分类研究

建立西洋参药材分类方法;采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法对12个西洋参样品中的15种无机元素的含量进行测定,用高效液相色谱(HPLC)法测定上述样品中的7种人参皂苷的含量,用蒽酮-硫酸法测定其中多糖的含量;进而采用主成分分析法(PCA)对所测得的西洋参样品的23个变量进行分类研究;12个西洋参样品能得到合理的分类,而各人参皂苷的含量是决定西洋参样品分类的第1关键因素,元素Mn、Cu、As、Ni、Mo以及多糖的含量是第2关键因素;主成分分析法是西洋参分析分类的有效方法。     

冬虫夏草不同发育时期蛋白质组iTRAQ质谱分析

本文选定冬虫夏草寄主昆虫幼虫（S1）、僵虫（S2）、子座初期（子座<1cm,S3）、子座早期（1cm<子座<3cm,S4）、成熟冬虫夏草（子座>7cm,S5）、商品冬虫夏草菌核（S6）、商品冬虫夏草子座（S7）及商品冬虫夏草（中期子座≈5cm,S8）8个样品,用定量蛋白质组学方法iTRAQ分析技术对冬虫夏草不同生长发育阶段的差异蛋白质组进行比较。共计获得9 924个不同肽段,鉴定到1 809个蛋白质,其中差异比值1.5倍以上,P<0.05蛋白个数506个,以商品冬虫夏草样本（S8）为参照,比较差异蛋白数量,寄主幼虫（S1）、僵虫（S2）、子座初期（S3）、子座早期（S4）、成熟冬虫夏草（S5）、商品冬虫夏草菌核（S6）及商品冬虫夏草子座（S7）阶段差异蛋白数分别为104、102、34、35、49、46和136个,说明昆虫幼虫、僵虫及子座与商品冬虫夏草样品差异显著。对鉴定蛋白质数据进行了主成分分析（principal component analysis,PCA）,在第三主成分（component 3）上的显著差异,表明成熟冬虫夏草（S5）的蛋白组成不同于商品虫草,说明成熟虫草品质下降。层次聚类（hierarchy clustering）分析结果表明所有样品分为两支,僵虫（S2）和商品冬虫夏草菌核（S6）与寄主幼虫（S1）聚在了一个分支上,而不同发育阶段样品（S3、S4和S5）与商品虫草子座（S7）聚在一个分支上,说明商品冬虫夏草菌核中还残留有寄主昆虫蛋白。冬虫夏草菌核部位的蛋白到子座部位的蛋白呈现由寄主幼虫蛋白向真菌蛋白发育过渡的聚类关系。子集嵌套关系同步子实体生长发育阶段蛋白组成变化随时间的程序性变化的规律。K-均值（K-means）聚类和Gene Ontology（GO）注释分析,提供了冬虫夏草成熟过程中能量代谢通路的变化趋势以及与真菌侵染昆虫和有性生殖相关蛋白质信息。研究结果为理解寄主昆虫对冬虫夏草功能的潜在贡献、子实体形成和发育的分子机制提供借鉴,并为蛋白质组作为冬虫夏草质量标准提供了科学参考。     

冬虫夏草口服液游离氨基酸和微量元素的分析比较

目的：为了研究冬虫夏草口服液的有效成分和药用价值,测定冬虫夏草口服液中的游离氨基酸和微量元素的不同种类和含量。方法：采用安捷伦1200高效液相色谱仪,C18反相柱梯度分离,邻苯二甲醛一芴甲酯柱前自动衍生化,利用已知浓度氨基酸标准品进行外标法定量,根据已知浓度氨基酸标准品的峰面积与样品峰面积之比计算游离氨基酸的含量。结果：冬虫夏草口服液中含有23种游离氨基酸和18种微量元素,氨基酸总量在口服液中占0．892％,必需氨基酸在游离氨基酸总量中占53．1％;含量最高的游离氨基酸依次是赖氨酸、亮氨酸、精氨酸。结论：游离氨基酸是冬虫夏草口服液中重要的生物有效成分,为冬虫夏草口服液的药效提供了基础数据。