痢疾杆菌与大肠杆菌的杂交及杂交株的生物学性状

以大肠杆菌高频重组品系Hfrc株和福氏志赞氏菌2a51573株进行杂交获得成功。每毫升含菌100亿,37℃杂交110分钟时的二菌杂交频率是0．7～6．0×10一,平均为2.9x10-8。电子显微镜观察到菌细胞间有原生质桥(“性须”)联结的正在杂交现象。在菌液浓度相同情况下,不同杂交时间对杂交频率有一定影响,20一100亿／毫升菌液浓度杂交30分钟时杂交频率最高,达4．8—6．6x10-8,杂交2—3小时为1.7--4．2×10-8,如再延长时间,其杂交频率明显下降。提高菌液浓度到500亿／毫升,并不能提高杂交频率。杂交株兼有二种亲本的某些特性,其子代表现出遗传因子的分离现彖,最容易观祭到的是乳糖发酵的分离。根据若干不同的遗传标记可将204株杂交株的重组类型至少分为10个杂交型。     

新疆出血热病原体的生物学及免疫学特性

出血热是一群自然疫源性的急性传染病,可由昆虫或动物传播于人。根据临床表现,病理改变,可分为有肾脏综合征和无肾脏综合征的出血热。新疆出血热为蜱传出血热,在蜱、羊之间传播。散发流行于新疆南部,为无肾脏综合征的出血热,它严重地危害着军民健康和边防建设。遵照伟大领袖毛主席《六·二六》光辉指示和备战、备荒、为人民”的教导,在党及各级革委会领导下和新疆自治区防疫站,新疆军区检验所,新疆军区建设兵团共     

宋内氏痢疾杆菌O-SP-TT结合疫苗的制备及其免疫学特性的研究

宋内氏痢疾杆菌（S.Sonnei)的一个重要保护性抗原是菌体抗原（O抗原）即细菌细胞壁中的脂多糖（LPS）成分,已证实血清中足够水平的抗LPS IgG抗体抗体即能对该菌提供免疫保护作用。本文选用Westphal热酚法提纯宋内氏痢疾菌LPS,经酸水解法进一步脱毒处理后得到无毒但却具弱免疫原性的O-特异性多糖（O－SP）,然后采用化学方法即通过连接剂己二酸二肼（ADH）将其共价结合到破伤风类毒素（TT）上,共制备得到了三批宋内氏痢疾杆菌O－SP－TT结合疫苗。经生化和免疫学方法检测证实我们提纯的LPOS,OSP及其合成的L－SP－AH衍生物,O－SP－TT结合物均具有宋内氏痢疾杆菌O抗原特异性,同时其核酸和杂蛋白质含量低（≤2%),表明纯度较高。同时经小鼠免疫原性试验证实三批结合物免疫小鼠后产生的抗LPS IgG抗体滴度均比单一O－SP免疫后产生的要高出10倍以上,且结合物再次注射后存在加强应答。补体介导的体外杀菌力试验表明结合物免疫小鼠后诱导产生的血清抗LPSIgG抗体对宋内氏痢疾杆菌具特异性杀菌活性。本文结果表明宋内氏痢疾杆菌O-SP-TT结合疫苗可望作为一种有效的侯选痢疾疫苗做进一步的大规模人体观察。     

痢疾杆菌L型的生物学性状及致病性

人工诱导痢疾杆菌Ｄ１５为稳定Ｌ型,比较原菌生物学性状及致病性的差异。发现Ｌ型菌除形态、染色、生长特性与原菌不同外,尚伴有部分生化反应的消失、对药物的敏感性下降、对小鼠的致病力减弱,回复菌则与原菌相同。结果表明痢疾杆菌Ｄ１５Ｌ型的生物学性状用致病性与原菌均有差异。     

539株痢疾杆菌生化反应报告

为了探索痢疾杆菌在生化特性方面的变异确地鉴定出痢疾杆菌,我们于1975—1978年先情况,摸清各菌型之间的生化反应规律,以便准后收集了539株痢疾杆菌,做了较系统的生化     

Zfb株牛源金黄色葡萄球菌生物学特性

从临床患病牛乳样内分离出的金黄色葡萄球菌β-溶血型致病菌株, 命名为zfb, 运用微生物学及现代分子生物学手段检测了该菌株的生物学特性, 以金葡菌ATCC 25923为对照株。结果表明, 金黄色葡萄球菌zfb不产生脂酶, 有抗药性, 在改良型血清软琼脂培养基中观察荚膜形态, 活体内和体外均显现散布型状态。同时, 以昆明小白鼠为动物模型, 测定了半数致死量和器官侵袭力。金黄色葡萄球菌牛源分离株zfb的半数致死率为10-4.33/mL, 参考菌株ATCC 25923菌株的半数致死率为10-2.5/mL。对牛源     

Oka株水痘病毒的生物学特性研究

将日本大阪大学微生物病研究会（BIKEN）提供的Oka水痘病毒第28代减毒株,通过MRC－5人二倍体细胞连续传递10代,建立主代及工作代毒种批,并对其后的32代,34代,36代及38代病毒按WHO规程进行全面检定,证实其生物学特性相似,免疫原性良好,确保制备水痘减毒活疫苗毒种的稳定性和一致性。     

四株野生毛木耳的生物学特性分析及驯化栽培

优质菌种是食用菌产业持续健康发展的基础。毛木耳野生种质资源丰富,可作为新种质创制和品种选育的重要来源。为丰富毛木耳的育种材料,本研究以采自中国、俄罗斯和赞比亚3个国家的4株野生木耳菌株为材料,进行了基于内转录间隔区序列(ITS)的分子系统发育鉴定、生物学特性分析及出菇品比试验。结果表明：4株野生木耳菌株均为毛木耳;菌丝体最适碳源各不相同,最适氮源为酵母粉或氯化铵,最适pH为7-9,最适温度为25-30 ℃;所有菌株均可驯化出菇,其中赞比亚菌株Ⅲ的发菌速度最快,且第一茬鲜重高于国内栽培菌株(Ⅴ和Ⅵ),俄罗斯菌株Ⅰ最先产生原基。本研究获得的4株野生毛木耳菌株,在营养需求、出菇形态、产量和生育期等农艺性状上均存在差异,为毛木耳育种工作提供了新的资源。     

一株烈性沙门氏菌噬菌体的生物学特性及基因组分析

随着抗生素耐药问题的日益加重,使得致病菌的生物防治愈发困难,新型抗菌剂的研发迫在眉睫.使用噬菌体控制致病菌重新获得了极大关注.为获取具有防治沙门氏菌潜力的噬菌体,采用双层琼脂平板法从河水中分离出一株烈性噬菌体PSM6,在肠炎沙门氏菌的菌苔可形成直径约1.5 mm-2 mm的透亮均匀的噬菌斑;具有宽裂解谱,可裂解多种血清...     

哈尔滨地区102株痢疾杆菌耐药性测定

近年来,由于临床上广泛使用抗菌素和有些人擅自滥用抗菌素,致使耐药菌株不断增加,也有些由肠道致病菌耐药株引起爆发流行的报导,其中以痢疾杆菌的耐药问题最为严重。为了解哈尔滨地区痢疾杆菌耐药情况,我们对1990年自痢疾患者分离的102株痢疾杆菌进行了药敏试验及结果分析,现报告如下:     

痢疾杆菌弱毒株的选育——Ⅰ.用杂交法选育弱毒菌株的探索

利用杂交法选育痢疾杆菌弱毒株,国外已有报道,如Dupont等用大肠杆菌高频重组株W 1895与福氏志贺氏菌Ⅱ型及痢疾志贺氏菌Ⅰ型杂交,得到一些无毒的杂交株。据观察,有的免疫力虽好,但反应较强(如H株),有的反应虽小,但免疫力不够理想(如MH株),因此均未被用于预防细菌性痢疾。为了探索获得既无     

水貂肠炎病毒山东株分离鉴定及生物学特性分析

【目的】本研究旨在研究水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)的基因组遗传进化特征。【方法】对采自山东境内水貂养殖场的109份水貂腹泻样品进行MEV的分离和鉴定,利用血凝和血凝抑制试验、多步生长曲线绘制以及蛋白的三级结构模拟等,对分离毒株生物学特性进行分析,通过重叠PCR对分离株进行全基因扩增,使用MegAlign进行序列同源性比对分析,利用DNAMANV6对基因组5’末端和3’末端回文结构进行预测,应用MEGAV6进行遗传进化分析。【结果】共分离得到5株病毒,经电镜观察和间接免疫荧光试验鉴定为MEV毒株,分别命名为MUTQS-1-5,GenBank登录号分别为OK275645、OK275646、OK275647、OK275648和OK275649;各分离株5’-和3’-UTR分别由长回文序列组成,具有典型的细小病毒基因组末端的茎环样结构,NS1和VP2基因的推导氨基酸序列存在多个非同义突变位点,其中NS1蛋白的E/Q545V位氨基酸突变,以及VP2蛋白的F267Y、Y324I位氨基酸突变为首次在MEV上发现;生物学特性分析表明,上述突变并未明显改变病毒的血凝及...     

一株硫酸盐还原菌的分离鉴定及生物学特性研究

从处理硫酸盐废水厌氧折流板反应器（Anaerobic battqe reactor,ABR）的污泥中分离到1株硫酸盐还原菌,对该菌株进行了形态、生理生化特性方面的研究,并对16S rDNA序列进行了分析。该菌株为杆状或弧状,大小为（0．5～0．7）μm×（1．4～1．9）μm,革兰染色阴性,芽胞染色阴性,能运动,具有硫酸盐还原功能。菌株最适生长pH为7．0～8．0,喜中性偏碱环境;初始[SO4^2-]为2000mg／L,OD600nm。值为1．206,SO4^2-去除率达到71％;该菌株能分别利用乳酸、丙酮酸、丁酸、乙酸、乙醇、甲醇、葡萄糖作为电子供体,进行硫酸盐异化还原,乳酸最有利于该菌SO4^2-的去除,SO4^2-去除率为91．4％,其次为丙酮酸,达到51．2％。基于16SrDNA序列同源性构建了系统发育树,结果表明此株菌是属于脱硫弧菌属（Desulfovibrio）的硫酸盐还原菌,与Desulfovibrio具有96．0％的序列相似性。     

禽致病性大肠杆菌gspL基因缺失株构建及生物学特性

【目的】研究gsp L基因缺失对禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)生物学特性的影响。【方法】利用Red重组方法构建禽致病性大肠杆菌DE17株的gsp L缺失株;分析野生株与缺失株的生长特性、黏附和入侵DF1细胞的差异;采用荧光定量PCR的方法比较野生株和缺失株毒力基因转录水平的变化;比较野生株与缺失株的半数致死量(LD50)差异。【结果】gsp L缺失不影响DE17的生长特性,但其黏附和入侵DF1细胞能力显著下调。荧光定量PCR检测结果表明,缺失株毒力基因lux S,pfs,fyu A和iss转录水平明显上调,tsh的转录水平明显下调,而vat,ibe A,stx2f和omp A的转录水平无显著变化;LD50检测结果表明,缺失株比野生株毒力增强了12倍。【结论】gsp L基因的缺失不影响禽致病性大肠杆菌的生长特性,但能减弱其黏附和入侵能力,且可以正调控禽致病性大肠杆菌部分毒力基因的转录水平,推测gsp L基因可能与APEC对宿主的致病性有关。     

嗜水气单胞菌cpxRA缺失株构建及生物学特性研究

为了探讨Cpx系统在嗜水气单胞菌生长及毒力等方面发挥的作用, 利用融合PCR和基因同源重组原理, 以自杀质粒pRE112为载体构建缺失57—1879 bp序列的cpxR-A基因簇突变株 Δcpx, 然后比较缺失株和野生株在生长、生物膜形成、应激耐受及毒力等生物学特性方面的差异。普通PCR及荧光定量PCR结果验证了突变株中cpxRA基因簇片段的部分缺失, 表明突变株构建成功; 生物学特性研究结果显示, 突变株在形态、生长、生物膜形成及毒力等方面与野生株没有显著差异, 两者主要在应对高渗透压、SDS (十二烷基磺酸钠)刺激及含有EDTA (乙二胺四乙酸二钠)或多黏菌素B环境表现不同。结果表明Cpx双组分系统在嗜水气单胞菌应对外界刺激方面扮演着重要角色, 但在毒力方面则可能处于次要地位。     

布鲁氏菌ery操纵子突变株生物学特性分析

布鲁氏菌ery操纵子参与赤藓醇代谢. 赤藓醇能够促进布鲁氏菌的生长.为进一步研究布鲁氏菌引发宿主流产的分子机制,采用基因重组技术构建布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株（△ery）,通过体内外实验探讨布鲁氏菌ery操纵子的生物学功能. 研究结果显示,获得了布鲁氏菌ery操纵子缺失株;布鲁氏菌ery操纵子缺失株侵染胚 胎滋养层细胞脱落较亲本株明显下降;巨噬细胞CFU计数缺失株作用组和亲本株作用组差异显著（P<0.05）.试管凝集和虎红平板实验结果显示均出现凝集现象;检测血清中细胞因子IL-10和TNF-α的表达水平,△ery诱导机体产生的IL-10和TNF-α明显低于亲本株（P<0.05）.小鼠脾脏细菌CFU计数结果显示,△ery较亲本株毒力明显下降.本研究表明,布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株毒力较亲本株明显下降,为进 一步揭示布鲁氏菌引起流产的致病机制提供了一定的理论依据.